專利名稱：一種降糖類藥品、保健品或食品中添加雙胍類化合物的快速檢測方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物檢測領(lǐng)域，具體涉及降糖類藥品、保健品和食品中非法添 加化合物的檢測領(lǐng)域，尤其涉及一種降糖類藥品、保健品或食品中添加雙胍類 化合物的快速檢測方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
雙胍類化合物是降糖藥家族的元老之一，主要包括鹽酸二甲雙胍、鹽酸苯 乙雙胍和鹽酸丁二胍，雙胍類化合物價格低廉，與其他化學(xué)降糖藥聯(lián)合使用可 增強(qiáng)降血糖作用，故在非法添加中出現(xiàn)頻率高，但雙胍類化合物作為藥物用于 降糖時，存在嚴(yán)重不良反應(yīng)包括乳酸中毒，是一種死亡率高的不良反應(yīng)，尤其 以老年人慎用。
鹽酸二甲雙胍的英文名稱為"MetforminHydrochloride",商品名稱有"降 糖片"、"甲福明"、"迪化糖錠"、"格華止"、"美迪康"、"君力達(dá)"等，化學(xué)名 稱為l，l-二甲基雙胍鹽酸鹽，其結(jié)構(gòu)式如式(I )所示。
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鹽酸苯乙雙胍又稱"降糖靈"，英文名稱為"PhenforminHydrochloride' 化學(xué)名稱為l-(2-苯乙基)雙胍鹽酸鹽，其結(jié)構(gòu)式如式(II)所示。H
H
(II)
鹽酸丁二胍，又稱為"丁福明"，化學(xué)名稱為l-丁基二胍，其結(jié)構(gòu)式如式 (III)所示。
HCI
Y 丫
NH NH
(III)
鹽酸苯乙雙胍、鹽酸二甲雙胍在我國為處方藥，患者需要在醫(yī)生的指導(dǎo)下 方能服用，國家對其生產(chǎn)、經(jīng)營及使用進(jìn)行了嚴(yán)格的規(guī)定；鹽酸丁二胍屬淘汰 藥，在我國和大部分發(fā)達(dá)國家均未批準(zhǔn)上市。關(guān)于鹽酸苯乙雙胍、鹽酸二甲雙 胍和鹽酸丁二胍引起的藥物不良反應(yīng)己有不少報道。近年來，在降糖類藥品、 保健品和食品中非法添加鹽酸苯乙雙胍、鹽酸二甲雙胍和鹽酸丁二胍的情況甚 為嚴(yán)重，對于降糖類藥品、保健品和食品中非法添加雙胍類降糖藥進(jìn)行監(jiān)督檢 測是一項(xiàng)長期的任務(wù)，它涉及范圍廣，需要進(jìn)行大量的檢驗(yàn)，在廣大的農(nóng)村地 區(qū)和經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)的中小城市開展這項(xiàng)檢驗(yàn)活動有較大的難度。
目前，檢驗(yàn)藥品、保健品和食品中非法添加雙胍類降糖藥的方法主要有薄 層色譜法、高效液相色譜法和高效液相色譜液一質(zhì)譜聯(lián)用法等，薄層色譜法的 優(yōu)點(diǎn)是不需要使用昂貴的分析儀器，但該方法受外界條件影響大，比移值不穩(wěn) 定，存在邊緣效應(yīng)，色譜展開和晾干的時間長，不能滿足快速測定的要求，并 且對儀器以及周圍環(huán)境要求高，同時還對實(shí)驗(yàn)人員技術(shù)要求也高；高效液相色譜法的優(yōu)點(diǎn)是色譜分離效率高，靈敏度高，但其缺點(diǎn)是儀器價格昂貴，樣品前 處理時間長，色譜柱易受污染，分析成本高，當(dāng)共存成分的色譜保留時間與鹽 酸苯乙雙胍、鹽酸二甲雙胍的色譜保留時間接近時容易作出錯誤的判斷，儀器
對使用環(huán)境要求高，需要固定擺放，不適合作流動性大的現(xiàn)場檢測；高效液相
