本發(fā)明涉及一種柿葉總黃酮的制備方法。

背景技術(shù)：

黃酮類(lèi)化合物是一類(lèi)廣泛存在于植物中的天然產(chǎn)物，由于其具有抑菌消炎、抗氧化口、預(yù)防心血管疾病和抗腫瘤H1等功效，近年來(lái)受到人們的極大關(guān)注。柿葉為柿樹(shù)科(Ebenaceae)柿屬(Diospyros)植物柿(Diospyros kaki L．f)的新鮮或干燥葉片，味苦：性寒、無(wú)毒，其主要有效成分是黃酮類(lèi)化合物。已有研究表明柿葉總黃酮具有多種藥理和I臨床作用，因而成為一類(lèi)極具開(kāi)發(fā)前景的天然植物藥用資源。

近年來(lái)，隨著環(huán)境污染日趨嚴(yán)重，人類(lèi)對(duì)各類(lèi)化學(xué)藥物的使用大幅增加，與肝臟有關(guān)的疾病呈不斷上升趨勢(shì)。各種肝臟疾病，諸如A或B型肝炎、中毒性肝炎、肝囊腫、肝血管瘤、肝纖維化和肝硬化等已嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康，因而肝損傷保護(hù)研究成為天然藥物研究的熱點(diǎn)之一。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提出一種柿葉總黃酮的制備方法。

1、一種柿葉總黃酮的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）取柿葉，清洗陰干后粉碎，用245目粒徑過(guò)篩，備用；

（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液備用；

（3）聯(lián)苯雙酯滴丸配制成質(zhì)量濃度為10mg／mL聯(lián)苯雙酯水溶液備用；

（4）稱(chēng)取柿葉粉10g，置于平底燒瓶，加入石油醚浸泡脫脂和除去葉綠素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加熱于20-105℃條件下提取50-150min，抽濾，定容；

（5）將提取液上聚酰胺型大孔樹(shù)脂柱吸附，用蒸餾水淋洗至洗脫液無(wú)色后，用100 mL濃度為70％的乙醇解吸，收集流出液，濃縮蒸干，85-150℃干燥，得初步純化的柿葉總黃酮。

如權(quán)利要求1所述一種柿葉總黃酮的制備方法，其特征在于：所述水浴溫度為85℃。

如權(quán)利要求1所述一種柿葉總黃酮的制備方法，其特征在于：所述步驟（4）加熱時(shí)間為70分鐘。

如權(quán)利要求1所述一種柿葉總黃酮的制備方法，其特征在于：所述步驟（4）加熱時(shí)間為90分鐘。

如權(quán)利要求1所述一種柿葉總黃酮的制備方法，其特征在于：所述步驟（5）干燥時(shí)間為105℃。

本發(fā)明所述方法制備的柿葉總黃酮，純化后柿葉提取物中總黃酮含量達(dá)72．5％。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1。

一種柿葉總黃酮的制備方法，包括以下步驟：

（1）取柿葉，清洗陰干后粉碎，用245目粒徑過(guò)篩，備用；

（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液備用；

（3）聯(lián)苯雙酯滴丸配制成質(zhì)量濃度為10mg／mL聯(lián)苯雙酯水溶液備用；

（4）稱(chēng)取柿葉粉10g，置于平底燒瓶，加入石油醚浸泡脫脂和除去葉綠素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加熱于20-105℃條件下提取50-150min，抽濾，定容；

（5）將提取液上聚酰胺型大孔樹(shù)脂柱吸附，用蒸餾水淋洗至洗脫液無(wú)色后，用100 mL濃度為70％的乙醇解吸，收集流出液，濃縮蒸干，85-150℃干燥，得初步純化的柿葉總黃酮。

實(shí)施例2。

一種柿葉總黃酮的制備方法，包括以下步驟：

（1）取柿葉，清洗陰干后粉碎，用245目粒徑過(guò)篩，備用；

（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液備用；

（3）聯(lián)苯雙酯滴丸配制成質(zhì)量濃度為10mg／mL聯(lián)苯雙酯水溶液備用；

（4）稱(chēng)取柿葉粉10g，置于平底燒瓶，加入石油醚浸泡脫脂和除去葉綠素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加熱于20-105℃條件下提取50-150min，抽濾，定容；

（5）將提取液上聚酰胺型大孔樹(shù)脂柱吸附，用蒸餾水淋洗至洗脫液無(wú)色后，用100 mL濃度為70％的乙醇解吸，收集流出液，濃縮蒸干，85-150℃干燥，得初步純化的柿葉總黃酮；

（6）所述水浴溫度為85℃。

實(shí)施例3。

一種柿葉總黃酮的制備方法，包括以下步驟：

（1）取柿葉，清洗陰干后粉碎，用245目粒徑過(guò)篩，備用；

（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液備用；

（3）聯(lián)苯雙酯滴丸配制成質(zhì)量濃度為10mg／mL聯(lián)苯雙酯水溶液備用；

（4）稱(chēng)取柿葉粉10g，置于平底燒瓶，加入石油醚浸泡脫脂和除去葉綠素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加熱于20-105℃條件下提取50-150min，抽濾，定容；

（5）將提取液上聚酰胺型大孔樹(shù)脂柱吸附，用蒸餾水淋洗至洗脫液無(wú)色后，用100 mL濃度為70％的乙醇解吸，收集流出液，濃縮蒸干，85-150℃干燥，得初步純化的柿葉總黃酮；

（6）所述水浴溫度為85℃；

（7）所述步驟（4）加熱時(shí)間為70分鐘。

實(shí)施例4。

一種柿葉總黃酮的制備方法，包括以下步驟：

（1）取柿葉，清洗陰干后粉碎，用245目粒徑過(guò)篩，備用；

（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液備用；

（3）聯(lián)苯雙酯滴丸配制成質(zhì)量濃度為10mg／mL聯(lián)苯雙酯水溶液備用；

（4）稱(chēng)取柿葉粉10g，置于平底燒瓶，加入石油醚浸泡脫脂和除去葉綠素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加熱于20-105℃條件下提取50-150min，抽濾，定容；

（5）將提取液上聚酰胺型大孔樹(shù)脂柱吸附，用蒸餾水淋洗至洗脫液無(wú)色后，用100 mL濃度為70％的乙醇解吸，收集流出液，濃縮蒸干，85-150℃干燥，得初步純化的柿葉總黃酮；

（6）所述水浴溫度為85℃；

（7）所述步驟（4）加熱時(shí)間為90分鐘。

實(shí)施例5。

一種柿葉總黃酮的制備方法，包括以下步驟：

（1）取柿葉，清洗陰干后粉碎，用245目粒徑過(guò)篩，備用；

（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液備用；

（3）聯(lián)苯雙酯滴丸配制成質(zhì)量濃度為10mg／mL聯(lián)苯雙酯水溶液備用；

（4）稱(chēng)取柿葉粉10g，置于平底燒瓶，加入石油醚浸泡脫脂和除去葉綠素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加熱于20-105℃條件下提取50-150min，抽濾，定容；

（5）將提取液上聚酰胺型大孔樹(shù)脂柱吸附，用蒸餾水淋洗至洗脫液無(wú)色后，用100 mL濃度為70％的乙醇解吸，收集流出液，濃縮蒸干，85-150℃干燥，得初步純化的柿葉總黃酮；

（6）所述水浴溫度為85℃；

（7）所述步驟（4）加熱時(shí)間為70分鐘；

（8）所述步驟（5）干燥時(shí)間為105℃。