哺乳動物細(xì)胞中最重要的細(xì)胞傳遞系統(tǒng)之一是環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)。其與由內(nèi)皮釋放并傳輸激素和機(jī)械信號的一氧化氮(NO)一起形成NO/cGMP體系。鳥苷酸環(huán)化酶催化由鳥苷三磷酸(GTP)生成cGMP的生物合成。迄今已知的該類的代表可以按照結(jié)構(gòu)特征和按照配體的類型分為兩組：可以由鈉尿肽激發(fā)的粒狀鳥苷酸環(huán)化酶，以及可以由NO激發(fā)的可溶性鳥苷酸環(huán)化酶。可溶性鳥苷酸環(huán)化酶由兩個亞單元組成并且最大可能每個異二聚體含有一個血紅素，其是調(diào)節(jié)中心的一部分。后者是活化機(jī)理的中心環(huán)節(jié)。NO能夠結(jié)合至血紅素的鐵原子并因此顯著增加酶的活性。相反，不含血紅素的制劑不能由NO激發(fā)。一氧化碳(CO)也能夠結(jié)合血紅素的中心鐵原子，其中由CO帶來的激發(fā)作用明顯地小于NO。
通過形成cGMP以及由此產(chǎn)生磷酸二酯酶、離子通道和蛋白質(zhì)激酶的調(diào)節(jié)，鳥苷酸環(huán)化酶在多種生理學(xué)過程中起到關(guān)鍵作用，特別是在平滑肌細(xì)胞的舒張和增生、血小板凝集和-粘連、神經(jīng)元的信號傳送中，以及在由上述過程的紊亂所引起的病癥中。在病理生理學(xué)條件下會抑制NO/cGMP系統(tǒng)，這可導(dǎo)致例如高血壓、血小板活化、增加的細(xì)胞增殖、內(nèi)皮機(jī)能障礙、動脈粥樣硬化、心絞痛、心力衰竭、心肌梗塞、血栓形成、中風(fēng)和性功能障礙。
在生物體中影響cGMP信號通道的、目的在于不依賴于NO治療此類疾病的可能性因?yàn)槠淇深A(yù)期的高效率和小的副作用是一種大有希望的方法。
迄今僅使用其作用基于NO的化合物如有機(jī)硝酸鹽用于治療性激發(fā)可溶性鳥苷酸環(huán)化酶。NO由生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)生并通過攻擊血紅素的鐵-中心原子而活化可溶性鳥苷酸環(huán)化酶。除副作用之外，耐受性的發(fā)展也是該治療方法的關(guān)鍵缺點(diǎn)之一。
近年來已經(jīng)描述了幾種直接刺激可溶性鳥苷酸環(huán)化酶，即沒有預(yù)先釋放NO的物質(zhì)，例如，3-(5'-羥基甲基-2'-呋喃基)-1-芐基吲唑 [YC-1; Wu等人，Blood 84 (1994)，4226; Mülsch等人，Brit. J. Pharmacol. 120 (1997)，681]、脂肪酸[Goldberg等人，J. Biol. Chem. 252 (1977)，1279]、二苯基碘鎓六氟磷酸鹽 [Pettibone等人，Eur. J. Pharmacol. 116 (1985)，307]、異甘草素[Yu等人，Brit. J. Pharmacol. 114 (1995)，1587]以及多種取代的吡唑衍生物(WO 98/16223)。
尤其在EP 0 266 890-A1、WO 89/03833-A1、JP 01258674-A [參見Chem. Abstr.112:178986]、WO 96/34866-A1、EP 1 277 754-A1、WO 2006/015737-A1、WO 2008/008539-A2、WO 2008/082490-A2、WO 2008/134553-A1、WO 2010/030538-A2、WO 2011/113606-A1和WO 2012/165399-A1中記載了多種可用于治療疾病的咪唑并[1,2-a]吡啶衍生物。
本發(fā)明的目的是提供新穎的物質(zhì)，其作為可溶性鳥苷酸環(huán)化酶的刺激劑起作用，并且因此適合用于治療和/或用于預(yù)防疾病。
本發(fā)明的主題是通式(I)的化合物及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物，
其中
A代表CH2、CD2或CH(CH3)，
R1代表苯基、萘基或5-10元雜芳基，
其中苯基、萘基或5-10元雜芳基可被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：鹵素、氰基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C6)-烷基、(C3-C7)-環(huán)烷基、(C1-C4)-烷基磺酰基、(C3-C6)-環(huán)烷基磺酰基、(C1-C4)-烷基磺酰基氨基、(C3-C6)-環(huán)烷基磺酰基氨基、羥基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、(C1-C4)-烷氧基、(C1-C4)-烷基羰基氨基、氨基、單-(C1-C4)-烷基氨基、二-(C1-C4)-烷基氨基、單-(C1-C4)-烷基氨基羰基、二-(C1-C4)-烷基氨基羰基、苯基、芐基、4-7元雜環(huán)基和5元雜芳基，
其中 (C1-C6)-烷基、單-(C1-C4)-烷基氨基和二-(C1-C4)-烷基氨基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、(C3-C7)-環(huán)烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基、羥基羰基、(C1-C4)-烷氧基羰基、(C1-C4)-烷基羰基氨基、氨基羰基、單-(C1-C4)-烷基氨基羰基、二-(C1-C4)-烷基氨基羰基、(C1-C4)-烷基磺酰基、(C1-C4)-烷基磺酰基氨基、氨基羰基氧基、苯基、4-7元雜環(huán)基、5元雜芳基和–NR6R7基團(tuán)，
其中
R6代表氫、(C1-C4)-烷基或(C3-C7)-環(huán)烷基，
其中 (C1-C4)-烷基本身可被1或2個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、(C3-C7)-環(huán)烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、氨基、單-(C1-C4)-烷基氨基和二-(C1-C4)-烷基氨基，
R7代表氫或(C1-C4)-烷基，
或者
其中 R6和R7與它們連接的氮原子一起形成4-7元雜環(huán)，
其中所述4-7元雜環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、(C1-C4)-烷基、(C3-C7)-環(huán)烷基、羥基、羥基甲基、氧代、(C1-C4)-烷氧基、氨基、單-(C1-C4)-烷基氨基和二-(C1-C4)-烷基氨基，
和
其中苯基、芐基、4-7元雜環(huán)基和5元雜芳基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：鹵素、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、羥基、二氟甲氧基、三氟甲氧基和(C1-C4)-烷氧基，
或者
其中苯基上兩個相鄰的基團(tuán)與它們連接的碳原子一起形成5或6元雜環(huán)，
其中所述5或6元雜環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、羥基、羥基甲基、氧代和(C1-C4)-烷氧基，
R2代表氫，
R3代表氫、(C1-C4)-烷基、環(huán)丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，
R4代表(C4-C6)-烷基、(C3-C7)-環(huán)烷基或苯基，
其中(C4-C6)-烷基可被1或2個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟和三氟甲基，
其中(C3-C7)-環(huán)烷基可被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基和(C1-C4)-烷基，
和
其中苯基可被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：鹵素、氰基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基，
R5代表氫、鹵素、氰基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、乙炔基、(C3-C7)-環(huán)烷基、(C1-C4)-烷氧基或4-7元雜環(huán)基。
本發(fā)明的主題是通式(I)的化合物及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物，
其中
A代表CH2、CD2或CH(CH3)，
R1代表苯基、萘基或5-10元雜芳基，
其中苯基、萘基或5-10元雜芳基可被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：鹵素、氰基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C6)-烷基、(C3-C7)-環(huán)烷基、羥基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、(C1-C4)-烷氧基、(C1-C4)-烷基羰基氨基、氨基、單-(C1-C4)-烷基氨基、二-(C1-C4)-烷基氨基、單-(C1-C4)-烷基氨基羰基、二-(C1-C4)-烷基氨基羰基、苯基、芐基、4-7元雜環(huán)基和5元雜芳基，
其中 (C1-C6)-烷基，單-(C1-C4)-烷基氨基和二-(C1-C4)-烷基氨基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、(C3-C7)-環(huán)烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基、羥基羰基、(C1-C4)-烷氧基羰基、(C1-C4)-烷基羰基氨基、氨基羰基、單-(C1-C4)-烷基氨基羰基、二-(C1-C4)-烷基氨基羰基、(C1-C4)-烷基磺酰基、(C1-C4)-烷基磺酰基氨基、氨基羰基氧基、苯基、4-7元雜環(huán)基、5元雜芳基和–NR6R7基團(tuán)，
其中
R6代表氫、(C1-C4)-烷基或(C3-C7)-環(huán)烷基，
其中(C1-C4)-烷基本身可被1或2個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、(C3-C7)-環(huán)烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、氨基、單-(C1-C4)-烷基氨基和二-(C1-C4)-烷基氨基，
R7代表氫或(C1-C4)-烷基，
或者
其中 R6和R7與它們連接的氮原子一起形成4-7元雜環(huán)，
其中所述4-7元雜環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、(C1-C4)-烷基、(C3-C7)-環(huán)烷基、羥基、羥基甲基、氧代、(C1-C4)-烷氧基、氨基、單-(C1-C4)-烷基氨基和二-(C1-C4)-烷基氨基，
和
其中苯基、芐基、4-7元雜環(huán)基和5元雜芳基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：鹵素、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、羥基、二氟甲氧基、三氟甲氧基和(C1-C4)-烷氧基，
或者
其中苯基上兩個相鄰的基團(tuán)與它們連接的碳原子一起形成5或6元雜環(huán)，
其中所述5或6元雜環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、羥基、羥基甲基、氧代和(C1-C4)-烷氧基，
R2代表氫，
R3代表氫、(C1-C4)-烷基、環(huán)丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，
R4代表(C4-C6)-烷基、(C3-C7)-環(huán)烷基或苯基，
其中(C4-C6)-烷基可被1或2個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟和三氟甲基，
其中(C3-C7)-環(huán)烷基可被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基和(C1-C4)-烷基，
和
其中苯基可被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：鹵素、氰基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基，
R5代表氫、鹵素、氰基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、乙炔基、(C3-C7)-環(huán)烷基、(C1-C4)-烷氧基或4-7元雜環(huán)基。
根據(jù)本發(fā)明的化合物是式(I)化合物和它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，在下文中提到的式的被式(I)包括的化合物和它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，以及被式(I)包括的在下文中作為實(shí)施方式實(shí)施例提到的化合物和它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，只要被式(I)包括的在下文中提到的化合物還不是鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物。
作為鹽，在本發(fā)明范圍中優(yōu)選的是根據(jù)本發(fā)明的化合物的生理學(xué)上可接受的鹽。也包括盡管自身不適合藥學(xué)應(yīng)用，但是仍可以例如用于分離或純化根據(jù)本發(fā)明的化合物的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的化合物的生理學(xué)上可接受的鹽包括無機(jī)酸、羧酸和磺酸的酸加成鹽，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、蟻酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、富馬酸、馬來酸和苯甲酸的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的化合物的生理學(xué)上可接受的鹽也包括常規(guī)堿的鹽，例如且優(yōu)選地，堿金屬鹽（例如鈉鹽和鉀鹽）、堿土金屬鹽（例如鈣鹽和鎂鹽）和銨鹽，該銨鹽衍生自氨或具有1-16個C-原子的有機(jī)胺，例如且優(yōu)選地，乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二異丙基胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二環(huán)己胺、二甲氨基乙醇、普魯卡因、二芐胺、N-甲基嗎啉、精氨酸、賴氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，作為溶劑合物是指根據(jù)本發(fā)明的化合物的這樣的形式：其以固體或液體狀態(tài)通過與溶劑分子配位形成配合物。水合物是溶劑合物的一種具體形式，其中所述配位與水進(jìn)行。在本發(fā)明范圍內(nèi)優(yōu)選水合物作為溶劑化物。
取決于它們的結(jié)構(gòu)，根據(jù)本發(fā)明的化合物可以以不同的立體異構(gòu)形式存在，即以構(gòu)型異構(gòu)體的形式存在，或者也可能作為構(gòu)象異構(gòu)體（對映異構(gòu)體和/或非對映異構(gòu)體，包括在阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的情況下的那些）存在。本發(fā)明因此包括對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體和它們各自的混合物。以已知的方式，可以從這樣的對映異構(gòu)體和/或非對映異構(gòu)體的混合物中分離出立體異構(gòu)一致的組分；為此優(yōu)選使用色譜法，尤其是在非手性或手性相上的HPLC色譜法。
如果根據(jù)本發(fā)明的化合物能夠以互變異構(gòu)形式存在，則本發(fā)明包括所有的互變異構(gòu)形式。
本發(fā)明也包括根據(jù)本發(fā)明的化合物的所有合適的同位素變體。根據(jù)本發(fā)明的化合物的同位素變體在這里理解為是指這樣的化合物：其中在根據(jù)本發(fā)明的化合物內(nèi)至少一個原子已經(jīng)被替換為相同原子序數(shù)的另一原子，但是所述另一原子的原子質(zhì)量不同于在自然界中通常存在或優(yōu)勢存在的原子質(zhì)量。可以摻入根據(jù)本發(fā)明的化合物中的同位素的實(shí)例是：氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，諸如2H（氘）、3H（氚）、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129I和131I。根據(jù)本發(fā)明的化合物的某些同位素變體（如特別是其中已經(jīng)摻入一種或多種放射性同位素的那些）可能是有用的，例如，用于檢查在體內(nèi)的作用機(jī)理或活性物質(zhì)在體內(nèi)的分布；由于比較而言容易的可制備性和可檢測性，用3H-或14C-同位素標(biāo)記的特殊化合物適用于該目的。另外，由于化合物的更大代謝穩(wěn)定性，同位素（例如氘）的摻入可以導(dǎo)致一定的治療益處，例如體內(nèi)半衰期的延長或必需的活性劑量的降低；因此，根據(jù)本發(fā)明的化合物的這種改性也可以任選構(gòu)成本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式。通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的通用方法，例如根據(jù)在下面描述的方法和在工作實(shí)施例中描述的方法，通過使用各自的反應(yīng)試劑和/或起始化合物的相應(yīng)的同位素改性，可以制備根據(jù)本發(fā)明的化合物的同位素變體。
此外，本發(fā)明還包括根據(jù)本發(fā)明的化合物的前藥。術(shù)語“前藥”在這里表示這樣的化合物：其本身可以是生物學(xué)上有活性的或無活性的，但是在它們在身體內(nèi)的停留時間期間，其被轉(zhuǎn)化成根據(jù)本發(fā)明的化合物（經(jīng)例如代謝或水解途徑）。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，除非另外指出，所述取代基具有下述含義：
烷基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基。示例性并優(yōu)選地可提及：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、1-甲基丙基、叔丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、異戊基、正己基、1-甲基戊基、1-乙基丁基、2-甲基戊基、2-乙基丁基、3-甲基戊基、4-甲基戊基。
環(huán)烷基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有3-7個環(huán)上的碳原子的單環(huán)飽和烷基。示例性并優(yōu)選地可提及：環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。
烷基羰基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有1-4個碳原子并在1位連接有羰基的直鏈或支鏈烷基。示例性并優(yōu)選地可提及：甲基羰基、乙基羰基、正丙基羰基、異丙基羰基、正丁基羰基、異丁基羰基和叔丁基羰基。
烷基羰基氨基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有直鏈或支鏈烷基羰基取代基的氨基，所述直鏈或支鏈烷基羰基取代基在烷基鏈中具有1-4個碳原子并且經(jīng)由羰基與氮原子相連。示例性并優(yōu)選地可提及：甲基羰基氨基、乙基羰基氨基、丙基羰基氨基、正丁基羰基氨基、異丁基羰基氨基和叔丁基羰基氨基。
烷氧基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基。示例性并優(yōu)選地可提及：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、1-甲基丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。
單烷基氨基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有直鏈或支鏈烷基取代基的氨基，所述直鏈或支鏈烷基取代基具有1-4個碳原子。示例性并優(yōu)選地可提及：甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、異丙基氨基和叔丁基氨基。
二烷基氨基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有兩個相同或不同的直鏈或支鏈烷基取代基的氨基，所述直鏈或支鏈烷基取代基各自具有1-4個碳原子。示例性并優(yōu)選地可提及：N,N-二甲基氨基、N,N-二乙基氨基、N-乙基-N-甲基氨基、N-甲基-N-正丙基氨基、N-異丙基-N-正丙基氨基和N-叔丁基-N-甲基氨基。
單烷基氨基羰基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表經(jīng)由一個羰基連接并具有帶1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基取代基的氨基。示例性并優(yōu)選地可提及：甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、正丙基氨基羰基、異丙基氨基羰基、正丁基氨基羰基、叔丁基氨基羰基、正戊基氨基羰基和正己基氨基羰基。
二烷基氨基羰基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表經(jīng)由一個羰基連接并具有2個相同或不同的分別帶1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基取代基的氨基。示例性并優(yōu)選地可提及：N,N-二甲基氨基羰基、N,N-二乙基氨基羰基、N-乙基-N-甲基氨基羰基、N-甲基-N-正丙基氨基羰基、N-正丁基-N-甲基氨基羰基、N-叔丁基-N-甲基氨基羰基、N-正戊基-N-甲基氨基羰基和N-正己基-N-甲基氨基羰基。
烷基磺酰基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表經(jīng)由磺酰基連接的具有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基。示例性并優(yōu)選地可提及：甲基磺酰基、乙基磺酰基、正丙基磺酰基、異丙基磺酰基、正丁基磺酰基和叔丁基磺酰基。
(C1-C4)-烷基磺酰基氨基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有直鏈或支鏈烷基磺酰基的氨基，其在烷基鏈中具有1-4個碳原子并經(jīng)由磺酰基與N原子相連。示例性并優(yōu)選地可提及：甲基磺酰基氨基、乙基磺酰基氨基、丙基磺酰基氨基、正丁基磺酰基氨基、異丁基磺酰基氨基和叔丁基磺酰基氨基。
雜環(huán)基或雜環(huán)在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有總共4-7個環(huán)原子的單環(huán)飽和或部分不飽和雜環(huán)，其包含1-3個選自N、O和/或S的環(huán)上的雜原子并經(jīng)由一個環(huán)上的碳原子或任選一個環(huán)上的氮原子相連。示例性可提及：氮雜環(huán)丁基、氧雜環(huán)丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、四氫呋喃基、硫雜環(huán)戊基、哌啶基、哌嗪基、四氫吡喃基、嗎啉基、硫代嗎啉基、氮雜環(huán)庚基、二氮雜環(huán)庚基、二氫吡咯基、四氫吡啶基、二氫噁嗪基或二氫吡嗪基。優(yōu)選的是具有1或2個環(huán)上的雜原子的飽和的5或6元雜環(huán)，所述環(huán)上的雜原子選自N、O和/或S。示例性可提及：氮雜環(huán)丁基、氧雜環(huán)丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、四氫呋喃基、哌啶基、哌嗪基、四氫吡喃基、嗎啉基和硫代嗎啉基。
雜芳基在本發(fā)明范圍內(nèi)代表具有總共5-10個環(huán)原子的單環(huán)或任選雙環(huán)芳族雜環(huán)（雜芳族化合物），其包含最多3個相同或不同的選自N、O和/或S的環(huán)上的雜原子并經(jīng)由一個環(huán)上的碳原子或任選經(jīng)由一個環(huán)上的氮原子連接。示例性可提及：呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、異噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、三嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、異喹啉基、萘啶基、喹唑啉基、喹喔啉基、酞嗪基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吡唑并[1,5-a]吡啶、吡唑并[3,4-b]吡啶基。示例性并優(yōu)選地可提及：吡唑基、咪唑基、異噁唑基、吡啶基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、異喹啉基、萘啶基、喹唑啉基、喹喔啉基、酞嗪基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吡唑并[1,5-a]吡啶、吡唑并[3,4-b]吡啶基。
鹵素在本發(fā)明范圍內(nèi)包括氟、氯、溴和碘。優(yōu)選的是氯或氟。
氧代基團(tuán)在本發(fā)明范圍內(nèi)代表經(jīng)由雙鍵與碳原子或硫原子連接的氧原子。
如果本發(fā)明的化合物中的基團(tuán)被取代，除非另行規(guī)定，該基團(tuán)可以被單-或多取代。在本發(fā)明范圍內(nèi)，對于所有出現(xiàn)多次的基團(tuán)，其含義彼此獨(dú)立。優(yōu)選被一個、兩個或三個相同或不同的取代基取代。
在本發(fā)明范圍內(nèi)優(yōu)選的是式(I)的化合物及其鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中
A代表CH2，
R1代表苯基、萘基、吡唑基、咪唑基、異噁唑基、1,3,4-噻二唑-2-基、1,3-噻唑-2-基、1,3-噁唑-2-基、吡啶基、嘧啶-2-基、吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吲唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶、喹啉基、異喹啉基或噌啉基，
