專利名稱：應用豆類產品治療和預防放療引起的皮膚損傷的制作方法
技術領域：
本發明涉及非變性豆類產品，包含所述非變性豆類產品的局部用組合物，以及這些產品的制備和應用。
背景技術：
進行放射治療或放療的病人，經常會經受急性和長期的從紅斑、蛻皮、和疼痛到纖維化和增加患皮膚癌危險之類的皮膚損傷。這些并發癥可能嚴重到改變這些病人全身的體質和生活質量。它們能夠導致潰瘍、受影響區域的運動范圍受限制和轉化為鱗狀上皮細胞癌(Lorette G, Machet L.，輻射引起的皮膚毒性預防、治療、癌癥放射指示劑Acta Oncol (Cancer Radiother Acta Oncol)，35 增刊 7 ； 141—8，1996)。放療包括比紫外線更強而且穿透更深的“電離”輻射。這種輻射強度高，要依照特殊的方案實施。由輻射引起的皮膚變化被稱為放射性皮炎，而且伴有干性或濕性脫屑和 TEffL增加(透皮水分損失)。已經證明，放療引起的永久性皮膚病變既是細胞水平的，又是超微結構水平的 (Rudolph R，Arganese Τ, Woodward Μ.，人類皮膚慢性放療損傷的超微結構和病因學(Ann Plast Surg,9 :4,282-92, Oct 1982 ；Nachtrab U, Oppitz U，Flentje Μ, Stopper H，放療后表現強烈和正常組織破壞的病人人類皮膚纖維原細胞中輻射引起的微核形成，ht J Radiat Biol 73 :3，279-87，五月，1998 ;Sivan V, Vozenin-Brotons MC, Tricaud Y, Lefaix 幾，Cosset JM, Dubray B, Martin MT，放療后皮膚纖維化中人類表皮變化增生和變異，Int J Radiat Oncol Biol Phys 53 :3，385-93，六月一日，2002)。目前沒有可用于預防或治療放療引起的皮膚損害的療法。不同的分次輻射和后處理方案的減小放療引起皮膚損傷的能力正在進行評價。例如Vab dei^chueren等人(對頭部和頸部癌癥每天多部分(MFD)放療皮膚和黏膜的急性反應，Int J Radiat Oncol Biol Phys 19 :2,301-11, Aug, 1990)已經評價了幾種頭部和頸部腫瘤放療不尋常的分段時間表對皮膚和黏膜急性反應方面的可行性。他們總結指出，十二天的間隔使得黏膜損傷能夠完整修復而沒有累積影響。然而，由于皮膚損傷生長更慢，甚至兩周間隔也不夠皮膚從輻射損傷中完全恢復。隨后的治療造成了累積的損傷。另一種方法用于對進行放療治療頭部和頸部或乳癌的，已經延遲并且皮膚反應日益嚴重的病人，進行至少六個月的口服Pentoxifylline和維生素E組合物治療。這種方法能顯著恢復慢性放療損傷。(Delanian S,Balla-mekias S, Lefaix 幾，在 Pentoxifylline 和維生素E結合的臨床試驗中放療損傷的顯著恢復，J Clin 0ncO117 :10，3283-90，十月， 1999)。然而，這種方法無法用于預防放射性皮炎。對晝夜生理節奏循環的正確時期輻射曾進行評價，但發現沒有用(Hirn-stadlerB, Rojas A，晝夜節律對放射敏感度的影響對老鼠皮膚單次和分次給藥的研究，Int J Radiat Biol 59 :1，185-93，一月，1991)。對使用各種藥劑的局部治療也已經進行了評價，發現僅有有限的應答。發現 Lalugen乳中的透明質酸能夠減小高度放射性皮炎(Liguori等人.，對放療治療病人透明質酸乳和安慰劑比較的雙盲，隨機臨床研究，Radiother Oncol 42 :2155-61，二月，1997)。另一種局部產品包含硬脂酸、疏水組分和丙二醇、甘油和聚不飽和醇、親水組分的混合物，對包括紅斑、干性和濕性蛻皮和潰瘍的急性放射皮膚損傷完全治愈率達到57. 9%0 36. 8%受治療病人得到改善，5. 3%受治療病人失敗。(Dini等人，急性放射性皮炎的處理。 藥理治療法還是非藥理治療法？，Cancer Nurs 16 :5，366-70，十月，1993)。然而，該療法不適于預防放射引起的皮膚損傷。Biafine 乳是一種用于減小放射治療的皮膚反應發生風險和治療放射治療的皮膚反應的局部制劑。這種乳有深度皮膚水合、潤膚劑和硬脂酸，聲稱補充了完好皮膚的自然阻礙功能和彈性，而且表明了放射/藥物腫瘤學引起的發紅、紅斑、干性/濕性蛻皮。