本發(fā)明屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種中藥組合物及其制備方法與應(yīng)用，尤其涉及一種具有補血功能和提高免疫力的中藥組合物及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：貧血是指人體外周血紅細(xì)胞容量減少，低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。貧血的表現(xiàn)為軟弱無力，疲乏、困倦，是因肌肉缺氧所致，為最常見和最早出現(xiàn)的癥狀。此外，頭暈、頭痛、耳鳴、眼花、注意力不集中、嗜睡等均為貧血常見癥狀。中醫(yī)認(rèn)為貧血屬于血虛的范疇。血虛多由于失血過多，或者血液生化之源不足，或因淤血阻滯或因新血不生等，臨床表現(xiàn)為面色淡白或萎黃，口唇、眼瞼、指甲色淡，心悸多夢，手足發(fā)麻，頭暈眼花，婦女經(jīng)血量少色淡、延期甚或閉經(jīng)，舌淡脈細(xì)。而血虛是中醫(yī)臨床最為常見的病證之一。目前市售的治療貧血的中成藥雖然確有一定療效，但大多配伍復(fù)雜、長期服用對身體有一定副作用。因此，研究開發(fā)服用配伍簡單、效果顯著、適合長期服用并宜于養(yǎng)生的中藥組合物具有重要意義。技術(shù)實現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種中藥組合物及其制備方法與用途。本發(fā)明所述組合物以中藥為主要原料，各種成分合理組方、配合共用，對貧血、免疫力低下有著顯著的改善作用。為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：一種中藥組合物，由下述重量份的組分制備而成：靈芝20～50份，黃芪30～60份，銀耳10～30份，當(dāng)歸10～30份。其中，靈芝為多孔菌科真菌赤芝ganodermalucidum(leyss.exfr.)karst.或紫芝ganodermasinensezhao，xuetzhang的干燥子實體，性味甘，平，歸心、肺、肝、腎經(jīng)，主要功能有補氣安神，止咳平喘，用于眩暈不眠、心悸氣短、虛勞咳喘。當(dāng)歸，傘形科植物當(dāng)歸angelicasinensis(oliv.)diels.的根，性味溫，甘、辛，歸肝、心、脾經(jīng)，主要功效有補血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤腸通便。臨床上常用于血虛萎黃，眩暈心悸，月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，虛寒腹痛，腸燥便秘，風(fēng)濕痹痛，跌撲損傷，癰疽瘡瘍。黃芪，豆科植物蒙古黃芪astragalusmembranaceus(fisch.)bge.var.mongholicus(bge.)hsiao或膜莢黃芪astragalusmembranaceus(fisch.)bge.的干燥根，甘，溫，歸肺、脾經(jīng)。主要功能有補氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌。臨床上常用于氣虛乏力，食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫，癰疽難潰，久潰不斂，血虛痿黃，內(nèi)熱消渴。銀耳，真菌類銀耳科銀耳屬植物銀耳tremellafuciformisberk.以子實體，甘，平。主要功能有補肺益氣，養(yǎng)陰潤燥。臨床上常用于病后體虛，肺虛久咳，痰中帶血，崩漏，大便秘結(jié)，高血壓病，血管硬化。本發(fā)明所述中藥組合物中以靈芝、黃芪、銀耳、當(dāng)歸進行復(fù)配，各種成分合理組方、配合共用，各組分產(chǎn)生增效協(xié)同作用，對貧血、免疫力低下有著顯著的改善作用，其效果顯著優(yōu)于單獨使用各組分。