其中苯基、萘基、吡唑基、異噁唑基、1,3,4-噻二唑-2-基、1,3-噻唑-2-基、1,3-噁唑-2-基、吡啶基、嘧啶-2-基、吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吲唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶、喹啉基、異喹啉基和噌啉基可被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、氯、三氟甲基、(C1-C6)-烷基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、(C1-C4)-烷基磺酰基、(C1-C4)-烷基磺酰基氨基、三氟甲氧基、(C1-C4)-烷氧基、甲基羰基氨基、乙基羰基氨基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、二甲基氨基羰基、二乙基氨基羰基、苯基、芐基、氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、哌啶基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、哌嗪基、嗎啉基和四唑基，
其中 (C1-C6)-烷基、乙基氨基和二乙基氨基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、羥基、甲氧基、乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、甲基羰基氨基、乙基羰基氨基、甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、二甲基氨基羰基、二乙基氨基羰基、甲基磺酰基、乙基磺酰基、氨基羰基氧基、氮雜環(huán)丁-3-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、哌嗪-2-基、哌嗪-3-基、嗎啉-2-基、嗎啉-3-基和四唑基和–NR6R7基團(tuán)，
其中
R6代表氫、(C1-C4)-烷基、環(huán)丙基或環(huán)丁基，
其中 (C1-C4)-烷基本身可被1或2個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、羥基、甲氧基和乙氧基，
R7代表氫或(C1-C4)-烷基，
或者
其中 R6和R7與它們連接的氮原子一起形成氮雜環(huán)丁基環(huán)、吡咯烷基環(huán)、哌啶基環(huán)、哌嗪基環(huán)或嗎啉基環(huán)，
其中所述氮雜環(huán)丁基環(huán)、吡咯烷基環(huán)、哌啶基環(huán)、哌嗪基環(huán)和嗎啉基環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、甲基、乙基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、羥基、羥基甲基、氧代、甲氧基和乙氧基，
或者
苯環(huán)上兩個相鄰的基團(tuán)與它們連接的碳原子一起形成二氫吡咯基環(huán)、四氫吡啶基環(huán)、二氫噁嗪基環(huán)或二氫吡嗪基環(huán)，
其中所述二氫吡咯基環(huán)、四氫吡啶基環(huán)、二氫噁嗪基環(huán)和二氫吡嗪基環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、甲基、乙基、羥基、羥基甲基和氧代，
R2代表氫，
R3代表甲基，
R4代表苯基，
其中，苯基被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟或氯，
R5代表氫、氟、氯或甲基。
在本發(fā)明范圍內(nèi)優(yōu)選的是式(I)的化合物及其鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中
A代表CH2，
R1代表苯基、萘基、吡唑基、咪唑基、異噁唑基、1,3,4-噻二唑-2-基、1,3-噻唑-2-基、1,3-噁唑-2-基、吡啶基、嘧啶-2-基、吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吲唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶、喹啉基、異喹啉基或噌啉基，
其中苯基、萘基、吡唑基、異噁唑基、1,3,4-噻二唑-2-基、1,3-噻唑-2-基、1,3-噁唑-2-基、吡啶基、嘧啶-2-基、吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吲唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶、喹啉基、異喹啉基和噌啉基可被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、氯、三氟甲基、(C1-C6)-烷基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、三氟甲氧基、(C1-C4)-烷氧基、甲基羰基氨基、乙基羰基氨基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、二甲基氨基羰基、二乙基氨基羰基、苯基、芐基、氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、哌啶基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、哌嗪基、嗎啉基和四唑基，
其中 (C1-C6)-烷基、乙基氨基和二乙基氨基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、羥基、甲氧基、乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、甲基羰基氨基、乙基羰基氨基、甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、二甲基氨基羰基、二乙基氨基羰基、甲基磺酰基、乙基磺酰基、氨基羰基氧基、氮雜環(huán)丁-3-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、哌嗪-2-基、哌嗪-3-基、嗎啉-2-基、嗎啉-3-基和四唑基和–NR6R7 基團(tuán)，
其中
R6代表氫、(C1-C4)-烷基、環(huán)丙基或環(huán)丁基，
其中 (C1-C4)-烷基本身可被1或2個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、羥基、甲氧基和乙氧基，
R7代表氫或(C1-C4)-烷基，
或者
其中 R6和R7與它們連接的氮原子一起形成氮雜環(huán)丁基環(huán)、吡咯烷基環(huán)、哌啶基環(huán)、哌嗪基環(huán)或嗎啉基環(huán)，
其中所述氮雜環(huán)丁基環(huán)、吡咯烷基環(huán)、哌啶基環(huán)、哌嗪基環(huán)和嗎啉基環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、甲基、乙基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、羥基、羥基甲基、氧代、甲氧基和乙氧基，
或者
苯環(huán)上兩個相鄰的基團(tuán)與它們連接的碳原子一起形成二氫吡咯基環(huán)、四氫吡啶基環(huán)、二氫噁嗪基環(huán)或二氫吡嗪基環(huán)，
其中所述二氫吡咯基環(huán)、四氫吡啶基環(huán)、二氫噁嗪基環(huán)和二氫吡嗪基環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、甲基、乙基、羥基、羥基甲基和氧代，
R2代表氫，
R3代表甲基，
R4代表苯基，
其中，苯基被1-4個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟或氯，
R5代表氫、氟、氯或甲基。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，特別優(yōu)選的是式(I)的化合物及其鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中
A代表CH2，
R1代表吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吲唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶、喹啉基或異喹啉基，
其中吡咯并[2,3-b]吡啶、吲哚基、吲唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶、喹啉基和異喹啉基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、氯、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、甲氧基和乙氧基，
其中 (C1-C4)-烷基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、羥基、甲氧基、乙氧基和甲基磺酰基，
R2代表氫，
R3代表甲基，
R4代表苯基，
其中苯基被1-3個彼此獨(dú)立地選自氟或氯的取代基取代，
R5代表氫、氟、氯或甲基。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，特別優(yōu)選的是式(I)的化合物及其鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中
A代表CH2，
R1代表吡唑-4-基，
其中吡唑-4-基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：三氟甲基、(C1-C4)-烷基和環(huán)丙基，
其中 (C1-C4)-烷基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、羥基、甲氧基、乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、甲基磺酰基和–NR6R7基團(tuán)，
其中
R6代表氫或(C1-C4)-烷基，
其中 (C1-C4)-烷基本身可被1或2個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、羥基、甲氧基和乙氧基，
R7代表氫或(C1-C4)-烷基，
或者
其中 R6和R7與它們連接的氮原子一起形成氮雜環(huán)丁基環(huán)、吡咯烷基環(huán)、哌啶基環(huán)、哌嗪基環(huán)或嗎啉基環(huán)，
其中所述氮雜環(huán)丁基環(huán)、吡咯烷基環(huán)、哌啶基環(huán)、哌嗪基環(huán)和嗎啉基環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、甲基、乙基、羥基、氧代、甲氧基和乙氧基，
R2代表氫，
R3代表甲基，
R4代表苯基，
其中苯基被1-3個彼此獨(dú)立地選自氟或氯的取代基取代，
R5代表氫、氟、氯或甲基。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中
A是CH2。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中
R1代表吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吲唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶、喹啉基或異喹啉基，
其中吡咯并[2,3-b]吡啶、吲哚基、吲唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶、喹啉基和異喹啉基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、氯、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、甲氧基和乙氧基，
其中 (C1-C4)-烷基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、羥基、甲氧基、乙氧基和甲基磺酰基。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中
R1代表吡唑-4-基，
其中吡唑-4-基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：三氟甲基、(C1-C4)-烷基和環(huán)丙基，
其中 (C1-C4)-烷基可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、羥基、甲氧基、乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、甲基磺酰基和–NR6R7基團(tuán)，
其中
R6代表氫或(C1-C4)-烷基，
其中 (C1-C4)-烷基本身可被1或2個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、三氟甲基、環(huán)丙基、羥基、甲氧基和乙氧基，
R7代表氫或(C1-C4)-烷基，
或者
其中 R6和R7與它們連接的氮原子一起形成氮雜環(huán)丁基環(huán)、吡咯烷基環(huán)、哌啶基環(huán)、哌嗪基環(huán)或嗎啉基環(huán)，
其中所述氮雜環(huán)丁基環(huán)、吡咯烷基環(huán)、哌啶基環(huán)、哌嗪基環(huán)和嗎啉基環(huán)本身可被1-3個彼此獨(dú)立地選自下述的取代基取代：氟、甲基、乙基、羥基、氧代、甲氧基和乙氧基。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物，其中
R2代表氫，
及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物，其中
R3代表甲基，
及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物，其中
R4代表苯基，
其中苯基被1-3個彼此獨(dú)立地選自氟或氯的取代基取代，
及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物，其中
R4代表苯基，
其中苯基被1-3個氟取代基取代，
及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物，其中
R5代表氫、氯或甲基，
及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物，其中
R5代表氫，
及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物，其中
R5代表氯，
及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選的是式(I)的化合物，其中
R5代表甲基，
及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、所述N-氧化物的鹽和所述N-氧化物和鹽的溶劑合物。
獨(dú)立于所述殘基的各自給出的組合，在殘基各自的組合或優(yōu)選組合中給出的具體殘基定義也任意被其它組合的殘基定義替換。
特別優(yōu)選的是上述優(yōu)選范圍中的兩個或更多個的組合。
本發(fā)明的另一主題是制備根據(jù)本發(fā)明的式(I)的化合物的方法，其特征在于，
[A]使式(II)的化合物
其中 A、R3、R4和R5各自具有上文中給出的含義且
T1代表(C1-C4)-烷基或芐基，
在惰性溶劑中在合適的堿或酸存在下轉(zhuǎn)化成式(III)的羧酸
其中 A、R3、R4和R5各自具有上文中給出的含義，
隨后其在惰性溶劑中，在酰胺偶聯(lián)條件下，與式(IV)的胺反應(yīng)
其中 R1和R2各自具有上文中給出的含義，
或者
[B]使式(III-B)的化合物
其中 R3和R5各自具有上文中給出的含義，
在惰性溶劑中，在酰胺偶聯(lián)條件下，與式(IV)的胺反應(yīng)生成式(I-B)的化合物
其中 R1、R2、R3和R5各自具有上文中給出的含義，
隨后根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法由其裂解芐基并使產(chǎn)生的式(V)的化合物
其中 R1、R2、R3和R5各自具有上文中給出的含義，
在惰性溶劑中，在合適的堿存在下，與式(VI)的化合物反應(yīng)
其中 A和R4 具有上文中給出的含義，
X1代表合適的離去基團(tuán)，特別是氯、溴、碘、甲磺酸根或甲苯磺酸根，
任選地，將產(chǎn)生的式(I)化合物任選用合適的(i)溶劑和/或(ii)酸或堿轉(zhuǎn)化成它們的溶劑合物、鹽和/或所述鹽的溶劑合物。
式(I-B)的化合物形成根據(jù)本發(fā)明的式(I)化合物的子群（Teilmenge）。
所描述的制備方法可通過下述合成方案（方案1和2）來示例性說明：
方案1:
[a): LiOH，THF/甲醇/ H2O，RT; b): HATU，N,N-二異丙基乙胺，DMF，RT]。
方案2:
[a): TBTU，N-甲基嗎啉，DMF; b): H2，Pd/C，乙酸乙酯; c): Cs2CO3，DMF ]。
式(IV)和(VI) 的化合物是商購可得的、由文獻(xiàn)已知的或者可以以類似于文獻(xiàn)已知的方法制備。
用于方法步驟(III) + (IV) → (I)和(III-B) + (IV) → (I-B)的惰性溶劑是，例如，醚如乙醚、二噁烷、四氫呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚，烴類如苯、甲苯、二甲苯、己烷、環(huán)己烷或石油餾分，鹵代烴如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯或氯苯，或者其它的溶劑，如丙酮、乙酸乙酯、乙腈、吡啶、二甲亞砜、N,N-二甲基甲酰胺、N,N'-二甲基丙烯基脲(DMPU)或者N-甲基吡咯烷酮(NMP)。也可以使用提到的溶劑的混合物。優(yōu)選的是二氯甲烷、四氫呋喃、二甲基甲酰胺或者這些溶劑的混合物。
適合于方法步驟(III) + (IV) → (I)和(III-B) + (IV) → (I-B)中的酰胺形成的縮合劑是例如碳二亞胺類諸如N,N'-二乙基-、N,N'-二丙基-、N,N'-二異丙基-、N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)或N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)，光氣衍生物諸如N,N'-羰二咪唑(CDI)、1,2-噁唑鎓化合物諸如2-乙基-5-苯基-1,2-噁唑鎓-3-硫酸鹽或2-叔丁基-5-甲基異噁唑鎓高氯酸鹽，酰氨基化合物諸如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氫喹啉，或氯甲酸異丁酯、丙烷膦酸酐(T3P)、1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺、氰基膦酸二乙酯、雙-(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯、苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽、苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷子基（pyrrolidino）)鏻六氟磷酸鹽(PyBOP)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TBTU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HBTU)、2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TPTU)、O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)或O-(1H-6-氯苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TCTU)，任選地與其它助劑組合，所述助劑如1-羥基苯并三唑(HOBt) 或N-羥基琥珀酰亞胺 (HOSu)，以及作為堿，合適的是堿金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉或碳酸鉀或碳酸氫鈉或碳酸氫鉀，或有機(jī)堿如三烷基胺，例如三乙胺、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶或N,N-二異丙基乙胺。優(yōu)選使用與N-甲基嗎啉組合的TBTU、與N,N-二異丙基乙胺或1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺組合的HATU。
縮合(III) + (IV) → (I)和(III-B) + (IV) → (I-B)通常在-20℃至 +100℃的溫度范圍內(nèi)，優(yōu)選在0℃至 +60℃下進(jìn)行。該反應(yīng)可以在常壓下、在升壓下或者在減壓下(例如在0.5到5巴)進(jìn)行。通常在常壓下進(jìn)行。
或者，也可以將式(III)的羧酸首先轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的羧酰氯，然后將其直接或在單獨(dú)的反應(yīng)中與式(IV)的胺反應(yīng)生成根據(jù)本發(fā)明的化合物。由羧酸形成羧酰氯按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，例如通過在合適的堿存在下，例如在吡啶存在下以及任選添加二甲基甲酰胺，任選在合適的惰性溶劑中，用亞硫酰氯、磺酰氯或草酰氯處理來進(jìn)行。
式(II)化合物的酯基團(tuán)T1 的水解按照常用的方法通過在惰性溶劑中用酸或堿處理該酯來進(jìn)行，其中在后者的情況中，通過用酸處理將首先產(chǎn)生的鹽轉(zhuǎn)化成游離的羧酸。在叔丁基酯的情況中，優(yōu)選用酸進(jìn)行酯裂解。在芐基酯的情況中，酯裂解優(yōu)選用活性炭載鈀或者雷尼鎳氫解進(jìn)行。
適合于該反應(yīng)的惰性溶劑是水或通常用于酯裂解的有機(jī)溶劑。這優(yōu)選包括醇例如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或叔丁醇，或者醚例如乙醚、四氫呋喃、二噁烷或乙二醇二甲醚，或其它溶劑例如丙酮、二氯甲烷、二甲基甲酰胺或二甲亞砜。同樣可以使用所提及的溶劑的混合物。在堿性酯水解的情況中，優(yōu)選使用水與二噁烷、四氫呋喃、甲醇和/或乙醇的混合物。
適合用于酯水解的堿是常用的無機(jī)堿。這些優(yōu)選包括堿金屬-或者堿土金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鋰、氫氧化鉀或者氫氧化鋇，或者堿金屬-或堿土金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉、碳酸鉀或者碳酸鈣。特別優(yōu)選氫氧化鈉或者氫氧化鋰。
對于酯裂解合適的酸通常是硫酸、氯化氫/鹽酸、溴化氫/氫溴酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、甲苯磺酸、甲磺酸或者三氟甲磺酸或者其混合物，任選地添加水。在叔丁酯的情況中優(yōu)選氯化氫或者三氟乙酸，而在甲酯的情況中優(yōu)選鹽酸。
所述酯裂解通常在0℃至 +100℃、優(yōu)選在+0℃至 +50℃的溫度范圍進(jìn)行。
所提及的反應(yīng)可以在常壓下、在升壓下或者在減壓下(例如在0.5到5巴的范圍)進(jìn)行。在每種情況中通常在常壓下進(jìn)行。
用于方法步驟(V) + (VI) → (I)的惰性溶劑是，例如，鹵代烴如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、三氯乙烯或氯苯，醚如乙醚、二噁烷、四氫呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚，烴類如苯、甲苯、二甲苯、己烷、環(huán)己烷或石油餾分，或其它溶劑如丙酮、甲基乙基酮、乙酸乙酯、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、N,N'-二甲基丙烯基脲 (DMPU)、N-甲基吡咯烷酮 (NMP)或吡啶。也可以使用提到的溶劑的混合物。優(yōu)選使用二甲基甲酰胺或二甲亞砜。
適合用于方法步驟(V) + (VI) → (I)的堿是常用的無機(jī)堿或有機(jī)堿。這些優(yōu)選包括堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀，堿金屬-或堿土金屬碳酸鹽，例如碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸鈣或者碳酸銫，任選地添加堿金屬碘化物，例如例如碘化鈉或碘化鉀，堿金屬醇鹽例如甲醇鈉或甲醇鉀、乙醇鈉或乙醇鉀或叔丁醇鈉或叔丁醇鉀，堿金屬氫化物，例如氫化鈉或氫化鉀，氨化物，如氨化鈉、雙-(三甲基甲硅烷基)氨化鋰或雙-(三甲基甲硅烷基) 氨化鉀或二異丙基氨化鋰，或有機(jī)胺，例如三乙胺、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙胺、吡啶、1,5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯 (DBN)、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯 (DBU)或1,4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷 (DABCO?)。優(yōu)選使用碳酸鉀、碳酸銫或甲醇鈉。
該反應(yīng)通常在0℃至 +120℃的溫度范圍內(nèi)，優(yōu)選在+20℃至 +80℃下進(jìn)行，任選在微波中。該反應(yīng)可以在常壓下、在升壓下或者在減壓下(例如在0.5到5巴)進(jìn)行。
反應(yīng)步驟(I-B) → (V)中的芐基的解離在此根據(jù)常用的由保護(hù)基團(tuán)化學(xué)已知的方法，優(yōu)選通過在鈀催化劑，例如活性炭載鈀的存在下，在惰性溶劑，例如乙醇或乙酸乙酯中進(jìn)行[也參見，例如，T.W. Greene和P.G.M. Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，Wiley，New York，1999]。
式(II)的化合物是文獻(xiàn)已知的或者可以如下來制備，使式(VII)的化合物
其中 R5 具有上文中給出的含義，
在惰性溶劑中，在合適的堿存在下，與式(VI)的化合物反應(yīng)生成式(VIII)的化合物
其中 R4和R5各自具有上文中給出的含義，
隨后使其在惰性溶劑中與式(IX)的化合物反應(yīng)，
其中 R3和T1各自具有上文中給出的含義。
所描述的方法通過下述方案（方案3）來示例性說明：
方案3:
