一種蟾皮凝膠劑及其制備工藝的制作方法
【專利摘要】一種蟾皮凝膠劑，其特征在于每100份蟾皮凝膠劑由以下重量份數的組份組成：蟾皮8-12份、HPMCK4M1-3份、HPMCK100M0.5-0.7份、薄荷腦0.8-1.2份、氮酮2-4份、丙二醇0.8-1.2份、甘油4-6份、尼泊金甲酯0.7-1.2份、水余量。其制備工藝為精密稱取處方量蟾皮超微粉加70%乙醇，超聲30min，揮干乙醇，至無醇味，加入處方量尼泊金甲酯，將處方量的HPMC溶脹，加入到蟾皮溶液中，加入氮酮、丙二醇、薄荷腦和甘油，混勻靜置過夜，即可形成蟾皮凝膠劑。本發明制備工藝簡單、設備要求較低、使用安全、病人的順應性高、毒副作用小、生物利用度高、對皮膚無刺激性和致敏性。
【專利說明】一種蟾皮凝膠劑及其制備工藝
【技術領域】
[0001]本發明屬于制藥【技術領域】，尤其涉及一種蟾皮凝膠劑及其制備工藝。
【背景技術】
[0002]蟾皮為蟾蜍科動物中華大蟾蜍的干燥皮，有清熱解毒、利水消脹之功效，性辛、涼、微毒，主治癰疽、腫毒，據《本草綱目拾遺》記載:蟾皮“貼大毒，能拔毒、收毒”，有明顯的鎮痛和抗炎、抗腫瘤作用。蟾皮具有確切的抗腫瘤活性，能夠直接作用于腫瘤細胞DNA，誘導腫瘤細胞凋亡、抑制多種腫瘤細胞增殖、促進腫瘤細胞分化，還有逆轉耐藥性、抑制腫瘤血管形成及增強機體免疫力作用。同時，腫瘤形成的主要因素是癌毒之邪，而蟾皮為有毒之品，可以毒攻毒，正合中醫治療腫瘤的原則。我國民間多用來治療原發性肝癌、肺癌、膀胱癌等，具有較好的臨床效果。目前已從蟾皮中分離出來的單體化合物有蟾毒靈、華蟾酥毒基等蟾蜍二烯內酯類化合物，現代中藥學研究表明蟾皮及其制劑治療肝癌、肺癌、腸癌、消化道癌癥等惡性腫瘤療效確切。
[0003]目前在臨床上廣泛應用的以蟾皮為來源的抗腫瘤制劑主要有華蟾素注射液、華蟾素膠囊，研究較多的有華蟾素納米劑型、微球、氣霧劑等，如沈陽藥科大學研制的華蟾素注射乳劑藥效學研究表明該制劑具有明顯的抗腫瘤，提高機體免疫力等功效。樓月芬等采用微球技術將干蟾皮提取液制成抗肝癌制劑，進一步提高了肝癌介入治療的效果。
[0004]蟾皮制劑具有抗腫瘤和增強腫瘤患者免疫功能的雙重作用在臨床已經得到肯定，但由于蟾皮化學成分較為復雜，有效成分與藥理作用之間關系研究較少，毒副作用較大，且抗腫瘤機理不明。此外，蟾皮作為藥物使用可通過興奮迷走神經，影響心肌和傳導系統，引起竇性心動過緩、房室傳導阻滯、室性早搏、心室纖顫，還可導致頭暈、惡心、四肢發涼，抽搐，甚至死亡。這些毒副作用大大增加了臨床使用風險，所以合理用藥，改進工藝，明確藥效成分和毒性成分顯得尤為重要。
[0005]中藥外治為體表給藥，經皮膚或粘膜吸收后，藥力直達病所，可避免口服所致的首關消除及某些毒副作用。中醫外治法是祖國醫學的重要組成部分，是治療癌痛的一支“奇兵”。外治宗師吳師機曰:“外治之理，即內治之理，外治之藥，即內治之藥，所異者法耳。醫理藥性無二，而法則神奇變化。”中藥外治為體表直接給藥，經皮膚或粘膜表面吸收后，藥力直達病所，起效迅速，且可避免口服經消化道吸收所遇到的多環節滅活作用及一些藥物內服帶來的某些副作用，特別是晚期癌癥患者正氣已虛，不耐攻伐，脾胃吸收功能減弱，單靠內服藥效果不佳，中藥外治更具優勢。
[0006]蟾皮作為傳統抗腫瘤外用中藥之一，能夠緩解癌性疼痛，改善患者癥狀，且對皮膚癌、宮頸癌、陰莖癌等體表淺部腫瘤療效確切，在腫瘤治療中具有舉足輕重的作用。蟾皮外敷用藥能夠顯著穩定瘤體，有效延長肝癌患者的生存期，提高生存質量。臨床應用發現蟾皮直接粘附于腫瘤部位，具有抗腫瘤、升高白細胞及增強網狀內皮系統的吞噬功能，并且能夠局部止痛，對于晚期癌癥病人的治療療效顯著。外用蟾皮抗癌多為蟾皮直接打粉或直接蟾皮外敷，存在使用過程中劑量難以控制，使用困難，病人適應性差，對皮膚有過敏性和刺激性等缺點，并存在重大安全隱患。

