本發(fā)明屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
寄生蟲(chóng)病是養(yǎng)殖業(yè)中常見(jiàn)的危害嚴(yán)重的一類(lèi)疾病，由于寄生蟲(chóng)奪取畜禽所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)病，分泌有害物質(zhì)，造成動(dòng)物消瘦、貧血、衰弱、降低生產(chǎn)性能，甚至死亡。伊維菌素是一種新型的廣譜、高效、低毒的抗生素類(lèi)抗寄生蟲(chóng)藥，對(duì)大多數(shù)的體內(nèi)外寄生蟲(chóng)均有良好驅(qū)殺作用。目前廣泛應(yīng)用于動(dòng)物的蜱、螨、蚊、線蟲(chóng)等體內(nèi)外寄生蟲(chóng)病。如今，在許多國(guó)家已被制成多種制劑，如片劑、注射劑、粉劑、膠囊劑、口服液、透皮劑、軟膏、搽劑等。
目前市場(chǎng)上的透皮劑類(lèi)、口服類(lèi)藥物持效時(shí)間短、需反復(fù)多次用藥；注射劑類(lèi)藥物費(fèi)工費(fèi)時(shí)，不適合放牧地區(qū)及大型養(yǎng)殖場(chǎng)等嚴(yán)重制約著寄生蟲(chóng)病的防控效果。本發(fā)明旨在研制出藥效時(shí)間長(zhǎng)、穩(wěn)定性好、高效、安全的伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，解決養(yǎng)殖場(chǎng)給藥費(fèi)時(shí)費(fèi)力的問(wèn)題。以期為獸醫(yī)臨床提供使用方便、持效時(shí)間比較長(zhǎng)的伊維菌素制劑，達(dá)到有效預(yù)防和控制牛、羊寄生蟲(chóng)病的效果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)目前市場(chǎng)上的透皮劑類(lèi)、口服類(lèi)藥物持效時(shí)間短、需反復(fù)多次用藥等問(wèn)題，本發(fā)明依據(jù)伊維菌素不溶于水、易溶于有機(jī)溶劑的理化性質(zhì)，經(jīng)過(guò)篩選多種溶劑系統(tǒng)，以高效滲透促進(jìn)劑氮酮、無(wú)水乙醇、n,n-二甲基甲酰胺和α-吡咯烷酮為賦型劑，進(jìn)行最佳的溶劑組合，采用透皮吸收理論和生產(chǎn)工藝等研制而成的伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，該產(chǎn)品具有使用方便、安全、有效時(shí)間長(zhǎng)的特點(diǎn)，可有效地殺滅動(dòng)物體內(nèi)寄生蟲(chóng)及體外寄生蟲(chóng)。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：2~20g；無(wú)水乙醇：100~200ml；氮酮：10~30ml；α-吡咯烷酮：100~400ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
根據(jù)上述的伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：10~15g；無(wú)水乙醇：160~180ml；氮酮：15~25ml；α-吡咯烷酮：200~350ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
所述的伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑的制備方法，包括以下步驟：
（1）按照上述配比稱(chēng)取伊維菌素原料藥和無(wú)水乙醇，將伊維菌素原料藥溶于無(wú)水乙醇中，攪拌至完全溶解得到混合液a；
（2）先取體積分?jǐn)?shù)為總體積20-30%的n,n-二甲基甲酰胺，加入配方量的氮酮，得到混合液b；
（3）將混合液b加入至混合液a中，攪拌均勻得到混合液c；
（4）向混合液c中加入配方量的α-吡咯烷酮，攪拌均勻得到混合液d；
（5）向混合液d加入余量的n,n-二甲基甲酰胺，攪拌均勻得到伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：
1.本發(fā)明依據(jù)伊維菌素不溶于水、易溶于有機(jī)溶劑的理化性質(zhì)，經(jīng)過(guò)篩選多種溶劑系統(tǒng)，以高效滲透促進(jìn)劑氮酮、無(wú)水乙醇、n,n-二甲基甲酰胺和α-吡咯烷酮為賦型劑，進(jìn)行最佳的溶劑組合，采用透皮吸收理論和生產(chǎn)工藝等研制而成的伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，該產(chǎn)品具有使用方便、安全、有效時(shí)間長(zhǎng)的特點(diǎn)，可有效地殺滅動(dòng)物體內(nèi)寄生蟲(chóng)及體外寄生蟲(chóng)。
