一種用于水胺硫磷富集的分子印跡固相萃取柱的制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種以分子印跡技術為基礎的水胺硫磷固相萃取材料的制備方法，屬于檢測【技術領域】。本發明基于分子印跡與固相萃取聯用技術，利用功能單體、引發劑熱引發聚合，合成水胺硫磷特異的分子印跡聚合物，并以此作為特異富集元件，結合固相萃取技術，建立一種新型的水胺硫磷富集與檢測方法，該方法具有特異富集大量樣品中的痕量水胺硫磷，穩定性高，既可以作為樣品前處理與富集手段，也可以作為特異識別材料，在農藥殘留檢測、食品安全等行業中具有很大的應用潛力。
【專利說明】—種用于水胺硫磷富集的分子印跡固相萃取柱的制備

【技術領域】
[0001]本發明涉及一種基于分子印跡技術的固相萃取材料的制備，并以材料作為富集設備可以用于水胺硫磷的檢測。

【背景技術】
[0002]農獸藥殘留不僅造成環境污染，危害食品安全，威脅人民群眾身體健康，還導致我國食品和農產品出口遭遇國際貿易“綠色壁壘”，阻礙相關產業的健康發展。水胺硫磷是一種速效廣譜硫逐式一硫代磷酰胺類殺蟲、殺螨劑，對蛛形綱中的螨類、昆蟲綱中的鱗翅目、同翅目昆蟲具有很好的防治作用。主要用于防治果樹紅蜘蛛、介殼蟲和水稻、棉花害蟲。水胺硫磷能通過食道、皮膚和呼吸道引起中毒，為高毒農藥，禁止用于果、茶、煙、菜、中草藥植物上。但是由于殺蟲效果較好、價格低廉，仍被違法使用。近幾年我國因農藥殘留問題導致出口的農產品屢遭禁運，2006年初我國出口韓國的鰻魚由于孔雀石綠檢測超標，使我國漁業遭受巨大經濟損失，2010年由水胺硫磷導致的“毒豇豆”事件直接導致海南農產品種植業遭受重大損失。建立水胺硫磷殘留的檢測方法十分迫切并具有重要的現實意義。但是，水胺硫磷是高度農藥，低濃度下就有毒性，因此測定前必需對樣品進行預處理，分離富集靶標組分、去除干擾物、降低樣品基質效應，而分子印跡聚合物的特異性吸附性能可以為樣品中靶標物的分析提供方便。
[0003]分子印跡材料作為一種可以根據目標物分子定制的聚合物材料，可對目標物特異性吸附和分離，被稱為“人工抗體”，并且易于制備、成本低、環境耐受性好。分子印跡作為富集材料的研究目前在農藥殘留檢測方面的應用較多，其形式為特異性的固相萃取及膜分離技術。其中固相萃取技術(Solid Phase Extract1n Technology, SPET),是利用固相材料吸附液體樣品中的目標化合物，使其與樣品基質及干擾物分離，再通過洗脫液洗脫收集，達到分離和富集目標化合物的目的。例如=Immer等利用分子印跡聚合物固相萃取水和土壤中的三嗪類農藥，回收率達到80%，最低檢測量0.05-0.2μ g/L。Tamayo等利用沉淀聚合法合成聚合物對植物組織中非草隆進行了固相萃取富集，去除植物組織干擾物效果良好。Kochkodan等利用光引發法合成分子印跡聚合物，在將其涂在支持膜上，利用所制備的分子印跡膜可有效的分離和富集水中的敵草凈。Sergeyeva等以特丁通為模板分子，在親水性聚偏氟乙烯膜表面接枝合成高聚物，用于樣品中除草劑的膜分離。


【發明內容】

[0004]本發明的目的是提供一種水胺硫磷特異的分子印跡固相萃取材料的制備方法。
[0005]本發明的技術方案概述如下:
[0006]一種水胺硫磷分子印跡固相萃取材料的制備方法，具體步驟如下:
[0007]在50mL的圓底燒瓶中加入適量289.29mg水胺硫磷、0.25mL N-異丙基丙烯酰胺和25mL乙腈，于室溫下震蕩20min，置于冰箱中過夜，再加入1.0mL交聯劑EGDMA和1mg引發齊[JAIBN，向混合液中通氮氣1min以除去溶解的氧氣，密封后，至于80°C水浴熱聚合10h，取出冷卻至室溫，1000rpm離心,用10%醋酸甲醇溶劑洗漆聚合物微球至檢測不到水胺硫磷分子和功能單體，于烘箱中40°C真空干燥，制得分子印跡聚合物(MIP)。按同樣方法不加模板分子水胺硫磷制得非印跡聚合物(N-MIP)
[0008]所述引發劑優選為偶氮二異丁腈、過氧化二碳酸二(2-乙基己基)酯、2，2'-偶氮二(2-咪基丙烷)二鹽酸鹽和偶氮二異丁基脒鹽酸鹽。
[0009]所述功能單體優選為N-異丙基丙烯酰胺、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、2-乙烯基吡啶。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0010]圖1水胺硫磷分子印跡膜掃描電鏡圖。
[0011]圖2分子印跡聚合物對水胺硫磷的吸附響應，從圖中可以看出MIP的吸附量明顯高于NIP分子。

【具體實施方式】
[0012]實施例一分子印跡材料吸附性能評價
[0013]取水胺硫磷MIP和N-MIP各lOOmg，分別置于2mL管中，加入不同梯度濃度的水胺硫磷溶液3mL，置于恒溫震蕩器上保持25°C振蕩24h，12000rpm離心5min，取離心液0.5mL，氮氣吹干后，稀釋定容至適當的濃度，紫外分光光度計檢測濃度。從而計算吸附平衡時溶液中水胺硫磷濃度，根據結合前后溶液中水胺硫磷的濃度變化可計算其在單位質量分子印跡聚合物上的結合量。
[0014]實施方式二分子印跡固相萃取柱的制備
[0015]根據特異吸附性能和粒徑，選擇適當的印跡材料作為填料，制備分子印跡固相萃取柱。稱取500mg MIP和N-MIP干法裝入5mL藍心玻璃注射器中(7.7cmX0.8cm id)，上下端用壓緊的脫脂棉作篩板。同法用非印跡材料為填料制備非印跡柱作為對比。
【權利要求】
1.一種水胺硫磷特異的分子印跡固相萃取材料的制備方法，其特征由以下步驟組成: 在50mL的圓底燒瓶中加入適量289.29mg水胺硫磷、0.25mL N-異丙基丙烯酰胺和25mL乙腈，于室溫下震蕩20min，置于冰箱中過夜，再加入1.0mL交聯劑EGDMA和1mg引發劑AIBN,向混合液中通氮氣1min以除去溶解的氧氣，密封后，至于80°C水浴熱聚合10h，取出冷卻至室溫，1000rpm離心,用10 %醋酸甲醇溶劑洗漆聚合物微球至檢測不到水胺硫磷分子和功能單體，于烘箱中40°C真空干燥，制得分子印跡聚合物(MIP)。按同樣方法不加模板分子水胺硫磷制得非印跡聚合物(N-MIP)。
2.所述引發劑優選為偶氮二異丁腈、過氧化二碳酸二(2-乙基己基)酯、2，2'-偶氮二(2-咪基丙烷)二鹽酸鹽和偶氮二異丁基脒鹽酸鹽。
3.所述功能單體優選為N-異丙基丙烯酰胺、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、2-乙烯基吡啶。
【文檔編號】C08J9/26GK104231170SQ201310244313
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2013年6月20日 優先權日:2013年6月20日
【發明者】劉永信 申請人:天津默斯生物科技有限公司