本發(fā)明所述中藥組合物所用原料均屬于食品或保健品可用范疇，無毒，長期食用依賴性小，且價格低廉，適合普通消費者適合日常及長期食用，具有廣闊的市場前景。在本發(fā)明提供的一些實施方案中，所述的中藥組合物由下述重量份的組分制備而成：靈芝50份，黃芪50份，銀耳10份，當(dāng)歸10份。在一些實施方案中，所述的中藥組合物由下述重量份的組分制備而成：靈芝20份，黃芪60份，銀耳20份，當(dāng)歸20份。在另一些實施方案中，所述的中藥組合物由下述重量份的組分制備而成：靈芝30份，黃芪30份，銀耳30份，當(dāng)歸30份。本發(fā)明中所述的靈芝、黃芪、銀耳、當(dāng)歸是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，可以通過商業(yè)途徑購買得到，可以為原藥，也可以為飲片，只要靈芝、黃芪、銀耳、當(dāng)歸滿足《中華人民共和國藥典》(2015年版)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)即可。本發(fā)明所述中藥組合物的使用劑量和使用方法取決于諸多因素，包括使用者的年齡、體重、性別、自然健康狀況、營養(yǎng)狀況、使用時間、代謝速率、病程嚴(yán)重程度以及診治醫(yī)師的主觀判斷。本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)上述因素可以容易地決定所述中藥組合物的使用劑量和使用方法。本發(fā)明還提供了所述中藥組合物的制備方法。一種中藥組合物的制備方法，取靈芝、當(dāng)歸、黃芪、銀耳混合加水提取，過濾后收集提取液。在一些實施方案中，所述中藥組合物的制備方法中所述水提取為加10-20倍量水，煎煮2-3次，每次1.5-3小時。在一些具體實施例中為：將靈芝、黃芪、銀耳、當(dāng)歸按比例稱量，第一次加20倍量水，煎煮2h，過濾，收集濾液，濾渣加入20倍水，煎煮1h，過濾，合并2次濾液。進一步的，所述中藥組合物的制備方法中還包括濃縮和干燥步驟。在一些實施方案中，合并的濾液濃縮至每100ml含有100g生藥量，干燥。所述干燥可以為冷凍干燥，也可以為70℃烘干。在一個具體實施方案中，本發(fā)明通過給予大鼠本發(fā)明所述中藥組合物30天，再以放血和環(huán)磷酰胺造模10天后，檢測本發(fā)明所述中藥組合物對血虛大鼠模型的體重、外周血相的影響，結(jié)果顯示，給予本發(fā)明所述中藥組合物的大鼠體內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白含量和血清鐵蛋白水平皆顯著高于模型組或空白對照組。表明本發(fā)明所述中藥組合物可增加紅細(xì)胞數(shù)量、提高血紅蛋白和血清鐵蛋白水平，具有補血、改善貧血的作用。因此，本發(fā)明提供了所述中藥組合物在制備增加紅細(xì)胞數(shù)量、提高血紅蛋白和/或血清鐵蛋白水平的產(chǎn)品中的應(yīng)用。同時還提供了所述中藥組合物在制備補血產(chǎn)品中的應(yīng)用。其中，所述中藥組合物用于補血的劑量為1ml/100g。在一個具體實施方案中，本發(fā)明通過給予大鼠本發(fā)明所述中藥組合物30天，再以放血和環(huán)磷酰胺造模10天后，檢測本發(fā)明所述中藥組合物對血虛大鼠模型的白細(xì)胞數(shù)量、脾指數(shù)和胸腺指數(shù)的影響，結(jié)果顯示給予本發(fā)明所述中藥組合物的大鼠造模后脾指數(shù)升高、胸腺指數(shù)升高，且血液中白細(xì)胞數(shù)量也得到顯著提高。表明本發(fā)明所述中藥組合物可提高白細(xì)胞數(shù)量、提高動物脾指數(shù)、提高胸腺指數(shù)，具有提高免疫力的作用。因此，本發(fā)明提供了所述中藥組合物在制備提高白細(xì)胞數(shù)量、提高動物脾指數(shù)、提高胸腺指數(shù)的產(chǎn)品中的應(yīng)用。