色譜液一質(zhì)譜聯(lián)用法適合于成分復(fù)雜、背景干擾嚴(yán)重的樣品分析，這種分析方 法可提高檢測結(jié)果的可靠性，但是該方法操作更加復(fù)雜，儀器對使用環(huán)境要求 更高，需要固定擺放，不適合作流動性大的現(xiàn)場檢測。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種分析成本低、專屬性強(qiáng)、 靈敏度高、抗共存物質(zhì)干擾能力強(qiáng)、試驗(yàn)現(xiàn)象明顯、檢驗(yàn)結(jié)論正確率高、操作 簡便且不需要使用貴重分析儀器，可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場對降糖類藥品、保健品或食品中 添加雙胍類化合物的快速檢測方法。
本發(fā)明的另一目的在于提供上述快速檢測方法在制備雙胍類化合物快速 檢測試劑盒中的應(yīng)用。
本發(fā)明的上述目的是通過如下方案予以實(shí)現(xiàn)的
目前，在降糖類藥品、降糖類保健品和降糖類食品中添加的雙胍類化合物 為鹽酸苯乙雙胍、鹽酸二甲雙胍和鹽酸丁二胍，通過對比鹽酸二甲雙胍、鹽酸 苯乙雙胍和鹽酸丁二胍的結(jié)構(gòu)式可以看出，這三個物質(zhì)在結(jié)構(gòu)上都有共同的雙 胍特征基團(tuán)，因此本發(fā)明針對該雙胍特征基團(tuán)，提供一種雙胍類化合物的快速 檢測方法，該方法是將雙胍類化合物從待測的降糖類藥品、降糖類保健品和降 糖類食品中先提取出來，然后用顯色劑對提取液進(jìn)行顯色，通過最后的顯色結(jié) 果就能準(zhǔn)確判斷出待測降糖類藥品、保健品或食品中是否添加了雙胍類化合物，本發(fā)明的快速檢測方法具體包括如下步驟
(1) 從降糖類藥品、保健品或食品中提取雙胍類化合物，收集提取液；
(2) 將提取液和顯色劑進(jìn)行顯色反應(yīng)，根據(jù)顯色結(jié)果即可判斷出降糖類藥 品、保健品或食品中是否添加有雙胍類化合物。
降糖類藥品、保健品或食品在采用上述方法進(jìn)行檢測前，可先進(jìn)行一些處 理，如片劑和顆粒劑可先研細(xì)，膠囊劑則取出內(nèi)容物。
上述步驟(1)中，為了保證提取效果，使得提取液中雜質(zhì)更少，在對降 糖類藥品、保健品或食品進(jìn)行雙胍類化合物的提取前，可先進(jìn)行預(yù)處理先向 降糖類藥品、保健品或食品中加入乙酸乙酯、二氯甲垸或三氯甲烷，振搖使分 散，過濾，棄濾液，收集過濾物再進(jìn)行后續(xù)的提取處理；乙酸乙酯、二氯甲垸 或三氯甲烷可以將降糖類藥品、保健品或食品中的脂溶性雜質(zhì)去除，同時也能
帶走部分水分起到脫水處理的作用；由于三氯甲烷具有一定的毒性，因此對降
糖類藥品、保健品或食品進(jìn)行預(yù)處理優(yōu)選乙酸乙酯或二氯甲垸。
上述步驟(1)中，可采用質(zhì)量百分比濃度為90%~100%的乙醇溶液作為 提取試劑，將降糖類藥品、保健品或食品中的雙胍類化合物提取出來，具體操 作為向降糖類藥品、保健品或食品(或經(jīng)過預(yù)處理后的過濾物)中加入質(zhì)量 百分比濃度為90%~100%的乙醇溶液，振搖使分散，過濾，收集濾液，該濾液 即為所需提取液，可用于后續(xù)的顯色檢測；作為提取劑的乙醇溶液優(yōu)選無水乙 醇。
