專利名稱：一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，屬于化工提取技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
苦參為豆科苦參屬的植物。分布于俄羅斯、日本、印度、朝鮮以及中國大陸的南北各省區(qū)等地，大多生長于海拔1，500米的地區(qū)，尤其是山坡、沙地、草坡、灌木林中及田野附近，目前尚未由人工引種栽培。已知，苦參隨產(chǎn)地的不同而含有不同含量的贗靛葉堿(一般為0.01%。 1%。，極少數(shù)品種能達到1%。)，而苦參中的贗靛葉堿具有以下功能:清熱燥濕，殺蟲，利尿。用于熱痢，便血，黃疸尿閉，赤白帶下，陰腫陰癢，濕疹，濕瘡，皮膚瘙癢，疥癬麻風(fēng)；還可以外治滴蟲性陰道炎。因此，提供從苦參中高效提取贗靛葉堿的方法將具有重要的經(jīng)濟和環(huán)境效益。

發(fā)明內(nèi)容
為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種高效的從苦參中提取贗靛葉堿的方法。為達到上述目的，本發(fā)明是通過以下的技術(shù)方案來實現(xiàn)的:
一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，包括以下步驟:
(1)制備苦參粗提物流體:將原料苦參浸入醇水溶液中在常溫下進行提取，并將提取液真空減壓濃縮后，得到苦參粗提物流體，其中，Ikg苦參用10-15L醇水溶液浸提；
(2)制備苦參浸膏:將步驟(I)制備的苦參粗提物流體通過石油醚進行脫脂處理，并對脫脂后的苦參粗提物進行真空減壓并`回收溶劑后，真空干燥得到苦參浸膏；
(3)制備贗靛葉堿粗品:將步驟(2)制備的苦參浸膏加入到pH=2的鹽酸水溶液中溶解，得到酸水溶液，然后向酸水溶液中加入萃取劑進行萃取，萃取2-10次，水層用氨水堿化至PH=IO后，繼續(xù)用萃取劑進行萃取，萃取2-10次，然后，合并所有的萃取液，并經(jīng)過減壓蒸餾回收溶劑后，得到贗靛葉堿粗品；
(4)制備贗靛葉堿半成品:將步驟(3)中制備的贗靛葉堿粗品利用乙醇-水溶液完全溶解，制成混濁度低于0.5°的上樣溶液，采用大孔樹脂DlOl分離柱，濕法上樣以后，靜置至樹脂達到吸附平衡，以乙醇-水溶液為洗脫液，進行梯度洗脫或等度分段洗脫，收集贗靛葉堿含量大于40%的洗脫液，然后經(jīng)過濃縮、干燥后得到贗靛葉堿半成品；
(5)制備贗靛葉堿:將步驟(4)制備的贗靛葉堿半成品利用乙醇-水溶液完全溶解，制成混濁度低于0.5°的上樣溶液，采用大孔樹脂DlOl分離柱，濕法上樣以后，靜置至樹脂達到吸附平衡，以乙醇-水溶液為洗脫液，進行梯度洗脫或等度分段洗脫，收集贗靛葉堿質(zhì)量百分含量大于等于95%的洗脫液，并合并洗脫液，然后經(jīng)過濃縮、干燥后得到贗靛葉堿。進一步,步驟(I)所述的原料苦參為干燥的苦參粉末，所述的苦參粉末的粒徑為80 100目。步驟(I)所述的醇水溶液中的醇為用于植物提取的甲醇或乙醇，優(yōu)選乙醇。而所述的醇水溶液中醇的體積含量為65% 75%。且，步驟(2)所述的真空干燥的溫度為25°C 30°C。而，步驟(3)中所述的苦參浸膏與鹽酸水溶液的用量比:lg:20mlο且，步驟(3)中所述的萃取劑為二氯甲烷，且每次進行萃取時，萃取劑的加入體積為待萃取溶液體積的2倍。步驟(4)和步驟(5)中靜置的時間為0.5-lh。而在進行等度分段洗脫時，以10%的濃度差為一個間隔段，每間隔段的洗脫體積為2 3個柱體積，洗脫液流速為Γ2個柱體積/小時。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明制備方法簡單、易于操作，且成本低廉，適合大規(guī)模生產(chǎn)，提取的贗靛葉堿的純度高，具有廣泛的應(yīng)用潛力。