炎癥部分是由通過環氧合酶-1和2(C0X-1和C0X-2)催化的反應產生的前列腺素 E(PGE2)介導的。輻射同時在局部上和系統上增加了 PGE2的產生，增加了放療的負面影響。 Liang和同事們研究了在老鼠模型放療系統中Cox-2抑制劑的使用(Am J Clin Oncol. 2003 八月；26 (4) :S114-21)。與鹽水處理控制對照，同時使用Cox-2抑制劑Celecoxib和50戈瑞的輻射導致更少的皮膚炎癥。檢驗點酶-1 (Chk-I)是DNA損壞檢驗點的重要組分。要求對細胞進行Chkl的磷酸化，來延遲細胞響應雙螺旋DNA斷裂的循環級數，給細胞足夠的時間進行DNA修復，從而降低癌癥風險。電離輻射同時減少了 S和G2檢驗點，而細胞覺察到DNA損壞，開始修復作用。缺少Chk-I的人類細胞無法在電離輻射后導致S和G2檢測點。(Siao等人，Proc Natl Acad Sci USA. 2002 年 11 月 12 日；99 (23) :14795_800。Epub 2002 年 10 月 24 日)。需要導致Chk-I磷酸化的試劑來保持這些檢驗點中的受輻射細胞和組織直到DNA損壞被修復， 從而降低放射引起的癌癥的風險。前述的例子關于對放射引起的急性和可見病癥的皮膚損傷的治療方法的選擇。然而這些例子都沒有檢驗降低放射引起的皮膚癌風險的途徑。因此，需要更好、更安全、更高效的用于預防和/或治療輻射引起的皮膚損傷。豆類種子含有高水平的蛋白質、脂類和糖。因此，大豆之類的豆類種子和含有豆類種子的組合物，被認為是對人有很高營養價值的產品。豆類種子還含有抑制蛋白酶活性的物質。例如，兩種蛋白酶抑制劑早在20世紀40年代即已從大豆中分離出來，Kimitz型胰蛋白酶抑制劑(大豆胰蛋白酶抑制劑，STI)和Bowman-Birk胰蛋白酶抑制劑(BBI)。參考文獻見 Birk, Int.J. Pept. Protein Res. 25 :113-131 (1985)和 Kennedy, Am. J.Clin. Neutr. 68 1406S-1412S(1998)。STI是通過形成穩定的化學當量的絡合物抑制胰蛋白酶的蛋白水解活性的。參見Liu，K.，化學和大豆成分的營養價值。在《大豆，化學，工藝及應用》32-35頁(Aspen publishers, Inc.，Gaithersburg，MD，1999)。STI 含有 181 個氨基酸殘基，通過兩個二硫鍵橋聯，并且大致為球形。參見Song等，J. Mol. Biol. 275 =347-63 (1998)。BBI是一個池-Da的蛋白質，在不同的反應位點抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶。參見 Billings 等，Pro. Natl. Acad. Sci. 89 :3120-3124(1992)。STI 和 BBI 只在大豆種子中被發現，而在大豆植物的其它部位未發現。參見Birk，Int. J. Pept. Protein Res. 25 113-131(1985)。

發明內容
本發明涉及具有胰蛋白酶抑制活性和降低的微生物數量的豆類產品，預防和治療放療引起的皮膚損傷的方法和含有這種豆類產品的用于預防和治療放療引起的皮膚損傷的組合物。在一個優選的實施方式中，該豆類產品為大豆產晶。
具體實施例方式我們相信本領域熟練技術人員能夠基于本申請說明書，最大限度利用本發明。以下優選的實施方式僅用于說明和解釋，并不以任何方式限定本發明。除非另有說明，本發明所述的技術和科學術語都是按照本領域普通技術人員通常所理解的意思。而且，這里提到的所有的出版物、專利申請、專利以及其它資料都用作參考。 在本文中，除非特別指出，所有百分比都是重量百分比。這里提到的“胰蛋白酶抑制活性”指的是例如0. 1% (w/w)濃度的豆類產品抑制胰蛋白酶活性的能力，通過以下實施例2所述測量方法測量。這種活性也可以通過純大豆衍生試劑或具有胰蛋白酶抑制活性的合成分子來執行。在一個實施方式中本發明的豆類產品具有至少約15%的胰蛋白酶活性抑制能力。進一步優選實施方式中，本發明的豆類產品至少有約25%，例如至少約35%的胰蛋白酶活性抑制能力。這里提到的“微生物含量”指的是存在于豆類產品的細菌、真菌和酵母菌的數量。