2.本發(fā)明首先對(duì)伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑的制備工藝進(jìn)行了研究，優(yōu)選了伊維菌素透皮吸收劑的處方工藝；進(jìn)行了凍融試驗(yàn)、藥物析出度試驗(yàn)和穩(wěn)定性考察；用高效液相色譜檢測(cè)方法檢測(cè)長(zhǎng)效伊維菌素透皮吸收劑的含量；通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制、精密度試驗(yàn)、回收率試驗(yàn)等驗(yàn)證此方法的準(zhǔn)確性。
附圖說(shuō)明
圖1是伊維菌素的標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
具體實(shí)施方式
以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的內(nèi)容進(jìn)一步描述，但不局限于這些實(shí)施例。
實(shí)施例1
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：2~20g；無(wú)水乙醇：100~200ml；氮酮10~30ml；α-吡咯烷酮100~400ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
所述的伊維菌素透皮吸收劑的制備方法，包括以下步驟：
（1）按照上述配比稱(chēng)取伊維菌素原料藥和無(wú)水乙醇，將伊維菌素原料藥溶于無(wú)水乙醇中，攪拌至完全溶解得到混合液a；
（2）先取體積分?jǐn)?shù)為總體積20-30%的n,n-二甲基甲酰胺，然后加入配方量的氮酮，得到混合液b；
（3）將混合液b加入至混合液a中，攪拌均勻得到混合液c；
（4）向混合液c中加入配方量的α-吡咯烷酮，攪拌均勻得到混合液d；
（5）向混合液d加入余量的n,n-二甲基甲酰胺，攪拌均勻得到伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑。
實(shí)施例2
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：15g；無(wú)水乙醇：180ml；氮酮：20ml；α-吡咯烷酮300ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例3
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：2g；無(wú)水乙醇：120ml；氮酮30ml；α-吡咯烷酮200ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例4
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：3g；無(wú)水乙醇：110ml；氮酮28ml；α-吡咯烷酮260ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例5
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：5g；無(wú)水乙醇：140ml；氮酮25ml；α-吡咯烷酮300ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例6
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：6g；無(wú)水乙醇：150ml；氮酮20ml；α-吡咯烷酮180ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例7
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：8g；無(wú)水乙醇：160ml；氮酮23ml；α-吡咯烷酮220ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例8
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：9g；無(wú)水乙醇：135ml；氮酮19ml；α-吡咯烷酮250ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例9
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：10g；無(wú)水乙醇：165ml；氮酮20ml；α-吡咯烷酮260ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例10
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：12g；無(wú)水乙醇：170ml；氮酮26ml；α-吡咯烷酮160ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例11
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：20g；無(wú)水乙醇：180ml；氮酮15ml；α-吡咯烷酮360ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例12