圖1為本發(fā)明實施例1制備的贗靛葉堿的HPLC譜圖。
具體實施例方式以下結(jié)合附圖和具體實施方式
對本發(fā)明進行具體的介紹。以下實施例中贗靛葉堿的含量測定方法均采用液質(zhì)聯(lián)用。儀器:島津LCMS-2010高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀。包括2臺LC-lOADvp泵，F(xiàn)CV-lOALvp四元低壓梯度流路閥，D⑶-14AM線真空脫氣機，CTO-lOAvp柱溫箱，7725i進樣閥(Rheodyne，USA), SPD-MlOAvp 二極管陣列檢測器，質(zhì)譜為LCMS-2010單級四極桿，電噴霧電離(ESI)離子源，數(shù)據(jù)采集和處理由LCMS solution 2.02軟件完成。色譜柱為ThermoHypersil-Keystone (Bellefonte, PA, USA) C18 (5 Mm, 150 X 2.1 mm),柱溫 40 °C。流動相使用前經(jīng)0.22 Mm濾膜過濾并超聲脫氣，流速為0.2 mL min_l。電噴霧電離(ESI)，離子極性:positive ion (+);全離子掃描(SCAN),掃描范圍:50-1000 (m/z);探針(probe)溫度:250 V (ESI);曲型脫溶劑裝置(CDL)溫度:250 V (ESI +);加熱塊(block)溫度200 °C;曲型脫溶劑裝置(CDL)電壓:-45 V (ESI+);探針(probe)電壓:4.5 kV (ESI+);檢測電壓 1.5 kV ；Q-array 電壓:DC 0V, RF 150V ;霧化氣體流速 2.5 L min-l(ESI)。紫外光譜掃描范圍為200到300 nm。
實施例1
一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，包括以下步驟:
(O制備苦參粗提物流體:將原料苦參(江蘇，贗靛葉堿含量0.5%。)陰涼處晾干(水分含量10%)，稱取粉碎過篩(80目)后的粉末500kg，70%乙醇-水溶液室溫浸提3次(4000LXl、2500LX2、12hrX3，每2hr溶液循環(huán)/攪拌lOmin)，合并3次乙醇提取液，55 0C真空減壓濃縮至100L流體；
(2)制備苦參浸膏:將步驟(I)制備的100L流體通過石油醚脫脂處理，并對脫脂后的苦參粗提物進行真空減壓并回收溶劑后，得到流體狀物質(zhì)，并在30°C下真空干燥，得到固體粉末18.7 kg，測其贗靛葉堿含量為1.1%。(3)制備贗靛葉堿粗品:將步驟(2)制備的苦參浸膏加入到pH=2的鹽酸水溶液中溶解Qg浸膏用20ml的酸水溶 解)，得到酸水溶液,然后向酸水溶液中加入2倍體積的二氯甲烷萃取劑萃取，萃取4次，水層繼續(xù)用氨水堿化至PH=IO,繼續(xù)用2倍體積的二氯甲烷萃取劑萃取4次，然后，合并二氯甲烷萃取液，減壓回收溶劑，得到贗靛葉堿粗品4.7kg，測其贗靛葉堿含量為4.2% ；
(4)制備贗靛葉堿半成品:將步驟(3)所得的贗靛葉堿粗品的固體粉末4.7kg加350C的30%乙醇水溶液，制成澄清或略混濁(混濁度低于0.5° )的上樣溶液，采用大孔樹月旨DlOl為分離介質(zhì)，濕法上樣以后，放置一段時間(約0.5 1小時)，以使樹脂對化學(xué)成分達到吸附平衡；以乙醇-水溶液為洗脫液，收集贗靛葉堿質(zhì)量分數(shù)大于40%的洗脫液，合并，濃縮，干燥，得350g粉末狀的贗靛葉堿半成品；
(5)制備贗靛葉堿:對步驟(4)得到的贗靛葉堿半成品，加350C的30%乙醇水溶液，制成澄清或略混濁(混濁度低于0.5° )的上樣溶液，采用大孔樹脂DlOl為分離介質(zhì)，濕法上樣以后，放置一段時間(約0.5 1小時)，以使樹脂對化學(xué)成分達到吸附平衡；以乙醇-水溶液為洗脫液，收集贗靛葉堿質(zhì)量分數(shù)大于等于95%的洗脫液，并合并合并，濃縮，真空干燥72小時，得贗靛葉堿晶體191克。圖1為本發(fā)明實施例1制備的贗靛葉堿的HPLC譜圖。如圖1所示:經(jīng)HPLC檢測(出峰圖參見圖1)，贗靛葉堿含量為96%。