測量微生物含量的方法的實例包括但不限于，在“Official Methods of Analysis of AOAC International", Patricia Cunniff 主編，第十六版，第 5 次修訂，1999 (A0AC International)中指出的 AOAC 986. 23 法；或在"Official CompendiaofStandards，USP 24USP/NF 19”，美國藥典協定，Inc.，2000 (Board ofTrustees，美國藥典協定，Inc.)指出的方法。“不允許的微生物含量”意思是指對人有害的存在于豆類產品中的細菌、真菌和酵母菌的數量，包括，但不限于，大腸菌類、大腸桿菌、沙門氏菌、嗜熱孢子、桿菌、腸道球菌、葡萄球菌、獎鏈球菌，禾口面β些在"Disinfection，sterilization, and preservation" % 4 片反， Seymour S. Block, pp. 887-888(1991，Lea&Febiger, Malvern, PA) 一文中所提到的微生物。這里提到的“局部應用”指的是直接涂布或鋪展于皮膚，可用手或諸如粉擦、膨脹棉、滾涂器、或噴霧器等涂抹器進行涂敷。這里提到的“化妝可接受的”是指那些適合于與組織(如皮膚)接觸的，沒有不適當的毒性、不相容性、不穩定性、刺激性、過敏反應等的產品或物質。這里提到的“局部載體”指的是一種或多種適于哺乳動物局部施用的固體或液體填充稀釋劑。局部載體的例子包括但不限于水、蠟、油、軟化劑、乳化劑、增稠劑、凝膠劑，及它們的混合物。這里提到的“治療放療引起的皮膚損傷”指的是對電離輻射在黏膜、皮膚、毛發或指甲損傷的再生或預防。放療引起的皮膚損傷的例子包括但不限于，對黏膜、皮膚、毛發和指甲的損傷，包括但不限于，皮炎、紅斑、上皮炎、蛻皮、疼痛、纖維化、潰瘍、病變、和由于增加的DNA損壞造成的皮膚癌風險增大。還可包括我們相信是由阻礙缺損引起的TEWL增加。這里提到的“安全有效量”指的是所用的化合物或組合物(如豆類產品)足夠對被調節或處理的狀況產生正面修飾作用，但不會造成嚴重的副作用的用量。化合物或組合物的安全有效量會隨著被治療狀況，最終的使用者年齡和身體狀況，預防/治療狀況的嚴重性，治療的持續時間，其它治療的情況，所用物質或產品/組合物的特性，所用的化妝品可接受的載體的特性及其它一些因素的不同而改變。引入本文作為參考的美國專利申請2000年10月27日提交的系列號09/698454 和2003年10月20日提交的系列號10/689149，描述了含有非變性大豆產品或胰蛋白酶抑制劑的組合物。豆類產品“豆類產品”指的是從豆類種子衍生的物質。豆類植物通常來源于豆科植物，都有開裂的種子，如蠶豆、豌豆或小扁豆。豆類植物的例子包括但不限于大豆、小扁豆，豌豆和花生。豆類產品可以包含全部的豆類種子(如將豆類種子碾成粉末)，或只用豆類的一部分(如豆類種子的提取物)。豆類產品可以是流體(如豆類種子和水的混合物)或是固體(如豆類種子的粉末)的形式。當是流體形式時，術語“豆類產品”指的是從豆類植物中衍生出的流體中的固體成分。本發明的組合物包含安全有效量的豆類產品(如大豆產品)。在一個實施方式中， 組合物包含約0. 001%到50%，優選約到30%的豆類產品(如大豆產品)。大豆產品本發明新穎的組合物包含豆類產品，優選可以是液體(例如豆奶)或固體(例如， 大豆粉、大豆面或豆奶粉)的大豆產品。“大豆產品”指的是衍生自大豆的物質，該物質含有能在大豆中找到的處于大豆中發現的相對濃度的無水天然組分。大豆產品可以只包含大豆的一部分(如大豆提取物如脂質減少的大豆粉，或濾過的豆奶)，也可以包含全部的大豆 (如碾碎的豆粉末)。在一個實施方式中，所述大豆產品是一種非變性大豆制品。“變性”在 Bantam醫學字典(1990年版)中定義為“通過加熱、X射線或化學制劑引起的蛋白質物理和生理性質的變化。這些變化包括失去活性(對酶來說)和失去(或變化)抗原性(對抗原來說)”。“非變性大豆產品”的含義是指在衍生加工(例如溫度、萃取介質)中并未除去大豆產品蛋白酶抑制活性的大豆產品。在一個實施方式中，所述的本發明非變性態的大豆產品在完好的大豆胰蛋白酶抑制劑(STI)蛋白質存在下進行測量。在另一個實施方式中， 在胰蛋白酶抑制活性存在下根據實施例2中的描述進行了測量。大豆產品可以是流體(如豆奶)，或是固體(如大豆粉末或豆奶粉末)。