【發明內容】

[0007]針對現有技術中存在的缺陷，本發明的目的是提供一種蟾皮凝膠劑及其制備工藝。
[0008]所述的一種蟾皮凝膠劑，其特征在于每100份蟾皮凝膠劑由以下重量份數的組份組成:蟾皮 8-12 份、HPMC K4M 1-3 份、HPMC K100M 0.5-0.7 份、薄荷腦 0.8-1.2 份、氮酮 2-4份、丙二醇0.8-1.2份、甘油4-6份、尼泊金甲酯0.7-1.2份、水余量。
[0009]所述的一種蟾皮凝膠劑，其特征在于每100份蟾皮凝膠劑由以下重量份數的組份組成:蟾皮10份、HPMC K4M 2份、HPMC K100M0.6份、薄荷腦1份、氮酮3份、丙二醇1份、甘油5份、尼泊金甲酯1份、水余量。
[0010]所述的一種蟾皮凝膠劑，其特征在于所述蟾皮含水量為3-4%。
[0011]所述的蟾皮凝膠劑制備工藝，其特征在于采用如下步驟:
(1)預處理:選取活蟾蜍取皮，洗凈、晾干；
(2)蟾皮干燥:將步驟(1)處理過的蟾皮于冷凍干燥儀中在_45°C至_55°C，壓強15-25Pa的條件下連續冷凍干燥16-24h，至含水量達到3-4%，制得鮮蟾皮；
(3)粉碎處理:將步驟(2)中制得的鮮蟾皮于小型粉碎機中粗粉碎直至全部通過10目篩，然后連續超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉；
(4)按處方量精密稱取步驟(3)制得的蟾皮超微粉，按固液比(g:ml)=1:4加入70%的乙醇超聲30min，揮干乙醇，直至無醇味，制得蟾皮溶液；
(5)往步驟(4)制得的蟾皮溶液中分別依次加入處方量的尼泊金甲酯、用蒸餾水溶脹后的HPMC K4M及HPMC K100M、氮酮、丙二醇、薄荷腦及甘油，加水定容，混勻后靜置12_24h，SP可形成蟾皮凝膠劑。
[0012]所述的蟾皮凝膠劑制備工藝，其特征在于步驟(2)所述的連續冷凍干燥時間優選為18小時。
[0013]所述的蟾皮凝膠制備工藝，其特征在于步驟(3)所述的蟾皮超微粉為粒徑小于蟾皮細胞的粒徑。
[0014] 所述的蟾皮凝膠劑制備工藝，其特征在于步驟(5)所述的溶脹后的HPMC K4M是按固液比(g:ml) =1:20進行溶脹的，溶脹后的HPMC K100M是按固液比(g:ml) =1.5:100進行溶脹的。
[0015]所述的蟾皮凝膠制備工藝，其特征在于所述溶脹后的HPMC K4M =HPMCKlOOM=1:0.23-0.5。
[0016]本發明的有益效果是:
本發明將蟾皮制成透皮給藥制劑一凝膠劑，制備工藝簡單，設備要求較低，使用舒適安全，病人的順應性高。凝膠劑基質具有緩釋作用，在一定程度上能夠降低藥物毒副作用。冷凍干燥能夠最大程度保持藥材內部有效成分不被破壞，保持最佳藥理活性，超微粉碎能夠使藥物內部有效成分迅速溶出，使藥物提取更完全，彌補了普通飲片提取不完全的不足，顯著提高藥物生物利用度。該劑型劑量可控，透皮吸收迅速，藥物吸收干擾因素小，避免藥物的肝臟首過作用，血藥濃度穩定，能夠有效提高藥物生物利用度，并可反復敷貼，可隨時使用或停止藥物治療，使用方便，對皮膚無刺激性和致敏性。
【具體實施方式】[0017]本發明下面結合實施例予以進一步詳述。
[0018]實施例1
選取活蟾蜍取皮，洗凈、晾干，將晾干后的蟾皮于冷凍干燥儀中在溫度為_45°C、壓強為25 Pa的條件下連續冷凍干燥16h，測定蟾皮含水量為3.97%，得鮮蟾皮；將鮮蟾皮于小型粉碎機中粗粉碎直至全部通過10目篩，然后連續超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉，蟾皮超微粉的粒徑小于蟾皮細胞的粒徑，備用。