同時還提供了所述中藥組合物在制備提高免疫力的產(chǎn)品中的應(yīng)用。其中，所述中藥組合物用于提高免疫力的劑量為1ml/100g。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)不同使用者的需求將本發(fā)明所述中藥組合物加入制備不同劑型時所需的各種常規(guī)的添加劑，如崩解劑、潤滑劑、乳化劑、粘合劑等，以常規(guī)制劑方法，制成常用藥品或保健食品，如膠囊劑、片劑、丸劑、口服液、粉劑、顆粒劑、散劑等。本發(fā)明所述中藥組合物選用靈芝、當(dāng)歸、黃芪、銀耳為原料按一定配比制成，靈芝、當(dāng)歸、黃芪、銀耳合理組方、配合共用，各組分產(chǎn)生增效協(xié)同作用，對貧血、免疫力低下有著顯著的改善作用，其效果顯著優(yōu)于單獨使用各組分。本發(fā)明所述中藥組合物的制備方法為取靈芝、當(dāng)歸、黃芪、銀耳混合加水提取，過濾后收集提取液，最大程度的保留了各原料的有效成分，制備得到的中藥組合物補血、提高免疫力效果顯著，同時操作簡單，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明所述中藥組合物能顯著提高血虛大鼠模型的體重以及增加紅細(xì)胞數(shù)量、提高血紅蛋白和/或血清鐵蛋白水平，具有補血、改善貧血的作用。同時本發(fā)明所述中藥組合物可提高白細(xì)胞數(shù)量、提高動物脾指數(shù)、提高胸腺指數(shù)，具有提高免疫力的作用。具體實施方式本發(fā)明公開了一種具有補血功能的中藥組合物及其制備方法與應(yīng)用。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及產(chǎn)品已經(jīng)通過較佳實施例進行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法進行改動或適當(dāng)變更與組合，來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。為了進一步理解本發(fā)明，下面將結(jié)合本發(fā)明實施例，對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。如無特殊說明，本發(fā)明實施例中所涉及的試劑均為市售產(chǎn)品，均可以通過商業(yè)渠道購買獲得。實施例1：中藥組合物按照重量份分別稱取靈芝50份，黃芪50份，銀耳10份，當(dāng)歸10份，加入20倍水，煎煮2h，過濾，收集濾液，濾渣加入20倍水，煎煮1h，過濾，合并2次濾液；濃縮濾液至每100ml含有100g生藥量，冷凍干燥或者70℃烘干，粉碎即得中藥組合物。實施例2：中藥組合物按照重量份分別稱取靈芝20份，黃芪60份，銀耳20份，當(dāng)歸20份，加入20倍水，煎煮2h，過濾，收集濾液，濾渣加入20倍水，煎煮1h，過濾，合并2次濾液；濃縮濾液至每100ml含有100g生藥量，冷凍干燥或者70℃烘干，粉碎即得中藥組合物。實施例3：中藥組合物按照重量份分別稱取靈芝30份，黃芪30份，銀耳30份，當(dāng)歸30份，加入20倍水，煎煮2h，過濾，收集濾液，濾渣加入20倍水，煎煮1h，過濾，合并2次濾液；濃縮濾液至每100ml含有100g生藥量，冷凍干燥或者70℃烘干，粉碎即得中藥組合物。對比例1～4處方如表1：組別靈芝黃芪銀耳當(dāng)歸對比例112份0份0份0份對比例20份12份0份0份對比例30份0份12份0份對比例40份0份0份12份按照重量份分別稱取靈芝、黃芪、銀耳、當(dāng)歸，加入20倍水，煎煮2h，過濾，收集濾液，濾渣加入20倍水，煎煮1h，過濾，合并2次濾液；濃縮濾液至每100ml含有100g生藥量，冷凍干燥或者70℃烘干，粉碎即得對比例1-4的組合物。