專利名稱：一種斯氏木堿的制備方法
技術領域：
本發明屬于天然產物分離領域，具體是涉及一種應用高速逆流色譜技術從威廉斯氏木中純化斯氏木堿的方法。
背景技術：
斯氏木堿(Sickingine)是從菌草科植物染料斯氏木tinctoria (HBK)Schum.及威廉斯氏木williamsii Standi.植物中分離得到的一種卩引哚類生物堿，呈淡黃色無定形粉末轉，mp. 136-138 。現代藥理研究表明，斯氏木堿具有抑制回腸收縮作用，可抑制膝鼠尚體回腸由點刺激引起的收縮，ED5tl為100 μ M。現有提取斯氏木堿的報道并不多見，市場上也尚未有斯氏木堿對照品的出售，因此提供一種斯氏木堿的制備方法則很有必要，可以為其后續研究提供支持。

發明內容
本發明的目的是提供一種斯氏木堿的制備方法，該方法制得的斯氏木堿質量好，
純度高。為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案
一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟
(1)提取將威廉斯氏木藥材粉碎，加入5 12倍量的乙醇水溶液液回流或滲漉提取廣2次，每次O. 5^5h,合并得提取液；
(2)除雜將上述提取液濃縮至小體積，加入2飛倍量質量百分比濃度為1%的鹽酸水溶液溶解，過濾，再加入堿液將稀釋液調至pHfll，加等體積量的二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑得威廉斯氏木總生物堿；
(3 )純化將上述威廉斯氏木總生物堿采用高速逆流色譜法分離純化，設定色譜儀轉速為80(T900r/min，流速為I. 5 5. Oml/min，收集流出液，回收試劑，真空干燥得產品。步驟(I)所述乙醇液為體積百分比濃度為6(Γ80%的乙醇水溶液。步驟(2)所述提取液濃縮至密度I. 2^1. 6g/ml。步驟(2)所述堿性溶液為2 5mol/L的氨水溶液。步驟(3)所述高速逆流色譜法采用的溶劑系統是二氯甲烷-甲醇-pH3. 3磷酸鹽緩沖液(5-9:15-17:5-8)。步驟(3)所述溶劑系統制備方法為將氯仿-甲醇-PH3. 3磷酸鹽緩沖液按上述比例量取，混合均勻后靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總生物堿用下相溶解。本發明的有益效果是采用高速逆流色譜法純化，樣品損失少，得率高。
具體實施例方式
下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
實施例I :
取威廉斯氏木全植物10kg，粉碎，加入50L60%乙醇回流提取2次，每次O. 5h，合并提取液，濃縮至密度I. 5g/ml，加入2倍量1%鹽酸溶液稀釋，濾除沉淀后，加入2mol/L氨水調至pH9. 2，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑，得威廉斯氏木總堿。取氯仿-甲醇-pH3. 3磷酸鹽緩沖液按(5:13:6)體積比置于分液漏斗中，混勻后，靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總堿用下相溶解，開啟制備型高速逆流色譜儀，先將固定相泵入色譜柱中，再以I. 5ml/min流速泵入流動相，并通過進樣閥連續進樣，控制轉速為800r/min，收集流出液，濃縮，干燥得斯氏木堿I. 45g，檢測含量
94.4%ο實施例2: 取威廉斯氏木全植物20kg，粉碎，加入240L70%乙醇滲漉提取2次，每次5h，合并提取液，濃縮至密度I. 6g/ml，加入3倍量1%鹽酸溶液稀釋，濾除沉淀后，加入4mol/L氨水調至PHlI. 0，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑，得威廉斯氏木總堿。取氯仿-甲醇-pH3. 3磷酸鹽緩沖液按(6:17:5)體積比置于分液漏斗中，混勻后，靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總堿用下相溶解，開啟制備型高速逆流色譜儀，先將固定相泵入色譜柱中，再以3. 5ml/min流速泵入流動相，并通過進樣閥連續進樣，控制轉速為920r/min，收集流出液，濃縮，干燥得斯氏木堿2. 81g，檢測含量96. 2%ο實施例3:
取威廉斯氏木全植物20kg，粉碎，加入160L80%乙醇回流提取I次，提取3h，合并提取液，濃縮至密度I. 2g/ml，加入5倍量1%鹽酸溶液稀釋，濾除沉淀后，加入5mol/L氨水調至ρΗΙΟ. 3，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑，得威廉斯氏木總堿。取氯仿-甲醇-pH3. 3磷酸鹽緩沖液按(9:16:8)體積比置于分液漏斗中，混勻后，靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總堿用下相溶解，開啟制備型高速逆流色譜儀，先將固定相泵入色譜柱中，再以5ml/min流速泵入流動相，并通過進樣閥連續進樣，控制轉速為1000r/min，收集流出液，濃縮，干燥得斯氏木堿3. 46g，檢測含量93. 7%。實施例4:
取威廉斯氏木全植物20kg，粉碎，加入138L65%乙醇回流提取2次，提取2. 5h，合并提取液，濃縮至密度I. 4g/ml，加入3倍量1%鹽酸溶液稀釋，濾除沉淀后，加入2mol/L氨水調至ρΗΙΟ. 6，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑，得威廉斯氏木總堿。取氯仿-甲醇-pH3.3磷酸鹽緩沖液按(8:15:7)體積比置于分液漏斗中，混勻后，靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總堿用下相溶解，開啟制備型高速逆流色譜儀，先將固定相泵入色譜柱中，再以2. 2ml/min流速泵入流動相，并通過進樣閥連續進樣，控制轉速為850r/min，收集流出液，濃縮，干燥得斯氏木堿3. 43g，檢測含量
95.3%。
權利要求
1.一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟 (1)提取將威廉斯氏木藥材粉碎，加入5 12倍量的乙醇水溶液液回流或滲漉提取廣2次，每次O. 5^5h,合并得提取液； (2)除雜將上述提取液濃縮至小體積，加入2飛倍量質量百分比濃度為1%的鹽酸水溶液溶解，過濾，再加入堿液將稀釋液調至pHfll，加等體積量的二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑得威廉斯氏木總生物堿； (3 )純化將上述威廉斯氏木總生物堿采用高速逆流色譜法分離純化，設定色譜儀轉速為80(T900r/min，流速為I. 5^5. Oml/min，收集流出液，回收試劑，真空干燥得產品。
2.如權利要求I所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(I)所述乙醇液為體積百分比濃度為6(Γ80%的乙醇水溶液。
3.如權利要求I所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(2)所述提取液濃 縮至密度1.2 L6g/ml。
4.如權利要求I所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(2)所述堿性溶液為2飛mol/L的氨水溶液。
5.如權利要求I所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(3)所述高速逆流色譜法采用的溶劑系統是二氯甲烷-甲醇_pH3. 3磷酸鹽緩沖液(5-9:15-17:5-8)。
6.如權利要求5所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(3)所述溶劑系統制備方法為將氯仿-甲醇-PH3. 3磷酸鹽緩沖液按上述比例量取，混合均勻后靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總生物堿用下相溶解。
全文摘要
本發明提供一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟(1)將威廉斯氏木藥材粉碎，用乙醇水溶液采用回流或滲漉法提取，提取液濃縮至小體積，加鹽酸溶解，濾除不溶物，再將酸液調至堿性，用二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑得總生物堿；(2)將上述總生物堿采用高速逆流色譜法分離純化得斯氏木堿。本方法具有所得產品含量高，操作簡單，提率高等優點。
文檔編號C07H1/08GK102875616SQ20121035991
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月25日 優先權日2012年9月25日
發明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業發展有限公司