當是流體形式時，術語“大豆產品”指的是從大豆中衍生出的流體中的固體成分。在一個實施方式中， 大豆產品是大豆粉末。大豆粉末可以通過碾壓干燥的大豆制得。在一個實施方式中，大豆粉末具有低于500微米的平均粒徑如小于200微米。在一個實施方式中，大豆粉末的水分含量小于10%，如小于5%。在一個實施方式中，大豆粉末是冷凍干燥的。在一個實施方式中，大豆產品是豆奶或豆奶粉末。豆奶是從大豆中衍生出的固體和水的混合物，混合中濾除全部或部分不溶殘留物。豆奶粉末是豆奶蒸干后得到的，在一個實施方式中，是冷凍干燥或是噴霧干燥的形式。制備豆奶的過程包括但不限于以下三種方法。首先，將大豆放入水中吸收水分；膨脹的豆子隨后碾壓，并加入剩余的水；過濾混合物除去纖維殘渣。第二，豆奶可以從大豆粉末制備。大豆粉末與水徹底混合(如至少混合一小時)，接著過濾除去纖維殘渣。第三，還可以通過加入水與豆奶粉末重新組合成豆奶。在一個實施方式中，豆奶含到50% (如2. 5%到20% )重量大豆固體。豆類產品的抗微生物處理如上所述，豆類果實表面通常含有較高濃度的微生物。因而，在人們應用之前，豆類產品均要經過處理減少或消除這些微生物。在一個實施方式中，本發明的豆類產品中微生物總數小于每克10000個菌落形成單位(cfu)。在另一個實施方式中，本發明的大豆產品的微生物總數大約小于IOOOcfu每克 (例如小于IOOcfu每克)。在一個實施方式中，本發明的豆類產品中不允許的微生物總數小于300cfu每克， 例如，小于150cfu每克。在進一步的實施方式中，本發明的豆類產品在至少1克(例如至少10克)產品中不允許的微生物總數達到測不出的水平。在一個實施方式中，豆類產品暴露在伽馬射線的輻射中。在進一步的實施方式中， 豆類產品是暴露在強度為2到30千戈瑞的伽馬射線的輻射下，例如伽馬射線的輻射強度為 5到10千戈瑞。如美國專利號655514!3Β2中所述，申請人意外發現這樣的處理在降低了豆類產品的微生物含量的同時，保持了其生物活性(如絲氨酸蛋白酶抑制活性)。申請人還發現用伽馬射線處理豆類產品可保持該產品的化妝品的優點，如保持天然色澤，且不帶來明顯的臭味。其它同樣保持豆類產品的蛋白酶抑制活性的微生物處理方法可以單獨應用，或可以與伽馬射線輻射聯合使用，這些加工方法包括但不限于X-射線，高能電子束或質子束，紫外線輻射，流體靜壓力，和加入具有抗微生物活性的化學試劑，及它們的組合。一個降低微生物數量的方法的完整記錄在“消毒，殺菌，保存” 一書第4版，Seymour S. Block, pp. 887-888(1991，Lea&Febiger, Malvern, PA)中已經闡明。申請人:發現使用熱處理的方法會導致蛋白酶抑制活性的喪失，并且處理時要十分小心。例如，申請人發現在100°C下加熱豆奶只要10分鐘即可將豆奶的蛋白酶抑制活性從 86% (在4°C時)降低到46%。申請人還發現加熱豆奶會導致產品色澤和味道的變化。局部用組合物本發明所用的局部組合物包括那些適于皮膚局部應用的組合。在一個實施方式中，組合物包括大豆產品和化妝品可接受的局部載體。在一個實施方式中，化妝品可接受的局部載體占組合物重量的50%到99. 99% (例如從80%到95% )。組合物可以制成各種不同的產品類型，包括但不限于洗劑、霜乳劑、凝膠劑、棒狀物、噴霧劑、剃須膏、軟膏、清潔洗滌液和固體洗滌棒、香波、膏劑、粉劑、摩絲、剃須膏、擦齊U、 貼劑、指甲油、外傷敷料和粘性繃帶，水凝膠、薄膜和諸如粉底、睫毛膏和唇膏等的化妝品。 這些產品劑型可以含有幾種化妝品可接受的局部載體，包括但不限于溶液、乳液(如微乳液和毫微乳液)、凝膠、固體和脂質體。以下是這些載體的非限定的實例。其它載體可以由本領域普通技術人員按常規方法得到。本發明的局部組合物可以制成溶液。溶液通常包括含水溶劑(如50% -99. 99%,或90% -99%的化妝品可接受的含水溶劑)。本發明應用的局部組合物可以制成含有潤膚劑的溶液。這樣的組合物優選包含約2% -50%的潤膚劑。在這里，“潤膚劑”是指那些可以用于防止或減輕干燥，而達到保護皮膚效果的物質。許多適合的潤膚劑都是已知的，并可在此使用。Sagarin，Cosmetics, Science and Technology，第2版，Vol. 1，pp. 32-43 (1972)，和國際化妝品活性成分辭典和手冊，Wenninger and McEwen 編，pp. 1656-61,1626,禾口 1654-55 (The Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Assoc.