[a): i) NaOMe，MeOH，RT; ii) DMSO，RT; b): EtOH，分子篩，80℃]。
所示出的合成順序可以如下修改，即各自的反應(yīng)步驟以改變的順序進(jìn)行。方案4中示出這樣修改的合成順序的一個實(shí)例。
方案4:
[a): EtOH，分子篩，80℃; b): i) Cs2CO3，DMF，50℃]。
適合于生成咪唑并[1,2-a]吡啶基礎(chǔ)骨架的閉環(huán)(VIII) + (IX) → (II)或(VII) + (IX) → (X)的惰性溶劑是常用的有機(jī)溶劑。優(yōu)選包括醇如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或叔丁醇，或者醚如乙醚、四氫呋喃、二噁烷或乙二醇二甲醚，或其它溶劑例如丙酮、二氯甲烷、二甲基甲酰胺或二甲亞砜。同樣可以使用所提及的溶劑的混合物。優(yōu)選使用乙醇。
所述閉環(huán)通常在+50℃至 +150℃，優(yōu)選在+50℃至 +100℃的溫度范圍內(nèi)，任選在微波中進(jìn)行。
所述閉環(huán)(VIII) + (IX) → (II)或(VII) + (IX) → (X)任選在吸水反應(yīng)添加劑存在下，例如在分子篩 (孔徑4?)存在下進(jìn)行。反應(yīng)(VIII) + (IX) → (II)或(VII) + (IX) → (X)使用過量的式(IX)的試劑，例如用1 -20當(dāng)量的試劑(IX)進(jìn)行，其中這些試劑的添加可以一次性進(jìn)行或者以多份進(jìn)行。
作為方案1-4中示出的通過使化合物(V)、(VII)或(X)與式(VI)的化合物反應(yīng)引入R4 的替代，同樣可以，如方案5中所示，在Mitsunobu反應(yīng)條件下使該中間化合物與所述式的醇反應(yīng)。
方案5:
苯酚與醇的這種Mitsunobu縮合的典型反應(yīng)條件可見于專業(yè)文獻(xiàn)中，例如Hughes，D.L. Org. React. 1992，42，335; Dembinski，R. Eur. J. Org. Chem. 2004，2763。典型地，與活化試劑，例如偶氮二甲酸二乙酯 (DEAD)或偶氮二甲酸二異丙酯 (DIAD)，以及膦試劑，例如三苯基膦 或三丁基膦，在惰性溶劑中，例如THF、DCM、甲苯或DMF，在0 ℃與所用溶劑沸點(diǎn)之間的溫度下反應(yīng)。
其它的根據(jù)本發(fā)明的化合物任選也可通過由按照上述方法獲得的式(I)的化合物起始轉(zhuǎn)化各取代基的官能團(tuán)，尤其是在R1下列舉的那些來進(jìn)行。所述轉(zhuǎn)化按照常用的、本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法進(jìn)行，包括例如下述反應(yīng)：如親核和親電取代、氧化、還原、氫化、過渡金屬催化的偶聯(lián)反應(yīng)、消除、烷基化、胺化、酯化、酯裂解、醚化、醚裂解、形成碳酰胺以及引入和除去臨時的保護(hù)基團(tuán)。
根據(jù)本發(fā)明的化合物具有有價值的藥理學(xué)性質(zhì)，并且能夠用于預(yù)防和治療人類和動物的疾病。根據(jù)本發(fā)明的化合物提供了另外的治療選擇并因此擴(kuò)展了藥學(xué)。
本發(fā)明的化合物起到血管舒張和抑制血小板聚集的作用，并導(dǎo)致血壓降低和冠脈血流量上升。這些作用經(jīng)由可溶性鳥苷酸環(huán)化酶的直接刺激和細(xì)胞內(nèi)cGMP-上升介導(dǎo)。另外，本發(fā)明的化合物增強(qiáng)提高cGMP水平的物質(zhì)的作用，例如EDRF（內(nèi)皮衍生舒張因子）、NO供體、原卟啉IX、花生四烯酸或苯基肼衍生物。
本發(fā)明的化合物適于治療和/或預(yù)防心血管疾病、肺病、血栓栓塞性疾病和纖維化疾病。
因此，根據(jù)本發(fā)明的化合物可以在藥物中使用，所述藥物用于治療和/或預(yù)防下述疾病：心血管病癥，例如高血壓(血壓升高)、頑固性高血壓、急性和慢性心力衰竭、冠心病、穩(wěn)定型和不穩(wěn)定型心絞痛、外周和心血管疾病、心律失常、房性和室性心律失常及傳導(dǎo)紊亂，例如，I-III度房室性傳導(dǎo)阻滯（AB-阻滯I-III）、室上性快速型心律失常、心房顫動、心房撲動、心室顫動、心室撲動、室性快速型心律失常、尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動過速、房性和室性期外收縮、AV-交界區(qū)性期外收縮、病態(tài)竇房結(jié)綜合征、暈厥、AV-結(jié)節(jié)折返性心動過速、沃-帕-懷綜合征、急性冠狀動脈綜合征(ACS)、自身免疫性心臟疾病(心包炎、心內(nèi)膜炎、心瓣膜炎(Valvolitis)、主動脈炎、心肌病)、休克如心源性休克、膿毒性休克和過敏性休克、動脈瘤、拳擊者心肌病（心室早發(fā)性收縮（PVC）），用于治療和/或預(yù)防下述疾病：血栓栓塞疾病和缺血癥如心肌缺血、心肌梗塞、腦中風(fēng)、心臟肥大、暫時性和缺血性發(fā)作、先兆子癇、炎癥性心血管病癥、冠狀動脈和外周動脈痙攣、水腫形成例如肺水腫、腦水腫、腎水腫或心力衰竭引起的水腫、周圍循環(huán)紊亂、再灌注損傷、動脈和靜脈血栓形成、微白蛋白尿、心肌衰弱、內(nèi)皮功能障礙，用于防止再狹窄，例如在血栓溶解療法、經(jīng)皮腔內(nèi)血管成形術(shù)(PTA)、腔內(nèi)冠狀動脈血管成形術(shù)(PTCA)、心臟移植和旁路手術(shù)以后，以及微血管和大血管損傷(脈管炎)、提高的纖維蛋白原水平和低密度脂蛋白（LDL）水平以及提高的纖溶酶原激活物抑制劑-1（PAI-1）的濃度，以及用于治療和/或預(yù)防勃起功能障礙和女性性功能障礙。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，術(shù)語心力衰竭包括急性和慢性的心力衰竭表現(xiàn)形式也包括特殊或相關(guān)的疾病形式，如急性代償失調(diào)性心力衰竭、右心衰竭、左心衰竭、整體衰竭、缺血性心肌病、擴(kuò)張型心肌病、肥厚型心肌病、特發(fā)性心肌病、先天性心臟缺損、心臟瓣膜缺損、心臟瓣膜缺損伴隨的心力衰竭、二尖瓣狹窄、二尖瓣關(guān)閉不全、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣關(guān)閉不全、三尖瓣狹窄、三尖瓣關(guān)閉不全、肺動脈瓣狹窄、肺動脈瓣關(guān)閉不全、組合性心臟瓣膜缺損、心肌炎癥(心肌炎)、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病性心力衰竭、酒精中毒性心肌病、心臟貯積性疾病（kardiale Speichererkrankungen）、舒張性心力衰竭和收縮性心力衰竭和現(xiàn)有慢性心力衰竭的惡化急性期 (惡化的心力衰竭)。
此外，根據(jù)本發(fā)明的化合物也可以用于治療和/或預(yù)防動脈硬化、脂質(zhì)代謝紊亂、低脂蛋白血癥(Hypolipoprotein?mie)、血脂異常、高甘油三酯血癥、高脂血癥、高膽固醇血癥、無β脂蛋白血癥（Abetelipoprotein?mie）、谷固醇血癥、黃瘤病、丹吉爾病、肥胖（Fettsucht）（肥胖（Adipositas））、肥胖癥（Fettleibigkeit）（肥胖癥（Obesitas））和組合的高脂血癥和代謝綜合征。
此外，根據(jù)本發(fā)明的化合物可以用于治療和/或預(yù)防原發(fā)性和繼發(fā)性雷諾現(xiàn)象、微循環(huán)紊亂、跛行、周圍和自主神經(jīng)病、糖尿病性微血管病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、四肢糖尿病性潰瘍、壞疽、CREST-綜合征、紅斑病(Erythematose)、甲癬、風(fēng)濕病以及用于促進(jìn)傷口愈合。
此外，根據(jù)本發(fā)明的化合物適合用于治療泌尿系統(tǒng)疾病，例如良性前列腺綜合征（BPS），良性前列腺增生（BPH），良性前列腺腫大（BPE），膀胱出口梗阻（BOO），下泌尿道綜合征（LUTS，包括貓泌尿綜合癥（FUS）），泌尿生殖系統(tǒng)的疾病，包括神經(jīng)性膀胱過度活動癥（OAB）和（IC），失禁（UI）例如混合性失禁，急迫性失禁、壓力性失禁或溢流性失禁（MUI，UUI，SUI，OUI），盆腔疼痛，男性和女性的泌尿生殖系統(tǒng)的器官的良性和惡性疾病。
此外，根據(jù)本發(fā)明的化合物適合用于治療和/或預(yù)防腎疾病，特別是急性和慢性的腎機(jī)能不全，以及急性和慢性的腎衰竭。在本發(fā)明范圍內(nèi)，術(shù)語腎機(jī)能不全包括腎機(jī)能不全的急性和慢性表現(xiàn)形式，和潛在的或者相關(guān)的腎疾病，如腎灌注不足、透析時低血壓、梗阻性尿路病、腎小球病、腎小球腎炎、急性腎小球腎炎、腎小球硬化癥、小管間質(zhì)性疾病、腎病諸如原發(fā)性和先天性腎病、腎炎、免疫學(xué)腎疾病，例如腎移植排斥、免疫復(fù)合物誘發(fā)的腎病、毒性物質(zhì)誘發(fā)的腎病、造影劑誘發(fā)的腎病、糖尿病性和非糖尿病性腎病、腎盂腎炎、腎囊腫、腎硬化、高血壓性腎硬化和腎病綜合征，所述疾病在診斷上例如可具有如下特征：異常減少的肌酸酐和/或水排泄，異常增高的尿、氮、鉀和/或肌酸酐的血濃度、改變的腎酶活性，例如谷氨酰合成酶、改變的尿滲透性或尿量、增加的微白蛋白尿、大蛋白尿、腎小球和微動脈上的損傷、腎小管擴(kuò)張、高磷酸酯酶血癥和/或透析需要。本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物用于治療和/或預(yù)防腎機(jī)能不全后遺癥的用途，例如肺水腫、心力衰竭、尿毒癥、貧血、電解質(zhì)紊亂(例如高鈣血癥、低鈉血癥)以及骨-和碳水化合物-代謝中的紊亂。
另外，本發(fā)明的化合物也適用于治療和/或預(yù)防哮喘疾病、肺動脈高血壓(PAH)和其它形式的肺性高血壓(PH)，包括與左心疾病、HIV、鐮狀細(xì)胞貧血、血栓栓塞（CTEPH）、結(jié)節(jié)病、COPD或肺纖維化-相關(guān)的肺性高血壓，慢性阻塞性肺疾病（COPD），急性呼吸道綜合征（ARDS），急性肺損傷（ALI），α-1抗胰蛋白酶缺乏癥（AATD），肺纖維化，肺氣腫（例如吸煙誘導(dǎo)的肺氣腫）和囊性纖維化（CF）。
本發(fā)明描述的化合物還為用于控制特征在于NO/cGMP系統(tǒng)紊亂的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的活性物質(zhì)。它們特別適合在認(rèn)知缺損后用于改善知覺、注意力、學(xué)習(xí)能力或記憶力，所述認(rèn)知缺損如特別是伴隨著狀況/疾病/綜合征發(fā)生的那些，如“輕度認(rèn)知缺損”、伴隨年老而來的學(xué)習(xí)-和記憶力減退、伴隨年老而來的記憶喪失、血管性癡呆、顱腦創(chuàng)傷、中風(fēng)、中風(fēng)后發(fā)生的癡呆(“中風(fēng)后癡呆”)、創(chuàng)傷后顱腦創(chuàng)傷、一般性注意集中障礙、兒童學(xué)習(xí)和記憶力問題方面的注意集中障礙、阿爾茨海默病、路易體癡呆、額葉退化癡呆包括皮克斯綜合癥、帕金森病、漸進(jìn)性核麻痹、皮質(zhì)基底節(jié)變性癡呆、肌萎縮側(cè)索硬化癥(ALS)、亨廷頓舞蹈病、脫髓鞘作用、多發(fā)性硬化癥、丘腦退化、克-雅病癡呆、HIV癡呆、伴有癡呆的精神分裂或柯薩可夫精神病。它們也適合用于治療和/或預(yù)防中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疾病如焦慮狀態(tài)、緊張狀態(tài)和抑郁狀態(tài)、中樞神經(jīng)引起的性功能障礙和睡眠紊亂以及用于調(diào)節(jié)食物、興奮劑和上癮性物質(zhì)攝取的病理紊亂。
根據(jù)本發(fā)明的化合物另外還適合用于調(diào)節(jié)腦血流量并且是用于防治偏頭疼的非常有效的藥劑。它們也適合用于預(yù)防和防治大腦梗死 (大腦中風(fēng)) 后遺癥如中風(fēng)、大腦缺血和顱腦創(chuàng)傷。根據(jù)本發(fā)明的化合物同樣可用于防治疼痛狀態(tài)和耳鳴。
此外，本發(fā)明的化合物具有抗炎作用，因此可以用作抗炎劑用于治療和/或預(yù)防敗血癥（SIRS）、多器官功能衰竭（MODS、MOF）、腎臟的炎性疾病、慢性腸炎（IBD、克羅恩病、UC）、胰腺炎、腹膜炎、類風(fēng)濕疾病、炎性皮膚病和炎性眼病。
此外，本發(fā)明的化合物同樣可以用于治療和/或預(yù)防自身免疫性疾病。
根據(jù)本發(fā)明的化合物還適合用于治療和/或預(yù)防內(nèi)臟器官例如肺、心、腎、骨髓并特別是肝的纖維化疾病，以及皮膚纖維化和眼的纖維化疾病。在本發(fā)明的范圍內(nèi)，術(shù)語纖維化疾病特別包括下面的術(shù)語：肝纖維化、肝硬化、肺纖維化、心內(nèi)膜心肌纖維化、腎病、腎小球腎炎、間質(zhì)性腎纖維化、糖尿病引起的纖維化損害、骨髓纖維化和類似的纖維化疾病、硬皮病、硬斑病、瘢痕疙瘩、肥厚型疤痕形成（也在外科手術(shù)后）、痣、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變和結(jié)締組織疾病(例如結(jié)節(jié)病)。
此外，根據(jù)本發(fā)明的化合物適合用于防治術(shù)后疤痕形成，例如在青光眼手術(shù)后。
根據(jù)本發(fā)明的化合物同樣可以在美容上用于老化和角質(zhì)化的皮膚。
此外，根據(jù)本發(fā)明的化合物適合用于治療和/或預(yù)防肝炎、贅生物、骨質(zhì)疏松癥、青光眼和胃輕癱。
本發(fā)明另外涉及根據(jù)本發(fā)明的化合物用于治療和/或預(yù)防疾病、特別是上述疾病的用途。
本發(fā)明的另一主題是根據(jù)本發(fā)明的化合物在治療和/或預(yù)防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動脈高血壓癥、缺血、血管疾病、腎機(jī)能不全、血栓栓塞性疾病、纖維化疾病和動脈硬化中的用途。
本發(fā)明的另一主題是用于治療和/或預(yù)防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動脈高血壓癥、缺血、血管疾病、腎機(jī)能不全、血栓栓塞性疾病、纖維化疾病和動脈硬化的方法中的根據(jù)本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明的另一主題是根據(jù)本發(fā)明的化合物在制備用于治療和/或預(yù)防疾病、特別是上述疾病的藥物中的用途。
本發(fā)明的另一主題是根據(jù)本發(fā)明的化合物在制備用于治療和/或預(yù)防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動脈高血壓癥、缺血、血管疾病、腎機(jī)能不全、血栓栓塞性疾病、纖維化疾病和動脈硬化的藥物中的用途。
本發(fā)明的另一主題是使用有效量的至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物用于治療和/或預(yù)防疾病、特別是上述疾病的方法。
本發(fā)明的另一主題是使用有效量的至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物用于治療和/或預(yù)防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動脈高血壓癥、缺血、血管疾病、腎機(jī)能不全、血栓栓塞性疾病、纖維化疾病和動脈硬化的方法。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可單獨(dú)使用，或者在需要時與其它活性物質(zhì)結(jié)合使用。本發(fā)明進(jìn)一步提供尤其是用于治療和/或預(yù)防上述疾病的藥物，所述藥物包含至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物和一種或多種另外的活性物質(zhì)。作為適合的組合活性物質(zhì)示例性并優(yōu)選地可提及：
·有機(jī)硝酸鹽/酯和NO-供體，例如硝普鈉、硝化甘油、單硝酸異山梨酯、二硝酸異山梨酯、嗎多明或SIN-1、和吸入性NO；
·抑制環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)分裂的化合物，例如，磷酸二酯酶(PDE)1，2和/或5抑制劑，特別是PDE 5抑制劑如西地那非，伐地那非和他達(dá)拉非；
·起抗血栓形成作用的試劑，例如并優(yōu)選選自血小板凝集抑制劑、抗凝血劑或致纖溶（profibrinolytischen）致纖溶物質(zhì)；
·降低血壓的活性物質(zhì)，例如并優(yōu)選選自：鈣拮抗劑、血管緊張素AII-拮抗劑、ACE-抑制劑、內(nèi)皮素-拮抗劑、腎素抑制劑、α-受體阻滯劑、β-受體-阻滯劑、鹽皮質(zhì)激素-受體-拮抗劑和利尿劑；和/或
·改變脂類代謝的活性物質(zhì)，例如并優(yōu)選選自甲狀腺受體-激動劑，膽固醇合成-抑制劑例如并優(yōu)選HMG-CoA-還原酶-抑制劑或角鯊烯合成-抑制劑，ACAT-抑制劑、CETP-抑制劑、MTP-抑制劑、PPAR-α-、PPAR-γ-和/或PPAR-δ-激動劑、膽固醇-吸收抑制劑、脂肪酶-抑制劑、多聚膽汁酸-吸附劑、膽汁酸-重吸收抑制劑和脂蛋白（a）拮抗劑。
起抗血栓形成作用的試劑優(yōu)選指的是選自血小板凝集抑制劑、抗凝血劑或致纖溶物質(zhì)的化合物。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與血小板凝集抑制劑聯(lián)合施用，所述凝血細(xì)胞聚集抑制劑例如且優(yōu)選是阿司匹林、氯吡格雷、噻氯匹定或雙嘧達(dá)莫。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與凝血酶抑制劑聯(lián)合施用，所述凝血酶抑制劑例如且優(yōu)選是希美加群、達(dá)比加群、美拉加群、比伐盧定或克賽。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與GPIIb/IIIa-拮抗劑聯(lián)合施用，所述GPIIb/IIIa-拮抗劑例如且優(yōu)選是替羅非班或阿昔單抗。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與因子Xa-抑制劑聯(lián)合施用，所述因子Xa-抑制劑例如且優(yōu)選是利伐沙班(BAY 59-7939)、DU-176b、阿派沙班、奧米沙班、非德沙班（Fidexaban）、雷扎沙班、磺達(dá)肝素、依達(dá)肝素（Idraparinux）、PMD-3112、YM-150、KFA-1982、EMD-503982、MCM-17、MLN-1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR-126512或SSR-128428。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與肝素或低分子量（LMW）-肝素-衍生物聯(lián)合施用。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與維生素K-拮抗劑聯(lián)合施用，所述維生素K-拮抗劑例如且優(yōu)選是香豆素。
降低血壓的活性物質(zhì)優(yōu)選地理解為是指選自下述的化合物：鈣-拮抗劑、血管緊張素AII-拮抗劑、ACE-抑制劑、內(nèi)皮素-拮抗劑、腎素-抑制劑、α-受體-阻滯劑、β-受體-阻滯劑、鹽皮質(zhì)激素-受體-拮抗劑和利尿劑。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與鈣-拮抗劑聯(lián)合施用，所述鈣-拮抗劑例如且優(yōu)選是硝苯地平、氨氯地平、維拉帕米或地爾硫。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與α-1-受體-阻滯劑聯(lián)合施用，所述α-1-受體阻滯劑例如且優(yōu)選是哌唑嗪。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與β-受體-阻滯劑聯(lián)合施用，所述β-受體-阻滯劑例如且優(yōu)選是普萘洛爾、阿替洛爾、噻嗎洛爾、吲哚洛爾、阿普洛爾（Alprenolol）、氧烯洛爾、噴布洛爾、布拉洛爾、美替洛爾、納多洛爾、甲吲洛爾、卡拉洛爾(Carazalol)、索他洛爾、美托洛爾、倍他洛爾、塞利洛爾、比索洛爾、卡替洛爾、艾司洛爾、拉貝洛爾、卡維地洛、阿達(dá)洛爾、蘭地洛爾、奈必洛爾、依泮洛爾或布新洛爾。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與血管緊張素AII-拮抗劑聯(lián)合施用，所述血管緊張素AII-拮抗劑例如且優(yōu)選是氯沙坦、坎地沙坦、纈沙坦、替米沙坦或恩布沙坦。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與ACE-抑制劑聯(lián)合施用，所述ACE-抑制劑例如且優(yōu)選是依那普利、卡托普利、賴諾普利、雷米普利、地拉普利、福辛普利、喹那普利（Quinopril）、培哚普利或川多普利（Trandopril）。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與內(nèi)皮素-拮抗劑聯(lián)合施用，所述內(nèi)皮素-拮抗劑例如且優(yōu)選是波生坦、達(dá)盧生坦、安倍生坦或西他生坦（Sitaxsentan）。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與腎素-抑制劑聯(lián)合施用，所述腎素-抑制劑例如且優(yōu)選是阿利吉侖、SPP-600或SPP-800。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與鹽皮質(zhì)激素-受體-拮抗劑聯(lián)合施用，所述鹽皮質(zhì)激素-受體-拮抗劑例如且優(yōu)選是螺內(nèi)酯或依普利酮。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與袢利尿劑聯(lián)合施用，所述袢利尿劑例如是呋塞米、托拉塞米、布美他尼和 吡咯他尼，與保鉀利尿劑例如阿米洛利和氨苯蝶啶聯(lián)合施用，與醛固酮拮抗劑例如螺內(nèi)酯、坎利酸鉀和依普利酮聯(lián)合施用，以及噻嗪類利尿劑，例如氫氯噻嗪、氯噻嗪、希帕胺和吲達(dá)帕胺。
改變脂類代謝的藥劑優(yōu)選理解為是指選自下述的化合物：CETP-抑制劑、甲狀腺受體-激動劑、膽固醇合成-抑制劑如HMG-CoA-還原酶-或角鯊烯合成-抑制劑、ACAT-抑制劑、MTP-抑制劑、PPAR-α-、PPAR-γ-和/或PPAR-δ-激動劑、膽固醇-吸收抑制劑、聚合的膽汁酸吸附劑、膽汁酸-重吸收抑制劑、脂肪酶-抑制劑和脂蛋白(a)-拮抗劑。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與CETP-抑制劑聯(lián)合施用，所述CETP-抑制劑例如且優(yōu)選是達(dá)塞曲匹、BAY 60-5521、Anacetrapib或CETP-疫苗(CETi-1)。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與甲狀腺受體-激動劑聯(lián)合施用，所述甲狀腺受體-激動劑例如且優(yōu)選是D-甲狀腺素、3,5,3'-三碘甲狀腺原氨酸(T3)、CGS 23425或阿昔替羅(CGS 26214)。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與選自他汀類的HMG-CoA-還原酶-抑制劑聯(lián)合施用，所述HMG-CoA-還原酶-抑制劑例如且優(yōu)選是洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、羅舒伐他汀或匹伐他汀。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與角鯊烯合成-抑制劑聯(lián)合施用，所述角鯊烯合成-抑制劑例如且優(yōu)選是BMS-188494或TAK-475。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與ACAT-抑制劑聯(lián)合施用，所述ACAT-抑制劑例如且優(yōu)選是阿伐麥布、甲亞油脂酰胺、帕替麥布、Eflucimibe或SMP-797。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與MTP-抑制劑聯(lián)合施用，所述MTP-抑制劑例如且優(yōu)選是英普他派（Implitapide）、BMS-201038、R-103757或JTT-130。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與PPAR-γ-激動劑聯(lián)合施用，所述PPAR-γ-激動劑例如且優(yōu)選是吡格列酮或羅格列酮。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與PPAR-δ-激動劑聯(lián)合施用，所述PPAR-δ-激動劑例如且優(yōu)選是GW-501516或BAY 68-5042。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與膽固醇-吸收抑制劑聯(lián)合施用，所述膽固醇-吸收抑制劑例如且優(yōu)選是依折麥布、替奎安或帕馬苷。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與脂肪酶-抑制劑聯(lián)合施用，所述脂肪酶-抑制劑例如且優(yōu)選是奧利司他。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與聚合的膽汁酸吸附劑聯(lián)合施用，所述吸附劑例如且優(yōu)選是考來烯胺、考來替泊、Colesolvam、考來膠或Colestimide。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與膽汁酸-重吸收抑制劑聯(lián)合施用，所述膽汁酸-重吸收抑制劑例如且優(yōu)選是ASBT (= IBAT)-抑制劑，例如AZD-7806、S-8921、AK-105、BARI-1741、SC-435或SC-635。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與脂蛋白(a)-拮抗劑聯(lián)合施用，所述脂蛋白(a)-拮抗劑例如且優(yōu)選是吉卡賓（Gemcabene）鈣(CI-1027)或煙酸。
本發(fā)明進(jìn)一步的主題是包含至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物、通常連同一種或多種惰性、無毒、藥物上適合的賦形劑的藥物，及其用于上面所述目的用途。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可全身和/或局部作用。為此目的，它們可以以適合的方式給藥，例如口服給藥、腸胃外給藥、經(jīng)肺給藥、經(jīng)鼻給藥、舌下給藥、經(jīng)舌給藥、經(jīng)頰給藥、直腸給藥、真皮給藥、經(jīng)皮給藥、結(jié)膜給藥、耳道給藥或作為植入物或支架給藥。
對于這些給藥途徑，根據(jù)本發(fā)明的化合物可以適合的給藥方式給藥。