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：19g；無(wú)水乙醇：190ml；氮酮22ml；α-吡咯烷酮320ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例13
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：18g；無(wú)水乙醇：185ml；氮酮16ml；α-吡咯烷酮240ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例15
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：16g；無(wú)水乙醇：170ml；氮酮10ml；α-吡咯烷酮400ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例16
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：14g；無(wú)水乙醇：160ml；氮酮30ml；α-吡咯烷酮100ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例17
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：13.5g；無(wú)水乙醇：135ml；氮酮29ml；α-吡咯烷酮210ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例18
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：12g；無(wú)水乙醇：160ml；氮酮24ml；α-吡咯烷酮340ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例19
本發(fā)明提供了一種伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑，每升伊維菌素長(zhǎng)效透皮吸收劑包括以下組分：伊維菌素原料藥：16g；無(wú)水乙醇：130ml；氮酮26ml；α-吡咯烷酮180ml；n,n-二甲基甲酰胺：加至1l。
本實(shí)施例的制備方法與實(shí)施例1相同。
1、處方研究
（1）處方依據(jù)
依據(jù)伊維菌素的理化性質(zhì)將其做成長(zhǎng)效透皮吸收劑，藥物能通過(guò)皮膚迅速吸收而很快發(fā)揮療效，同時(shí)用藥劑量也容易控制。長(zhǎng)效透皮吸收制劑具有其它劑型不可比擬的優(yōu)點(diǎn)，使用方便，安全、有效時(shí)間長(zhǎng)，無(wú)毒副作用。
因?yàn)殚L(zhǎng)效透皮吸收制劑是油性系統(tǒng)，溶液需呈微黃色或幾乎無(wú)色、澄清透明的油狀液體，而伊維菌素在水、油中的溶解性不好，所以選取無(wú)毒、無(wú)副作用的合適溶媒是處方篩選的關(guān)鍵，首先要解決的問(wèn)題是伊維菌素的溶解性。篩選溶媒時(shí)不僅要考慮治療的需求，還要考慮安全性、有效性，以及成本降到最低等因素。查閱相關(guān)文獻(xiàn)，同時(shí)進(jìn)行了資料檢索，根據(jù)油性系統(tǒng)常用的溶劑系統(tǒng)和伊維菌素的理化性質(zhì)，以采用的溶劑系統(tǒng)與主藥不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，不干擾主藥的含量測(cè)定，有利于溶液的穩(wěn)定和藥物的溶解為依據(jù)，對(duì)處方進(jìn)行了篩選和確定。
針對(duì)上述情況，采用排除法篩選最合適的溶媒，優(yōu)良的溶劑應(yīng)對(duì)藥物有較好的溶解性和分散性，毒性小，無(wú)刺激性，無(wú)不適的臭味。溶媒的選取主要從非極性溶媒、半極性溶媒入手，分別篩選了無(wú)水乙醇、n,n-二甲基甲酰胺、丙二醇為溶媒。由于透皮劑型的特點(diǎn)，為增加生物利用度，選取油性月桂氮卓酮為透皮吸收促進(jìn)劑。根據(jù)溶液的澄明狀態(tài)、溶劑的毒性大小、工藝的繁瑣程度、成本的預(yù)算情況，最后確定了無(wú)水乙醇、n,n-二甲基甲酰胺、丙二醇為溶媒系統(tǒng)，溶媒聯(lián)用不僅提高了藥物的溶解度，而且增加藥物的穩(wěn)定性和安全性。
溶媒系統(tǒng)確定后，為進(jìn)一步增加藥物的溶解性，且制備出持效時(shí)間長(zhǎng)的透皮制劑，經(jīng)過(guò)篩選，選取大分子物質(zhì)α-吡咯烷酮為長(zhǎng)效劑，由于其獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，在透皮溶液中不僅起到較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)持續(xù)釋放藥物的特點(diǎn)，還避免了藥物的水解和降解，提高藥物的穩(wěn)定性。
長(zhǎng)效伊維菌素透皮劑主要是根據(jù)藥劑學(xué)的理論進(jìn)行處方設(shè)計(jì)的，處方設(shè)計(jì)前的基礎(chǔ)工作，如測(cè)定藥物的理化性質(zhì)等。做到了程序化、規(guī)范化，為最終處方的確定提供了有力的依據(jù)。
