專利名稱：一種葛根黃酮和葛根多糖的提取與分離的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種天然產(chǎn)物的提取方法，尤其涉及一種葛根黃酮和葛根多糖的提取 與分離的方法。
背景技術：
葛根別名鹿藿、雞齊，為野葛或粉葛的干燥根，是常用的中藥材，歷代以來本草均 有記載，味甘、辛、性平，具有解肌退熱、生津、透疹、溫陽止瀉、提高機體免疫力等功能。目 前，葛根廣泛用于改善心腦血管。治療腹瀉、糖尿病等重要復方制劑中，用量極大，是制劑的 重要成分。《中華人民共和國藥典》和《衛(wèi)生部藥品標準》中收錄大約有140余種葛根復方 制劑，其中主要有葛根片劑、針劑等。實際上葛根主要含有兩類有效成分葛根總黃酮和葛 根多糖。其中野葛含葛根總黃酮較多，主要作為葛根制劑、藥品、保健品等的原料，粉葛則主 要含葛根多糖，多用來制作葛根類食品的原料。由于黃酮類化合物和多糖類化合物的功效 相差很大，黃酮類化合物主要是具有抗癌抗腫瘤、抗心腦血管疾病、抗過敏、抗輻射、抗炎抑 菌、抗病毒、抗氧化、抗突變、以及增強免疫能力等廣泛的生理活性。能防治心腦血管系統(tǒng)的 疾病和呼吸系統(tǒng)的疾病等，如對治療冠心病、心絞痛、高血壓等有顯著效果，對防治心肌梗 塞、心肌缺血，心律失常等也起重要療效。多糖類化合物主要是增強人體免疫功能、抵抗衰 老、抑制腫瘤、活血抗栓、降低血壓、血脂、血糖以及對肝腎等主要臟器的保護作用等。葛根 黃酮廣泛應用于醫(yī)藥、食品、化妝品等工業(yè)中，且因其毒性較低及顯著獨特的生物活性，還 被應用到保健食品方面，即用作食品、化妝品的天然添加劑，如食用色素、甜味劑、抗氧化劑 等。葛根多糖由于獨特的生理活性也備受人們青睞，葛根多糖主要用作食品、保健品等，在 抗擊腫瘤方面有良好的療效，相關報道顯示，葛根多糖對嗜鉻細胞瘤細胞PC12的增殖具有 損傷作用。目前，國內(nèi)外對葛根提取物的研究主要為對葛根黃酮這一有效成分的分析，對葛 根多糖的研究報道較少。傳統(tǒng)方法一般采用乙醇為溶劑提取葛根，其提取物的產(chǎn)率在8%以 上，醇提取物中黃酮的含量在40%以上，而葛根多糖含量在5%以上，此提取物以黃酮的藥理 作用為主，多糖的免疫效果不明顯。所以一直期盼有一種簡便的方法，讓葛根的主要成分黃 酮類化合物和多糖類化合物分離。最近公開的專利CN101570581A，該專利申請文件公開了一種綜合提取葛根多糖和 黃酮的方法直接用熱水提取，然后用乙醇沉淀分離葛根多糖和黃酮，由于他們僅用了水提 取一步，葛根中可溶性較差的黃酮提取率低，且水提取液中的雜質含量高，導致葛根黃酮和 多糖的分離較為困難，乙醇用量大。專利CN1493695A，該專利申請文件公開了一種葛根同步提取葛根淀粉、葛根多糖、 葛根異黃酮工藝利用酶解、醇沉、真空減壓濃縮、干燥以提取葛根淀粉、葛根多糖、和葛根 異黃酮。但是采用酶解的成本較高，且僅用酶解一步，導致雜質過多，葛根黃酮和葛根多糖 的分離較困難，乙醇用量大。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了克服上述現(xiàn)有技術存在的不足而提出一種葛根黃酮和葛根 多糖的提取與分離的方法，其分離簡單，效果好，且乙醇可循環(huán)使用。本發(fā)明為解決上述技術問題所采用的技術方案是葛根黃酮和葛根多糖的提取與 分離的方法，其特征在于包括有以下步驟
1)取一定重量的葛根，加入質量百分比為50-95%乙醇溶液提取葛根黃酮，其中葛根 (g)與乙醇溶液(mL)固液比為1 :5-1: 30，進行一次回流提取，過濾，得到乙醇提取液A 和一次濾渣，一次濾渣再加入質量百分比50-95%乙醇溶液，其中濾渣(g)與乙醇溶液(mL) 固液比為1 5-1 30，進行二次回流提取，過濾，得到乙醇提取液B和二次濾渣，將乙醇提 取液B與乙醇提取液A合并，得到葛根黃酮提取液；
