本發明涉及醫學領域，更具體的說是涉及一種大鼠肺細胞纖維化模型。
背景技術：
胺碘酮又稱乙胺碘呋酮，是含碘苯丙呋喃衍生物，作為ⅲ類抗心律失常藥物廣泛應用于臨床，主要用于治療室性心律失常和心房顫動。其副作用主要表現為肺毒性、甲狀腺毒性、心臟毒性、消化系統毒性等，其中肺毒性反應最為嚴重，其發生率在1％-10％，肺毒性主要表現為肺纖維化，因臨床缺乏有效治療措施，其死亡率高達33％，嚴重影響人民生命健康。但胺碘酮在抗心律失常方面療效確切、穩定，目前尚無其他類似藥物替代，在臨床上應用仍十分廣泛。因此，闡明胺碘酮誘導肺纖維化機制對降低其藥物毒副作用，逆轉或延緩肺纖維化進程、改善患者預后、提高生存率有重要的臨床意義。目前其發病機制尚不清楚，無有效的治療方法，肺纖維化動物模型是研究疾病發生發展和新型藥物必不可少的實驗手段，在嚴格控制各種條件下，利用動物模型，我們可以觀察肺纖維化的發生、發展和疾病轉歸以及這些不同改變在形態學、影像學和分子生物學上的表現等規律。因此，建立一種簡便、成熟而穩定的符合胺碘酮誘導肺纖維化發病過程的動物模型，對深入研究肺纖維化發病機制、開發先進的治療方法具有極其重要的意義。
現有的構建肺纖維化動物模型的方法有很多，主要包括：氣管切開術、氣管插管、額鏡引導灌注、腹腔注射、鼻腔給藥、靜脈滴注化學藥物法和口咽部給藥法，造模方法有很多，但是各自存在缺點，比如氣管切開對標本鼠的外源性創傷大操作繁雜，對相關實驗室數據的影響較大，且實施操作耗費時間。
技術實現要素：
針對現有技術存在的不足，本發明的目的在于提供一種大鼠肺細胞纖維化模型，操作方便，在給藥過程對大鼠損傷小。
為實現上述目的，本發明提供了如下技術方案：一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，隨機分為給藥組和對照組，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，給藥的過程中觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長20-30天；對于對照組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于等體積0.9％氯化鈉注射液，給樣的過程中觀察小鼠的呼吸情況，給樣結束，讓大鼠繼續生長20-30天；然后給藥組和對照組用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
作為本發明的進一步改進，所述藥品中胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉濃度分別為3-5mg/ml和0.03-0.06mg/ml。
作為本發明的進一步改進，所述藥品中含有濃度為5-10μm的1-磷酸鞘氨醇和1-5μm的激動劑sew2871。
作為本發明的進一步改進，所述胺碘酮的給藥量為3-5mg/kg體重。
作為本發明的進一步改進，所述采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品具體步驟如下：將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上；給藥步驟如下，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持3-5s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品100-200μl進入鼻腔內，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，推注完畢后，保持5-10s，重復上述給藥步驟若干次，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，然后置于恒溫大鼠房飼養。
作為本發明的進一步改進，所述加樣槍的加樣速度為15-30μl/min。
作為本發明的進一步改進，鼻腔給藥后將小鼠直立旋轉2-3min，利用體位及重力作用，盡量使藥液在兩側肺內均勻分布。
作為本發明的進一步改進，鼻腔給藥時把鼠板豎起與桌面成70-80°夾角，然后向右傾斜與桌面成60-70°夾角，將藥品吹入單側肺中。
本發明的大鼠肺細胞纖維化模型，采用無創鼻腔給藥注入胺碘酮構建肺纖維化大鼠模型，其操作方便，成功率高，在給藥過程對大鼠損傷小，減少氣管切開等對大鼠造成的外源性損傷，在給藥過程大鼠死亡率小，且能夠保證藥物完全進入氣管內。
具體實施方式
下面將結合實施例對本發明做進一步的詳述。
實施例1
一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有濃度分別為3mg/ml和0.03mg/ml的胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，所述胺碘酮的給藥量為3mg/kg體重，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，把鼠板豎起與桌面成70°夾角，然后向右傾斜與桌面成60°夾角，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持3s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品100μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為15μl/min，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，然后吹入單側肺中，推注完畢后，保持5s，重復上述給藥步驟3次，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給藥的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長20天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
實施例2
一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有濃度分別為4mg/ml和0.04mg/ml的胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，所述胺碘酮的給藥量為4mg/kg體重，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，把鼠板豎起與桌面成75°夾角，然后向右傾斜與桌面成65°夾角，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持4s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品150μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為20μl/min，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，然后吹入單側肺中，推注完畢后，保持6s，重復上述給藥步驟3次，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給藥的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長28天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
實施例3