，Washington, D. C.，第 7 版，1997)(以下簡稱 “ ICI 手冊”)中記載了許多合適的上述物質的例子。洗劑可以從上述溶液制備。洗劑通常含有大約-20% (如，約5% -10% )的一種潤膚劑以及大約50% -90% (如，約60% -80% )的水。本發明的產品另一種可從溶液制備的劑型是乳劑。乳劑通常含有約5% -50% (如，約10% -20% )的潤膚劑，和大約45% -85% (如約50% -75% )的水。還有一種可從溶液制備的劑型是軟膏。軟膏通常含有一種簡單的基質如動物油、 植物油或半固體的烴類。軟膏可以含有大約2% -10%的潤膚劑，加上大約0. 1% -2%的增厚劑。常用的增厚劑或增稠劑都可以在&igarin，Cosmetics，Science and Technology，第 2 版，Vol. 1，pp. 72-73(1972)，和 ICI 手冊 p. 1693-1697 中找到。發明的局部組合物可以制成乳液。若載體是一種乳液，應該含有約1 % -10 % (如， 約2%-5%)的乳化劑。乳化劑可以是非離子、陰離子或陽離子的。適合的乳化劑在美國專利 No. 3755560,4421769, McCutcheon’ s Detergents and Emulsifiers, NorthAmerican Edition, pp. 317-324 (1986)，和 ICI 手冊，pp. 1673-1686 中已經公開。洗劑和霜劑可以制成乳液。通常這樣的洗劑含有大約0.5%-5%的乳化劑。這樣的乳劑通常含有大約1^-20% (如約5% -10% )的潤膚劑；大約20% -80% (如約 30% -70% )的水；和大約-10% (如約2% -5% )的乳化劑。本發明組合物應含有能夠有效保護、預防和/或治療放射引起的皮膚損傷含量的非變性大豆，配方中不應有過多的大豆，以免產生多粒狀的或不美觀的組合物。本發明組合物應當優選含有占組合物重量0. 1到15%的非變性大豆。應該更優選含有占組合物重量 0. 5到10%的非變性大豆。最優選應含有占組合物重量的2到6%的非變性大豆。水包油型和油包水型的單相乳液護膚制劑，如洗劑和乳劑，都是化妝品領域公知的，并在本發明中使用。多相乳液組合物，如水包油包水型，在美國專利No. 4254105和 4960764中公開并也在本發明中使用。通常，上述單相和多相乳化劑均含有水、潤膚劑和乳化劑作為必要組分。本發明的局部組合物還可以制成凝膠(如用適當凝膠劑制成水凝膠)。用作含水凝膠的合適的凝膠劑包括但不限于天然樹膠、丙烯酸和丙烯酸酯聚合物和共聚物、纖維素衍生物(如羥甲基纖維素，羥乙基纖維素)。適合的用于油類(如礦物油)的凝膠劑包括但不限于氫化丁烯/乙烯/苯乙烯共聚物，和氫化乙烯/丙烯/苯乙烯共聚物。上述凝膠通常含有重量百分比為約0. 1% -5%的上述凝膠劑。本發明的局部用組合物還可以是固體劑型(如蠟制的條狀物，肥皂組合物，粉劑， 或粉擦)。脂質體制劑也是本發明有用的組合物。脂質體可以是單層，多層和寡層的脂質體，可以包含或不包含磷脂。制備這樣的組合物首先是將桔皮素與磷脂，如二棕櫚酰磷脂酰膽堿，膽固醇和水按照Mezei&Gulasekharam, "Liposomes-Α Selective Drug Delivery System for the Topical Route of Administration ；Gel Dosage Form，，，Journal ofPharmaceutics and Pharmacology, Vol. 34 (1982), pp. 473-474 所述的方法，或改良方法進行混合。形成脂質體的適宜的組合物的表皮脂類可以替代磷脂。然后是將脂質體混入一種上述載體(如凝膠或水包油乳液)，以獲得脂質體劑型。局部施用脂質體的其它組合物和藥用在Mezei，M. ,“Liposomes as a Skin Drug DeliverySystem", Topics in Pharmaceutical Sciences(D. D. Breimer and P. Speiser, eds. , )ElsevierSciencePublishersB. V.