本發明屬于醫藥技術領域，具體地，涉及一種促進毛發生長的乳化組合物及其制備方法。
背景技術：
脫發是目前困擾現代人的一大難題。頭發對良好的自我形成十分重要，尤其是年輕人，比起老年人脫發，年輕人脫發更容易導致自信心喪失。脫發的誘因很多，從病因角度分類，主要包括雄激素性脫發、病理性脫發、化學性脫發、物理性脫發、營養性脫發、肥胖性脫發、遺傳性脫發、神經性脫發等。
雄激素性脫發(androgeneticalopecia，aga)是最為常見的脫發類型。aga是一種發生于青春期和青春期后的毛發進行性減少性疾病，從外觀上看主要是前額部和頭頂部的頭發軟毛化而變細變短，最終額頭的發際線后退而頭頂部的頭發消失。aga的關鍵性特征是頭發毛囊生長期縮短并伴有終端頭發毛囊小型化。國內最新流行病學調查顯示，本病在我國的總體患病率達到21.3％，并且所有研究都表明發病率隨著年齡增長而逐漸增加。
aga的常見治療方法包括藥物治療與非藥物治療，如5-α還原酶抑制劑、富含血小板血漿和頭發移植等。目前較為公認aga與雄激素、雄激素受體及雄激素代謝相關酶密切相關。最為常用的藥物有非那雄胺、米諾地爾等。非那雄胺是特異性的2型5α-還原酶抑制劑，可阻礙睪酮向雙氫睪酮轉化，從而降低血清及組織中雙氫睪酮濃度。非那雄胺通過使患者頭皮及血清中雙氫睪酮的濃度下降，抑制毛囊變小，促進毛發生長，逆轉脫發過程。但是該類藥物長期服用有較為明顯副作用，如男性呈現部分女性化的特征(如乳腺發育等)、性欲減退等。米諾地爾是近年來普遍公認的對脫發有明顯療效的外用化學藥，其促進頭發生長的作用機理為擴張血管和增加真皮乳頭血流量，促進毛囊上皮細胞的增殖和分化，作用于毛發周期，延長毛發生長期、縮短休止期，推遲退行期。口服米諾地爾可以引發全身性反應，包括多毛癥和心血管反應，局部外用含米諾地爾的各種溶液是最佳選擇。已有充分的臨床試驗證實米諾地爾對aga有較好的療效，但需長期用藥維持療效。由于米諾地爾在水中的溶解度很小，目前市售產品常包含較高濃度的乙醇或丙二醇，頻繁使用易導致頭屑增加、頭皮瘙癢、皮膚紅腫干燥、過敏性皮炎等不良反應，阻礙患者長期使用。
近年來，植物提取物也成為防治脫發藥物的開發熱點。例如，有研究表明，表沒食子兒茶素沒食子酸酯可能通過選擇性抑制5-α還原酶活性有助于預防或治療aga。此外，已有研究證實齊墩果酸、甘草酸、槲皮素、黃芩素、姜黃素等都可促進毛發生長。
但是，目前尚且沒有關于米諾地爾與植物提取物等聯合使用促進毛發生長的報道。
技術實現要素：
為了克服目前防治脫發存在的問題和不足以及現有制劑產生的不良反應，本發明提供了一種促進毛發生長的乳化組合物，并進一步提供了制備所述乳化組合物的方法。經研究發現，將米諾地爾與植物提取物姜黃素以及抗真菌藥酮康唑聯合使用時，對毛發生長產生協同增效作用，將所述有效成分制成穩定的乳化組合物更便于患者使用。
本發明的技術方案如下：
一種促進毛發生長的乳化組合物，其有效成分為米諾地爾、酮康唑和姜黃素的組合。
在一個實施方案中，米諾地爾、姜黃素和酮康唑的質量比為1-5∶1-10∶1-6，優選的質量比為1-3∶2-8∶1-5，尤其優選的質量比為1-2∶2-6∶1-4，更優選的質量比為1-2∶2-4∶1-3，具體地，可以為1∶3∶2，2∶4∶1，1∶2∶1。
在一個實施方案中，所述有效成分占乳化組合物的含量為8-20％(重量)，優選8-15％，更優選8％-12％，具體地，可以為8％，9％，12％，15％，20％。
在一個實施方案中，所述乳化組合物還包含10-20％的油相基質，20％-40％的助溶劑，4％-10％的乳化劑，0.05％-0.2％的防腐劑，且ph值為6.5-7.5。
其中，所述油相基質選自植物油、中鏈脂肪酸三甘油酯、長鏈脂肪酸三甘油酯或油酸乙酯。
所述助溶劑選自甲醇、乙醇、丙二醇、甘油或聚乙二醇類。