上述步驟(2)中，將提取液和顯色劑進(jìn)行顯色反應(yīng)，可將提取液和顯色 劑都加入試管中進(jìn)行顯色反應(yīng)，也可以將提取液和顯色劑都加在反應(yīng)載板上進(jìn) 行顯色反應(yīng)，但本發(fā)明人經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)采用試管中進(jìn)行顯色其顯色效果不理想，而采用薄層色譜用的硅膠類薄層板作為反應(yīng)載板進(jìn)行顯色反應(yīng)，會得到很好的 顯色效果，結(jié)果觀察清晰準(zhǔn)確，因?yàn)楣枘z作為固定相，而作為提取劑的乙醇溶 液為流動相，當(dāng)提取液滴加到硅膠板上后，乙醇溶液快速擴(kuò)散、揮發(fā)，而雙胍 成分緊密吸附在孔徑平面上不隨溶劑擴(kuò)散而得到濃集(在待測組分的量大、超
過吸附容量時才擴(kuò)散，溶液越稀濃集效率越高)；其它在板材例如濾紙，擴(kuò)散
更嚴(yán)重，有的板材反應(yīng)速度慢，顏色較淺。薄層色譜用的硅膠類薄層板具有普 及易于獲取、成本低等優(yōu)點(diǎn)。
因此本發(fā)明在顯色時優(yōu)選采用硅膠類薄層板作為反應(yīng)載板進(jìn)行顯色反應(yīng)， 可大幅度提高檢測靈敏度，反應(yīng)速度比溶液明顯提高。
此外本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)當(dāng)提取劑為無水乙醇時，其顯色效果最好。
上述步驟(2)中，顯色劑選擇10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶 液-10%氫氧化鈉溶液，該混合液是10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液、10%鐵氰化鉀溶 液和10%氫氧化鈉溶液的等體積比混合液，所述百分比均為質(zhì)量/體積百分比。
上述步驟(2)中，將提取液點(diǎn)在反應(yīng)載板上，然后將反應(yīng)載板浸入顯色 劑中，或者將顯色劑加在反應(yīng)載板上顯色，顯色反應(yīng)的速度以及顏色深淺往往 會和點(diǎn)樣溶液的濃度有關(guān)。本方法顯色的靈敏度可以達(dá)到雙胍類物質(zhì)濃度 0.05mg/ml，在存在樣品基質(zhì)的溶液中，lmg/ml的雙胍類物質(zhì)檢測非常明顯， 此濃度對應(yīng)低于臨床有效劑量的1/20，因此顯色靈敏度足夠保證不會漏檢降糖 類藥品、保健品或食品中雙胍類化合物。在進(jìn)行顯色反應(yīng)時，通常會平行進(jìn)行 陽性對照反應(yīng)(釆用鹽酸二甲雙胍、鹽酸苯乙雙胍或鹽酸丁二胍作為陽性對照 品)，或配備彩色照片供對照判斷。顯色結(jié)果判斷依據(jù)如下
a.加入顯色劑后，如果提取液點(diǎn)樣位置不出現(xiàn)斑點(diǎn)，則待測降糖類藥品、保健品或食品中不含雙胍類化合物；
b. 加入顯色劑后，如果提取液點(diǎn)樣位置出現(xiàn)斑點(diǎn)，且斑點(diǎn)顏色為黃棕色，與陽性對照品顏色不一致，則待測降糖類藥品、保健品或食品中不含雙胍類化合物；
c. 加入顯色劑后，如果提取液點(diǎn)樣位置出現(xiàn)斑點(diǎn)，斑點(diǎn)顏色為棕紅或紅褐色，5分鐘內(nèi)褪為黃棕色，與陽性對照品顏色不一致，則待測降糖類藥品、保健品或食品中不含雙胍類化合物；
d. 加入顯色劑后，如果提取液點(diǎn)樣位置出現(xiàn)斑點(diǎn)，斑點(diǎn)顏色為棕紅或紅褐色，5分鐘內(nèi)棕紅或紅褐色不發(fā)生變化，依然保持棕紅或紅褐色，與陽性對照品顏色一致，則待測降糖類藥品、保健品或食品中含有雙胍類化合物；
e. 加入顯色劑后，如果提取液點(diǎn)樣位置出現(xiàn)斑點(diǎn)，斑點(diǎn)顏色為棕紅或紅褐色，放置30 60分鐘后顏色轉(zhuǎn)為藍(lán)色，則待測降糖類藥品、保健品或食品中含鹽酸二甲雙胍。