，NewYork, N. Y.，1985，pp. 345-358，PCT 專利申請 W096/31194和美國專利No. 5260065中有詳細說明。本發明的局部組合物除前述組分以外可以含有多種附加的油溶性物質和/或水溶性物質，它們可以以現有技術確立的水平按常規方法用于皮膚、毛發和指甲用組合物。附加的化妝用活件劑在一個實施方式中，局部組合物在大豆產品以外可以進一步含有另一種化妝用或藥學活性劑。這里“化妝用或藥學活性劑”指的是對皮膚、毛發和指甲具有美容或治療作用的化合物(例如，合成化合物或化合物或化合物的混合物，可以是合成的或從天然原料中分離得到的)，包括但不限于，例如增亮用試劑、變暗用試劑(如自曬黑試劑)、抗痤瘡試劑、抗癌劑、癌癥預防劑、消光劑、抗微生物劑、抗炎劑、抗真菌劑、抗寄生蟲劑、外用鎮痛劑、 防曬劑、光防護劑、抗氧劑、角蛋白溶解劑、洗滌劑/表面活性劑、增濕劑、營養劑、維生素、 能量增強劑、抗汗劑、收斂劑、除臭劑、毛發剝離劑、毛發生長促進劑、固化劑、抗硬化劑和毛發、指甲和/或皮膚調理劑。自然提取物包含適用于本發明組合物的抗氧化劑，包括但不限于含有類黃酮和異黃酮(isoflavonoids)的提取物和它們的衍生物(例如染料木黃酮和黃豆苷原)，含有白藜蘆醇的提取物等。這種自然提取物的例子包括葡萄籽、綠茶、松樹皮、菊科植物和蜂膠。其他抗氧化劑的例子可在ICI手冊1612-13頁找到。其他來自天然原料含有色素(pigment) (例如來自Hedychium類或熊果類植物的棕色色素，或來自含有類胡蘿卜素或斑蜇黃植物的黃色、橙色和紅色色素)的提取物也可用于本發明的局部組合物。礦質水本發明的組合物可以使用礦質水制備，例如Evian 礦質水(法國，evian)之類自然礦化的礦質水。在一個實施方式中，礦質水的礦化程度至少是約200mg/L(如約300mg/L 到約1000mg/L)。在一個實施方式中，礦化水包含至少約10mg/L的鈣和/或至少約5mg/L 的鎂。抗炎劑本發明組合物還含有合成的或天然提取的抗炎劑，抗炎劑中含有氫化可的松等等之類的皮質類固醇、非留族抗炎藥物、包括布洛芬、水楊酸鹽、甲氧萘丙酸鹽、 acetominophen, C0X-2抑制劑等，菊科植物和其它抗炎的化合物或天然提取物。在一個具體的實施方案中，這些試劑可以選自包括但不限于羥基酸、過氧苯甲酸、 硫代間苯二酚、抗壞血酸、D-泛醇、氫醌、甲氧基肉桂酸辛基酯、二氧化鈦、水楊酸辛基酯、水楊酸三甲環己酯、avobenzone、聚酚醛塑料、類胡蘿卜素、自由基清除劑、自旋捕捉劑、類維生素A如視黃醇和視黃醇棕櫚酸酯、神經酰胺、多不飽和脂肪酸、必需的脂肪酸、酶、酶抑制劑、礦物質、激素如雌激素、類固醇如氫化可的松、2-二甲基氨基乙醇、銅鹽如氯化銅、含銅肽如Cu:Gly-His-Lys，輔酶Q10、如那些在PCT專利申請W00015188中公開的肽、硫辛酸、 諸如脯氨酸和酪氨酸的氨基酸、維生素和與它們相關的例如維甲酸、維生素Α、α、γ或δ 維生素E和其它維生素E或它們的混合物，乳糖酸、乙酰輔酶Α、煙酸、核黃素、維生素Bi、 核糖、電子轉移劑如NADH和FADH2，以及其它植物提取物如蘆薈、菊科植物、Bugrane-P和它們的衍生物及其混合物。本發明組合物中的化妝活性劑的含量通常占組合物重量的約 0. 001% -20%，例如約 0. 01% -10%，更進一步是如約 0. 1% -5%ο維生素的例子包括但不限于維生素Α、視黃醇或視黃醇酯之類的維生素A前體、維生素B系列如維生素Β3、維生素Β5、維生素Β12，維生素C，維生素K，及α、γ或δ維生素 E和其它維生素E或它們的混合物之類的維生素Ε。羥基酸的例子包括但不限于乙醇酸，乳酸，蘋果酸，水楊酸，檸檬酸，及酒石酸等， 參見歐洲專利申請No. 273202。抗氧劑的例子包括但不限于水溶性抗氧劑如硫醇化合物及衍生物，(如偏亞硫酸氫鈉和N-乙酰半胱氨酸)，硫辛酸及二氫硫辛酸，白藜蘆醇，乳鐵蛋白，以及抗壞血酸和抗壞血酸衍生物(如維生素C棕櫚酸酯和維生素C多肽)。適用于本發明的組合物的油溶性抗氧劑包括但不限于丁基化羥基甲苯，類維生素A(如視黃醇和視黃醇棕櫚酸酯)，不同的維生素E(如α、γ或δ它們的混合物，如生育酚醋酸鹽)，生育三烯酚，輔酶Q。適于本發明組合物的含抗氧劑的天然提取物包括但不限于含黃酮，異黃酮及衍生物(如三羥基異黃酮和diadzein)的提取物，含白藜蘆醇的提取物及其它。