實施例2
一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，包括以下步驟:
(O制備苦參粗提物流體:將原料苦參(江蘇，贗靛葉堿含量0.5%。)陰涼處晾干(水分含量10%)，稱取粉碎過篩(80目)后的粉末500kg，70%乙醇-水溶液室溫浸提3次(40001^1、25001^2、121^\3，每2111'溶液循環(huán)/攪拌lOmin)，合并3次乙醇提取液，550C真空減壓濃縮至IOOL流體；
(2)制備苦參浸膏:將步驟(I)制備的IOOL流體通過石油醚脫脂處理，并對脫脂后的苦參粗提物進行真空減壓并回收溶劑后，得到流體狀物質(zhì)，并在30°C下真空干燥，得到固體粉末18.7 kg，測其贗靛葉堿含量為1.1%。(3)制備贗靛葉堿粗品:將步驟(2)制備的苦參浸膏加入到pH=2的鹽酸水溶液中溶解Qg浸膏用20ml的酸水溶解)，得到酸水溶液,然后向酸水溶液中加入2倍體積的二氯甲烷萃取劑萃取，萃取4次，水層繼續(xù)用氨水堿化至PH=IO,繼續(xù)用2倍體積的二氯甲烷萃取劑萃取4次，然后，合并二氯甲烷萃取液，減壓回收溶劑，得到贗靛葉堿粗品4.7kg，測其贗靛葉堿含量為4.2% ；
(4)制備贗靛葉堿半成品:將步驟(3)所得的贗靛葉堿粗品的固體粉末4.7kg加350C的30%乙醇水溶液，制成澄清或略混濁(混濁度低于0.5° )的上樣溶液，采用大孔樹月旨DlOl為分離介質(zhì)，濕法上樣以后，放置一段時間(約0.5 1小時)，以使樹脂對化學(xué)成分達到吸附平衡；以乙醇-水溶液為洗脫液，洗脫采用的是等度分段洗脫，以10%的濃度差為一個間隔段，每段的洗脫體積為2個柱體積，洗脫液流速為I個柱體積/小時，收集贗靛葉堿質(zhì)量分數(shù)大于40%的洗脫液，合并，濃縮，干燥，得贗靛葉堿半成品；
(5)制備贗靛葉堿:對步驟(4)得到的贗靛葉堿半成品，加350C的30%乙醇水溶液，制成澄清或略混濁(混濁度低于0.5° )的上樣溶液，采用大孔樹脂DlOl為分離介質(zhì)，濕法上樣以后，放置一 段時間(約0.5 1小時)，以使樹脂對化學(xué)成分達到吸附平衡；以乙醇-水溶液為洗脫液，洗脫采用的是等度分段洗脫，以10%的濃度差為一個間隔段，每段的洗脫體積為2個柱體積，洗脫液流速為I個柱體積/小時,收集贗靛葉堿質(zhì)量分數(shù)大于等于95%的洗脫液，并合并洗脫液，濃縮，真空干燥后得贗靛葉堿晶體208克。經(jīng)HPLC檢測，贗靛葉堿含量為96%。以上所有實施例中，萃取次數(shù)可在2-20的范圍內(nèi)合理控制。本發(fā)明制備方法簡單、易于操作，且成本低廉，適合大規(guī)模生產(chǎn)，提取的贗靛葉堿的純度高，具有廣泛的應(yīng)用潛力。

本發(fā)明按照上述實施例進行了說明，應(yīng)當(dāng)理解，上述實施例不以任何形式限定本發(fā)明，凡采用等同替換或等效變換方式所獲得的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)制備苦參粗提物流體:將原料苦參浸入醇水溶液中在常溫下進行提取，并將提取液真空減壓濃縮后，得到苦參粗提物流體，其中，Ikg苦參用10-15L醇水溶液浸提； (2)制備苦參浸膏:將步驟(I)制備的苦參粗提物流體通過石油醚進行脫脂處理，并對脫脂后的苦參粗提物進行真空減壓并回收溶劑后，真空干燥得到苦參浸膏； (3)制備贗靛葉堿粗品:將步驟(2)制備的苦參浸膏加入到pH=2的鹽酸水溶液中溶解，得到酸水溶液，然后向酸水溶液中加入萃取劑進行萃取，萃取2-10