由于降糖類藥品、保健品和食品中的成分非常復(fù)雜，因此提取液可能有一定的底色，加入顯色劑后，作為陽性對照品的鹽酸二甲雙胍、鹽酸苯乙雙胍和鹽酸丁二胍在5分鐘時所顯顏色比開始時更為清晰，而提取液顯色后呈黃棕色，或一開始為棕紅或紅褐色但3分鐘內(nèi)迅速褪為黃棕色，因此本發(fā)明選擇在5分鐘時對顯色結(jié)果進(jìn)行判斷，可以使提取液中的干擾成分所呈現(xiàn)的干擾色消褪，從而保證了顯色結(jié)果判斷的準(zhǔn)確性。
基于本發(fā)明的快速檢測方法，可以制備雙胍類化合物的快速檢測試劑盒，也可以制備成適合藥品檢測車上使用的雙胍類化合物的快速檢測套裝，用于降糖類藥品、保健品和食品的快速檢測。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果
1. 本發(fā)明的方法其分析成本低、不需要專門設(shè)備、專屬性強(qiáng)、靈敏度高，適用于現(xiàn)場對降糖類藥品、保健品和食品中是否添加有雙胍類化合物進(jìn)行快速檢測，克服了現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)，滿足藥品、保健品和食品監(jiān)督檢驗(yàn)的需要;
2. 由于降糖類藥品、保健品和食品中的成分非常復(fù)雜，若采用水作為提取劑時，后期顯色反應(yīng)的干擾色非常深，而本發(fā)明采用先乙酸乙酯、二氯甲烷或三氯甲烷進(jìn)行去除脂溶性雜質(zhì)和脫水處理，然后用無水乙醇提取，解決了干擾色問題使得顯色判斷清晰、準(zhǔn)確；
3. 在溶液中進(jìn)行顯色反應(yīng)， 一般都比較慢而本發(fā)明的顯色反應(yīng)采用反應(yīng)載
板，如硅膠板，則顯色反應(yīng)速度快，而且硅膠板使得雙胍類成分富集，顯色結(jié)
果更加準(zhǔn)確；
4. 本發(fā)明的方法具有抗共存物質(zhì)干擾能力強(qiáng)、顯色結(jié)果明顯易于觀察判斷、檢驗(yàn)結(jié)論正確率高、操作簡便快速，無需對檢測人員進(jìn)行培訓(xùn)，所需檢測儀器簡單等特點(diǎn)；
5. 根據(jù)本發(fā)明的方法制備快速檢測試劑盒，將能滿足農(nóng)村地區(qū)開展相關(guān)的食品監(jiān)督檢驗(yàn)的需要。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步地解釋，但具體實(shí)施例并不對本發(fā)明做任何限定。
實(shí)施例1 膠囊劑的檢測
樣品奈糖tm芙蓉花粉，膠囊劑，HPLC法檢測本品每粒含鹽酸二甲雙胍287mg。采用本發(fā)明的快速檢測方法對樣品進(jìn)行檢測，其具體步驟如下
(1) 取樣品1粒，將其內(nèi)容物(約0.32g)置于2ml注射器中，加入lml二氯甲垸，過濾，棄去濾液，收集濾渣；向?yàn)V渣中加入lml無水乙醇，以有機(jī)濾頭(0.45um孔徑，外徑12mm)過濾，前5滴濾液棄去，收集后續(xù)濾液，即為提取液；
(2) 吸取上述提取液2ul，點(diǎn)于反應(yīng)載板上；將反應(yīng)載板浸入顯色劑(10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶液-10%氫氧化鈉溶液，1: 1: 1的體積比)中，迅速拎起并觀察；提取液點(diǎn)樣位置上立即可見明顯紅褐色，5分鐘內(nèi)顏色不褪，由此說明樣品中含有雙胍類化合物，待30分鐘后紅褐色轉(zhuǎn)為藍(lán)色，由此說明樣品中含有鹽酸二甲雙胍，該結(jié)果與HPLC的檢測結(jié)果一致。