天然提取物包括葡萄籽，綠茶，松樹皮，及蜂膠。其它抗氧劑的例子參見ICI手冊第1612-13頁。其它物質其它不同的物質也可以用于本發明的組合物。這些包括保濕劑，蛋白質和多肽，防腐劑，及堿性試劑。這些試劑在ICI手冊，pp. 1650-1667中公開。本發明的組合物還含有螯合劑(如EDTA)和防腐劑(如對羥基苯甲酸酯類)。合適的防腐劑和螯合劑的例子已經在ICI手冊，pp. 1626和16M-55中公開。另外，這里的局部組合物通常含有化妝輔劑，如染料，遮光劑(如二氧化鈦)，顏料及香味劑。實施例1豆類產品的伽馬射線輻射處理申請人:發現，豆奶粉進行滅菌滅菌操作(例如伽馬輻射)前含有高水平的微生物， 最多可高達50，OOOcfu/克。還發現這些產品含有可探測水平的有害微生物成份，例如達到 20，OOOcfu/g的排泄物鏈球菌。申請人:曾經將不同量的(例如，從約Ig到約200kg)豆奶粉曝曬在lkGy_16kGy 的伽馬射線中。所需要的使總的微生物含量低于lOOcfu/g的劑量或伽馬輻射量大約是 IOKGy0使排泄物鏈球菌減少1個對數的劑量測定出是約3KGy，而5KGy的輻射劑量相應地使10克豆奶粉樣品中微生物含量減少到無法探測水平。不過，用于照射豆類產品的伽馬射線的輻射量最終要通過微生物含量和待處理的豆類產品的尺寸來決定。實施例2豆類產品的胰島素抑制性按照廠商指導的方法(EnzChekTM蛋白酶化驗試劑盒產品信息，3/15/99修訂版； Molecular Probes, Eugene OR)使用EnzChekTM蛋白酶測定試劑盒測定熒光酪蛋白肽對胰島素誘導裂解的抑制作用。總的來說，不同的豆類制品首先在IX消化緩沖液(在試劑盒中預備)中稀釋，并在不同的濃度下與溶解在IX消化緩沖液中的1000單位胰島素 (Sigma, St. Louis, MO) 一起培養。純的絲氨酸蛋白酶抑制劑(豆類胰島素抑制劑，來自 Sigma, St. Louis,MO)在 0. 1%，0. 01%和 0. 001 % w/v 濃度用作陽性對照。接著，1. Omg/ml BODIPY FL酪蛋白儲備液通過向與底物(試劑盒中預備)一起提供的小瓶加入0. 2ml去離子水獲得，然后，在消化緩沖液中制得最終濃度為10微克/毫升。加入或不加入測試物質的情況下，胰島素與BODIPY熒光酪蛋白底物室溫下培養一小時后，使用Softmax 0 軟件(Molecular Devices Corporation)在SpectraMax Gemini 微量滴定平板讀數器 (Molecular Devices Corporation, Sunnyvale, CA)上測定熒光(激發波長 485nm，發射波長530nm)。每個試驗采用三份試樣，每份試樣重復兩遍。該測量方法可用于用七種不同方法處理的豆類產品的測量。實例A是碾成粉末的豆類(陽光食品公司，臺灣臺北，R. 0. C)。實例B是用約8-15KGy的伽馬射線輻射處理的實例A的粉末。實例C是油脂被提取出的豆類粉末(來自Central Soya Company Inc., Fort Weyne, IN的Soyaf luff ,)。實例D是豆奶粉末，該粉末由去皮豆類和水通過過濾、 加熱、噴霧干燥(Devansoy Farms, Carroll, Iowa)并用7_9KGy的伽馬射線輻射處理。實例E是豆奶粉末，該粉末是通過將豆類與水混合，將混合物加熱過夜，再加入1，3- 丁二醇后混合得到(來自日本 Ichimaru Pharcos C0.，Ltd，Gifu 的 FlavosteroneSB)。實例 F 是豆奶粉末，該粉末是通過將豆類與水混合，將混合物加熱過夜，再加入乙醇后得到(來自日本 Ichimaru Pharcos C0.，Ltd, Gifu 的 FlavosteroneSE)。實例 G 是豆類蛋白提取物(來自法國 Laboratories Serobiologiques S. A. , Pulnoy 的 Vegeseryl HGP LS 8572)。所有這些豆類產品均與豆類胰蛋白酶抑制劑(STI) (Sigma)進行對比。不同豆類制品對底物的胰蛋白酶裂解抑制作用的百分數通過MicrosoftExcelTM 計算并記錄在表1。表 1
測試產品濃度%胰蛋白酶抑制能力STI0. 0143. 0STI0. 176. 1實例A0. 0132. 8實例A0. 167. 1實例B0. 0131. 5實例B0. 167. 2實例C0. 0122. 7