一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有濃度分別為5mg/ml和0.06mg/ml的胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，所述胺碘酮的給藥量為5mg/kg體重，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，把鼠板豎起與桌面成80°夾角，然后向右傾斜與桌面成70°夾角，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持5s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品200μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為30μl/min，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，然后吹入單側肺中，推注完畢后，保持10s，重復上述給藥步驟4次，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給藥的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長30天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
實施例4
一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有濃度分別為3mg/ml和0.03mg/ml的胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，所述胺碘酮的給藥量為3mg/kg體重，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持4s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品100μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為15μl/min，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，推注完畢后，保持5s，重復上述給藥步驟5次，將小鼠直立旋轉2min，利用體位及重力作用，盡量使藥液在兩側肺內均勻分布，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給藥的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長20天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
實施例5
一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有濃度分別為4mg/ml和0.04mg/ml的胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，所述胺碘酮的給藥量為4mg/kg體重，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持4s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品150μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為20μl/min，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，然后吹入單側肺中，推注完畢后，保持8s，重復上述給藥步驟5次，將小鼠直立旋轉3min，利用體位及重力作用，盡量使藥液在兩側肺內均勻分布，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給藥的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長28天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
實施例6
一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有濃度分別為5mg/ml和0.06mg/ml的胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，所述胺碘酮的給藥量為5mg/kg體重，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持5s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品200μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為30μl/min，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，然后吹入單側肺中，推注完畢后，保持10s，重復上述給藥步驟4次，將小鼠直立旋轉3min，利用體位及重力作用，盡量使藥液在兩側肺內均勻分布，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給藥的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長30天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
實施例7
一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有濃度分別為5mg/ml和0.06mg/ml的胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，以及濃度為5μm的1-磷酸鞘氨醇和1μm的激動劑sew2871，所述胺碘酮的給藥量為5mg/kg體重，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持5s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品200μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為30μl/min，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，然后吹入單側肺中，推注完畢后，保持10s，重復上述給藥步驟3次，將小鼠直立旋轉3min，利用體位及重力作用，盡量使藥液在兩側肺內均勻分布，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給藥的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長30天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
實施例8