次，水層用氨水堿化至PH=IO后，繼續(xù)用萃取劑進行萃取，萃取2-10次，然后，合并所有的萃取液，并經(jīng)過減壓蒸餾回收溶劑后，得到贗靛葉堿粗品； (4)制備贗靛葉堿半成品:將步驟(3)中制備的贗靛葉堿粗品利用乙醇-水溶液完全溶解，制成混濁度低于0.5°的上樣溶液，采用大孔樹脂DlOl分離柱，濕法上樣以后，靜置至樹脂達到吸附平衡，以乙醇-水溶液為洗脫液，進行梯度洗脫或等度分段洗脫，收集贗靛葉堿含量大于40%的洗脫液，然后經(jīng)過濃縮、干燥后得到贗靛葉堿半成品； (5)制備贗靛葉堿:將步驟(4)制備的贗靛葉堿半成品利用乙醇-水溶液完全溶解，制成混濁度低于0.5°的上樣溶液，采用大孔樹脂DlOl分離柱，濕法上樣以后，靜置至樹脂達到吸附平衡，以乙醇-水溶液為洗脫液，進行梯度洗脫或等度分段洗脫，收集贗靛葉堿質(zhì)量百分含量大于等于95% 的洗脫液，并合并洗脫液，然后經(jīng)過濃縮、干燥后得到贗靛葉堿。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，步驟(I)所述的原料苦參為干燥的苦參粉末，所述的苦參粉末的粒徑為8(Tl00目。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，步驟(I)所述的醇水溶液中的醇為用于植物提取的甲醇或乙醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，步驟(I)所述的醇水溶液中醇的體積含量為65% 75%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，步驟(2)所述的真空干燥的溫度為25°C 30°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，步驟(3)中所述的苦參浸膏與鹽酸水溶液的用量比:lg:20ml ο
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，步驟(3)中所述的萃取劑為二氯甲烷，且每次進行萃取時，萃取劑的加入體積為待萃取溶液體積的2倍。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，步驟(4)和步驟(5)中靜置的時間為0.5-lh。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，步驟(4)和步驟(5)中，進行等度分段洗脫時，以10%的濃度差為一個間隔段，每間隔段的洗脫體積為2^3個柱體積，洗脫液流速為1 2個柱體積/小時。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從苦參中提取贗靛葉堿的方法，其特征在于，包括以下步驟(1)利用醇水溶液浸提原料苦參制備苦參粗提物流體；(2)將步驟(1)制備的苦參粗提物流體通過石油醚進行脫脂、真空減壓、干燥后得到苦參浸膏；(3)經(jīng)過對苦參浸膏進行萃取、減壓蒸餾制備贗靛葉堿粗品；(4)將贗靛葉堿半成品采用大孔樹脂D101分離柱洗脫、濃縮、干燥后得到贗靛葉堿半成品；(5)重復(fù)步驟(4)制備贗靛葉堿。本發(fā)明制備方法簡單、易于操作，且成本低廉，適合大規(guī)模生產(chǎn)，提取的贗靛葉堿的純度高，具有廣泛的應(yīng)用潛力。
文檔編號C07D471/22GK103159767SQ20131006276
公開日2013年6月19日 申請日期2013年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月28日
發(fā)明者余雁, 司文會, 黃超群, 胡舒洋 申請人:蘇州農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院