1權利要求
1.一種用于預防或治療放療引起的皮膚損傷的包含非變性豆類產品的組合物。
2.如權利要求1所述的組合物，其特征在于，所述豆類產品包含非變性大豆產品。
3.如權利要求2所述的組合物，其特征在于，所述非變性大豆產品選自大豆粉、大豆奶、大豆奶粉、利馬豆、利馬豆奶、利馬豆奶粉、黑豆粉、黑豆奶、黑豆奶粉和它們的組合。
4.如權利要求3所述的組合物，其特征在于，在組合物中所述非變性大豆產品的含量能夠有效預防放療引起的皮膚損傷。
5.如權利要求4所述的組合物，其特征在于，組合物中非變性大豆產品的含量占組合物重量的0.1到20%。
6.如權利要求5所述的組合物，其特征在于，組合物中非變性大豆產品的含量占組合物重量的0.5到15%。
7.如權利要求6所述的組合物，其特征在于，組合物中非變性大豆產品的含量占組合物重量的到10%。
8.如權利要求3所述的組合物，其特征在于，在組合物中所述非變性大豆產品的含量能夠有效治療放療引起的皮膚損傷。
9.如權利要求8所述的組合物，其特征在于，組合物中非變性大豆產品的含量占組合物重量的0.1到20%。
10.如權利要求9所述的組合物，其特征在于，組合物中非變性大豆產品的含量占組合物重量的0.5到15%。
11.如權利要求10所述的組合物，其特征在于，組合物中非變性大豆產品的含量占組合物重量的到10%。
12.如權利要求1所述的組合物，其特征在于，所述組合物為乳劑形式。
13.如權利要求2所述的組合物，其特征在于，所述組合物為乳劑形式。
14.如權利要求2所述的組合物，其特征在于，所述組合物還包含潤膚劑。
15.如權利要求2所述的組合物，其特征在于，所述組合物還包含保濕劑。
16.如權利要求3所述的組合物，其特征在于，所述組合物還包含一種或多種下列試劑增亮用試劑、變暗用試劑(如自曬黑試劑)、抗痤瘡試劑、消光劑、抗微生物劑、抗炎齊U、 抗真菌劑、抗寄生蟲劑、外用鎮痛劑、防曬劑、光防護劑、抗氧劑、角蛋白溶解劑、洗滌劑/表面活性劑、增濕劑、營養劑、維生素、能量增強劑、抗汗劑、收斂劑、除臭劑、毛發剝離劑、毛發生長促進劑、固化劑、抗硬化劑、維生素、漂白劑、脫色劑、發泡劑、調節劑、保濕劑、芳香齊U、 抗老化劑、防銹劑、抗癌劑、癌癥預防劑和毛發、指甲和皮膚調理劑。
17.一種使用非變性豆類產品治療或預防放療引起的皮膚損傷的方法，此方法包含將所述非變性豆類產品涂施到病人皮膚上的一個將會依照所述放射治療使用電離輻射線進行輻射的區域上。
18.如權利要求17所述的方法，其特征在于，所述豆類產品是一種非變性大豆產品。
19.如權利要求17所述的方法，其特征在于，包含在暴露于輻射之前涂施所述的非變性豆類產品。
20.如權利要求17所述的方法，其特征在于，包括在暴露于輻射之前和之后涂施所述的非變性豆類產品。
21.如權利要求19所述的方法，其特征在于，包含在暴露于輻射之前大約1到14天，每天涂施所述的非變性豆類產品。
22.如權利要求21所述的方法，其特征在于，所述的非變性豆類產品每天涂施兩次，至少間隔6小時。
23.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述的非變性豆類產品在暴露于輻射之前涂施大約1到14天，在暴露于輻射之后至少涂施約30天。
24.如權利要求17所述的方法，其特征在于，所述的非變性豆類產品在暴露于輻射之后涂施。
25.如權利要求M所述的方法，其特征在于，所述的非變性豆類產品在暴露于輻射之后涂施至少30天。
26.如權利要求M所述的方法，其特征在于，所述的非變性豆類產品在每次暴露于輻射之后涂施。
27.如權利要求沈所述的方法，其特征在于，所述的非變性豆類產品首先在第一次暴露于輻射之前大約1到14天涂施。
28.如權利要求27所述的方法，其特征在于，所述的非變性豆類產品在暴露于輻射完成之后再涂施至少30天。
全文摘要
本發明涉及具有胰蛋白酶抑制活性和減少的微生物含量的非變性豆類產品，使用這種豆類產品、含這種豆類產品的組合物治療或預防放療產生的皮膚損傷的方法，和這種豆類產品或組合物對皮膚、指甲和毛發的局部應用。
文檔編號A61Q17/04GK102379917SQ20111034510
公開日2012年3月21日 申請日期2005年7月18日 優先權日2004年7月16日
發明者M·瑟博格 申請人:強生消費者公司