所述乳化劑選自油酸鈉、硬脂酸鈉、脂肪酸山梨坦類，泊洛沙姆類，蔗糖脂肪酸類、聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯固化蓖麻油等。
所述防腐劑選自苯扎氯銨，山梨酸鉀，苯甲酸鈉，尼泊金甲酯或者尼泊金乙酯。
適當時，可使用ph調節劑使得ph范圍在6.5-7.5之間。所述ph調節劑是呈酸性或者呈堿性的ph調節劑，或者二者的組合；所述呈酸性的ph調節劑選自鹽酸、磷酸、硝酸、乳酸、乙酸、枸櫞酸、酒石酸等或其組合；所述呈堿性的ph調節劑選自氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鉀、磷酸鈉、磷酸鉀等或其組合。
在一個實施方案中，所述油相基質為大豆油或者油酸乙酯，所述助溶劑為乙醇、甘油或者聚乙二醇200中一種或多種，所述乳化劑選自吐溫80或者聚氧乙烯固化蓖麻油中的一種或者兩種組合，所述防腐劑選自苯扎氯銨、苯甲酸鈉或者尼泊金甲酯中的一種或多種。
在一個優選的實施方案中，所述乳化組合物包含8％-12％的有效成分，10％-20％的油酸乙酯，3％-5％的乙醇，5％-15％的甘油，10-20％的聚乙二醇200，4％-5％的吐溫80，4％-6％的聚氧乙烯固化蓖麻油，0.1％-0.15％的苯扎氯銨，且ph值為6.5-7.5。
本發明的另一目的還在于提供一種所述乳化物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：
a)將米諾地爾、酮康唑和姜黃素按質量比混勻后粉碎，過篩備用；
b)將乙醇、甘油和聚乙二醇200按處方量混合后，按處方量加入步驟a所得藥粉，攪拌均勻至充分溶解，備用；
c)將吐溫80、苯扎氯銨按處方量和水一起研磨均勻得水相；
d)按處方量將聚氧乙烯固化蓖麻油溶解于油酸乙酯中得油相；
e)將油相加入到水相中在研缽中進行研磨，研磨均勻后，加入步驟b制備得到的溶液加入到研缽中，調節ph至6.5-7.5，繼續研磨均勻，隨后使用超聲波乳化裝置二次乳化，乳化充分后即得所述乳化組合物。
本發明的另一目的還在于提供一種所述乳化組合物的用途，其用于制備治療雄激素性脫發的藥物。
有益效果
本發明的乳化組合物以米諾地爾、酮康唑和姜黃素組合作為有效成分。在研究的過程中，本發明人驚訝地發現，與其它已知具有促進毛發生長的植物提取物(如齊墩果酸、egcg)相比，米諾地爾與姜黃素組合對毛發生長的促進作用更為顯著，而且在加入酮康唑之后呈現出協同增效的促進作用，這是現有技術中從未報道過的。而且，本發明將所述有效成分制備成乳化物，盡可能少地使用乙醇并以刺激性更低的甘油和聚乙二醇200替代常規溶劑丙二醇增強米諾地爾的溶解性，有效地避免由丙二醇導致的刺激性以及如頭屑、皮膚瘙癢紅腫等局部皮膚反應。同時，所述乳化組合物的ph值維持在弱酸性至中性的范圍，可以更進一步地減少對皮膚的刺激性。本發明制備得到的乳化組合物具有更佳的穩定性，長期保存不會引起分層或者有效成分的析出，便于患者使用和保存。
具體實施方式
在下文中更詳細地描述了本發明以有助于對本發明的理解。
應當理解的是，在說明書和權利要求書中使用的術語或詞語不應當理解為具有在字典中限定的含義，而應理解為在以下原則的基礎上具有與其在本發明上下文中的含義一致的含義：術語的概念可以適當地由發明人為了對本發明的最佳說明而限定。
試驗例1：對aga治療作用的大鼠篩選試驗
1.1實驗動物
選取42只雄性wistar大鼠，6周齡左右，體重在190-210g之間。將所有大鼠置于溫濕度適宜的動物房中飼養，每日通風1-2次，每次1小時。每日保證各12小時白天和黑夜交替，同時保持安靜并避免其他干擾。保證大鼠有足夠的活動空間。給予大鼠維持飼料進行喂養，采用市政自來水作為大鼠飲用水，飲水不受限制。所有大鼠先進行2周的適應性飼養后開始實驗。
1.2動物分組