一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有濃度分別為5mg/ml和0.06mg/ml的胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，以及濃度為8μm的1-磷酸鞘氨醇和4μm的激動劑sew2871，所述胺碘酮的給藥量為5mg/kg體重，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持5s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品200μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為30μl/min，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，然后吹入單側肺中，推注完畢后，保持10s，重復上述給藥步驟3次，將小鼠直立旋轉3min，利用體位及重力作用，盡量使藥液在兩側肺內均勻分布，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給藥的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長30天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
實施例9
一種大鼠肺細胞纖維化模型，建立方法如下：將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于給藥組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于藥品，所述藥品中含有濃度分別為5mg/ml和0.06mg/ml的胺碘酮和鹽酸萘甲唑啉，以及濃度為10μm的1-磷酸鞘氨醇和5μm的激動劑sew2871，所述胺碘酮的給藥量為5mg/kg體重，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量藥品，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持5s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注藥品200μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為30μl/min，使藥物隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，然后吹入單側肺中，推注完畢后，保持10s，重復上述給藥步驟4次，將小鼠直立旋轉3min，利用體位及重力作用，盡量使藥液在兩側肺內均勻分布，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給藥的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給藥結束，讓大鼠繼續生長30天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
對照組
將大鼠進行稱重，腹腔注射麻藥進行麻醉，將其放于籠中，讓其自然暈倒，對于對照組采用加樣槍通過鼻腔給藥的方式給于和實施例6中藥品等體積的0.9％氯化鈉注射液，將大鼠脖頸處毛發剔除，準備一個口部邊沿帶彈性緊固帶的透明塑料袋，將所述透明塑料袋套在大鼠頭部，使所述透明塑料袋口部邊沿的彈性緊固帶套設在大鼠脖頸處，在透明塑料袋上設置兩個洞，其中一個洞中插入導氣管，所述導氣管另一端連接有三通閥，所述三通閥一端和抽氣泵相連，還有一端和吹氣泵相連，另一個洞中插入軟質導藥管，所述導藥管一端和加樣槍的針頭相連，另一端和大鼠一側鼻孔相連，所述導氣管和導藥管外側壁與透明塑料袋相接處無縫貼合；在大鼠暈倒后，使大鼠呈仰臥位狀以彈力固定夾將其四肢分別固定于鼠板上，首先打開抽氣泵和吹氣泵，操作者一手控制三通閥，另一手控制注射器，注射器內裝定量氯化鈉注射液，先讓抽氣泵和導氣管相通將透明塑料袋中空氣抽出，保持5s，迅速切換三通閥使吹氣泵和導氣管相連，與此同時，迅速推注氯化鈉注射液200μl進入鼻腔內，所述加樣槍的加樣速度為30μl/min，使氯化鈉注射液隨大鼠吸氣時的氣流充分進入支氣管內，然后吹入單側肺中，推注完畢后，保持10s，重復上述給樣步驟4次，將小鼠直立旋轉3min，利用體位及重力作用，盡量使氯化鈉注射液在兩側肺內均勻分布，解除鼠四肢彈力固定夾將鼠放回鼠籠內待復蘇，給樣的過程中不時觀察小鼠的呼吸情況，給樣結束，讓大鼠繼續生長30天，然后置于恒溫大鼠房飼養；然后用戊巴比妥鈉麻醉處死大鼠,迅速開胸,取出肺臟,部分用于制作組織切片,部分速凍于液氮備作羥脯氨酸含量測定。
ct掃描
將實施例1-3和對照組處理過的兩組大鼠飼養28天后進行ct觀察記錄肺部變化。用3％戊巴比妥0.3ml/100g腹腔注射進行麻醉，然后通過高分辨率ct進行掃描觀察肺部變化，最佳的掃描條件：層厚0.67mm，120kv，300mas，掃描結果顯示：對照組和實施例1-3組右肺的ct圖，肺部無明顯異常；而實施例1-3組的ct圖，左肺部內有蜂窩狀陰影和磨玻璃影，具有典型的肺纖維化特征。
將實施例4-6和對照組處理過的兩組大鼠飼養28天后進行ct觀察記錄肺部變化。用3％戊巴比妥0.3ml/100g腹腔注射進行麻醉，然后通過高分辨率ct進行掃描觀察肺部變化，最佳的掃描條件：層厚0.67mm，120kv，300mas，掃描結果顯示：對照組的ct圖，肺部無明顯異常；而實施例4-6組的ct圖，肺部內有蜂窩狀陰影和磨玻璃影，具有典型的肺纖維化特征。
病理切片鑒定(he染色)
將實施例1-3和對照組處理過的兩組大鼠飼養28天后，脫臼處死大鼠，取下大鼠兩側肺部組織，一部分放進10％福爾馬林固定液固定進行病理鑒定，一部分發到超低溫冰箱保存進行羥脯氨酸含量測定。結果顯示：對照組肺部和實施例1-3組的大鼠右肺部：肺泡大小均勻，肺泡分布均勻，肺泡內未見炎癥細胞侵潤和成纖維細胞增生，而實施例1-3組的大鼠左肺部明顯可見融合形成較大的肺泡或肺泡結構消失，有大量的成纖維細胞和纖維組織增生，炎性細胞侵潤明顯，具有明顯纖維化癥狀。
將實施例4-6和對照組處理過的兩組大鼠飼養28天后，脫臼處死大鼠，取下大鼠兩側肺部組織，一部分放進10％福爾馬林固定液固定進行病理鑒定，一部分發到超低溫冰箱保存進行羥脯氨酸含量測定。結果顯示：對照組肺部：肺泡大小均勻，肺泡分布均勻，肺泡內未見炎癥細胞侵潤和成纖維細胞增生，而實施例4-6組的大鼠肺部明顯可見融合形成較大的肺泡或肺泡結構消失，有大量的成纖維細胞和纖維組織增生，炎性細胞侵潤明顯，具有明顯纖維化癥狀。
羥脯氨酸含量測定
羥脯氨酸是膠原纖維中特有的一類氨基酸，測定肺部羥脯氨酸含量可以換算出膠原蛋白的含量，以判斷肺纖維化程度，按羥脯氨酸檢測試劑盒說明書方法測定培養基中羥脯氨酸含量，在酶標儀540nm處測定a值，樣品中羥脯氨酸質量濃度(mg/l培養基)＝測定管a值×標準管濃度/標準液a值。
從上表數據可知通過在鼻腔給藥時把鼠板豎起與桌面成70-80°夾角，然后向右傾斜與桌面成60-70°夾角，將藥品吹入單側肺中，為實現在同一個體上評價藥物治療肺纖維化的同時對正常肺部的毒性研究，肺纖維化和正常肺部組織基因表達譜分析、肺部代償性增生的誘導機制等提供可靠的大鼠實驗模型。
從上標數據可以看出在藥品中加入濃度為5-10μm的1-磷酸鞘氨醇和1-5μm的激動劑sew2871，能夠有效促進胺碘酮致肺纖維化進程。
以上所述僅是本發明的優選實施方式，本發明的保護范圍并不僅局限于上述實施例，凡屬于本發明思路下的技術方案均屬于本發明的保護范圍。應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理前提下的若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。