就口服給藥而言，這樣的給藥形式是合適的：所述給藥形式根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)起作用的，快速地和/或以受限制地釋放根據(jù)本發(fā)明的化合物，其含有結(jié)晶形式和/或無定形化形式和/或溶解形式的根據(jù)本發(fā)明的化合物，例如片劑（無包衣的或包衣的片劑，例如具有胃液抗性的或延遲溶解的或不溶性的包衣，所述包衣劑控制根據(jù)本發(fā)明的化合物的釋放）、在口腔中快速崩解的片劑或膜/淀粉紙、膜/凍干粉劑、膠囊劑（例如硬或軟明膠膠囊劑）、糖衣藥丸、顆粒、丸劑、散劑、乳劑、混懸液、氣霧劑或溶液。
繞開吸收步驟（例如靜脈內(nèi)的、動脈內(nèi)的、心內(nèi)的、脊柱內(nèi)或腰內(nèi)的給藥），或包括吸收（例如肌肉內(nèi)的、皮下的、皮內(nèi)的、經(jīng)皮的或腹膜內(nèi)的給藥），可以實(shí)現(xiàn)腸胃外給藥。適合腸胃外給藥的給藥形式包括以溶液、混懸液、乳劑、凍干粉劑或無菌粉末形式的注射制劑和輸注制劑。
就其它給藥途徑而言，合適的是，例如吸入藥形式（尤其是粉末吸入器和噴霧器）、滴鼻劑、-溶液或-噴劑、用于舌、舌下或經(jīng)頰給藥的片劑、膜劑/淀粉紙劑或膠囊劑、栓劑、耳-或眼用制劑、陰道膠囊劑、水性混懸液（洗劑、振搖混合物）、親脂混懸液、軟膏劑、乳膏劑、透皮治療體系（例如膏藥）、乳狀液、糊劑、泡沫、撲粉、植入物或支架。
優(yōu)選口服或腸胃外給藥，尤其是口服和靜脈內(nèi)給藥。
可以將根據(jù)本發(fā)明的化合物轉(zhuǎn)化成所述的給藥形式。這可以以本身已知的方式，通過與惰性的、無毒的、藥學(xué)上合適的賦形劑相混合來實(shí)現(xiàn)。這些賦形劑尤其包括載體物質(zhì)（例如微晶纖維素、乳糖、甘露醇）、溶劑（例如液體聚乙二醇）、乳化劑和分散劑或潤濕劑（例如十二烷基硫酸鈉、聚氧山梨醇酐油酸酯）、粘合劑（例如聚乙烯吡咯烷酮）、合成的和天然的聚合物（例如白蛋白）、穩(wěn)定劑（例如抗氧化劑例如抗壞血酸）、著色劑（例如無機(jī)顏料例如鐵氧化物）以及口味-和/或氣味矯正劑。
一般而言，已經(jīng)證實(shí)有利的是，在腸胃外給藥時施用約0.001-1mg/kg、優(yōu)選大約0.01-0.5 mg/kg體重的量實(shí)現(xiàn)了有效的結(jié)果。在口服給藥的情況下，所述劑量為大約0.001-2 mg/kg，優(yōu)選大約0.001- 1 mg/kg體重。
盡管如此，有時可能會需要偏離所述量，即取決于體重、給藥途徑、個體對活性物質(zhì)的應(yīng)答、制劑的類型和進(jìn)行給藥的時間或間隔。因而，在有些情況下，少于前述最少量可能足以應(yīng)付，而在另一些情況下，必須超過所述上限。在施用更大量的情況下，可能適當(dāng)?shù)氖牵瑢⑦@些量分成在一天中多次的單獨(dú)給藥。
下面的工作實(shí)施例說明了本發(fā)明。本發(fā)明不限于所述實(shí)施例。
除非另有說明，在下述的實(shí)驗(yàn)和實(shí)施例中所述的百分比數(shù)據(jù)是重量百分比，份數(shù)是重量份數(shù)。液體/液體溶液的溶劑比、稀釋比和濃度數(shù)據(jù)各基于體積計。
A. 實(shí)施例
縮寫和首字母簡略詞：
abs. 絕對的(= 干燥的)
aq. 水溶液
br 寬信號 (NMR耦合模式)
δ 在NMR譜中的位移 (以ppm給出)
d 雙峰 (NMR 耦合模式)
DCI 直接化學(xué)電離 (在 MS中)
DMAP 4-N,N-二甲基氨基吡啶
DMF 二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亞砜
d. Th 理論值的（收率）
eq. 當(dāng)量
ESI 電噴霧電離 (在 MS中)
Et 乙基
h 小時
HPLC 高壓高效液相色譜
HRMS 高分辨率質(zhì)譜
konz. 濃縮的
LC/MS 液相色譜-質(zhì)譜法聯(lián)用
LiHMDS 六甲基二硅基氨基鋰
m 多重峰 (NMR 耦合模式)
Me 甲基
min 分鐘
MS 質(zhì)譜法
NMR 核磁共振譜法
Ph 苯基
q 四重峰(NMR 耦合模式)
quint. 五重峰(NMR 耦合模式)
RT 室溫
Rt 保留時間(在HPLC中)
s 單峰(NMR 耦合模式)
t 三重峰(NMR 耦合模式)
tert 第三
THF 四氫呋喃
TBTU (苯并三唑-1-基氧基)雙-二甲基氨基甲基鎓氟硼酸鹽
UV 紫外光譜法
v/v (溶液的)體積與體積比
XPHOS 二環(huán)己基(2',4',6'-三異丙基聯(lián)苯-2-基)膦。
LC/MS和HPLC方法:
方法1 (LC-MS):
儀器：具有Waters UPLC Acquity的Micromass QuattroPremier; 柱： Thermo Hypersil GOLD 1.9μ 50 mm x 1 mm; 洗脫液 A: 1 l水 + 0.5 ml 50%的甲酸，洗脫液 B: 1 l 乙腈 + 0.5 ml 50%的甲酸; 梯度: 0.0 min 90% A → 0.1 min 90% A → 1.5 min 10% A → 2.2 min 10% A; 流速: 0.33 ml/min; 烘箱: 50℃; UV檢測: 210 nm。
方法2 (LC-MS):
儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC System; 柱： Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 x 1mm; 洗脫液 A: 1 l 水 + 0.25 ml 99%的甲酸，洗脫液 B: 1 l 乙腈 + 0.25 ml 99%的甲酸; 梯度: 0.0 min 90% A → 1.2 min 5% A → 2.0 min 5% A; 烘箱: 50℃; 流速: 0.40 ml/min; UV檢測: 210 – 400 nm。
方法3 (LC-MS):
MS儀器類型: Waters Micromass Quattro Micro; HPLC儀器類型: Agilent 1100 series; 柱： Thermo Hypersil GOLD 3 μ 20 mm x 4 mm; 洗脫液 A: 1 l 水 + 0.5 ml 50%的甲酸，洗脫液 B: 1 l 乙腈 + 0.5 ml 50%的甲酸; 梯度: 0.0 min 100% A → 3.0 min 10% A → 4.0 min 10% A → 4.01 min 100% A (流速 2.5 ml/min) → 5.00 min 100% A; 烘箱: 50℃; 流速: 2 ml/min; UV檢測: 210 nm。
方法4 (DCI-MS):
儀器：DSQ II; Thermo Fisher-Scientific; DCI 含有氨，流速: 1.1 ml/min; 源溫度: 200℃; 電離能70 eV; DCI絲加熱到800℃; 質(zhì)量范圍80-900。
方法5 (LCMS):
MS 儀器：Waters SQD; HPLC 儀器：Waters UPLC; 柱： Zorbax SB-Aq (Agilent)，50 mm x 2.1 mm，1.8 μm; 洗脫液 A: 水 + 0.025%甲酸，洗脫液 B: 乙腈 (ULC) + 0.025%甲酸; 梯度: 0.0 min 98%A - 0.9 min 25%A – 1.0 min 5%A - 1.4 min 5%A – 1.41 min 98%A – 1.5 min 98%A; 烘箱: 40℃; 流速: 0.600 ml/min; UV檢測: DAD; 210 nm。
方法6 (制備型LCMS):
MS 儀器：Waters ; HPLC 儀器：Waters (柱Waters X-Bridge C18，18 mm x 50 mm，5 μm，洗脫液 A: 水 + 0.05% 三乙胺，洗脫液 B: 乙腈 (ULC) + 0.05% 三乙胺; 梯度: 0.0 min 95%A – 0.15 min 95%A – 8.0 min 5%A – 9.0 min 5%A; 流速: 40 ml/min; UV檢測: DAD; 210 – 400 nm)。
或者:
MS 儀器：Waters ; HPLC 儀器：Waters (柱Phenomenex Luna 5μ C18(2) 100A，AXIA Tech. 50 x 21.2 mm，洗脫液 A: 水 + 0.05%甲酸，洗脫液 B: 乙腈 (ULC) + 0.05%甲酸; 梯度: 0.0 min 95%A – 0.15 min 95%A – 8.0 min 5%A – 9.0 min 5%A; 流速: 40 ml/min; UV檢測: DAD; 210 – 400 nm)。
方法7 (制備型HPLC):
方案a) 柱： Macherey-Nagel VP 50/21 Nucleosil 100-5 C18 Nautilus. 流速: 25 ml/min。梯度: A = 水 + 0.1%甲酸 ，B = 甲醇，0 min = 30% B，2 min = 30% B，6 min = 100% B，7 min = 100% B，7.1 min = 30% B，8 min = 30% B，流速 25 ml/min，UV檢測 220 nm。
方案b) 柱： Macherey-Nagel VP 50/21 Nucleosil 100-5 C18 Nautilus. 流速: 25 ml/min。梯度: A = 水 + 0.1% 濃氨水 ，B = 甲醇，0 min = 30% B，2 min = 30% B，6 min = 100% B，7 min = 100% B，7.1 min = 30% B，8 min = 30% B，流速 25 ml/min，UV檢測 220 nm。
方法8 (制備型HPLC):
柱： Phenomenex Gemini C18; 110A，AXIA，5 μm，21.2 X 50 mm 5微米; 梯度: A = 水 + 0.1% 濃氨，B = 乙腈，0 min = 10% B，2 min = 10% B，6 min = 90% B，7 min = 90% B，7.1 min = 10% B，8 min = 10% B，流速 25 ml/min，UV檢測 220 nm。
方法9 (制備型HPLC):
柱： Axia Gemini 5 μ C18 110 A，50 x 21.5 mm，P/NO: 00B-4435-P0-AX，S/NO: 35997-2，梯度: A = 水 + 0.1% 濃氨，B = 乙腈，0 min = 30% B，2 min = 30% B，6 min = 100% B，7 min = 100% B，7.1 min = 30% B，8 min = 30% B，流速 25 ml/min，UV檢測 220 nm。
方法10:
儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC system; 柱： Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 μ 30 x 2 mm; 洗脫液 A: 1 l 水 + 0.25 ml 99%的甲酸，洗脫液 B: 1 l 乙腈 + 0.25 ml 99%的甲酸; 梯度: 0.0 min 90% A → 1.2 min 5% A → 2.0 min 5% A 烘箱: 50℃; 流速: 0.60 ml/min; UV檢測: 208 – 400 nm。
方法11:
MS儀器類型: Waters (Micromass) Quattro Micro; HPLC儀器類型: Agilent 1100 series; 柱： Thermo Hypersil GOLD 3 μ 20 x 4 mm; 洗脫液 A: 1 l 水 + 0.5 ml 50%的甲酸，洗脫液 B: 1 l 乙腈 + 0.5 ml 50%的甲酸; 梯度: 0.0 min 100% A → 3.0 min 10% A → 4.0 min 10% A; 烘箱: 50℃; 流速: 2 ml/min; UV檢測: 210 nm。
方法12:
儀器：Thermo DFS，Trace GC Ultra; 柱： Restek RTX-35，15 m x 200 μm x 0.33 μm; 恒定氦流速: 1.20 ml/min; 烘箱: 60℃; 入口溫度: 220℃; 梯度: 60℃，30℃/min → 300℃ (維持3.33 min)。
除非另有說明，在下述的實(shí)驗(yàn)和實(shí)施例中所述的百分比數(shù)據(jù)是重量百分比，份數(shù)是重量份數(shù)。液體/液體溶液的溶劑比、稀釋比和濃度數(shù)據(jù)各基于體積計。
在以下段落中給出的1H-NMR 譜中的質(zhì)子信號的多重峰反映了在每種情況下觀察到的信號形式，并未考慮高階的信號現(xiàn)象。所有1H NMR譜中的數(shù)據(jù)均是以ppm給出的化學(xué)位移δ。
在根據(jù)上述洗脫劑包含添加劑例如三氟乙酸、甲酸或氨的方法借助制備型HPLC提純本發(fā)明的化合物時，根據(jù)本發(fā)明的化合物可以以鹽形式，例如作為三氟乙酸鹽、甲酸鹽或銨鹽制得，只要根據(jù)本發(fā)明的化合物包含足夠的堿性或酸性官能。這樣的鹽可通過多種本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的游離堿或酸。
鹽可以以低于化學(xué)計量或超化學(xué)計量的形式存在，尤其是在胺或羧酸存在時。另外，對于存在的咪唑并吡啶，在酸性條件下，鹽可以始終存在，甚至在化學(xué)計量不足的情況下，而不會在1H-NMR中被識別，并且在各自的IUPAC命名和結(jié)構(gòu)式中沒有特別說明和告知。
在下面描述的合成中間體和工作實(shí)施例中，如果以相應(yīng)的堿或酸的鹽的形式給出化合物，通過分別的制備和/或純化過程獲得的這樣的鹽的精確化學(xué)計量組成通常是未知的。除非更詳細(xì)地說明，否則對名稱和結(jié)構(gòu)式的添加，例如“鹽酸鹽”、“三氟乙酸鹽”、“鈉鹽”或"x HCl"，"x CF3COOH"，"x Na+" 就此類鹽而言不在化學(xué)計量上理解，而是僅具有關(guān)于其中包含的成鹽組分的描述性特征。
這相應(yīng)地適用于當(dāng)通過制備和/或純化過程獲得的合成中間體和工作實(shí)施例或其鹽以溶劑化物，例如水合物的形式描述時，其化學(xué)計量組成（如果為定義的類型）是未知的。
通用工作規(guī)程
通用工作規(guī)程 1: 使用TBTU作為偶聯(lián)劑形成酰胺
將1 當(dāng)量待偶聯(lián)的羧酸 (例如實(shí)施例3A)、1.2 – 1.3 當(dāng)量(苯并三唑-1-基氧基)雙二甲基氨基甲基鎓氟硼酸鹽(TBTU)和6 當(dāng)量4-甲基嗎啉預(yù)先放入到DMF中(大約0.1-0.2 M基于待偶聯(lián)的羧酸計)，然后添加1.2-1.5當(dāng)量待偶聯(lián)的胺，并在室溫下攪拌過夜。
反應(yīng)混合物的示例性后處理：將水加入到反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀繼續(xù)攪拌30min，抽濾并用水充分洗滌，在高真空下干燥過夜。或者，將粗制反應(yīng)混合物直接濃縮并借助制備型HPLC進(jìn)一步提純。
通用工作規(guī)程 2：使用HATU 作為偶聯(lián)劑形成酰胺
將1 當(dāng)量待偶聯(lián)的羧酸 (例如實(shí)施例3A，6A，11A，16A，19A，21A，23A，25A或26A)、1.2-1.3 當(dāng)量O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和3-4 當(dāng)量N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到DMF中(大約0.2 M基于待偶聯(lián)的羧酸計)，然后添加1.2-1.5當(dāng)量待偶聯(lián)的胺，并在室溫下攪拌過夜。
反應(yīng)混合物的示例性后處理：將水加入到反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀繼續(xù)攪拌30min，抽濾并用水充分洗滌，在高真空下干燥過夜。或者，將粗制反應(yīng)混合物在真空中濃縮后直接借助制備型HPLC進(jìn)一步提純或者在萃取后處理之后借助制備型HPLC進(jìn)一步提純。
通用工作規(guī)程 3：使用用于羧酸活化的Ghosez試劑形成酰胺
將1 當(dāng)量待偶聯(lián)的羧酸 (例如實(shí)施例3A，6A，11A，16A，19A，21A，23A，25A或26A)預(yù)先放入到THF中(大約0.1-0.2 M基于待偶聯(lián)的羧酸計)，加入1.5 當(dāng)量1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺 (Ghosez試劑)，并在室溫下攪拌30 min。隨后加入1.2 當(dāng)量的胺組分，并將該懸浮液在室溫下攪拌過夜。任選地(例如在不完全轉(zhuǎn)化的情況下)，再次加入1.5 當(dāng)量1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺以及隨后加入另外的待偶聯(lián)的胺，將該懸浮液在室溫下重新攪拌過夜。濃縮該反應(yīng)混合物，并借助例如制備型HPLC純化粗產(chǎn)物。
代表工作規(guī)程4: 使用羧酰氯形成酰胺
將1 當(dāng)量待偶聯(lián)的羧酰氯(例如實(shí)施例27A)預(yù)先放入到THF中(大約0.02-0.03 M)，加入1.2 當(dāng)量待偶聯(lián)的胺和4 當(dāng)量N,N-二異丙基乙胺，并在室溫下攪拌過夜。在旋蒸儀上濃縮反應(yīng)溶液，用少量乙腈再次溶解，并加入水。將產(chǎn)生的固體攪拌大約30 min，過濾，并用水充分洗滌。或者，通過制備型HPLC進(jìn)一步純化粗制反應(yīng)產(chǎn)物。
起始化合物和中間體：
實(shí)施例1A
3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺
在室溫下，將51 g 甲醇鈉 (953 mmol，1.05當(dāng)量)預(yù)先放入到1000 ml 甲醇中，加入100 g 2-氨基-3-羥基吡啶 (908 mmol，1當(dāng)量)，并在室溫下攪拌另外15 min。將該反應(yīng)混合物在真空下很大程度地濃縮，將殘余物置于2500 ml DMSO中，并加入197 g 2,6-二氟芐基溴化物 (953 mmol，1.05當(dāng)量)。在室溫下4 h后，將該反應(yīng)混合物倒在20 l水上，繼續(xù)攪拌15 min，抽濾固體。濾餅用1 l 水和100 ml 異丙醇和500 ml 石油醚洗滌并在高真空下干燥。得到171 g 標(biāo)題化合物(理論值的78%)。
實(shí)施例2A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將170 g 3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺 (實(shí)施例1A; 719 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到3800 ml 乙醇中，加入151 g 制成粉末的分子篩 3?和623 g 2-氯乙酰乙酸乙酯 (3.6 mol，5當(dāng)量)。將產(chǎn)生的反應(yīng)混合物加熱回流24 h，然后抽濾通過硅藻土并在真空中濃縮。殘余物在室溫下較長時間(48 h)靜置后結(jié)晶。過濾晶體漿液，用少量異丙醇攪拌3次，并且各自抽濾，最后用乙醚洗滌。得到60.8 g (理論值的23.4%)的標(biāo)題化合物。過濾步驟的合并的母液用環(huán)己烷/乙醚作為洗脫液在硅膠上用色譜法分離，得到另外46.5 g (理論值的18.2%; 總收率：理論值的41.6%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例3A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將107 g 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例2A; 300 mmol，1當(dāng)量)溶解在2.8 l THF/甲醇 (1:1) 中，加入1.5 l 1 N氫氧化鋰水溶液(1.5 mol，5當(dāng)量)，并在室溫下攪拌 16 h。在真空中除去有機(jī)溶劑，并將產(chǎn)生的水溶液在冰浴中用1 N 鹽酸調(diào)節(jié)到pH 3-4。抽濾產(chǎn)生的固體，用水和異丙醇洗滌，并在真空下干燥。得到92 g (理論值的95%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例4A
3-(環(huán)己基甲氧基)吡啶-2-胺
在室溫下，將96 g 氫氧化鈉水溶液(45%的，1081 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到1170 ml 甲醇中，加入119 g 2-氨基-3-羥基吡啶 (1080 mmol，1當(dāng)量)，并在室溫下攪拌另外10 min。將該反應(yīng)混合物在真空下很大程度地濃縮，將殘余物置于2900 ml DMSO中，加入101 g 環(huán)己基甲基溴化物 (1135 mmol，1.05當(dāng)量)。在室溫下16 h之后，將該反應(yīng)混合物攪入6 l 水中，用每次2 l 乙酸乙酯萃取該水溶液2次，合并的有機(jī)相用每次1L飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，干燥，過濾并濃縮。殘余物用500 ml 戊烷攪拌，抽濾并在真空下干燥。得到130 g (理論值的58.3%)。
實(shí)施例5A
8-(環(huán)己基甲氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將130 g 3-(環(huán)己基甲氧基)吡啶-2-胺 (實(shí)施例4A; 630 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到3950 ml 乙醇中，加入436 ml 2-氯乙酰乙酸乙酯 (3.2 mol，5當(dāng)量)。將產(chǎn)生的反應(yīng)混合物加熱回流24 h，然后在真空下濃縮。如此得到的粗產(chǎn)物在硅膠上用色譜法分離，使用環(huán)己烷/乙醚作為洗脫液，得到66.2 g (理論值的33.2%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例6A
8-(環(huán)己基甲氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將50 g 8-(環(huán)己基甲氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例5A; 158 mmol，1當(dāng)量)溶解在600 ml 二噁烷中，加入790 ml 2 N 氫氧化鈉水溶液(1.58 mol，10當(dāng)量)，并在室溫下攪拌 16 h。向該混合物中加入316 ml 6 N鹽酸并濃縮至總體積的大約1/5。抽濾產(chǎn)生的固體，用水和叔丁基甲基醚洗滌并在真空下干燥。得到35 g (理論值的74%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例7A
5-氟-2-硝基吡啶-3-醇
在冰冷卻下，將5 g 5-氟吡啶-3-醇 (44 mmol，1當(dāng)量)溶解在43 ml 濃硫酸中，并在0℃經(jīng)5 min 加入2.8 ml濃硝酸。將該反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝夭⒗^續(xù)攪拌過夜。將該混合物傾倒在100g冰上并攪拌30 min。抽濾晶體并在真空下干燥。得到5.6 g (理論值的81%)標(biāo)題化合物并不經(jīng)進(jìn)一步提純將其用于后續(xù)反應(yīng)中。
實(shí)施例8A
2-氨基-5-氟吡啶-3-醇
將5.6 g 5-氟-2-硝基吡啶-3-醇 (實(shí)施例7A; 36 mmol)溶解在2 l 乙醇中，加入催化劑量的活性炭載鈀 (10%的)并在1個大氣壓的氫氣下氫化16h。將該混合物經(jīng)過硅藻土過濾，并濃縮濾液。用甲醇洗滌濾餅，直至濾液不再具有黃色。濃縮濾液，得到第二批產(chǎn)物。共計得到4.26 g (理論值的85%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例9A
6-氟-8-羥基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將3.2 g 2-氨基-5-氟吡啶-3-醇 (實(shí)施例8A; 25 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到155 ml 乙醇中，加入1.5 g 制成粉末的分子篩 3?和20.6 g 2-氯乙酰乙酸乙酯 (125 mmol，5當(dāng)量)，并在回流下加熱過夜。濃縮反應(yīng)溶液并用色譜法分離(Biotage Isolera Four; SNAP Cartridge KP-Sil 50 g; 環(huán)己烷/乙酸乙酯 梯度; 然后二氯甲烷/甲醇 梯度)。將粗產(chǎn)物溶解在少許甲醇中，加入叔丁基甲基醚，抽濾晶體，并用叔丁基甲基醚洗滌。得到570 mg (理論值的10%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例10A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-6-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將560 mg 6-氟-8-羥基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例9A; 2.4 mmol，1.0當(dāng)量)、1.7 g 碳酸銫 (5.17 mmol，2.2當(dāng)量)和535 mg 2,6-二氟芐基溴化物 (2.6 mmol，1.1當(dāng)量)預(yù)先放入到34 ml干燥的DMF中，并在50℃溫?zé)?5 min。加入水，繼續(xù)攪拌30 min，抽濾晶體并用水洗滌。得到560 mg (理論值的65%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例11A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-6-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將550 mg 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-6-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例10A; 1.5 mmol，1當(dāng)量)溶解在64 ml THF和12 ml 甲醇中，加入7.5 ml 1N氫氧化鋰水溶液并在室溫下攪拌過夜。加入8 ml 1N 鹽酸并濃縮。抽濾形成的晶體并用水洗滌。得到429 mg 標(biāo)題化合物(理論值的80%)。
實(shí)施例12A
5-氯-2-硝基吡啶-3-醇