實(shí)施例2膠囊劑的檢測
樣品圣首牌蕎芪膠囊，膠囊劑，HPLC法檢測本品每粒含鹽酸苯乙雙胍16.6mg。
采用本發(fā)明的快速檢測方法對樣品進(jìn)行檢測，其具體步驟如下
(1) 取樣品1粒，將其內(nèi)容物(約0.4g)置于2ml注射器中，加入lml乙酸乙酯，過濾，棄去濾液，收集濾渣；向?yàn)V渣中加入lml無水乙醇，以有機(jī)濾頭(0.45"m孔徑，外徑12mm)過濾，前5滴濾液棄去，收集后續(xù)濾液，即為提取液；
(2) 吸取上述提取液2ul，點(diǎn)于反應(yīng)載板上；將反應(yīng)載板浸入顯色劑(10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶液-10%氫氧化鈉溶液，1: 1: 1的體積比)中，迅速拎起并觀察；提取液點(diǎn)樣位置上立即可見明顯紅褐色，5分鐘內(nèi)顏色不褪，由此說明樣品中含有雙胍類化合物，待30分鐘后紅褐色并未轉(zhuǎn)為藍(lán)色，由此說明樣品中含有鹽酸苯乙雙胍或鹽酸丁二胍等雙胍類化合物，該結(jié)果與HPLC的檢測結(jié)果一致。
實(shí)施例3片劑的檢測
樣品清血養(yǎng)胰TM苳曲葛根復(fù)合植物片，片劑，HPLC法檢測本品每粒含鹽酸苯乙雙胍6.0mg。
采用本發(fā)明的快速檢測方法對樣品進(jìn)行檢測，其具體步驟如下
(1) 取樣品l片，研細(xì)，置于2ml注射器中，加入lml乙酸乙酯，過濾，棄去濾液，收集濾渣；向?yàn)V渣中加入lml無水乙醇，以有機(jī)濾頭(0.45 ii m孔徑，外徑12mm)過濾，前5滴濾液棄去，收集后續(xù)濾液，即為提取液；
(2) 吸取上述提取液2 P 1，點(diǎn)于反應(yīng)載板上；將反應(yīng)載板浸入顯色劑(10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶液-10%氫氧化鈉溶液，1:1:1的體積比)中，迅速拎起并觀察；提取液點(diǎn)樣位置上立即可見明顯紅褐色，5分鐘內(nèi)顏色不褪，由此說明樣品中含有雙胍類化合物，待30分鐘后紅褐色并未轉(zhuǎn)為藍(lán)色，由此說明樣品中含有鹽酸苯乙雙胍或鹽酸丁二胍等雙胍類化合物，該結(jié)果與HPLC的檢測結(jié)果一致。
實(shí)施例4丸劑的檢測
樣品六味地黃丸，丸劑，HPLC法檢測本品不含鹽酸苯乙雙胍、鹽酸二
甲雙胍和鹽酸丁二胍。
采用本發(fā)明的快速檢測方法對樣品進(jìn)行檢測，其具體步驟如下
(l)取樣品研細(xì)，約lg，置于2ml注射器中，加入lml乙酸乙酯，過濾，棄去濾液，收集濾渣；向?yàn)V渣中加入lml無水乙醇，以有機(jī)濾頭(0.45 um孔徑，外徑12mm)過濾，前5滴濾液棄去，收集后續(xù)濾液，即為提取液；(2)吸取上述提取液2U1，點(diǎn)于反應(yīng)載板上；將顯色劑(10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶液-10%氫氧化鈉溶液，1: 1: l的體積比)加至反應(yīng)載板上顯色；提取液點(diǎn)樣位置無有色斑點(diǎn)，由此說明樣品中不含有雙胍類化合物，該結(jié)果與HPLC的檢測結(jié)果一致。
實(shí)施例5顆粒劑的檢測
樣品糖脈康顆粒，顆粒劑，HPLC-MS檢測本品不含鹽酸苯乙雙胍、鹽
酸二甲雙胍和鹽酸丁二胍。
采用本發(fā)明的快速檢測方法對樣品進(jìn)行檢測，其具體步驟如下
(1) 取樣品研細(xì)，約lg，置于2ml注射器中，加入lml二氯甲烷，過濾，棄去濾液，收集濾渣；向?yàn)V渣中加入lml無水乙醇，以有機(jī)濾頭(0.45 ym孔徑，外徑12mm)過濾，前5滴濾液棄去，收集后續(xù)濾液，即為提取液；