將42只大鼠隨機分為7組，分別為組1：空白對照組6只；組2：模型組6只；組3：米諾地爾組6只；組4：米諾地爾+齊墩果酸(1∶2)組6只；組5：米諾地爾+egcg(1∶2)組6只；組6：米諾地爾+姜黃素(1∶2)組6只；組7：米諾地爾+姜黃素+酮康唑(1∶2∶1)組6只。各組之間的動物在體重、周齡、全身狀態等方面無顯著性差異。
1.3實驗藥物
將實驗藥物溶于乙醇、甘油和水(4∶4∶2)組成的溶劑中，制成10％的外用甘油制劑。
1.4造模
除空白對照組之外，所有大鼠每天于背部皮下注射劑量為5mg/kg/日的丙酸睪丸酮1次，持續8周，空白對照組在大鼠背部相同部位皮下注射等量生理鹽水。連續皮下注射丙酸睪丸酮3周后，觀察所有注射造模藥物的大鼠，背部皮毛均開始毛色變灰，且容易斷裂。4周后開始出現毛發脫落，造模動物脫毛區皮毛更為稀疏，纖細，易斷。表明造模成功。
1.5給藥
從實驗開始第2天起，對組3-7使用實驗用甘油制劑進行治療，組1和組2不給藥。在實驗過程中，除了組1皮下注射生理鹽水之外，其余各組持續皮下注射丙酸睪丸酮，維持大鼠體內的雄激素水平。
1.6實驗動物觀察
1.6.1一般狀態觀察
每天觀察各組大鼠的脫毛程度，并觀察藥物涂抹區是否出現紅腫、滲液等皮膚局部反應。
1.6.2制備皮膚組織切片
實驗8周后，選取各組大鼠背部脫毛區，平行脊柱取材，選取面積約為3×2cm2，每只大鼠取三塊面積基本相同的皮膚組織切片。按照常規皮膚組織病理過程制作標本，石蠟包埋、切片，he染色，在顯微鏡下觀察大鼠鼠毛囊形態學變化并計數視野內的毛囊總數，取三塊切片的平均值，進行相關統計學分析，數據以x±sd表示。當p＜0.05時，差異顯著，有統計學意義。
1.7實驗結果
1.7.1肉眼觀察大鼠毛發脫落情況
表1、肉眼觀察各組大鼠毛發脫落情況
從表1列出的肉眼觀察結果可以看出，米諾地爾+齊墩果酸(1∶2)組和米諾地爾+egcg(1∶2)組相較于米諾地爾單用組，有一定改善脫發的作用，但是相較于米諾地爾+姜黃素(1∶2)組，效果較差。米諾地爾+姜黃素+酮康唑(1∶2∶1)組改善脫發的效果明顯優于其他各組，與空白對照組大鼠的毛發情況最為接近。各組的藥物涂抹區均未出現紅腫、滲液等皮膚局部反應。
1.7.2切片毛囊觀察與毛囊計數
觀察皮膚毛囊的橫斷面情況，空白對照組中毛囊密度最高，造模組中視野內可見毛囊明顯減少，其它各組較空白對照組均有不同程度的減少，而且各組之間毛囊密度可見明顯差異，組7＞組6＞組5≈組4＞組3。
表2、各組毛囊計數情況比較
注：*與空白對照組相比，p＜0.05；#與造模組相比，p＜0.05，；$與米諾地爾+姜黃素+酮康唑(1∶2∶1)組相比，p＜0.05。
從表2可以看出，米諾地爾與齊墩果酸、egcg、姜黃素聯合使用時促進毛發生長的作用優于單用米諾地爾，其中米諾地爾與姜黃素聯合使用時效果最好，在米諾地爾與姜黃素聯用時加入抗真菌藥酮康唑后，促進毛發生長的作用有顯著性增強(p＜0.05)。上述結果表明米諾地爾+姜黃素+酮康唑在促進毛發生長、防止脫發方面取得了協同增效的作用。
試驗例2：對aga治療作用的停藥試驗
按照試驗例1的方法及分組進行相關實驗，在給藥8周后各組停止給藥，但繼續注射丙酸睪丸酮；各組停藥3周后，按照試驗例1中1.6.2部分內容制備皮膚組織切片，對毛囊總數計數，以考察停藥后的大鼠毛發生長情況，具體結果如下：
表3、各組毛囊計數情況比較
注：*與空白對照組相比，p＜0.05；#與造模組相比，p＜0.05，；$與米諾地爾+姜黃素+酮康唑(1∶2∶1)組相比，p＜0.05。
實施例1
一種促進毛發生長的乳化組合物包含10％的有效成分，20％的油酸乙酯，3％的乙醇，10％的甘油，20％的聚乙二醇200，4％的吐溫80，4％的聚氧乙烯固化蓖麻油，0.1％的苯扎氯銨，且ph值為6.8，其中有效成分中米諾地爾、姜黃素和酮康唑的質量比為1∶2∶1；
制備方法包括以下步驟：