在冰冷卻下，將30 g 5-氯吡啶-3-醇 (232 mmol，1當(dāng)量)溶解在228 ml 濃硫酸中，在0℃緩慢加入24 ml濃硝酸。將該反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。將該反應(yīng)混合物攪入冰/水混合物中并攪拌30 min。過濾晶體，用冷水洗滌并在空氣下干燥。得到33 g (理論值的82%)標(biāo)題化合物并不經(jīng)進(jìn)一步提純將其用于后續(xù)反應(yīng)中。
實(shí)施例13A
5-氯-3-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-硝基吡啶
將33 g 5-氯-2-硝基吡啶-3-醇 (實(shí)施例12A; 189 mmol，1當(dāng)量)和61.6 g 碳酸銫 (189 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到528 ml DMF中，加入40.4 g 2,6-二氟芐基溴化物 (189 mmol，1當(dāng)量)并在室溫下攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物攪入水/1N 鹽酸的混合物中，抽濾晶體，用水洗滌并在空氣下干燥。得到54.9 g (理論值的97%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例14A
5-氯-3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺
將59.7 g 5-氯-3-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-硝基吡啶 (實(shí)施例13A; 199 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到600 ml 乙醇中，加入34.4 g制成粉末的鐵(616 mmol，3.1當(dāng)量)并加熱至沸騰。緩慢滴加152 ml濃鹽酸并在回流下加熱另外30 min。冷卻該反應(yīng)混合物并攪入冰/水混合物中。產(chǎn)生的混合物用乙酸鈉調(diào)節(jié)至pH 5，抽濾晶體，用水洗滌，并在空氣中干燥然后在50℃在真空下干燥。得到52.7 g (理論值的98%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例15A
6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將40 g 5-氯-3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺 (實(shí)施例14A; 147.8 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到800 ml 乙醇中，加入30 g 制成粉末的分子篩 3?和128 g 2-氯乙酰乙酸乙酯 (739 mmol，5當(dāng)量)并在回流下加熱過夜。濃縮該反應(yīng)混合物，將殘余物置于中乙酸乙酯并過濾。乙酸乙酯相用洗滌水，干燥，過濾并濃縮。得到44 g (理論值的78%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例16A
6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將44 g 6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例15A; 115.5 mmol，1當(dāng)量)溶解在550 ml THF和700 ml 甲醇中，加入13.8 g 氫氧化鋰 (溶解在150 ml 水中; 577 mmol，5當(dāng)量)并在室溫下攪拌過夜。加入1N 鹽酸并濃縮。抽濾形成的晶體并用水洗滌。得到34 g 標(biāo)題化合物(理論值的84%)。
實(shí)施例17A
5-溴-3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺
將32.6 g 3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺 (實(shí)施例1A; 138 mmol，1當(dāng)量)懸浮在552 ml 10%的硫酸中，并冷卻至0℃。將8.5 ml 溴 (165 mmol，1.2當(dāng)量)溶解在85 ml 乙酸中，然后經(jīng)90 min滴加至冰冷卻的氨基吡啶的硫酸溶液中。添加結(jié)束后在0℃攪拌90 min，然后用600 ml 乙酸乙酯稀釋，分離水相。水相用乙酸乙酯反萃，合并有機(jī)相，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥并濃縮。殘余物溶解在二氯甲烷中并在硅膠上色譜分離(石油醚/乙酸乙酯 梯度作為洗脫液)。得到24 g (理論值的55%)標(biāo)題化合物，為淺色晶體。
實(shí)施例18A
6-溴-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將24 g 5-溴-3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺 (實(shí)施例17A; 76.2 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到400 ml 乙醇中，加入16 g 制成粉末的分子篩 3?和52.7 ml 2-氯乙酰乙酸乙酯 (380.8 mmol，5當(dāng)量)并在回流下加熱過夜。加入另外8 g 分子篩，并在回流下加熱另外24 h。將將該反應(yīng)混合物濃縮，將殘余物置于二氯甲烷中并在硅膠上色譜分離(洗脫液: 二氯甲烷/甲醇 20:1)。濃縮包含產(chǎn)物的級分，并將殘余物在100 ml 乙醚中攪拌30 min，抽濾，用少許乙醚洗滌并干燥。得到15 g (理論值的45%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例19A
6-溴-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將1.5 g 6-溴-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例18A; 3.5 mmol，1當(dāng)量)溶解在72 ml THF/甲醇 5:1中，加入17.6 ml 1N氫氧化鋰水溶液(17.6 mmol，5當(dāng)量) ，溫?zé)嶂?0℃并在該溫度下攪拌6 h。用6N鹽酸將該混合物調(diào)節(jié)至pH 4并濃縮。將水加入到形成的晶體中，攪拌，抽濾，用水洗滌并在真空下干燥。得到1.24 g 標(biāo)題化合物(理論值的88% )。
實(shí)施例20A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將600 mg 6-溴-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (1.4 mmol，1當(dāng)量)和230 mg 1,1’-雙-(二苯基膦基)二茂鐵氯化鈀(II)/二氯甲烷配合物(0.282 mmol，20 mol%)溶解在25 ml THF中，并加入0.88 ml 2 M甲基氯化鋅在THF(1.76 mmol，1.2當(dāng)量)中的溶液。在微波中，將該反應(yīng)混合物在100℃加熱40 min。用Celite過濾該反應(yīng)混合物并在旋蒸儀上蒸發(fā)濃縮。殘余物用色譜法分離(Biotage Isolera Four)。得到225 mg (理論值的38%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例21A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將220 mg 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例20A; 0.524 mmol，1當(dāng)量)溶解在7 ml THF/甲醇 (1:1)中，加入2.6 ml 1 N氫氧化鋰水溶液(2.6 mmol，5當(dāng)量)，并在室溫下攪拌 16 h。濃縮該混合物并用1N鹽酸酸化殘余物。攪拌形成的晶體并抽濾，用水洗滌并在真空下干燥。得到120 mg 標(biāo)題化合物(理論值的60%)。
實(shí)施例22A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-6-(吡咯烷-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將500 mg 6-溴-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (1.18 mmol，1當(dāng)量)、43 mg 三(二亞芐基丙酮)二鈀 (0.047 mmol，4 mol%)、158 mg 叔丁醇鈉 (1.65 mmol，1.4當(dāng)量)、67 mg XPHOS (0.141 mmol，12 mol%)和294 μl 吡咯烷(3.5 mmol，3當(dāng)量)溶解在30 ml 干燥的甲苯中并在預(yù)熱到100℃的油浴中反應(yīng)。在該溫度下16h后，將該反應(yīng)混合物冷卻，用硅藻土過濾，濃縮并色譜分離(Biotage Isolera Four; 洗脫液: 環(huán)己烷/乙酸乙酯 梯度)。得到100 mg (理論值的19%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例23A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-6-(吡咯烷-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將90 mg 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-6-(吡咯烷-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例22A; 0.217 mmol，1當(dāng)量)溶解在6 ml THF/甲醇 (5:1)中，加入1.1 ml 1 N氫氧化鋰水溶液(1.1 mmol，5當(dāng)量) 并溫?zé)嶂?0℃并在該溫度下攪拌20 h。冷卻該混合物，用6 N 鹽酸酸化至pH 4并濃縮。將水加入到形成的晶體中，攪拌，抽濾，用水洗滌并在真空下干燥。得到87 mg 標(biāo)題化合物(理論值的93%)。
實(shí)施例24A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-6-(嗎啉-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將500 mg 6-溴-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (1.18 mmol，1當(dāng)量)、43 mg 三(二亞芐基丙酮)二鈀 (0.047 mmol，4 mol%)、158 mg 叔丁醇鈉 (1.65 mmol，1.4當(dāng)量)、67 mg XPHOS (0.141 mmol，12 mol%)和307 μl 嗎啉 (3.5 mmol，3當(dāng)量)溶解在30 ml 干燥的甲苯中并在預(yù)熱到100℃的油浴中反應(yīng)。在該溫度下16h后，將該反應(yīng)混合物冷卻，用硅藻土過濾，濃縮并色譜分離(Biotage Isolera Four; 洗脫液: 環(huán)己烷/乙酸乙酯 梯度)。得到352 mg (理論值的63%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例25A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-6-(嗎啉-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將400 mg 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-6-(吡咯烷-1-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例24A; 0.927 mmol，1當(dāng)量)溶解在24 ml THF/甲醇 (5:1)中，加入4.6 ml 1 N氫氧化鋰水溶液(4.6 mmol，5當(dāng)量) 并溫?zé)嶂?0℃并在該溫度下攪拌4 h。冷卻該混合物，用6 N 鹽酸酸化至pH 4并濃縮。將水加入殘余物中并用二氯甲烷多次萃取。合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥，過濾并濃縮。得到145 mg 標(biāo)題化合物(理論值的35%)，將其不經(jīng)進(jìn)一步提純就進(jìn)行進(jìn)一步轉(zhuǎn)化。
實(shí)施例26A
6-氯-8-[(2,3-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
步驟a): 2-氨基-5-氯吡啶-3-醇
類似于實(shí)施例14A的制備，將5-氯-2-硝基吡啶-3-醇 (實(shí)施例12A)硝基還原成2-氨基-5-氯吡啶-3-醇；收率84% (包含33%的脫氯產(chǎn)物)。
步驟b): 5-氯-3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺
使2-氨基-5-氯吡啶-3-醇與1.1 當(dāng)量2,3-二氟芐基溴化物和2.2 當(dāng)量碳酸銫在DMF 中反應(yīng)(15 min 在50℃)，水性后處理，用乙酸乙酯萃取，隨后色譜分離有機(jī)殘余物(梯度: 環(huán)己烷/乙酸乙酯 8:1至純乙酸乙酯)，得到5-氯-3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺；收率10%。
步驟c): 6-氯-8-[(2,3-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
環(huán)化(類似于實(shí)施例15A的制備)，生成6-氯-8-[(2,3-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯；收率48%。
步驟d): 6-氯-8-[(2,3-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
酯皂化(類似于實(shí)施例16A的制備)，生成6-氯-8-[(2,3-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸；收率67%。
實(shí)施例27A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰氯鹽酸鹽
將2.0 g (6.28 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸預(yù)先放入到絕對THF中，加入4滴DMF并滴加3.19 g (25.14 mmol) 草酰氯。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物3 h。加入另外0.80 g (6.29 mmol) 草酰氯并在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物另外4 h。濃縮該反應(yīng)混合物用甲苯蒸發(fā)3次，在高真空下干燥殘余物。得到2.43 g 目標(biāo)化合物 (理論值的103%)。
實(shí)施例28A
3-氨基-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯
將150 mg (1.13 mmol) 1H-吲唑-3-胺預(yù)先放入到3 ml THF中，隨后加入320 mg (1.46 mmol) 二碳酸二叔丁酯、137 mg (1.35 mmol) 三乙胺和48 mg (0.39 mmol) 二甲基氨基吡啶，并在室溫下攪拌 1.5 h。用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)溶液并用水、飽和氯化銨水溶液和飽和氯化鈉水溶液各洗滌1次。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并濃縮濾液。借助硅膠-色譜法提純殘余物(洗脫液: 環(huán)己烷/乙酸乙酯 3/1 -> 1/1)。得到126 mg目標(biāo)化合物(理論值的48%)。
實(shí)施例29A
3-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸鹽
將100 mg (0.27 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰氯鹽酸鹽預(yù)先放入到絕對THF中懸浮，加入75 mg (0.32 mmol) 3-氨基-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯和139 mg (1.07 mmol) N,N-二異丙基乙胺并在60℃攪拌4天。過濾該反應(yīng)混合物并將濾液略濃縮，借助制備型HPLC提純(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。得到74 mg目標(biāo)化合物(理論值的43%，純度93%)。
實(shí)施例30A
4-{[(芐基氧基)羰基]氨基}-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
將300 mg 4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯 (1.9 mmol，1當(dāng)量)溶解在8 ml干燥的四氫呋喃中，依次加入0.3 ml 氯甲酸芐酯 (2.12 mmol，1.1當(dāng)量)、1.01 ml 二異丙基乙胺 (5.8 mmol，3當(dāng)量)和47 mg N,N-二甲基氨基吡啶 (0.387 mmol，0.2當(dāng)量)，并在室溫下攪拌。為提高溶解度，在30分鐘后另外添加2 ml 二甲基甲酰胺。在室溫下共計3.5 h 后，向反應(yīng)混合物中加入水，用二氯甲烷萃取3次，合并的有機(jī)相用硫酸鎂干燥，過濾并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至干燥。殘余物 (491 mg，純度81%，理論值的73%)不經(jīng)進(jìn)一步提純即用于下一反應(yīng)中。
實(shí)施例31A
[3-(羥基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸芐基酯
將493 mg 4-{[(芐基氧基)羰基]氨基}-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯 (純度81%，1.39 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到4 ml干燥的四氫呋喃中并冷卻至-78℃，加入5.5 ml 1M 氫化二異丁基鋁在甲苯中的溶液 (5.5 mmol，4當(dāng)量)。經(jīng)30分鐘，將該混合物溫?zé)嶂潦覝兀⒃谠摐囟认聰嚢枇硗? h。隨后將水加入到反應(yīng)混合物中，用二氯甲烷萃取3次，合并的有機(jī)相用硫酸鎂干燥，過濾并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至干燥。殘余物用色譜法分離(Biotage Isolera; 洗脫液: 環(huán)己烷/乙酸乙酯 梯度從6:1至純乙酸乙酯)，得到293 mg (理論值的78%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例32A
(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲醇
將290 mg [3-(羥基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸芐基酯 (1.1 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到50 ml 乙醇中，加入一藥匙尖鈀(10%的在活性炭上)，并在室溫下在1大氣壓氫氣下攪拌2 h。過濾該反應(yīng)混合物通過硅藻土，并將濾液在真空下濃縮。得到164 mg (理論值的96%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例33A
2-{4-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吡唑-1-基}乙基甲磺酸酯
將1.3 g (3.1 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-[1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺 (實(shí)施例22)溶解在7 ml 二氯甲烷中，在冰冷卻下加入0.86 ml 三乙胺 (6.14 mmol)和1.48 ml 甲磺酰氯 (3.7 mmol)。將產(chǎn)生的混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢? h。加入0.74 ml 甲磺酰氯 (1.85 mmol)，繼續(xù)攪拌另外30 min。將飽和氯化鈉水溶液加入到該反應(yīng)混合物中，干燥有機(jī)相并濃縮。粗產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步提純繼續(xù)反應(yīng)。
實(shí)施例34A
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-{1-[2-(1,3-二氧代-1,3-二氫-2H-異吲哚-2-基)乙基]-1H-吡唑-4-基}-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將312 mg 鄰苯二甲酰亞胺 (2.1 mmol)溶解在18 ml 1-甲基-2-吡咯烷酮 (NMP)中，在冰冷卻下加入7.4 ml 0.6 M 雙-(三甲基甲硅烷基)氨化鈉在甲苯 (4.4 mmol)中的溶液。在室溫下攪拌5分鐘，隨后添加894 mg (3.1 mmol) 2-{4-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吡唑-1-基}乙基甲磺酸酯 (實(shí)施例33A)和662 mg 碘化鈉 (4.4 mmol)。將產(chǎn)生的混合物在100℃攪拌16 h。隨后將水加入到反應(yīng)混合物中，用乙酸乙酯萃取4次，合并的有機(jī)相用水和飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥并濃縮。粗產(chǎn)物用色譜法提純 (Biotage Isolera，環(huán)己烷/乙酸乙酯 梯度) 。得到355 mg (理論值的35%)的標(biāo)題化合物。
表1A中示出的實(shí)施例類似于實(shí)施例48來制備，其中使合適的羧酸與商購可得的合適的胺(1-3當(dāng)量)、HATU (1-2.5當(dāng)量)和N,N-二異丙基乙胺 (3-4當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。反應(yīng)時間為1-3天。任選借助制備型HPLC提純(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1% 三氟乙酸) 或借助硅膠-色譜法提純(洗脫液-梯度: 二氯甲烷/甲醇)。任選濃縮包含產(chǎn)物的級分，殘余物溶解在乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇中，用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并將濾液濃縮。
a) 該反應(yīng)在室溫下攪拌1天，然后該反應(yīng)在60℃攪拌1天。
實(shí)施例37A
{2-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5-氟芐基}氨基甲酸叔丁酯 三氟乙酸鹽
將65 mg (0.21 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、82 mg (0.22 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和106 mg (0.82 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到0.9 ml DMF中，并在室溫下攪拌 15 min。隨后加入80 mg (0.23 mmol) (2-氨基-5-氟芐基)氨基甲酸叔丁酯 [M. Munson等人，US2004/180896]作為三氟乙酸鹽，并在60℃攪拌過夜。將33 mg (0.11 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸溶解在0.47 ml DMF中，并在室溫下，在單獨(dú)的反應(yīng)燒瓶中與41 mg (0.11 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和53 mg (0.41 mmol) N,N-二異丙基乙胺攪拌15 min。然后將該溶液加入反應(yīng)混合物中，并在60℃攪拌11 h。借助制備型HPLC提純該反應(yīng)溶液(RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。得到44 mg目標(biāo)化合物(理論值的30%)。
實(shí)施例38A
{2-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]芐基}氨基甲酸叔丁酯
將150 mg (0.47 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、358 mg (0.94 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和152 mg (1.18 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到3 ml DMF中，并在室溫下攪拌 10 min。隨后加入157 mg (0.71 mmol) (2-氨基芐基)氨基甲酸叔丁酯，并在室溫下攪拌過夜。首先在40℃攪拌過夜，然后在60℃攪拌過夜。加入大約24 ml 水，并將產(chǎn)生的沉淀繼續(xù)攪拌30min，抽濾并用水充分洗滌。得到265 mg 目標(biāo)化合物 (理論值的88%，純度大約82%)。
實(shí)施例39A
{2-[({6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]芐基}氨基甲酸叔丁酯 三氟乙酸鹽