2)將步驟1)所得的二次濾渣加水提取葛根多糖，其中二次濾渣(g)與水(mL)固液比 為1 5-1 30，進行回流提取，過濾，得到水提取液，濾渣丟棄；
3)將步驟2)所得的水提取液濃縮至體積倍數(shù)的1/10-1/50，得到水提取濃縮液和回 收的水，水提取濃縮液加入質量百分比75- 95%乙醇溶液，搖勻，靜置1-12 h，過濾，濾出的 沉淀，烘干，得到葛根多糖，所得濾液與步驟1)所得的葛根黃酮提取液合并，經(jīng)濃縮、干燥， 得到葛根黃酮和回收的乙醇溶液。按上述方案，步驟1)所述的一次回流提取的溫度為60_90°C，時間為1-6 h。按上述方案，步驟1)所述的二次回流提取的溫度為60_90°C，時間為1-6 h。按上述方案，步驟2)所述的回流提取的溫度為70-100°C，時間為1-6 h。按上述方案，步驟3)所述的回收的水經(jīng)補加所需的水返回步驟2)的二次濾渣加 水提取葛根多糖步驟，水得到循環(huán)利用。按上述方案，步驟3)所述的回收的乙醇溶液補加質量百分比95%乙醇調制成所需 乙醇溶液濃度后返回步驟1)的葛根加入乙醇溶液提取葛根黃酮步驟，乙醇得到循環(huán)利用。上述制取的葛根黃酮和葛根多糖可以制成片劑、膠囊、飲料和口服液。本發(fā)明通過乙醇提取法，所用試劑無毒，操作方便，工藝簡單，所用的都是通用設 備，乙醇能夠循環(huán)利用，本發(fā)明首先采用乙醇溶液提取葛根黃酮，再用水提取葛根多糖的兩 步法分離葛根黃酮和葛根多糖，不但葛根黃酮提取率高，而且充分利用醇提之后的提取渣， 有效地將葛根黃酮和葛根多糖分離開來，并將用水提取所得的葛根多糖提取液進行濃縮， 濃縮液用乙醇沉淀，分離葛根多糖和葛根黃酮，進一步提高葛根多糖的含量，此外，濃縮回 收的溶劑能循環(huán)再利用，以減小溶劑用量和廢水的排放。


圖1是葛根黃酮和葛根多糖的提取與分離工藝流程圖。
具體實施例方式實施例1
云南產(chǎn)野葛20 g，用75%乙醇溶液(質量比)提取葛根黃酮，按葛根(g)與乙醇溶液(mL) 固液比1 20，在1 L的燒瓶中，80°C下回流提取4 h，過濾，得到乙醇提取液A和一次濾渣， 一次濾渣再用75%乙醇溶液(質量比)按固液比1 20在80°C下回流提取4 h，過濾，得到的乙醇提取液B和二次濾渣，將其與乙醇提取液A合并，得到750 mL葛根黃酮提取液；將二次 濾渣用水提取葛根多糖，按濾渣(g)與水(mL)固液比1 :20，100°C下回流提取4 h，過濾，得 到380 mL水提取液，濾渣棄之；將水提取液進行濃縮，得到10 mL水提取濃縮液并回收368 mL的水，回收的水補加水至所需的體積用于二次濾渣提取葛根多糖，水得到循環(huán)利用，水提 取濃縮液中加入30 mL 95%乙醇溶液(質量比)，搖勻，靜置3 h，過濾，濾出的沉淀、烘干，得 到1.71 g葛根多糖，得到的35 mL濾液與上述750 mL葛根黃酮提取液合并，濃縮，干燥，得 到2. 22 g葛根黃酮含量為73. 25%，葛根黃酮的提取率為11. 1%，濃縮蒸發(fā)回收的700 mL乙 醇溶液用150 mL 95%乙醇(質量比)調制成75%乙醇溶液(質量比)，用于葛根黃酮的提取， 乙醇得到循環(huán)利用。實施例2