（2）處方篩選
①伊維菌素透皮吸收劑的溶媒處方篩選
根據(jù)上述伊維菌素原料的理化性質(zhì)和初步溶劑篩選的結(jié)果，設(shè)定了伊維菌素透皮吸收劑的初工藝，擬定了多個(gè)處方進(jìn)行篩選，首先從溶劑系統(tǒng)開(kāi)始篩選，分別選用無(wú)水乙醇、n,n-二甲基甲酰胺、丙二醇作為伊維菌素溶劑，然后篩選不同濃度比例的附加劑，確定添加量，分別做了試驗(yàn)，并將每個(gè)溶劑配方配制成三個(gè)不同濃度伊維菌素的溶液，即含伊維菌素濃度分別為0.5%、1.0%、1.5%的伊維菌素透皮劑，篩選出選出穩(wěn)定性最好的濃度的伊維菌素透皮劑。幾種不同溶媒的配比處方見(jiàn)表1。
通過(guò)室溫觀察、高溫試驗(yàn)、冷凍試驗(yàn)觀察配制的伊維菌素透皮劑的性狀來(lái)判斷藥物的穩(wěn)定性。藥物若溶解完全，即成幾乎無(wú)色、澄清透明的油狀液體。首先進(jìn)行室溫觀察：將配制好的伊維菌素透皮劑放至室溫，觀察藥物是否溶解完全，即成幾乎無(wú)色、澄清透明的油狀液體。反之即為白色渾濁液體。如果完全溶解，將其繼續(xù)放置室溫內(nèi)靜置。分別于0.5h、1h、3h觀察溶液有無(wú)變渾濁，來(lái)判斷藥物的穩(wěn)定性。然后是冷凍試驗(yàn)：將室溫觀察通過(guò)的溶劑過(guò)濾，于4℃冰箱中放置15h后取出觀察伊維菌素透皮劑的性狀，指標(biāo)與室溫觀察相同，且連續(xù)觀察三天。如果溶液變渾濁，將其室溫靜置1-2h后觀察藥物是否恢復(fù)澄清透明。如果短時(shí)間恢復(fù)說(shuō)明藥物穩(wěn)定性較好。反之，則證明此種配方伊維菌素穩(wěn)定性差。最后進(jìn)行高溫試驗(yàn)，方法同冷凍試驗(yàn)。結(jié)果見(jiàn)表2。
通過(guò)上表可以看出，處方2和處方6的效果穩(wěn)定性較好，溶劑篩選的結(jié)果是復(fù)合溶劑為最佳溶劑，溶劑聯(lián)用具有良好的潛溶效應(yīng)，以此處方為基礎(chǔ)處方，確定了透皮吸收促進(jìn)劑和附加劑在伊維菌素、溶液中的最佳用量。
②伊維菌素透皮溶液加入長(zhǎng)效劑后的溶媒處方篩選
根據(jù)溶劑、附加劑篩選的結(jié)果，根據(jù)獸藥典的規(guī)定和要求，加入一定比例的長(zhǎng)效劑α-吡咯烷酮，除對(duì)處方2和6進(jìn)行了深入研究和進(jìn)一步篩選外，還增加了一組處方篩選。結(jié)果見(jiàn)表3。
檢測(cè)其溶液穩(wěn)定性（方法同溶媒處方穩(wěn)定性篩選）：結(jié)果見(jiàn)表4。
通過(guò)上表可以得出處方a3符合要求，將處方a3藥品經(jīng)密封并通過(guò)進(jìn)一步的穩(wěn)定性試驗(yàn)鑒定，本批藥品置于冷藏室一周，每天觀察結(jié)果，見(jiàn)表5。
由上表可知，藥品穩(wěn)定性良好。可最后確定處方和制備工藝。經(jīng)小試、中試和車(chē)間生產(chǎn)多次反復(fù)驗(yàn)證，證明長(zhǎng)效伊維菌素透皮溶液的組方比較合理，生產(chǎn)工藝切實(shí)可行，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。處方a3三種濃度伊維菌素溶液即0.5%伊維菌素、1%伊維菌素、1.5%伊維菌素溶液穩(wěn)定性均良好。
2、長(zhǎng)效伊維菌素透皮劑的含量測(cè)定
本試驗(yàn)采用高效液相色譜法測(cè)定透皮劑中伊維菌素的含量，色譜柱選擇：（waterssurfirec18柱150mm×2.1mm,5μm)，流動(dòng)相為乙腈—甲醇—水(56∶38∶6)，流速1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量20μl。
（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精確稱(chēng)取伊維菌素標(biāo)準(zhǔn)品20.86mg，置200ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得100μg/ml對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。精確量取儲(chǔ)備液1.0、2.0、4.0、5.0、10.0ml,置于5個(gè)10ml的容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，得濃度分別為10、20、40、50、100μg/ml的系列溶液，分別進(jìn)樣20μl，以濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
a.對(duì)照品溶液的制備精確量取伊維菌素對(duì)照品儲(chǔ)備液10ml置于10ml量瓶中，得濃度為100μg/ml的伊維菌素對(duì)照品溶液1。精確稱(chēng)取伊維菌素標(biāo)準(zhǔn)品15.29mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得150μg/ml對(duì)照品溶液2。