將150 mg (0.43 mmol) 6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、323 mg (0.85 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和137 mg (1.06 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到2.7 ml DMF中，并在室溫下攪拌 10 min。隨后加入142 mg (0.64 mmol) (2-氨基芐基)氨基甲酸叔丁酯，并在60℃攪拌過夜。將大約22 ml 水加入到該反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀攪拌30 min，抽濾并用水充分洗滌。借助硅膠-色譜法提純殘余物(洗脫液: 二氯甲烷/甲醇 = 100/1)。借助制備型HPLC 再次提純粗產(chǎn)物(RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。得到153 mg目標(biāo)化合物(理論值的54%) 。
實(shí)施例40A
{2-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]芐基}氨基甲酸叔丁酯 三氟乙酸鹽
將150 mg (0.45 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、429 mg (1.13 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和146 mg (1.13 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到2.9 ml DMF中，并在室溫下攪拌 10 min。隨后加入151 mg (0.68 mmol) (2-氨基芐基)氨基甲酸叔丁酯，并在60℃攪拌過夜。加入另外50 mg (0.23 mmol) (2-氨基芐基)氨基甲酸叔丁酯，并在60℃攪拌過夜。將大約40 ml 水加入到該反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀攪拌30 min，抽濾并用水充分洗滌。借助制備型HPLC提純殘余物(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。得到112 mg目標(biāo)化合物(理論值的38%) 。
類似于實(shí)施例40A來制備表2A中示出的實(shí)施例，其中使合適的羧酸與商購可得的合適的胺(1-3當(dāng)量)、HATU (1-2.5當(dāng)量)和N,N-二異丙基乙胺 (4當(dāng)量)反應(yīng)。反應(yīng)時間為1-3天。任選借助制備型HPLC提純(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1% 三氟乙酸)和/或借助硅膠-色譜法提純(洗脫液-梯度: 二氯甲烷/甲醇或乙酸乙酯/環(huán)己烷)。任選濃縮包含產(chǎn)物的級分，殘余物溶解在乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇中，用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并將濾液濃縮。
實(shí)施例44A
{2-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5-氟芐基}氨基甲酸叔丁酯 三氟乙酸鹽
將100 mg (0.30 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、120 mg (0.32 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和156 mg (1.20 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到1.4 ml DMF中，并在室溫下攪拌 15 min。隨后加入117 mg (0.33 mmol) (2-氨基-5-氟芐基)氨基甲酸叔丁酯，并在60℃攪拌過夜。加入另外120 mg (0.32 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和78 mg (0.60 mmol) N,N-二異丙基乙胺，10min后，加入117 mg (0.33 mmol) (2-氨基-5-氟芐基)氨基甲酸叔丁酯 三氟乙酸鹽，并在60℃攪拌過夜。將乙腈和三氟乙酸加入到該反應(yīng)溶液并借助制備型HPLC迅速提純(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。得到103 mg目標(biāo)化合物(理論值的50%) 。
類似于實(shí)施例28A來制備表3A中示出的實(shí)施例，其中使合適的胺與二碳酸二叔丁酯 (1.2-2.1當(dāng)量)和4-二甲基氨基吡啶 (0.2當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。反應(yīng)時間為1-3 h。提純借助硅膠-色譜法進(jìn)行(洗脫液-梯度: 乙酸乙酯/環(huán)己烷)。
類似于實(shí)施例29A來制備表4A中示出的實(shí)施例，其中使羧酰氯與合適的胺 (1當(dāng)量)和N,N-二異丙基乙胺 (4當(dāng)量)在THF 中在60℃反應(yīng)。反應(yīng)時間為4-6天。任選借助制備型HPLC提純(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1% 三氟乙酸)和/或借助硅膠-色譜法提純(洗脫液-梯度: 二氯甲烷/甲醇)。任選濃縮包含產(chǎn)物的級分，殘余物溶解在乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇中，并用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并將濾液濃縮。
實(shí)施例49A
2-(5-甲基-4-硝基-1H-吡唑-3-基)丙-2-醇
將2.23 g (12.05 mmol) 5-甲基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯 [記載于：DE 1945430，Minnesota Mining and Manufacturing Co.]預(yù)先放入到89 ml干燥的四氫呋喃中。在-50℃，滴加26.35 ml (42.16 mmol) 甲基鋰 (1.6 M在乙醚中)，并使其緩慢升至0℃。再次將該反應(yīng)混合物冷卻到-50℃，加入7.52 ml (12.04 mmol) 甲基鋰 (1.6 M在乙醚中) 并使其緩慢升至0℃。用二氯甲烷稀釋該反應(yīng)溶液，并用飽和氯化銨水溶液洗滌。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并用旋蒸儀濃縮。粗產(chǎn)物借助硅膠-色譜法提純(洗脫液: 二氯甲烷至二氯甲烷/甲醇 = 50/1)。得到640 mg目標(biāo)化合物(理論值的29%) 。
實(shí)施例50A
2-(4-氨基-5-甲基-1H-吡唑-3-基)丙-2-醇 三氟乙酸鹽
將得自實(shí)施例49A的175 mg (0.95 mmol) 2-(5-甲基-4-硝基-1H-吡唑-3-基)丙-2-醇預(yù)先放入到20 ml 乙醇/乙酸乙酯中，加入596 mg (9.45 mmol) 甲酸銨和75 mg 鈀(10%在活性炭上)，并在80℃攪拌4 h。過濾該反應(yīng)混合物通過微孔過濾器，用乙醇/乙酸乙酯洗滌，并在旋蒸儀上濃縮濾液。粗產(chǎn)物借助制備型HPLC提純(RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%TFA)。得到179 mg目標(biāo)化合物(理論值的68%) 。
實(shí)施例51A
2-氯-3-環(huán)丙基-3-氧代丙酸乙酯
將3.1 ml 磺酰氯 (38.2 mmol，1.05當(dāng)量)預(yù)先放入到21 ml 二氯甲烷中，在水浴上滴加5.68 g 3-環(huán)丙基-3-氧代丙酸乙酯 (36.4 mmol)。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物2 h，然后用水、5%的碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌該混合物，用硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物 (6.8 g) 不經(jīng)進(jìn)一步提存繼續(xù)使用。
實(shí)施例52A
2-環(huán)丙基-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將1.69 g 3-[(2,6-二氟芐基)氧基]吡啶-2-胺 (實(shí)施例1A; 7.13 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到44.4 ml 乙醇中，加入425 g 制成粉末的分子篩 (3?)和6.8 g 2-氯-3-環(huán)丙基-3-氧代丙酸乙酯 (得自實(shí)施例51A的粗產(chǎn)物)。將產(chǎn)生的反應(yīng)混合物加熱回流48 h，然后濃縮，殘余物用色譜法分離 (洗脫液: 環(huán)己烷/乙酸乙酯)。合并包含產(chǎn)物的級分，并濃縮。將如此得到的殘余物置于甲醇、二甲亞砜和水中，濾出產(chǎn)生的固體并干燥。得到410 mg (理論值的15.4%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例53A
2-環(huán)丙基-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將410 mg 2-環(huán)丙基-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯 (實(shí)施例52A，1.1 mmol，1當(dāng)量)預(yù)先放入到15 ml 甲醇/四氫呋喃 (1:1)中，加入5.5 ml 1 N氫氧化鋰水溶液(5.5 mmol，5當(dāng)量)。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物過夜，在此之后反應(yīng)轉(zhuǎn)化尚未完全。加入另外5.5 ml 1 N氫氧化鋰水溶液，并在室溫下攪拌另外一夜。濃縮該混合物，將殘余物置于中水并用1N水性鹽酸酸化。濾出析出的產(chǎn)物并在高真空下干燥。得到293 mg (理論值的77%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例54A
3-(芐基氧基)-5-溴吡啶-2-胺
將200 g (1 mol) 2-氨基-3-芐基氧基吡啶預(yù)先放入到4 l 二氯甲烷中，并在0℃經(jīng)30 min加入62 ml (1.2 mol) 溴在620 ml 二氯甲烷中的溶液。添加結(jié)束后在0oC攪拌該反應(yīng)溶液 60 min。然后用大約4 l 飽和碳酸氫鈉溶液猝滅該混合物。除去有機(jī)相并濃縮。殘余物借助硅膠柱色譜法提純 (石油醚/乙酸乙酯 = 6:4) 并濃縮產(chǎn)物級分。得到214 g (理論值的77%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例55A
8-(芐基氧基)-6-溴-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
在氬氣下，將200 g (0.72 mol) 3-(芐基氧基)-5-溴吡啶-2-胺、590 g (3.58 mol) 2-氯乙酰乙酸乙酯和436 g 3A 分子篩懸浮在6 l 乙醇中，并在回流下加熱72 h。該反應(yīng)混合物抽濾通過硅藻土并濃縮。借助硅膠-色譜法提純殘余物(石油醚:乙酸乙酯 = 9:1，然后6:4)和濃縮產(chǎn)物級分。得到221 g (理論值的79%) 目標(biāo)化合物。
實(shí)施例56A
8-(芐基氧基)-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
在氬氣下，將得自實(shí)施例55A的105 g (270 mmol) 8-(芐基氧基)-6-溴-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯懸浮在4.2 l 1,4-二噁烷中，依次加入135.4 g (539 mmol，純度50%) 三甲基環(huán)三硼氧烷、31.2 g (27 mmol) 四(三苯基膦)鈀(0)和78.3 g (566 mmol) 碳酸鉀，并在回流下攪拌8h。將冷卻到室溫的反應(yīng)混合物經(jīng)由硅膠抽吸濾出沉淀，并濃縮濾液。殘余物溶解在二氯甲烷中并借助硅膠-色譜法提純(二氯甲烷:乙酸乙酯 = 9:1)。得到74 g (理論值的84.6%) 目標(biāo)化合物。
實(shí)施例57A
8-羥基-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將得自實(shí)施例56A的74 g (228 mmol) 8-(芐基氧基)-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯預(yù)先放入到1254 ml 二氯甲烷和251 ml 乙醇中，在氬氣下加入20.1 g 10%的活性炭載鈀 (水潤濕，50%) ，在室溫和常壓下氫化過夜。將該反應(yīng)混合物抽濾通過硅藻土并濃縮。粗產(chǎn)物借助硅膠-色譜法提純 (二氯甲烷:甲醇 = 95:5)。得到50.4 g (理論值的94%) 目標(biāo)化合物。
實(shí)施例58A
2,6-二甲基-8-[4,4,4-三氟-3-(三氟甲基)丁氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將得自實(shí)施例57A的1.89 g (8.07 mmol) 8-羥基-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯預(yù)先放入到60 ml DMF中，加入7.89 g (24.2 mol) 碳酸銫和2.30 g (8.88 mmol) 4,4,4-三氟-3-(三氟甲基)丁基溴化物，在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物90 min。將60 ml 水加入到該反應(yīng)混合物中，濾出形成的固體，過濾殘余物用100 ml 水和2次用20 ml MTBE洗滌。過濾從濾液中析出的沉淀，用母液洗滌。將兩次的過濾殘余物置于50 ml 乙酸乙酯中，在旋蒸儀上濃縮該溶液，在真空下干燥殘余物過夜。得到2.25 g目標(biāo)化合物 (理論值的64%)。
實(shí)施例59A
2,6-二甲基-8-[4,4,4-三氟-3-(三氟甲基)丁氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將得自實(shí)施例58A的1.95 g (4.73 mmol) 2,6-二甲基-8-[4,4,4-三氟-3-(三氟甲基)丁氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯預(yù)先放入到30 ml 甲醇中，加入3.28 g (10.4 mmol) 氫氧化鋇-八水合物，并在室溫下攪拌 3天。用30 ml 水稀釋該懸浮液，并用1M水性鹽酸調(diào)節(jié)至pH 6。濾出固體，用50 ml 水洗滌，在真空下在70℃干燥2 h。得到1.64 g 目標(biāo)化合物 (理論值的81%，90%純度)。
實(shí)施例60A
(3,3-二氟環(huán)丁基)甲磺酸甲酯
將1.35 g (11.06 mmol) (3,3-二氟環(huán)丁基)甲醇預(yù)先放入到41.8 ml 絕對二氯甲烷中，加入3.08 ml (22.11 mmol) 三乙胺和1.03 ml (13.27 mmol) 甲磺酰氯，在室溫下攪拌過夜。將水加入到該反應(yīng)混合物中，用二氯甲烷萃取水相2次，合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉水溶液洗滌1次，用硫酸鈉干燥并過濾，并濃縮濾液。得到2.37 g (定量收率) 目標(biāo)化合物。
實(shí)施例61A
8-[(3,3-二氟環(huán)丁基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
將得自實(shí)施例57A 的1.85 g (7.89 mmol) 8-羥基-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯和得自實(shí)施例60A的2.37 g (9.47 mmol) (3,3-二氟環(huán)丁基)甲磺酸甲酯預(yù)先放入到104.4 ml DMF中，加入10.28 g (31.56 mmol) 碳酸銫。將該反應(yīng)混合物在60℃攪拌過夜。冷卻后，過濾該反應(yīng)混合物，用洗滌乙酸乙酯固體，濃縮濾液，將大約150 ml 的水加入到殘余物中。濾出形成的固體，并在高真空下干燥。得到2.51 g (理論值的89%) 的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例62A
8-[(3,3-二氟環(huán)丁基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
將得自實(shí)施例61A的2.39 g (7.06 mmol) 8-[(3,3-二氟環(huán)丁基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯溶解在151 ml THF/甲醇 (5/1)中，加入35.3 ml (35.3 mmol) 1 N氫氧化鋰水溶液，并在室溫下攪拌 2天。將該反應(yīng)混合物用1N的鹽酸水溶液酸化至pH 4，然后濃縮。抽濾固體，用水洗滌并在高真空下干燥。得到1.63 g (理論值的71%)的標(biāo)題化合物。
工作實(shí)施例
實(shí)施例1
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-N-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將75 mg (0.24 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、91 mg (0.28 mmol) (苯并三唑-1-基氧基)雙二甲基氨基甲基鎓氟硼酸鹽(TBTU)和143 mg (1.41 mmol) 4-甲基嗎啉預(yù)先放入到1.5 ml DMF中，隨后加入63 mg (0.35 mmol) 吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺鹽酸鹽，并在室溫下攪拌過夜。將大約12 ml 水加入到該反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀攪拌另外30 min，抽濾并用水充分洗滌。沉淀用1.5 ml 乙腈攪拌，抽濾，在高真空下干燥過夜。得到71 mg目標(biāo)化合物(理論值的70%)。
類似于實(shí)施例1制備表1中示出的實(shí)施例，其中使8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸與商購可得的合適的胺在通用工作規(guī)程1中描寫的反應(yīng)條件下反應(yīng)：
1) 在用乙腈攪拌后，將沉淀再次借助制備型TLC (二氯甲烷:甲醇 = 10:1)然后借助制備型HPLC [Sunfire C 18，5 μm，250 x 20 mm，洗脫液: 50% 甲醇，40% 水，10%的1%的 三氟乙酸水溶液]提純。
實(shí)施例22
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-[1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將70 mg 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例3A; 0.22 mmol，1當(dāng)量)、109 mg O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU; 0.286 mmol，1.3當(dāng)量)和153 μl N,N-二異丙基乙胺 (DIPEA; 0.880 mmol，4當(dāng)量)預(yù)先放入到1 ml DMF中，加入54 mg 2-(4-氨基-1H-吡唑-1-基)乙烷-1-醇鹽酸鹽 (0.33 mmol，1.5當(dāng)量) 并在室溫下攪拌過夜。將水加入到反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀攪拌另外5 min，抽濾并用水充分洗滌，在高真空下干燥過夜。得到70 mg (理論值的75%)標(biāo)題化合物。
類似于實(shí)施例22制備表2中示出的實(shí)施例，其中使8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例3A)與商購可得的合適的胺在所述通用工作規(guī)程2中描寫的反應(yīng)條件下反應(yīng)：
實(shí)施例38
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(1-乙基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將50 mg (0.16 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、149 mg (0.39 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和51 mg (0.39 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到1 ml DMF中，攪拌20 min，隨后加入44 mg (0.31 mmol) 1-乙基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-胺，并在室溫下攪拌過夜。隨后加入另外11 mg (0.08 mmol) 1-乙基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-胺，并在室溫下攪拌 2 h。加入大約8 ml 水并將該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取3次。濃縮合并的有機(jī)相并借助制備型HPLC提純殘余物(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。然后濃縮包含產(chǎn)物的級分，并用制備型薄層層析提純(二氯甲烷:甲醇 = 15:1)。得到25 mg目標(biāo)化合物 (理論值的36% ) 。
實(shí)施例39
6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將60 mg 6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例16A; 0.17 mmol，1當(dāng)量)、84 mg O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU; 0.221 mmol，1.3當(dāng)量)和84 μl N,N-二異丙基乙胺 (DIPEA; 0.51 mmol，3當(dāng)量)預(yù)先放入到0.5 ml DMF中，加入27 mg 4-氨基-3,5-二甲基異噁唑(0.24 mmol，1.4當(dāng)量)，并在室溫下攪拌 4 h。將水加入到反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀攪拌另外5 min，抽濾并用水充分洗滌，在高真空下干燥過夜。得到63 mg (理論值的79% )標(biāo)題化合物，為米色晶體。
類似于實(shí)施例39制備表3中示出的實(shí)施例，其中使6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例16A)與商購可得的合適的胺在所述典型的工作規(guī)程2中描寫的反應(yīng)條件下反應(yīng)：
實(shí)施例48
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-6-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將80 mg 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-6-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例11A; 0.24 mmol，1當(dāng)量)、118 mg O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU; 0.31 mmol，1.3當(dāng)量)和118 μl N,N-二異丙基乙胺 (DIPEA; 0.714 mmol，3當(dāng)量)預(yù)先放入到0.75 ml DMF中，加入37 mg 3,5-二甲基-1H-吡唑-4-胺 (0.33 mmol，1.4當(dāng)量) 并在室溫下攪拌過夜。將水加入該反應(yīng)溶液中，抽濾，用水洗滌，在高真空下干燥過夜。得到97 g (理論值的93%)標(biāo)題化合物，為淺米色晶體。
類似于實(shí)施例48來制備表4中示出的實(shí)施例，其中使各自的羧酸(例如實(shí)施例6A，21A，23A，25A或26A)分別與3,5-二甲基-1H-吡唑-4-胺在典型工作規(guī)程2中描述的反應(yīng)條件下反應(yīng)：
實(shí)施例54
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(6-氟喹啉-4-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將150 mg (0.47 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、448 mg (1.18 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和152 mg (1.18 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到3 ml DMF中，并在室溫下攪拌 20 min。隨后加入153 mg (0.94 mmol) 6-氟喹啉-4-胺，并在室溫下攪拌過夜。向反應(yīng)混合物中加入另外38 mg (0.24 mmol) 6-氟喹啉-4-胺，并在60℃攪拌過夜。將大約100 ml 水加入到該反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀攪拌另外30 min，抽濾并用水充分洗滌。獲得的殘余物借助硅膠-色譜法提純(洗脫液: 二氯甲烷:甲醇 = 50:1)。獲得的粗產(chǎn)物用乙腈攪拌并濾出。得到80 mg目標(biāo)化合物(理論值的37%)。
實(shí)施例55