湖北產(chǎn)野葛20 g，用80%乙醇溶液(質量比)提取葛根黃酮，按葛根(g)與乙醇溶液(mL) 固液比1 5，在500 mL的燒瓶中，80°C下回流提取1 h，過濾，得到乙醇提取液A和一次濾 渣，一次濾渣再用80%乙醇溶液(質量比)按固液比1 5在80°C下回流提取4 h，過濾，得 到的乙醇提取液B和二次濾渣，將乙醇提取液B與乙醇提取液A合并，得到190 mL葛根黃 酮提取液；二次濾渣用水提取葛根多糖，按濾渣(g)與水(mL)固液比1 :5，100°C下回流提 取4 h，過濾，得到90 mL水提取液，濾渣棄之；將水提取液濃縮，得到3 mL水提取濃縮液并 回收86 mL的水，回收的水補加水至所需的體積用于二次濾渣提取葛根多糖，水得到循環(huán)利 用，水提取濃縮液中加入15 mL 95%乙醇溶液(質量比)，搖勻，靜置3 h，過濾，濾出的沉淀、 烘干，得到1. 58g葛根多糖，得到的ISmL濾液與上述190 mL葛根黃酮提取液合并，濃縮，干 燥，得到1. 85 g葛根黃酮含量為58. 15%，葛根黃酮的提取率為9. 25%，濃縮蒸發(fā)回收的175 mL乙醇溶液用80 mL 95%乙醇(質量比)調制成75%乙醇溶液(質量比)，用于葛根黃酮的提 取，乙醇得到循環(huán)利用。實施例3
浙江產(chǎn)野葛20 g，用75%乙醇溶液(質量比)提取葛根黃酮，按葛根(g)與乙醇溶液(mL) 固液比1 10，在500 mL的燒瓶中，80°C下回流提取2 h，過濾，得到乙醇提取液A和一次 濾渣，一次濾渣再用75%乙醇溶液(質量比)按固液比1 20在80°C下回流提取2 h，過濾， 得到的乙醇提取液B和二次濾渣，將乙醇提取液B與乙醇提取液A合并，得到380 mL葛根 黃酮提取液；將乙醇溶液二次提取后的濾渣用水提取葛根多糖，按濾渣(g)與水(mL)固液 比1 :10，80°C下回流提取2 h，過濾，得到190 mL水提取液，濾渣棄之；將水提取液濃縮，得 到7mL水提取濃縮液并回收182 mL的水，回收的水補加水至所需的體積用于二次濾渣提取 葛根多糖，水得到循環(huán)利用，水提取濃縮液中加入25 mL 95%乙醇溶液(質量比)，搖勻，靜置 1 h，過濾，濾出的沉淀、烘干，得到1.67 g葛根多糖，得到的27 mL濾液與上述380 mL葛 根黃酮提取液合并，濃縮，干燥，得到2. 03 g葛根黃酮含量為60. 17%，葛根黃酮的提取率為 10. 15%，濃縮蒸發(fā)回收的400 mL乙醇溶液用210 mL 95%乙醇(質量比)調制成75%乙醇溶 液(質量比)，用于葛根黃酮的提取，乙醇得到循環(huán)利用。實施例4
湖南產(chǎn)野葛50 g，用80%乙醇溶液(質量比)提取葛根黃酮，按葛根(g)與乙醇溶液(mL) 固液比1 20，在2 L的燒瓶中，80°C下回流提取3 h，過濾，得到乙醇提取液A和一次濾渣， 一次濾渣再用80%乙醇溶液(質量比)按固液比1 20在80°C下回流提取3 h，過濾，得到的乙醇提取液B和二次濾渣，將乙醇提取液B與乙醇提取液A合并，得到1900 mL葛根黃酮 提取液；將乙醇溶液二次濾渣用水提取葛根多糖，按濾渣(g)與水(mL)固液比1 :20，80°C 下回流提取3 h，過濾，得到900 mL水提取液，濾渣棄之；將水提取液濃縮，得到30 mL水提 取濃縮液并回收864 mL的水，回收的水補加水至所需的體積用于二次濾渣提取葛根多糖， 水得到循環(huán)利用，水提取濃縮液中加入75 mL 95%乙醇溶液(質量比)，搖勻，靜置3 h，過濾， 濾出的沉淀、烘干，得到4. 52 g葛根多糖，得到的90mL濾液與上述1900 mL葛根黃酮提取 液合并，濃縮，干燥，得到5. 53 g葛根黃酮含量為70. 55%，葛根黃酮的提取率為11. 06%，濃 縮蒸發(fā)回收的1980 mL乙醇溶液用905 mL 95%乙醇(質量比)調制成75%乙醇溶液(質量 比)，用于葛根黃酮的提取，乙醇得到循環(huán)利用。 本發(fā)明所列舉的各原料都能實現(xiàn)本發(fā)明，以及各原料的上下限取值、區(qū)間值都能 實現(xiàn)本發(fā)明；在此不一一列舉實施例。本發(fā)明的工藝參數(shù)(如溫度、時間等)的上下限取值、 區(qū)間值都能實現(xiàn)本發(fā)明，在此不一一列舉實施例。