a)將米諾地爾、酮康唑和姜黃素按質量比混勻后粉碎，過篩備用；
b)將乙醇、甘油和聚乙二醇200按處方量混合后，按處方量加入步驟a所得藥粉，攪拌均勻至充分溶解，備用；
c)將吐溫80、苯扎氯銨按處方量和水一起研磨均勻得水相；
d)按處方量將聚氧乙烯固化蓖麻油溶解于油酸乙酯中得油相；
e)將油相加入到水相中在研缽中進行研磨，研磨均勻后，加入步驟b制備得到的溶液加入到研缽中，調節ph至6.8，繼續研磨均勻，隨后使用超聲波乳化裝置二次乳化，乳化充分后即得所述乳化組合物。
實施例2
一種促進毛發生長的乳化組合物包含12％的有效成分，18％的油酸乙酯，5％的乙醇，12％的甘油，18％的聚乙二醇200，4％的吐溫80，5％的聚氧乙烯固化蓖麻油，0.1％的苯扎氯銨，且ph值為6.9，其中有效成分中米諾地爾、姜黃素和酮康唑的質量比為1∶3∶2；
制備方法包括以下步驟：
a)將米諾地爾、酮康唑和姜黃素按質量比混勻后粉碎，過篩備用；
b)將乙醇、甘油和聚乙二醇200按處方量混合后，按處方量加入步驟a所得藥粉，攪拌均勻至充分溶解，備用；
c)將吐溫80、苯扎氯銨按處方量和水一起研磨均勻得水相；
d)按處方量將聚氧乙烯固化蓖麻油溶解于油酸乙酯中得油相；
e)將油相加入到水相中在研缽中進行研磨，研磨均勻后，加入步驟b制備得到的溶液加入到研缽中，調節ph至6.9，繼續研磨均勻，隨后使用超聲波乳化裝置二次乳化，乳化充分后即得所述乳化組合物。
實施例3
一種促進毛發生長的乳化組合物包含8％的有效成分，15％的油酸乙酯，4％的乙醇，15％的甘油，15％的聚乙二醇200，5％的吐溫80，4％的聚氧乙烯固化蓖麻油，0.1％的苯扎氯銨，且ph值為7.3，其中有效成分中米諾地爾、姜黃素和酮康唑的質量比為2∶4∶1；
制備方法包括以下步驟：
a)將米諾地爾、酮康唑和姜黃素按質量比混勻后粉碎，過篩備用；
b)將乙醇、甘油和聚乙二醇200按處方量混合后，按處方量加入步驟a所得藥粉，攪拌均勻至充分溶解，備用；
c)將吐溫80、苯扎氯銨按處方量和水一起研磨均勻得水相；
d)按處方量將聚氧乙烯固化蓖麻油溶解于油酸乙酯中得油相；
e)將油相加入到水相中在研缽中進行研磨，研磨均勻后，加入步驟b制備得到的溶液加入到研缽中，調節ph至7.3，繼續研磨均勻，隨后使用超聲波乳化裝置二次乳化，乳化充分后即得所述乳化組合物。
試驗例3：乳化組合物的穩定性研究
2.1低溫試驗
取實施例1的乳化組合物樣品，置于4℃冰箱內48h，取出后置于40℃水浴鍋中水浴48h，重復循環3次后觀察乳劑外觀變化。
2.2凍融試驗
取實施例1的乳化組合物樣品，置于-20℃冰箱內48h，取出后置于40℃水浴鍋中水浴48h，重復循環3次后觀察乳劑外觀變化。
2.3加速穩定性試驗
取實施例1的乳化組合物樣品，置于40℃±2℃、rh75％±5％條件下6個月，于第0個月、1個月、2個月、3個月、6個月取樣，觀察其外觀顏色、性狀、測定其中米諾地爾的含量。
2.4長期穩定性試驗
取實施例1的乳化組合物樣品，置于25℃±2℃、rh60％±5％條件下6個月，于第0個月、3個月、6個月、9個月、12個月取樣，觀察其外觀顏色、性狀、測定米諾地爾的含量。
2.5試驗結果
2.5.1低溫和凍融試驗結果
反復低溫或凍融后，實施例1的乳化組合物保持乳白色且均一無分層的外觀。
2.5.2加速穩定性試驗結果
表3、實施例1乳化組合物的加速穩定性試驗結果
2.5.3長期穩定性試驗結果
表4、實施例1乳化組合物的長期穩定性試驗結果
從以上穩定性結果可以看出，本發明的乳化組合物在試驗過程中保持良好的外觀性狀，雖然米諾地爾的含量略有降低，但是在規定的標準之內。可見，本發明的乳化組合物具有良好的穩定性。
以上描述了本發明優選實施方式，然其并非用以限定本發明。本領域技術人員對在此公開的實施方案可進行并不偏離本發明范疇和精神的改進和變化。