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-N-(5-甲基-3-苯基-1,2-噁唑-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將75 mg (0.24 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、179 mg (0.47 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和76 mg (0.59 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到1.5 ml DMF中，攪拌10 min，加入63 mg (0.35 mmol) 5-甲基-3-苯基-1,2-噁唑-4-胺，并在室溫下攪拌過夜。然后在40℃攪拌該反應(yīng)混合物過夜，隨后在60℃攪拌過夜。將大約24 ml 水加入到該反應(yīng)溶液中，攪拌形成的沉淀另外30 min，抽濾，用水充分洗滌，借助制備型HPLC提純(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。濃縮包含產(chǎn)物的級分，將殘余物溶解在乙酸乙酯中并少許飽和碳酸氫鈉水溶液用洗滌2次。濃縮有機(jī)相，將殘余物溶解在乙腈/水中，并凍干。得到26 mg目標(biāo)化合物(理論值的22%，純度95%)。
類似于實(shí)施例55制備表5中示出的實(shí)施例，其中使8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例3A)與合適的商購可得的胺在通用工作規(guī)程 1中描述的條件下反應(yīng):
實(shí)施例57
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-N-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將50 mg (0.16 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸、149 mg (0.39 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和51 mg (0.39 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到1 ml DMF中，攪拌20 min，然后加入39 mg (0.31 mmol) 1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-胺，并在60℃攪拌過夜。將大約20 ml 水加入到該反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀攪拌另外30 min，抽濾并用水充分洗滌。得到46 mg目標(biāo)化合物(理論值的65%，純度95%)。
類似于實(shí)施例57制備表6中示出的實(shí)施例，其中使8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例3A)與合適的商購可得的胺在所述通用工作規(guī)程中描述的條件下反應(yīng)。任選地，借助制備型HPLC提純 (RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。任選濃縮包含產(chǎn)物的級分，殘余物溶解在乙酸乙酯中，用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并將濾液濃縮。
實(shí)施例60
N-(8-氯萘-1-基)-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺 三氟乙酸鹽
將70 mg (0.22 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸預(yù)先放入到3 ml THF中，加入44 mg (0.33 mmol) 1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺，并在室溫下攪拌30 min。47 mg (0.26 mmol) 8-氯萘-1-胺隨后加入，并將該懸浮液在室溫下攪拌過夜。加入另外44 mg (0.33 mmol) 1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺，并將該懸浮液在室溫下攪拌過夜。濃縮該反應(yīng)混合物，粗產(chǎn)物借助制備型HPLC提純(RP18柱，洗脫液: 甲醇/水 梯度，添加0.1%TFA)。得到81 mg目標(biāo)化合物(理論值的62% )。
類似于實(shí)施例60制備表7中示出的實(shí)施例，其中使8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例3A)與商購可得的合適的胺在所述通用工作規(guī)程3中描述的條件下反應(yīng)。
實(shí)施例76
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-N-[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將384 mg (1.03 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰氯鹽酸鹽預(yù)先放入到37 ml 絕對THF中，然后加入204 mg (1.24 mmol) 5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-胺和532 mg (4.12 mmol) N,N-二異丙基乙胺在5.4 ml 絕對THF中的溶液，并在室溫下攪拌過夜。濃縮反應(yīng)溶液，用少量乙腈再次溶解，并加入水。將產(chǎn)生的固體攪拌大約30 min，過濾，并用水充分洗滌。得到428 mg目標(biāo)化合物(理論值的87%)。
實(shí)施例77
N-(7-氯喹啉-4-基)-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將70 mg (0.19 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰氯鹽酸鹽預(yù)先放入到7 ml 絕對THF中，隨后加入40 mg (0.23 mmol) 7-氯喹啉-4-胺和97 mg (0.75 mmol) N,N-二異丙基乙胺，并在室溫下攪拌過夜。隨后借助制備型HPLC提純該反應(yīng)溶液(RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。濃縮包含產(chǎn)物的級分，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并濃縮濾液。粗產(chǎn)物借助硅膠-色譜法提純(洗脫液: 二氯甲烷:甲醇 = 40:1 恒溶劑)。得到34 mg目標(biāo)化合物(理論值的37%)。
類似于實(shí)施例76和77制備表8中示出的實(shí)施例，其中使8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰氯鹽酸鹽 (實(shí)施例27A)與商購可得的合適的胺在所述通用工作規(guī)程4中描述的條件下反應(yīng)。
實(shí)施例80
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(1H-吲唑-3-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將1.7 ml 1M 氯化氫在乙醚中的溶液加入到110 mg (0.17 mmol) 3-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸鹽中，并在室溫下攪拌過夜。加入同樣量的1M 氯化氫在二噁烷中的溶液，在40℃攪拌過夜。 重新加入同樣量的1M 氯化氫在二噁烷中的溶液，并在60℃攪拌12 h。濃縮該反應(yīng)混合物，借助制備型HPLC提純殘余物(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。將所得產(chǎn)物溶解在乙酸乙酯中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并濃縮濾液。將產(chǎn)物溶解在乙腈/水中并凍干。得到60 mg目標(biāo)化合物(理論值的82%)。
實(shí)施例81
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(1H-吲唑-3-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將70 mg 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例3A; 0.22 mmol，1當(dāng)量)、109 mg O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU; 0.286 mmol，1.3當(dāng)量)和109 μl N,N-二異丙基乙胺 (DIPEA; 0.66 mmol，3當(dāng)量)預(yù)先放入到0.7 ml DMF中，加入39 mg (4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲醇 (實(shí)施例30A; 0.31 mmol，1.4當(dāng)量)，并在室溫下攪拌過夜。將水加入到反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀攪拌另外5 min，抽濾并用水充分洗滌，在高真空下干燥過夜。獲得的粗產(chǎn)物進(jìn)一步借助HPLC提純(柱： Macherey-Nagel VP 50/21 Nucleodur C18 Gravity，5 μm商品目錄號: 762103.210，序列號: E9051009，Batch 37508074，50 x 21 mm，梯度: A = 水 + 0.1% 濃氨水，B = 甲醇，0 min = 30 % B，2 min = 30% B，6 min = 100% B，7 min = 100% B，7.1 min = 30% B，8 min=30% B，流速 25 ml/min，波長220 nm)，得到21.5 mg (理論值的22%)的標(biāo)題化合物。
表9中示出的實(shí)施例類似于實(shí)施例1來制備，其中使合適的羧酸與商購可得的合適的胺(1-3當(dāng)量)、TBTU (1-2.5當(dāng)量)和4-甲基嗎啉 (4-5當(dāng)量)反應(yīng)。反應(yīng)時間為1-3天。任選地，提純借助制備型HPLC進(jìn)行(RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)和/或借助硅膠-色譜法提純(洗脫液-梯度: 二氯甲烷/甲醇)。任選濃縮包含產(chǎn)物的級分，將殘余物溶解在乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇中，用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并將濾液濃縮。
a) 反應(yīng)溫度為50℃。
表10中示出的實(shí)施例類似于實(shí)施例48來制備，其中使合適的羧酸與商購可得的合適的胺(1-3當(dāng)量)、HATU (1-2.5當(dāng)量)和N,N-二異丙基乙胺 (4-6當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。反應(yīng)時間為1-3天。任選地，提純借助制備型HPLC進(jìn)行(RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)和/或借助硅膠-色譜法提純(洗脫液-梯度: 二氯甲烷/甲醇)。任選濃縮包含產(chǎn)物的級分，將殘余物溶解在乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇中，用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并將濾液濃縮。
實(shí)施例91
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(6-氟喹啉-4-基)-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將100 mg (0.30 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例21A)、73 mg (0.45 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和97 mg (0.75 mmol) N,N-二異丙基乙胺預(yù)先放入到1.9 ml DMF中，攪拌20 min，隨后加入73 mg (0.45 mmol) 6-氟喹啉-4-胺，并在60℃攪拌2天。將大約40 ml 水加入到該反應(yīng)溶液中，將產(chǎn)生的沉淀攪拌另外30 min，抽濾并用水充分洗滌。殘余物溶解在乙腈中，借助制備型HPLC提純(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%TFA)。將產(chǎn)物級分置于二氯甲烷中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌1次并濃縮。粗產(chǎn)物用乙腈攪拌并濾出固體。得到16 mg目標(biāo)化合物(理論值的11%) 。
表11中示出的實(shí)施例類似于實(shí)施例91來制備，其中使合適的羧酸與商購可得的合適的胺(1-3當(dāng)量)、HATU (1-2.5當(dāng)量)和N,N-二異丙基乙胺 (4當(dāng)量)反應(yīng)。反應(yīng)時間為1-3天。任選地，提純借助制備型HPLC進(jìn)行(RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)和/或借助硅膠-色譜法提純(洗脫液-梯度: 二氯甲烷/甲醇)。任選濃縮包含產(chǎn)物的級分，將殘余物溶解在乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇中，用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并將濾液濃縮。
a) 進(jìn)行進(jìn)一步的色譜分離：Sunfire C18，5 μm，250 x 20 mm，甲醇:1%的 TFA溶液 (30:70)，流速: 25 ml/min，波長: 210 nm，溫度: 40℃。
表12中示出的實(shí)施例類似于實(shí)施例76和77來制備，其中使合適的羧酰氯與商購可得的合適的胺(0.3-2當(dāng)量)和N,N-二異丙基乙胺 (2-4當(dāng)量)反應(yīng)。反應(yīng)時間為1-5天。任選地，提純借助制備型HPLC進(jìn)行(RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸) 或借助硅膠-色譜法提純(洗脫液-梯度: 二氯甲烷/甲醇)。任選濃縮包含產(chǎn)物的級分，將殘余物溶解在乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇中，用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并將濾液濃縮。
a) 反應(yīng)溫度為40℃。
實(shí)施例103
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-N-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-3-基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將82 mg (0.22 mmol) 1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-3-胺懸浮在7.1 ml THF中，加入47 mg (0.22 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰氯鹽酸鹽 (實(shí)施例27A)和0.15 ml N,N-二異丙基乙胺在1.1 ml THF中的溶液，并在室溫下攪拌過夜。隨后，將該反應(yīng)溶液在40℃下攪拌過夜。將82 mg (0.22 mmol) 1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-3-胺加入到該反應(yīng)溶液中，在40℃攪拌過夜。然后，將82 mg (0.22 mmol) 1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-3-胺和0.038 ml N,N-二異丙基乙胺加入到該反應(yīng)溶液中，在40℃攪拌過夜。略微濃縮反應(yīng)溶液，加入TFA，并借助制備型HPLC提純 (RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%TFA)。進(jìn)行另外的色譜分離[XBridge C 18，5 μm，100 x 30 mm; 洗脫液: 水/乙腈/在水中1%的 TFA = 65/30/5); 流速: 25 ml/min，波長: 210 nm]。將產(chǎn)物級分溶解在二氯甲烷中并用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌1次。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并用旋蒸儀濃縮。得到45 mg目標(biāo)化合物(理論值的40%)。
實(shí)施例104
N-[2-(氨基甲基)苯基]-6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將151 mg (0.27 mmol) {2-[({6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]芐基}氨基甲酸叔丁酯 三氟乙酸鹽 (實(shí)施例39A)懸浮在1.4 ml 乙醚中，加入1.35 ml (2.7 mmol) 2 M 氯化氫在乙醚中的溶液，并在室溫下攪拌過夜。抽濾沉淀，用乙醚洗滌，借助制備型HPLC提純(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)。所得產(chǎn)物溶解在乙酸乙酯中并用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并濃縮濾液。得到92 mg目標(biāo)化合物(理論值的74%)。
表13中示出的實(shí)施例類似于實(shí)施例104來制備，其中使合適的被保護(hù)的胺與鹽酸 (10-15當(dāng)量; 1 M或2 M在乙醚中)反應(yīng)。反應(yīng)時間為5 h - 3天。任選地，提純借助制備型HPLC進(jìn)行(RP18柱; 洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%三氟乙酸)和/或借助硅膠-色譜法提純(洗脫液-梯度: 二氯甲烷/甲醇)。任選濃縮包含產(chǎn)物的級分，將殘余物溶解在乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇中，用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并將濾液濃縮。
任選地，用乙醚稀釋該反應(yīng)混合物，過濾出沉淀并在乙酸乙酯或二氯甲烷和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。有機(jī)相用飽和氯化鈉水溶液洗滌1次，用硫酸鈉干燥并過濾，并將濾液濃縮并在高真空下干燥。
實(shí)施例110
N-[2-(氨基甲基)-4-氟苯基]-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將58 mg (0.09 mmol) {2-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5-氟芐基}氨基甲酸叔丁酯 三氟乙酸鹽 (實(shí)施例37A)懸浮在2.5 ml 乙醚中，加入0.44 ml (0.89 mmol) 2 M 氯化氫在乙醚中的溶液，并在室溫下攪拌過夜。加入另外0.88 ml 2 M的氯化氫在乙醚中的溶液，并在室溫下攪拌過夜。在旋蒸儀上濃縮該反應(yīng)混合物，加入2 ml 4 N 氯化氫在二噁烷中的溶液，在40℃下攪拌6 h。過濾該反應(yīng)混合物并用乙醚充分洗滌。將殘余物溶解在帶有少許甲醇的二氯甲烷中，并用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌1次。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并用旋蒸儀濃縮。得到25 mg目標(biāo)化合物(理論值的59% ，純度92%)。
實(shí)施例111
N-[2-(氨基甲基)苯基]-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將2.54 ml (5.07 mmol) 2 M 氯化氫在乙醚中的溶液加入到265 mg (0.51 mmol) {2-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]芐基}氨基甲酸叔丁酯 (實(shí)施例38A)中，并在室溫下攪拌 5.5 h。抽濾沉淀，用乙醚洗滌，粗產(chǎn)物借助硅膠-色譜法提純(洗脫液: 二氯甲烷:甲醇 40:1 -> 20:1)。然后借助制備型HPLC再提純(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%TFA)。濃縮包含產(chǎn)物的級分，將殘余物溶解在乙酸乙酯中并用少許飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌2次。濃縮有機(jī)相，將殘余物溶解在乙腈/水中并凍干。得到89 mg目標(biāo)化合物(理論值的39%，純度95%)。
實(shí)施例112
N-[2-(氨基甲基)苯基]-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將110 mg (0.17 mmol) {2-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]芐基}氨基甲酸叔丁酯三氟乙酸鹽 (實(shí)施例40A)懸浮在4 ml 乙醚中，加入3.38 ml (3.38 mmol) 1 M 氯化氫在乙醚中的溶液，并在室溫下攪拌過夜。隨后加入3 ml 2 M氯化氫在乙醚中的溶液，并在室溫下繼續(xù)攪拌過夜。抽濾沉淀，用乙醚洗滌。將固體懸浮在二氯甲烷和少許甲醇中，并用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾，在旋蒸儀上濃縮并在高真空下干燥。得到61 mg目標(biāo)化合物(理論值的83%) 。
實(shí)施例113
N-[2-(氨基甲基)-4-氟苯基]-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將100 mg (0.15 mmol) {2-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5-氟芐基}氨基甲酸叔丁酯 三氟乙酸鹽 (實(shí)施例44A)懸浮在0.7 ml 乙醚中，加入0.75 ml (1.50 mmol) 2 M 氯化氫在乙醚中的溶液，并在室溫下攪拌過夜。然后在旋蒸儀上濃縮該反應(yīng)混合物，置于2 ml 二噁烷中，加入0.19 ml 4 N 氯化氫在二噁烷中的溶液，在40℃攪拌4 h。向該反應(yīng)混合物中加入另外1 ml 4 N 氯化氫在二噁烷中的溶液，并在40℃攪拌過夜。過濾出沉淀并用乙醚充分洗滌。將殘余物置于二氯甲烷和少許甲醇中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并用旋蒸儀濃縮。得到55 mg目標(biāo)化合物(理論值的80%)。
實(shí)施例114
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-N-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-3-基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將47 mg (0.07 mmol) 3-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-1-甲酸叔丁基酯 (實(shí)施例47A)懸浮在0.3 ml 乙醚中，加入0.33 ml (0.66 mmol) 2 M 氯化氫在乙醚中的溶液，并在室溫下攪拌過夜。然后濃縮該反應(yīng)混合物，將殘余物置于2 ml 二噁烷中，加入0.08 ml 4 N 氯化氫在二噁烷中的溶液，在40℃攪拌4 h。向該反應(yīng)混合物中加入1 ml 4 N 氯化氫在二噁烷中的溶液，并在40℃攪拌過夜。向該反應(yīng)混合物中加入另外1 ml 4 N 氯化氫在二噁烷中的溶液，并在40℃攪拌5 h。過濾出沉淀并用乙醚充分洗滌。將殘余物置于二氯甲烷和少許甲醇中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾并濃縮。得到25 mg目標(biāo)化合物(理論值的74%)。
實(shí)施例115
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(5-氟-1H-吲唑-3-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將26 mg (0.05 mmol) 3-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5-氟-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯 (實(shí)施例48A)懸浮在0.2 ml 乙醚中，加入0.24 ml (0.47 mmol) 2 M 氯化氫在乙醚中的溶液，并在室溫下攪拌過夜。過濾沉淀，用乙醚充分洗滌并在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。用乙酸乙酯萃取水相2次，合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并過濾，將濾液濃縮并凍干。將粗產(chǎn)物再次溶解在乙酸乙酯中，并用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌2次，用硫酸鈉干燥有機(jī)相并過濾，將濾液濃縮并凍干。粗產(chǎn)物溶解在乙酸乙酯中并用水洗滌2次，用硫酸鈉干燥有機(jī)相并過濾，將濾液濃縮并凍干。得到16 mg目標(biāo)化合物(理論值的71%，純度95%)。
實(shí)施例116