權利要求
1.一種葛根黃酮和葛根多糖的提取與分離的方法，其特征在于包括有以下步驟1)取一定重量的葛根，加入質量百分比為50-95%乙醇溶液提取葛根黃酮，其中葛根 (g)與乙醇溶液(mL)固液比為1 :5-1: 30，進行一次回流提取，過濾，得到乙醇提取液A 和一次濾渣，一次濾渣再加入質量百分比50-95%乙醇溶液，其中濾渣(g)與乙醇溶液(mL) 固液比為1 5-1 30，進行二次回流提取，過濾，得到乙醇提取液B和二次濾渣，將乙醇提 取液B與乙醇提取液A合并，得到葛根黃酮提取液；2)將步驟1)所得的二次濾渣加水提取葛根多糖，其中二次濾渣(g)與水(mL)固液比 為1 5-1 30，進行回流提取，過濾，得到水提取液，濾渣丟棄；3)將步驟2)所得的水提取液濃縮至體積倍數(shù)的1/10-1/50，得到水提取濃縮液和回 收的水，水提取濃縮液加入質量百分比75- 95%乙醇溶液，搖勻，靜置1-12 h，過濾，濾出的 沉淀，烘干，得到葛根多糖，所得濾液與步驟1)所得的葛根黃酮提取液合并，經(jīng)濃縮、干燥， 得到葛根黃酮和回收的乙醇溶液。
2.按權利要求1所述的葛根黃酮和葛根多糖的提取與分離的方法，其特征在于步驟1) 所述的一次回流提取的溫度為60-90°C，時間為1-6 h。
3.按權利要求1或2所述的葛根黃酮和葛根多糖的提取與分離的方法，其特征在于步 驟1)所述的二次回流提取的溫度為60-90°C，時間為1-6 h。
4.按權利要求3所述的葛根黃酮和葛根多糖的提取與分離的方法，其特征在于步驟2) 所述的回流提取的溫度為70-100°C，時間為1-6 h。
5.按權利要求1或2所述的葛根黃酮和葛根多糖的提取與分離的方法，其特征在于步 驟3)所述的回收的水經(jīng)補加所需的水返回步驟2)的二次濾渣加水提取葛根多糖步驟，水 得到循環(huán)利用。
6.按權利要求1或2所述的葛根黃酮和葛根多糖的提取與分離的方法，其特征在于步 驟3)所述的回收的乙醇溶液補加質量百分比95%乙醇調制成所需乙醇溶液濃度后返回步 驟1)的葛根加入乙醇溶液提取葛根黃酮步驟，乙醇得到循環(huán)利用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種葛根黃酮和葛根多糖的提取與分離的方法，包括有以下步驟1)取葛根加入乙醇溶液，進行一次回流提取，過濾，得到乙醇提取液A和一次濾渣，一次濾渣再加入乙醇溶液，進行二次回流提取，過濾，得到乙醇提取液B和二次濾渣，將乙醇提取液B與乙醇提取液A合并，得到葛根黃酮提取液；2)將所得的二次濾渣加水，進行回流提取，過濾，得到水提取液；3)水提取液濃縮得到水提取濃縮液，加入乙醇溶液，搖勻，靜置，過濾，濾出的沉淀，烘干，得到葛根多糖，所得濾液與所得的葛根黃酮提取液合并，經(jīng)濃縮、干燥，得到葛根黃酮和回收的乙醇溶液。本發(fā)明所用試劑無毒，操作方便，工藝簡單，所用的都是通用設備，乙醇能夠循環(huán)利用。
文檔編號C08B37/00GK102127043SQ201010605800
公開日2011年7月20日 申請日期2010年12月27日 優(yōu)先權日2010年12月27日
發(fā)明者周芳, 徐志高, 池汝安, 汪洋 申請人:武漢工程大學