[0019]精密稱取處方量蟾皮超微粉8g加32ml70%乙醇，超聲提取30min，揮干乙醇，直至無醇味，制得蟾皮溶液，往蟾皮溶液中依次加入尼泊金甲酯0.7g、溶脹后的HPMC K4Mlg、溶脹后的HPMC K100M0.5g、氮酮2g、丙二醇0.8g、甘油4g，余量為水，混勻后靜置12-24h，即可形成均勻、細膩、深灰色、黏度適中的100g蟾皮凝膠劑。
[0020]實施例2
選取活蟾蜍取皮，洗凈、晾干，將晾干后的蟾皮于冷凍干燥儀中在溫度為_50°C、壓強為20 Pa的條件下連續冷凍干燥18h，測定蟾皮含水量為3.185%，得鮮蟾皮；將鮮蟾皮于小型粉碎機中粗粉碎直至全部通過10目篩，然后連續超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉，蟾皮超微粉的粒徑小于蟾皮細胞的粒徑，備用。
[0021 ] 精密稱取處方量蟾皮超微粉IOg加40ml70%乙醇，超聲提取30min，揮干乙醇，直至無醇味，制得蟾皮溶液，往蟾皮溶液中依次加入尼泊金甲酯lg、溶脹后的HPMC K4M2g、溶脹后的HPMC K100M0.6g、氮酮3g、丙二醇lg、甘油5g，余量為水，混勻后靜置12_24h，即可形成均勻、細膩、深灰色、黏度適中的100g蟾皮凝膠劑。
[0022]實施例3
選取活蟾蜍取皮，洗凈、晾干，將晾干后的蟾皮于冷凍干燥儀中在溫度為_55°C、壓強為
15Pa的條件下連續冷凍干燥24h，測定蟾皮含水量為2.864%，得鮮蟾皮；將鮮蟾皮于小型粉碎機中粗粉碎直至全部通過10目篩，然后連續超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉，蟾皮超微粉的粒徑小于蟾皮細胞的粒徑，備用。
[0023]精密稱取處方量蟾皮超微粉12g加48ml70%乙醇，超聲提取30min，揮干乙醇，直至無醇味，制得蟾皮溶液，往蟾皮溶液中依次加入尼泊金甲酯1.2g、溶脹后的HPMC K4M3g、溶脹后的HPMC K100M0.7g、氮酮4g、丙二醇1.2g、甘油6g，余量為水，混勻后靜置12_24h，即可形成均勻、細膩、深灰色、黏度適中的100g蟾皮凝膠劑。
[0024]試驗例
蟾皮凝膠劑處方前研究
實驗藥品和試劑:蟾皮(浙江百草中藥飲片公司，產地為江蘇，經本校中藥資源與鑒定教研室張水利教授鑒定為蟾蜍科動物中華大蟾蜍及z/b bufo gargrizans Caflior和黑框蟾蜍及//b melanostictus混合藥材,批號20120521),華蟾酥毒基對照品(中
國食品藥品檢定研究院提供，110803-200605),脂膽毒配基對照品(中國食品藥品檢定研究院提供，110718-200507 )，甲醇(天津市四友精細化學品有限公司，120215，色譜純)，乙腈(天津市四友精細化學品有限公司，091010，色譜純)，甘油(浙江杭州大方化學試劑廠，20050812)，乙醇(杭州長征化學試劑有限公司，20101201 )，環磷酰胺(江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，11072821)，生理鹽水(中國廣州百特醫療用品有限公司生產，GS1105064)，水為高純水，其它試劑均為分析純。
[0025]實驗器材:天美公司LC2000梯度系統；LC2130輸液泵(日本原裝進口)，配梯度洗脫和在線脫氣裝置；LC2030紫外檢測器；手動進樣器7725i ;色譜工作站T2000P ；400克搖擺式高速萬能粉碎機(型號0FY-400，溫嶺市林大機械有限公司);振動式超微粉碎研磨混煉機(XDW-6B1，濟南達微機械有限公司)；WQL粒度儀(LKY-2，上海精密科學儀器有限公司);真空冷凍干燥機(FD-1-50，北京博醫康實驗儀器有限公司)；電熱鼓風干燥箱(HN101-2，南通滬南科學儀器有限公司);烘干法水分測定儀(DHS 20-A，上海精密科學儀器有限公司);電子天平(FA2004，常州市幸運電子設備有限公司)；數控超聲波清洗器(KQ5200DE，昆山市超聲儀器有限公司)；數顯恒溫水浴鍋(HH-4，常州澳華儀器有限公司)。