(2) 吸取上述提取液2lU，點(diǎn)于反應(yīng)載板上；將顯色劑(10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶液-10%氫氧化鈉溶液，1: 1: l的體積比)加至反應(yīng)載板上顯色；提取液點(diǎn)樣位置無有色斑點(diǎn)，由此說明樣品中不含有雙胍類化合物，該結(jié)果與HPLC的檢測結(jié)果一致。
實(shí)施例6軟膠囊的檢測
樣品蜂膠軟膠囊，HPLC-MS檢測本品不含鹽酸苯乙雙胍、鹽酸二甲雙胍和鹽酸丁二胍。
采用本發(fā)明的快速檢測方法對樣品進(jìn)行檢測，其具體步驟如下
(1)取樣品1粒，剪開，擠出內(nèi)容物約lg，置于2ml注射器中，分三次加入約共5ml 二氯甲烷，過濾，棄去濾液，收集濾渣；向?yàn)V渣中加入lml無水乙醇，以有機(jī)濾頭(0.45um孔徑，外徑12mm)過濾，前5滴濾液棄去，收集后續(xù)濾液，即為提取液；
(2)吸取上述提取液2Pl，點(diǎn)于反應(yīng)載板上；將顯色劑(10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶液-10%氫氧化鈉溶液，1: 1: l的體積比)加至反應(yīng)載板上顯色；提取液點(diǎn)樣位置呈淡黃棕色斑點(diǎn)，由此說明樣品中不含有雙胍類化合物，該結(jié)果與HPLC的檢測結(jié)果一致。
實(shí)施例7茶劑的檢測
樣品苦蕎降糖茶，HPLC-MS檢測本品不含鹽酸苯乙雙胍、鹽酸二甲雙胍和鹽酸丁二胍。
采用本發(fā)明的快速檢測方法對樣品進(jìn)行檢測，其具體步驟如下
(1) 取樣品2g，置于2ml注射器中，加入lml二氯甲垸，過濾，棄去濾液，收集濾渣；向?yàn)V渣中加入lml無水乙醇，以有機(jī)濾頭(0.45um孔徑，外徑13mm)過濾，前5滴濾液棄去，收集后續(xù)濾液，即為提取液；
(2) 吸取上述提取液2ul，點(diǎn)于反應(yīng)載板上；將顯色劑(10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶液-10%氫氧化鈉溶液，1: 1: l的體積比)加至反應(yīng)載板上顯色；提取液點(diǎn)樣位置呈黃棕色斑點(diǎn)，由此說明樣品中不含有雙胍類化合物，該結(jié)果與HPLC的檢測結(jié)果一致。
實(shí)施例8 膠囊劑的檢測
樣品文糖膠囊，膠囊劑，HPLC法檢測本品每粒含鹽酸丁二胍12mg。采用本發(fā)明的快速檢測方法對樣品進(jìn)行檢測，其具體步驟如下(1)取樣品1粒，將其內(nèi)容物(約0.4g)置于2ml注射器中，加入lml乙酸乙酯，過濾，棄去濾液，收集濾渣；向?yàn)V渣中加入lml無水乙醇，以有機(jī)濾頭(0.45um孔徑，外徑13mm)過濾，前5滴濾液棄去，收集后續(xù)濾液，即為提取液；
(2)吸取上述提取液2U1，點(diǎn)于反應(yīng)載板上；將反應(yīng)載板浸入顯色劑(10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶液-10%氫氧化鈉溶液，1:1:1的體積比)中，迅速拎起并觀察；提取液點(diǎn)樣位置上立即可見明顯紅褐色，5分鐘內(nèi)顏色不褪，由此說明樣品中含有雙胍類化合物，待30分鐘后紅褐色并未轉(zhuǎn)為藍(lán)色，由此說明樣品中含有鹽酸苯乙雙胍或鹽酸丁二胍等雙胍類化合物，該結(jié)果與
HPLC的檢測結(jié)果一致。