實施例4：中藥組合物對血虛大鼠模型的干預(yù)研究1材料和方法1.1材料1.1.1實驗動物spf大鼠，雄性，動物適應(yīng)性喂養(yǎng)5天后，將所有大鼠稱體重，按照體重由輕到重排列。剔除重量在150～160g以及240g以上的大鼠。將體重在180-230g的大鼠分為12個區(qū)間，每個區(qū)間4.2g，隨機分為每組12只。本次實驗所需大鼠均從華中農(nóng)業(yè)大學(xué)實驗動物中心訂購且自行飼養(yǎng)及管理。1.1.2供試品實施例1-3所述中藥組合物和對比例1-4所述中藥組合物，需在4℃避光保存。1.1.3主要試劑及儀器鐵蛋白檢測試劑盒(南京建成；貨號:h129；48t)電子天平bsa124s，賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司；臺式高速離心機tg16-ⅱ，長沙平凡儀器儀表有限公司；血細(xì)胞分析儀xfa6100，美國貝克曼庫爾特；灌胃針，1ml注射器，1.5mlep管，移液槍，離心機，小剪刀鑷子等。1.2方法1.2.1動物分組將spf級大鼠進行隨機分組，分為空白對照組、模型組、陽性藥對照組(當(dāng)歸補血口服液，國藥準(zhǔn)字z10970001，鄭州市協(xié)和制藥廠)、實施例1～3組，對比例1～4組；每組12只。將0.06g實施例和對比例所述中藥組合物粉末溶解于1ml蒸餾水中，用灌胃針吸取藥品溶液，按給藥量1ml/100g對大鼠進行灌胃。1.2.2動物造模大鼠分組后，除空白對照組和模型組外，其他組別大鼠均預(yù)給藥30d，劑量為1ml/100g(實施例1～3組分別給予各實施例中藥組合物，對比例1～4組分別給予各對比例中藥組合物，陽性藥組給予當(dāng)歸補血口服液)。除空白對照組外，其他各組開始造模10d。造模第一日每鼠尾部(眼眶)放血5ml/kg，隔日再放血1次，共放血5次，大鼠于造模的第2日，每鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺40mg/kg，隔日注射，共注射5次(第2次-第5次的劑量為20mg/kg)，造成血虛模型共10d。1.2.3動物外觀及行為學(xué)觀察主要觀察造模后各組中大鼠的精神狀態(tài)、體重、眼、耳、皮毛色澤等外觀行為變化。精神狀態(tài)：正常；自發(fā)活動減少；逃避、攻擊行為明顯減少。外觀狀況：觀察大鼠毛發(fā)(光澤、稀疏脫落程度)、耳邊緣、眼部變化(眼球及眼周圍顏色)。體重：稱量體重變化。結(jié)果顯示，造模后大鼠的耳邊緣明顯要比空白對照組大鼠顏色蒼白，鼻周圍明顯要比空白對照組血色暗淡，眼球顏色比空白對照組暗淡，無神。造模10天后，與空白對照組大鼠比較，模型組活動明顯減弱，逃避、攻擊行為明顯減少，通過對模型大鼠外觀及行為學(xué)的觀察，表明造模后大鼠有明顯的血虛狀態(tài)，表明血虛模型大鼠造模成功。表2造模后大鼠體重占初始體重百分比(％)(n＝12)注：*示與空白對照組相比存在顯著性差異，p<0.05；#示與模型組相比存在顯著性差異，p<0.05；a表示對比例與實施例1相比存在顯著性差異，p<0.05；b表示對比例與實施例2相比存在顯著性差異，p<0.05；c表示對比例與實施例3相比存在顯著性差異，p<0.05；如表2所示，空白對照組大鼠體重未出現(xiàn)明顯波動；模型組大鼠體重呈下降趨勢，在第3天至第7天下降幅度明顯；陽性藥對照組大鼠體重呈先上升再下降趨勢；各個實施例組大鼠體重均呈逐漸上升趨勢，且與模型組對比均有顯著性差異(p<0.05)；第7天，對比例1、3、4與實施例2和3相比具有顯著性差異(p<0.05)；第10天，對比例1、2、3、4與各實施例相比均具有顯著性差異(p<0.05)。1.2.4外周血相的測定大鼠氣血兩虛模型成功后，末次放血造模中，收集大鼠眼眶取血1.5ml，其中0.5ml全血(肝素抗凝450u·ml-1)，用動物血細(xì)胞分析儀測定血常規(guī)包括紅細(xì)胞計數(shù)(rbc)、白細(xì)胞計數(shù)(wbc)、血紅蛋白(hb)。