本發明屬于氣管插管技術領域，尤其涉及一種大鼠氣管插管方法及其應用。
背景技術：
大鼠氣管插管技術常用于大鼠氣管給藥、大鼠氣管給藥造模、大鼠肺功能測定以及與呼吸系統疾病相關的實驗研究。大鼠相關模型復制以及大鼠肺功能檢測時均要進行氣管插管，氣管插管技術直接影響動模型復制的成功率以及肺功能檢測的成敗，在整個實驗過程中非常關鍵。
以往的氣管插管方法多以盲插法和氣管切開法為主。
盲插法易插入食管，成功率低，需要反復試插，容易損傷大鼠會咽部，導致分泌大量的粘液而影響給藥，特別在測定肺功能時，粘液堵塞氣管插管直接導致肺功能指標檢測錯誤，盲插法造成創傷較大，容易造成感染，且創傷不易恢復，反而又給動物增加了病理狀態，增加了整個實驗過程的誤差。
氣管切開法需要切開大鼠的頸部皮膚，進行逐層分離暴露氣管并切開氣管，插管后綁緊，這種方法容易造成術后局部感染和一些并發癥的發生，造成了二次創傷，且由于動物插管處理后不能長時間存活，不能進行延續性研究。
技術實現要素：
本發明的目的在于提供一種大鼠氣管插管方法，旨在解決現有氣管插管方法對大鼠存在傷害、創傷以及實驗結果有誤差等問題。
本發明是這樣實現的，一種大鼠氣管插管方法，該方法包括以下步驟：
（1）將麻醉后的大鼠仰臥位放置，固定大鼠四肢、頭部，將大鼠上下頜拉開；
（2）通過適當大小的喉鏡伸入大鼠口腔內暴露大鼠聲門，趁其吸氣的瞬間，將長為6~7cm的氣管套管順勢插入大鼠氣管；其中，在插入大鼠氣管前，所述氣管套管內插入細鐵絲并注入一小節水柱，所述細鐵絲遠離套管插入大鼠氣管方向的尾端繞成圓環狀，所述細鐵絲長度小于套管長度；
（3）觀察套管內水柱的移動變化，若套管內水柱不動或猛烈噴出或吸入，說明插管進入食管，需要重新插管；若套管內水柱隨動物呼吸頻率有節奏的上下運動，說明插入氣管。
優選地，在步驟（3）之后還包括步驟：
（4）在套管插入氣管后，迅速拔出細鐵絲，將預裝有注射液的注射器連接在氣管套管上，一次性推入氣管，立即拔出套管，將大鼠直立，然后左右旋轉1~2分鐘，使注射液在大鼠肺內分布均勻。
優選地，在步驟（1）中，所述麻醉具體為：讓大鼠吸入異氟烷進行麻醉，并通過夾尾無疼痛反應判定是否麻醉成功。
優選地，在步驟（1）中，所述大鼠上下頜拉開的方式為：通過一根橡皮筋勒在大鼠上齒，向前下方牽拉，用另一根橡皮筋勒住下齒向后上方牽拉。
優選地，在步驟（1）中，所述向后上方牽拉的角度為60°。
優選地，在步驟（2）中，所述喉鏡為小動物專用喉鏡；
所述大鼠聲門的暴露操作具體為：手持所述喉鏡伸入大鼠口腔內，喉鏡開口向右下，喉鏡背段向上抬輕輕頂起舌根后暴露大鼠聲門。
優選地，在步驟（2）中，所述氣管套管為去剪掉針頭部分后的一次性使用靜脈輸液管。
本發明進一步提供了一種大鼠氣管插管方法的應用，該大鼠氣管插管方法包括以下步驟：
（1）將麻醉后的大鼠仰臥位放置，固定大鼠四肢、頭部，將大鼠上下頜拉開；
（2）通過適當大小的喉鏡伸入大鼠口腔內暴露大鼠聲門，趁其吸氣的瞬間，將長為6~7cm的氣管套管順勢插入大鼠氣管；其中，在插入大鼠氣管前，所述氣管套管內插入細鐵絲并注入一小節水柱，所述細鐵絲遠離套管插入大鼠氣管方向的尾端繞成圓環狀，所述細鐵絲長度小于套管長度；
（3）觀察套管內水柱的移動變化，若套管內水柱不動或猛烈噴出或吸入，說明插管進入食管，需要重新插管；若套管內水柱隨動物呼吸頻率有節奏的上下運動，說明插入氣管。
上述方法應用在大鼠氣管給藥、大鼠氣管給藥造模以及大鼠肺功能測定等情況下的氣管插管。
本發明克服現有技術的不足，提供一種大鼠氣管插管方法及其應用。本發明方法包括以下步驟：將麻醉后的大鼠仰臥位放置、固定，將大鼠上下頜拉開，通過喉鏡暴露大鼠聲門，將長為6~7cm的氣管套管借助于喉鏡的觀察直接插入大鼠氣管，即聲門開合處；氣管套管內插入細鐵絲（對套管其支持作用）并注入一小節水柱；觀察套管內水柱的移動變化，若套管內水柱不動或猛烈噴出或吸入，說明插管進入食管，需要重新插管；若套管內水柱隨動物呼吸頻率有節奏的上下運動，說明插入氣管。
本發明是在小動物喉鏡引導下進行的，采用小動物喉鏡引導氣管插管可避免切開大鼠的頸部皮膚進行逐層分離并暴露氣管的方法，消除了大鼠的切開皮膚術后局部感染和一些并發癥的誘因，避免了二次創傷。