權(quán)利要求
1、一種降糖類藥品、保健品或食品中添加雙胍類化合物的快速檢測方法，其特征在于該方法包括如下步驟(1)從降糖類藥品、保健品或食品中提取雙胍類化合物，收集提取液；(2)將提取液和顯色劑進(jìn)行顯色反應(yīng)，根據(jù)顯色結(jié)果判斷降糖類藥品、保健品或食品中是否添加有雙胍類化合物。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述快速檢測方法，其特征在于所述步驟(1)中，在 從降糖類藥品、保健品或食品中提取雙胍類化合物前，先向降糖類藥品、保健 品或食品中加入乙酸乙酯、二氯甲垸或三氯甲烷，振搖使分散，過濾，棄濾液， 收集過濾物進(jìn)行后續(xù)提取處理。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述快速檢測方法，其特征在于所述步驟(1)中，從 降糖類藥品、保健品或食品中提取雙胍類化合物，采用質(zhì)量百分比濃度為 90% 100%的乙醇溶液作為提取試劑。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述快速檢測方法，其特征在于所述提取試劑為無水 乙醇。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述快速檢測方法，其特征在于步驟(2)中，所述顯 色劑為10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液-10%鐵氰化鉀溶液-10%氫氧化鈉溶液，該混 合液是10%亞硝酰鐵氰化鈉溶液、10%鐵氰化鉀溶液和10%氫氧化鈉溶液的等 體積比混合液，所述百分比均為質(zhì)量/體積百分比。
6、 根據(jù)權(quán)利要求1所述快速檢測方法，其特征在于所述步驟(2)中，采 用硅膠類薄層板作為反應(yīng)載板，將提取液和顯色劑進(jìn)行顯色反應(yīng)
7、 根據(jù)權(quán)利要求1所述快速檢測方法，其特征在于所述步驟(2)中，提 取液和顯色劑進(jìn)行顯色反應(yīng)，5分鐘后判斷顯色結(jié)果。
8、權(quán)利要求1所述快速檢測方法在制備雙胍類化合物的快速檢測試劑盒 中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開一種降糖類藥品、保健品或食品中添加雙胍類化合物的快速檢測方法及其應(yīng)用，該方法是先從降糖類藥品、保健品或食品中提取雙胍類化合物，收集提取液；然后向提取液中加入顯色劑，根據(jù)顯色結(jié)果判斷降糖類藥品、保健品或食品中是否添加有雙胍類化合物。本發(fā)明的方法其分析成本低、抗共存物質(zhì)干擾能力強(qiáng)、無需專門設(shè)備、靈敏度高、顯色結(jié)果明顯易于觀察判斷、檢驗(yàn)結(jié)論正確率高、適用于現(xiàn)場對降糖類藥品、保健品和食品中是否添加有雙胍類化合物進(jìn)行快速檢測。根據(jù)本發(fā)明的快速檢測方法，制備雙胍類化合物的快速檢測試劑盒，能滿足農(nóng)村地區(qū)開展相關(guān)的食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)的需要。
文檔編號C07C279/26GK101581712SQ20091004038
公開日2009年11月18日 申請日期2009年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月19日
發(fā)明者關(guān)日晴, 李延志, 李晨輝, 譚婉清, 賴宇紅 申請人:廣東省藥品檢驗(yàn)所