另取1ml于干燥ep管收集全血，充分靜置使得紅細(xì)胞充分自然凝固后，3000r/min離心10min，取上層血清(約200μl)。按鐵蛋白試劑盒(南京建成，貨號:h129；48t)操作說明測定。結(jié)果如表3：表3造模后大鼠紅細(xì)胞和白細(xì)胞含量變化(n＝12)注：*示與空白對照組相比存在顯著性差異，p<0.05；#示與模型組相比存在顯著性差異，p<0.05；a示對比例與實施例1相比存在顯著性差異，p<0.05；b表示對比例與實施例2相比存在顯著性差異，p<0.05；c表示對比例與實施例3相比存在顯著性差異，p<0.05；如表3，大鼠經(jīng)預(yù)給藥30天，放血和環(huán)磷酰胺造模10天后，測得紅細(xì)胞含量和白細(xì)胞含量。其中，紅細(xì)胞含量，與空白對照組比較，模型組中紅細(xì)胞數(shù)量顯著降低(p<0.05)。與模型組比較，陽性藥對照組顯著提高造模后大鼠的紅細(xì)胞數(shù)量。實施例1～3組大鼠的紅細(xì)胞數(shù)量均高于模型組也高于各對比例組，且實施例1～3組與模型組或?qū)Ρ壤M相比均具有顯著性差異(p<0.05)。白細(xì)胞含量，與空白對照組比較，模型組中白細(xì)胞數(shù)量顯著降低(p<0.05)。與模型組比較，陽性藥對照組沒有顯著提高造模后大鼠的白細(xì)胞數(shù)量。且實施例1～3組與模型組或?qū)Ρ壤M相比均具有顯著性差異(p<0.05)。表4造模后大鼠血紅蛋白和血清鐵蛋白含量變化注：*示與空白對照組相比存在顯著性差異，p<0.05；#示與模型組相比存在顯著性差異，p<0.05；a示對比例與實施例1相比存在顯著性差異，p<0.05；b表示對比例與實施例2相比存在顯著性差異，p<0.05；c表示對比例與實施例3相比存在顯著性差異，p<0.05；如表4，大鼠經(jīng)預(yù)給藥30天，放血和環(huán)磷酰胺造模10天后，測得血紅蛋白含量和血清鐵蛋白含量。其中，血紅蛋白含量，與空白對照組比較，模型組中血紅蛋白含量顯著降低(p<0.05)。與模型組比較，陽性藥對照組顯著提高造模后大鼠的血紅蛋白的含量(p<0.05)。且實施例1～3組與模型組或?qū)Ρ壤M相比均具有顯著性差異(p<0.05)。血清鐵蛋白含量，與空白對照組比較，模型組大鼠的血清中鐵蛋白含量顯著降低(p<0.05)。與模型組比較，陽性藥對照組顯著提高造模后大鼠的血清中鐵蛋白含量(p<0.05)。且實施例1～3組與模型組或?qū)Ρ壤M相比均具有顯著性差異(p<0.05)。1.2.5脾指數(shù)和胸腺指數(shù)的測定將試驗大鼠腹主動脈取血后，解剖取脾臟、胸腺，于生理鹽水中漂洗掉表面的血液，在用濾紙吸去水分，用電子天平稱重，計算胸腺和脾指數(shù)，胸腺指數(shù)＝胸腺重(mg)/鼠重(g)；脾指數(shù)＝脾重(mg)/鼠重(g)。表5造模后大鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)和肝糖原指標(biāo)含量(n＝12)注：*示與空白對照組相比存在顯著性差異，p<0.05；#示與模型組相比存在顯著性差異，p<0.05；a示對比例與實施例1相比存在顯著性差異，p<0.05；b表示對比例與實施例2相比存在顯著性差異，p<0.05；c表示對比例與實施例3相比存在顯著性差異，p<0.05；如表5所示，大鼠經(jīng)預(yù)給藥30天，放血和環(huán)磷酰胺造模10天后，測得其脾指數(shù)、胸腺指數(shù)和肝糖原數(shù)值。與空白對照組比較，模型組大鼠脾指數(shù)或胸腺指數(shù)顯著降低(p<0.05)。與模型組比較，陽性藥對照組顯著提高造模后大鼠脾指數(shù)或胸腺指數(shù)(p<0.05)。實施例1～3組大鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)均高于模型組或各對比例組。當(dāng)前第1頁12