在造模過程中應用小動物喉鏡引導可減少經典造模過程中的縫合過程，并可減少麻藥的用量，在大量動物造模的過程中可極大的提高效率，避免了傳統方法多次插管造成的氣管粘液分泌及創傷，在應用在造模過程中，可減少或避免大鼠會咽部炎癥，避免因刺激導致的粘液堵塞插管進而影響給藥及肺功能測定（粘液進入或堵塞插管對于肺功能指標的檢測是致命的），是對以往方法的改進，具有簡便、無創傷、速度快、造模和給藥成功率高的特點。
另外，本發明插管過程中動物的麻醉采用實驗動物用臺式麻醉機異氟烷吸入麻醉法，具有良好的麻醉作用，麻醉誘導和復蘇均較快。麻醉時無交感神經系統興奮現象，在體內很少被分解，以原形由呼吸道排出， 而傳統的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉對呼吸的抑制作用明顯，氣管分泌粘液多，不利于插管的進行。
相比于現有技術的缺點和不足，本發明具有以下有益效果：
（1）本發明插管方法消除了大鼠的切開皮膚術后局部感染和一些并發癥的誘因，避免了二次創傷；
（2）本發明插管方法在應用在造模過程中，可減少經典造模過程中的縫合過程、麻藥的用量，避免了傳統方法多次插管造成的氣管粘液分泌及創傷，在應用在造模過程中，可減少或避免大鼠會咽部炎癥，避免因刺激導致的粘液堵塞插管進而影響給藥及肺功能測定（粘液進入或堵塞插管對于肺功能指標的檢測是致命的），具有簡便、無創傷、速度快、造模和給藥成功率高的特點。
具體實施方式
為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。
本發明公開了一種大鼠氣管插管方法，該方法包括以下步驟：
（1）常規飼養動物，用實驗動物用臺式麻醉機異氟烷吸入麻醉，待夾尾無疼痛反應后，將大鼠仰臥位固定于鼠板上，固定四肢，固定頭部，使頭部略向后仰。助手用一根橡皮筋勒在大鼠上齒，向前下方牽拉，用另一根橡皮筋勒住下齒向后上方牽拉（角度以60o為宜）；
（2）術者左手持小動物專用喉鏡，伸入大鼠口腔內，開口向右下，背段向上略上抬輕輕頂起舌根，暴露聲門，趁動物吸氣的瞬間，將自制的氣管套管（將一次性使用靜脈留置針（22G×25mm/Y-G）剪去針頭的部分，剩下塑料膠管的長度以6～7cm為宜，用細鐵絲把尾端做成圓環狀插入膠管內作為針芯，長度與塑料膠管相等，不可超出膠管，以免刺傷大鼠喉部）順勢插入大鼠氣管內，預先在套管內注入2~3節小水柱；
（3）觀察套管內水柱的移動變化，若套管內水柱不動或猛烈噴出或吸入，說明插管進入食管，需要重新插管；若套管內水柱隨動物呼吸頻率有節奏的上下運動，說明插入氣管。
（4）插入氣管成功后，迅速拔出針芯，將事先抽好藥液或生理鹽水的lml注射器連接在氣管套管上，一次性推入氣管。注藥后，立即拔出套管，將動物直立，然后左右旋轉約1分鐘，使藥物在肺內分布均勻。待動物自然清醒后，常規SPF飼養。
本發明大鼠氣管插管方法用于大鼠氣管給藥、大鼠氣管給藥造模、大鼠肺功能測定以及與呼吸系統疾病相關的實驗研究。大鼠相關模型復制以及大鼠肺功能檢測時均要進行氣管插管，氣管插管技術直接影響動模型復制的成功率以及肺功能檢測的成敗，在整個實驗過程中非常關鍵。
本方法是在小動物喉鏡引導下進行的，采用小動物喉鏡引導氣管插管可避免切開大鼠的頸部皮膚進行逐層分離并暴露氣管的方法，消除了大鼠的切開皮膚術后局部感染和一些并發癥的誘因，避免了二次創傷。在造模過程中應用小動物喉鏡引導可減少經典造模過程中的縫合過程，并可減少麻藥的用量，在大量動物造模的過程中可極大的提高效率。是對以往方法的改進，具有簡便、無創傷、速度快、造模和給藥成功率高的特點。
另外，本發明插管過程中動物的麻醉采用實驗動物用臺式麻醉機異氟烷吸入麻醉法，具有良好的麻醉作用，麻醉誘導和復蘇均較快。麻醉時無交感神經系統興奮現象，在體內很少被分解，以原形由呼吸道排出， 而傳統的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉對呼吸的抑制作用明顯，氣管分泌粘液多，不利于插管的進行。
以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，并不用以限制本發明，凡在本發明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。