[0026]實驗動物和材料
細胞株:小鼠S180腹水型腫瘤細胞，由浙江省醫科院提供。動物:健康ICR小鼠，SPF級，雌雄各半，年齡:4-6周，體重18-22g。購自中科院上海實驗動物中，合格證SCXK (滬)2007 -0005。
[0027]方法和結果
蟾皮冷凍干燥工藝:蟾皮冷凍干燥工藝主要影響因素為冷凍干燥時間，冷凍干燥后物料含水量約為3-5%，本實驗以冷凍后藥物水分含量不超過4%為指標，采用單因素考察冷凍干燥時間。精密稱取蟾皮100g置于冷凍干燥儀中(溫度:-50±5°C，壓強:20±5Pa)，分別干燥6h、12h、18h、24h測定藥物水分含量。結果見表1。
[0028]表1冷凍干燥時間考察
【權利要求】
1.一種蟾皮凝膠劑，其特征在于每100份蟾皮凝膠劑由以下重量份數的組份組成:蟾皮 8-12 份、HPMC K4M 1-3 份、HPMC K100M 0.5-0.7 份、薄荷腦 0.8-1.2 份、氮酮 2-4 份、丙二醇0.8-1.2份、甘油4-6份、尼泊金甲酯0.7-1.2份、水余量。
2.根據權利要求1所述的一種蟾皮凝膠劑，其特征在于每100份蟾皮凝膠劑由以下重量份數的組份組成:蟾皮10份、HPMC K4M 2份、HPMC K100M0.6份、薄荷腦1份、氮酮3份、丙二醇1份、甘油5份、尼泊金甲酯1份、水余量。
3.根據權利要求1或2所述的一種蟾皮凝膠劑，其特征在于所述蟾皮含水量為3-4%。
4.蟾皮凝膠劑制備工藝，其特征在于采用如下步驟: (1)預處理:選取活蟾蜍取皮，洗凈、晾干； (2)蟾皮干燥:將步驟(1)處理過的蟾皮于冷凍干燥儀中在-45°C至-55°C，壓強15-25Pa的條件下連續冷凍干燥16-24h，至含水量達到3-4%，制得鮮蟾皮； (3)粉碎處理:將步驟(2)中制得的鮮蟾皮于小型粉碎機中粗粉碎直至全部通過10目篩，然后連續超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉； (4)按處方量精密稱取步驟(3)制得的蟾皮超微粉，按固液比(g:ml)=1:4加入70%的乙醇超聲30min，揮干乙醇，直至無醇味，制得蟾皮溶液； (5)往步驟(4)制得的蟾皮溶液中分別依次加入處方量的尼泊金甲酯、用蒸餾水溶脹后的HPMC K4M及HPMC K100M、氮酮、丙二醇、薄荷腦及甘油，加水定容，混勻后靜置12_24h，SP可形成蟾皮凝膠劑。
5.根據權利要求4所述的蟾皮凝膠劑制備工藝，其特征在于步驟(2)所述的連續冷凍干燥時間優選為18小時。`
6.根據權利要求4所述的蟾皮凝膠制備工藝，其特征在于步驟(3)所述的蟾皮超微粉為粒徑小于蟾皮細胞的粒徑。
7.根據權利要求4所述的蟾皮凝膠劑制備工藝，其特征在于步驟(5)所述的溶脹后的HPMC K4M是按固液比(g:ml) =1:20進行溶脹的，溶脹后的HPMC K100M是按固液比(g:ml)=1.5:100進行溶脹的。
8.根據權利要求7所述的蟾皮凝膠制備工藝，其特征在于所述溶脹后的HPMCK4M:HPMC KlOOM=1:0.23-0.5。
【文檔編號】A61P35/00GK103655620SQ201310554129
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年11月11日 優先權日:2013年11月11日
【發明者】黃繩武, 李雅雅, 趙丹丹, 王俊俊, 蔣杉杉, 閭紅燕 申請人:浙江中醫藥大學