b.供試品溶液的制備分別精確量取伊維菌素含量為0.5%、1%、1.5%的伊維菌素透皮劑2.0、1.0、1.0ml于100ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，超聲震蕩3min，得濃度分別為100、100、150μg/ml的系列溶液，分別進(jìn)樣20μl測(cè)定,得伊維菌素透皮劑三個(gè)濃度的含量。
經(jīng)試驗(yàn)，伊維菌素在10~100μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。以標(biāo)準(zhǔn)液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。該標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為y=31172x+137536.4472，r2=0.99962，r=0.9998，結(jié)果符合要求，見(jiàn)圖1。
（2）精密度試驗(yàn)取伊維菌素含量為0.5%、1%、1.5%的伊維菌素透皮劑供試品溶液，在“(1)”條件下分別進(jìn)樣20μl，分別于1d內(nèi)測(cè)定5次，5天內(nèi)隔天測(cè)定3d，計(jì)算日內(nèi)和日間精密度。經(jīng)計(jì)算，三個(gè)樣品的日內(nèi)精密度和日間精密度均小于1%，說(shuō)明本試驗(yàn)精密度良好，見(jiàn)表6。
(3)回收率試驗(yàn)配制一定濃度的樣品溶液，分別加入不同濃度的對(duì)照品溶液，伊維菌素含量為0.5%、1.0%、1.5%的透皮劑各制備出伊維菌素含量為37.5μg/ml、50μg/ml的兩種濃度，進(jìn)樣測(cè)定，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量和回收率。
a.配制對(duì)照品濃度取對(duì)照品a25ml于100ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，制成濃度為50μg/ml的溶液,記為對(duì)照品。取對(duì)照品25ml于50ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，制成濃度為25μg/ml的溶液，記為對(duì)照品。用對(duì)照品2同法配制對(duì)照品，濃度為37.5μg/ml。
b.配制樣品濃度取樣品1、樣品2、樣品3各1ml分別于100、200、200ml容量瓶中，每個(gè)樣品設(shè)兩個(gè)平行，用甲醇定容至刻度，制成濃度為50、50、75μg/ml的溶液經(jīng)測(cè)定伊維菌素含量為0.5%、1.0%、1.5%的透皮劑的回收率均在90%左右，符合要求，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表7。
（4）含量測(cè)定制定兩個(gè)批次伊維菌素，分別測(cè)定這三個(gè)批次三個(gè)濃度即含伊維菌素為0.5%、1.0%、1.5%的伊維菌素透皮劑中伊維菌素的含量，記錄不同批次間的含量變化。將每個(gè)批次伊維菌素含量為0.5%、1.0%、1.5%的透皮劑依次標(biāo)為樣1、樣2、樣3。不同批次不同濃度透皮劑含量見(jiàn)表8。
（5）水分測(cè)定用自動(dòng)水分滴定儀測(cè)定伊維菌素透皮劑中的水分。依據(jù)中國(guó)獸藥典2010版規(guī)定伊維菌素注射液含水量不得超過(guò)1%。經(jīng)測(cè)定樣品1平均含水量為1.24%，樣品2為0.94%，樣品3為0.88%。樣品2和樣品3符合要求，結(jié)果如表9所示。
3、本藥物處方優(yōu)點(diǎn)：
本發(fā)明制備了長(zhǎng)效伊維菌素透皮吸收劑并建立相應(yīng)的檢測(cè)方法，以期為獸醫(yī)臨床提供使用方便、持效時(shí)間比較長(zhǎng)的伊維菌素制劑。本吸收劑經(jīng)皮給藥，使藥物通過(guò)皮膚吸收后進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)而發(fā)揮全身療效。該制劑最大的優(yōu)點(diǎn)是經(jīng)皮給藥，避免了肝臟的首過(guò)效應(yīng)，用藥方便，減少對(duì)喂藥動(dòng)物的應(yīng)激性刺激，且有效時(shí)間長(zhǎng)，減少動(dòng)物的用藥次數(shù)，血藥濃度“峰谷”波動(dòng)小，血藥濃度平穩(wěn)，可避免超過(guò)治療血藥濃度范圍的毒副作用且能保持在治療期內(nèi)維持療效。
上述為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式，在不脫離本發(fā)明所附權(quán)利說(shuō)明書(shū)所限定的本發(fā)明精神范圍內(nèi)，在形式和細(xì)節(jié)上對(duì)本發(fā)明所做的任何變化，都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。