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-[1-(2-羥基乙基)-5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將20 mg (0.043 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-N-[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺 (實(shí)施例76)預(yù)先放入到0.24 ml DMF中，隨后加入36.4 mg (0.112 mmol) 碳酸銫、0.7 mg (0.004 mmol) 碘化鉀和7 mg (0.056 mmol) 溴乙醇，在50℃下攪拌過夜。然后在70℃下攪拌過夜。將大約20 ml 水加入到該反應(yīng)溶液中。將產(chǎn)生的固體攪拌大約30 min，過濾，并用水充分洗滌。得到10.5 mg目標(biāo)化合物(理論值的48%)。
表14中示出的實(shí)施例類似于實(shí)施例116來制備：
a) 后處理：析出的固體隨后借助硅膠-色譜法來提純(洗脫液-梯度: 二氯甲烷/甲醇 100/1至60/1)。濃縮產(chǎn)物級分，借助制備型HPLC提純殘余物(RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%TFA)。濃縮包含產(chǎn)物的級分，置于乙酸乙酯中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌1次，用硫酸鈉干燥并過濾，將濾液濃縮并凍干。
b) 后處理：將濾出的固體用乙腈攪拌并將殘留的固體濾出。借助厚層層析提純?yōu)V液(洗脫液: 二氯甲烷/甲醇 = 10/1)。將厚層層析的產(chǎn)物級分與所述固體合并。
類似于實(shí)施例1制備表15中示出的實(shí)施例，其中使8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸與商購可得的合適的胺在典型工作規(guī)程1中描寫的反應(yīng)條件下反應(yīng)：
類似于實(shí)施例22制備表16中示出的實(shí)施例，其中使8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例3A)與商購可得的合適的胺在所述典型工作規(guī)程2中描寫的反應(yīng)條件下反應(yīng)：
類似于實(shí)施例22制備表17中示出的實(shí)施例，其中使8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例3A)與商購可得的合適的胺在所述典型工作規(guī)程2中描寫的反應(yīng)條件下反應(yīng)，其中由于低的轉(zhuǎn)化率，使用過量較多的胺成分，并將反應(yīng)溫度提高到66℃。
類似于實(shí)施例48制備表18中示出的實(shí)施例，其中使各自的羧酸分別與商購可得的胺在典型工作規(guī)程2中描述的反應(yīng)條件下反應(yīng)：
實(shí)施例126
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-N-(4-甲基嘧啶-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
在室溫下，在氬氣保護(hù)氣下，預(yù)先置入50 mg (0.157 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例3A)，加入200 μl 亞硫酰氯并攪拌過夜。然后將該混合物在高真空下濃縮至干，并將殘余物置于300 μl干燥的THF中。在第二個燒瓶中，將21 mg 2-氨基-4-甲基嘧啶 (0.189 mmol)預(yù)先放入到200 μl干燥的THF中，在冰冷卻下加入79 μl 2.6 M 正丁基鋰溶液 (在甲苯中; 0.2 mmol)，繼續(xù)攪拌另外15分鐘。將產(chǎn)生的溶液滴加到用冰冷卻的酰氯的溶液中，將產(chǎn)生的混合物溫?zé)嶂潦覝兀嚢枇硗?6 h。在水性后處理之后通過HPLC提純(方法9)。得到16.6 mg (理論值的24%)。
實(shí)施例127
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-{1-[2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基}-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將100 mg (0.198 mmol) 2-{4-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吡唑-1-基}乙基甲磺酸酯 (實(shí)施例33A)溶解在2 ml 四氫呋喃中，依次加入119 mg 4,4-二氟哌啶 (1 mmol)、69 μl 二異丙基乙胺 (0.396 mmol)、59 mg 碘化鈉 (0.396 mmol)、83 μl 三乙胺 (0.593 mmol)和催化劑量的4-二甲基氨基吡啶，并在回流下加熱 16 h。然后用乙酸乙酯稀釋，并用水和飽和氯化鈉水溶液洗滌。用乙酸乙酯萃取水相2次。干燥合并的有機(jī)相，濃縮并借助HPLC提純 (方法7)。得到28 mg (理論值的26％)所希望的產(chǎn)物。
類似于上述實(shí)施例制備下表19中列出的實(shí)施例化合物，其中使2-{4-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吡唑-1-基}乙基甲磺酸酯 (實(shí)施例33A)與合適的商購可得的胺反應(yīng)。
實(shí)施例135
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基-N-{1-[2-(甲基磺酰基)乙基]-1H-吡唑-4-基}咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將100 mg (0.198 mmol) 2-{4-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吡唑-1-基}乙基甲磺酸酯 (實(shí)施例33A)溶解在2 ml 二甲基甲酰胺中，依次加入201 mg 甲基亞磺酸鈉 (2 mmol)和297 mg 碘化鈉 (2 mmol)，在100℃加熱4 h。然后用乙酸乙酯稀釋，并用水洗滌。用乙酸乙酯萃取水相。合并的有機(jī)相用硫代硫酸鈉溶液洗滌，干燥并濃縮，殘余物用色譜法分離(Biotage Isolera SP4，乙酸乙酯/環(huán)己烷 梯度)。得到45 mg (理論值的47%) 目標(biāo)化合物。
實(shí)施例136
N-[1-(2-氨基乙基)-1H-吡唑-4-基]-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將1 ml 40% 的甲胺水溶液加入到335 mg (0.6 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-{1-[2-(1,3-二氧代-1,3-二氫-2H-異吲哚-2-基)乙基]-1H-吡唑-4-基}-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺 (實(shí)施例34A)中，在壓力容器中，在60℃下攪拌16 h。抽濾固體，用少許水洗滌并干燥。得到195 mg (理論值的76%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例137
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(1-{2-[(乙基磺酰基)氨基]乙基}-1H-吡唑-4-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將32 mg (0.075 mmol) N-[1-(2-氨基乙基)-1H-吡唑-4-基]-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺預(yù)先放入到150 μl THF和150 μl 吡啶中，在冰冷卻下加入7.8 μl 乙基磺酰氯 (0.08 mmol)。在室溫下攪拌該反應(yīng)。分份添加另外17.8 μl 乙基磺酰氯 (0.187 mmol)并在室溫下攪拌總共48 h。然后加入小量N-甲基哌嗪，濃縮該混合物，將殘余物置于中甲醇并借助HPLC提純 (方法7)。得到8.4 mg (理論值的22%)目標(biāo)化合物，為無色晶體。
實(shí)施例138
2-{4-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吡唑-1-基}乙基 氨基甲酸酯
將100 mg (0.234 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-[1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺 (實(shí)施例22)溶解在24 ml 二氯甲烷中，在冰冷卻下加入41 μl 氯磺酰異氰酸酯 (0.468 mmol)。將產(chǎn)生的混合物溫?zé)嶂潦覝兀嚢枇硗? h。然后通過HPLC提純 (方法7)。如此得到的粗產(chǎn)物通過第二個HPLC提純 (Sunfire C 18.5 μM，250 x 20 mm，25 ml/min，恒溶劑 65% 水，30% 乙腈，在水中的1% TFA)分離成目標(biāo)化合物和下文中示出的次要成分實(shí)施例39。得到12 mg (理論值的11%) 目標(biāo)化合物。
實(shí)施例139
2-{4-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吡唑-1-基}乙基 氨基磺酸酯三氟乙酸鹽
2-{4-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吡唑-1-基}乙基 氨基磺酸酯作為副產(chǎn)物由前述2-{4-[({8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-1H-吡唑-1-基}乙基氨基甲酸酯的制備中分離出來。得到25 mg (理論值的21%)。
實(shí)施例140
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-[1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將100 mg (0.234 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-[1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺 (實(shí)施例22)溶解在1 ml 二氯甲烷中，在-78℃下加入83 μl 二乙胺基三氟化硫 (DAST) (0.632 mmol)。逐步溫?zé)嶂潦覝亍? h后，滴加另外46 μl DAST (0.35 mmol)，并將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16 h。將該反應(yīng)混合物施加到Isolute上并色譜分離(Biotage Isolera，梯度 環(huán)己烷/乙酸乙酯)。得到11.5 mg (理論值的12%)標(biāo)題化合物。
類似于上述實(shí)施例，通過6-氯-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-[1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺 (實(shí)施例46)的反應(yīng)制備下表20中列出的實(shí)施例化合物。
實(shí)施例142
2-環(huán)丙基-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-[1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將實(shí)施例53A的70 mg (0.20 mmol) 2-環(huán)丙基-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸預(yù)先放入到0.93 ml DMF中，加入39 mg (0.31 mmol) 2-(4-氨基-1H-吡唑-1-基)乙醇、100 mg (0.26 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和79 mg (0.61 mmol) N,N-二異丙基乙胺，并在室溫下攪拌過夜。將水加入到該反應(yīng)溶液中，抽濾產(chǎn)生的沉淀，用水洗滌，并在高真空下干燥。得到30 mg目標(biāo)化合物(理論值的33%)。
實(shí)施例143
N-(2-氨基-3,5-二氟苯基)-8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
預(yù)先置入17 mg (0.12 mmol) 3,5-二氟苯-1,2-二胺，加入得自實(shí)施例3A的32 mg (0.10 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸在0.4 ml DMF中的溶液、42 mg (0.13 mmol) TBTU在0.2 ml DMF中的溶液和隨后加入20 mg (0.20 mmol) 4-甲基嗎啉，在室溫下振搖過夜。借助制備型HPLC分離目標(biāo)化合物(方法6)。得到3 mg (理論值的5%)。
類似于實(shí)施例143制備表21中示出的實(shí)施例化合物，其中使得自實(shí)施例3A的8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸與合適的商購可得的胺在所述條件下反應(yīng)：
實(shí)施例147
N-(1-乙基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2,6-二甲基-8-[4,4,4-三氟-3-(三氟甲基)丁氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
預(yù)先置入11 mg (0.08 mmol) 1-乙基-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-胺，加入得自實(shí)施例59A的31 mg (0.08 mmol) 2,6-二甲基-8-[4,4,4-三氟-3-(三氟甲基)丁氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸在0.3 ml DMF中的溶液、40 mg (0.104 mmol) HATU在0.3 ml DMF中的溶液和隨后加入16 mg (0.16 mmol) 4-甲基嗎啉，在室溫下振搖過夜。借助制備型HPLC分離目標(biāo)化合物(方法6)。得到2.3 mg (理論值的6% )。
類似于實(shí)施例147制備示于表22中的實(shí)施例化合物，其中使2,6-二甲基-8-[4,4,4-三氟-3-(三氟甲基)丁氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸與合適的商購可得的胺在所述條件下反應(yīng)：
a) 替代4-甲基嗎啉，使用N,N-二異丙基乙胺 (3當(dāng)量)作為堿。反應(yīng)溫度為60℃。
實(shí)施例150
3-[3-({[8-(環(huán)己基甲氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基]羰基}氨基)苯基]丙酸
預(yù)先置入19 mg 3-(3-氨基苯基)丙酸乙酯 (0.1 mmol，1.0當(dāng)量，可能的制備根據(jù)Strawn，Laurie M.; Martell，Robert E.; Simpson，Robert U.; Leach，Karen L.; Counsell，Raymond E.; Journal of Medicinal Chemistry，1989，卷32，第2104 – 2110頁)，依次加入在0.3 ml DMSO中的29 mg 8-(環(huán)己基甲氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例6A; 0.1 mmol，1當(dāng)量)、在0.3 ml DMSO 中的41.7 mg (苯并三唑-1-基氧基)雙二甲基氨基甲基鎓氟硼酸鹽(TBTU，0.13 mmol，1.3當(dāng)量)和26 mg N,N-二異丙基乙胺 (0.2 mmol，2當(dāng)量)。在室溫下振搖該混合物過夜，然后加入0.4 ml 2 N 氫氧化鈉水溶液，并重新在室溫下振搖過夜。濃縮溶劑，借助制備型HPLC提純殘余物(方法6)。得到31 mg (理論值的72%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例151
8-[(3,3-二氟環(huán)丁基)甲氧基]-2,6-二甲基-N-[3-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將100 mg (0.322 mmol) 8-[(3,3-二氟環(huán)丁基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例62A)和135 mg (0.354 mmol) HATU預(yù)先放入到2 ml DMF中，加入0.17 ml (0.97 mmol) N,N-二異丙基乙胺和64 mg (0.387 mmol) 5-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-基胺，并在60℃攪拌過夜。加入另外135 mg (0.354 mmol) HATU和0.17 ml (0.97 mmol) N,N-二異丙基乙胺，并在60℃攪拌過夜。用1 N水性鹽酸將pH調(diào)節(jié)至pH 6，并用制備型RP-HPLC提純(乙腈/水 梯度，添加0.1%甲酸)。合并產(chǎn)物級分，并完全濃縮。得到55 mg目標(biāo)化合物(理論值的36%，純度95%)。
實(shí)施例152
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基-N-[3-(甲基磺酰基)苯基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將75 mg (0.23 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例21A)、112 mg (0.29 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和248 μl (1.42 mmol) N,N-二異丙基乙胺 (DIPEA)預(yù)先放入到0.8 ml DMF中。在室溫下攪拌該混合物20 min，隨后加入61 mg (0.29 mmol) 3-(甲基磺酰基)苯胺鹽酸鹽，并在60℃攪拌1 h。用乙腈稀釋該反應(yīng)混合物，加入水/TFA，并借助制備型HPLC提純 (RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%TFA)。濃縮包含產(chǎn)物的級分，并借助制備型厚層層析再次純化(洗脫液: 二氯甲烷/甲醇 = 50/1)。得到2.5 mg (理論值的2%; 純度90%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例153
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基-N-{3-[(甲基磺酰基)氨基]苯基}咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將75 mg (0.23 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸 (實(shí)施例21A)、112 mg (0.29 mmol) O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 (HATU)和197 μl (1.13 mmol) N,N-二異丙基乙胺 (DIPEA)預(yù)先放入到0.8 ml DMF中。在室溫下攪拌該混合物20 min，隨后加入55 mg (0.29 mmol) N-(3-氨基苯基)甲磺酰胺，并在60℃攪拌1 h。用乙腈稀釋該反應(yīng)混合物，加入水/TFA，并借助制備型HPLC提純 (RP18柱，洗脫液: 乙腈/水 梯度，添加0.1%TFA)。濃縮包含產(chǎn)物的級分，并借助制備型厚層層析再次純化(洗脫液: 二氯甲烷/甲醇 = 70/1)。得到3.4 mg (理論值的3%; 純度98%)的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例154
8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-[3,5-二甲基-1-(甲基磺酰基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
將得自實(shí)施例29的40 mg (0.10 mmol) 8-[(2,6-二氟芐基)氧基]-N-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺預(yù)先放入到0.8 ml 二氯甲烷中，加入43 μl (0.31 mmol) 三乙胺，然后加入11 μl (0.15 mmol) 甲磺酰氯。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物2 h。加入另外2 μl (0.02 mmol) 甲磺酰氯，并在室溫下攪拌30 min。用二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，并用水洗滌2次，用硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾，濃縮并在高真空下干燥。得到46 mg目標(biāo)化合物(理論值的94%，純度98%)。
B. 藥理學(xué)活性的評價
使用下列縮略語：
ATP 三磷酸腺苷
Brij35 聚氧乙烯(23)月桂基醚
BSA 牛血清白蛋白
DTT 二硫蘇糖醇
TEA 三乙醇胺。
可以在下列檢測中顯示本發(fā)明的化合物的藥理作用：
B-1. 借助PPi檢測測量sGC酶活性
可溶性鳥苷酸環(huán)化酶（sGC）在刺激下將GTP轉(zhuǎn)化成cGMP和焦磷酸鹽（PPi）。借助WO 2008/061626中描述的方法檢測PPi。該檢測中產(chǎn)生的信號隨反應(yīng)進(jìn)行提高并充當(dāng)sGC酶活性的度量。借助PPi參考曲線，該酶可以以已知方式表征，例如在轉(zhuǎn)化速率、可刺激性或米氏常數(shù)方面。
該試驗(yàn)的實(shí)施
為了進(jìn)行該檢測，將29微升酶溶液（0-10 nM可溶性鳥苷酸環(huán)化酶（根據(jù)H?nicka等人, Journal of Molecular Medicine 77(1999)14-23制備），在50 mM TEA、2 mM氯化鎂、0.1% BSA (級分V)、0.005% Brij 35中，pH 7.5）預(yù)先置入微板中，并加入1微升刺激物溶液（0-10 μM 3-嗎啉代-斯德酮亞胺（Morpholinosydnonimine）, SIN-1, Merck在DMSO中）。在室溫下培養(yǎng)10分鐘。隨后加入20微升檢測混合物（1.2 nM熒火蟲熒光素酶（Photinus pyralisLuziferase, Promega）、29 μM脫氫熒光素（根據(jù)Bitler & McElroy, Arch. Biochem. Biophys. 72 (1957) 358制備）、122 μM熒光素(Promega)、153 μM ATP (Sigma)和0.4 mM DTT (Sigma)在50 mM TEA、2 mM氯化鎂、0.1% BSA (級分 V)、0.005% Brij 35中，pH 7.5）。通過添加20微升底物溶液（1.25 mM 5'-三磷酸鳥苷(Sigma)，在50 mM TEA、2 mM氯化鎂、0.1% BSA (級分V)、0.005% Brij 35中，pH 7.5），啟動酶反應(yīng)并在光度計中連續(xù)測量。
B-2. 對重組鳥苷酸環(huán)化酶報告細(xì)胞系的作用
如F. Wunder等人, Anal. Biochem. 339, 104-112 (2005)中所述在重組鳥苷酸環(huán)化酶報告細(xì)胞系上測定本發(fā)明的化合物的細(xì)胞作用。
根據(jù)本發(fā)明的化合物的代表性MEC值(MEC = 最低有效濃度)示于下表中(在某些情況中作為各測量的平均值)：
B-3. 體外血管舒張作用
將兔子在頸背上敲昏并放血。取出主動脈，除去粘附的組織，分成1.5毫米寬的環(huán)，并在預(yù)應(yīng)力下單獨(dú)置于5毫升器官浴中，該器官浴含有具有下列組成（在每種情況下為mM）的37℃的 Carbogen加氣的克雷布斯-漢斯萊特(Krebs-Henseleit)-溶液：氯化鈉: 119；氯化鉀: 4.8；二水合氯化鈣: 1；七水合硫酸鎂: 1.4；磷酸二氫鉀: 1.2；碳酸氫鈉: 25；葡萄糖: 10。用Statham UC2-細(xì)胞記錄收縮力，經(jīng)由A/D轉(zhuǎn)換器（DAS-1802 HC, Keithley Instruments 慕尼黑）增強(qiáng)并數(shù)字化，并行記錄在線記錄器上。為了產(chǎn)生收縮，將苯腎上腺素以遞增濃度累積添加到該浴中。在幾個控制周期后，在各后繼流程中以遞增劑量加入待檢測的物質(zhì)并將收縮水平與在前一個流程中實(shí)現(xiàn)的收縮水平比較。由此計算將控制值降低50%的高度所需的濃度（IC50值）。標(biāo)準(zhǔn)施加體積為5微升，浴溶液中的DMSO的比例相當(dāng)于0.1%。
B-4. 麻醉大鼠的血壓測量
用戊硫代巴比妥（100 mg/kg i.p.）將體重300-350克的雄性Wistar大鼠麻醉。在氣管切開術(shù)后，在股動脈中插入用于測量血壓的導(dǎo)管。受試物質(zhì)作為溶液借助管飼法經(jīng)口給藥或經(jīng)股靜脈在靜脈內(nèi)給藥（Stasch等人Br. J. Pharmacol. 2002；135：344-355）。
B-5. 清醒的自發(fā)性高血壓大鼠的無線電遙測血壓測量
對下述清醒大鼠的血壓測量使用來自DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI，USA公司的市售遙測系統(tǒng)。
該系統(tǒng)由3個主要部件構(gòu)成：
可植入發(fā)射器（Physiotel?遙測發(fā)射器）
接收器（Physiotel?接收器），其經(jīng)多路轉(zhuǎn)換器（DSI Data Exchange Matrix）連向
數(shù)據(jù)采集計算機(jī)。
該遙測裝置能夠?qū)崿F(xiàn)清醒動物在它們的常見生活空間中的血壓、心率和身體活動的連續(xù)采集。
動物材料
對體重>200克的成年雌性、自發(fā)性高血壓大鼠（SHR Okamoto）進(jìn)行研究。來自O(shè)kamoto Kyoto School of Medicine，1963的SHR/NCrl由血壓極大提高的雄性Wistar Kyoto大鼠和血壓略微提高的雌性大鼠雜交而得，并在F13中運(yùn)送至U.S. National Institutes of Health。
在發(fā)射器植入后，將實(shí)驗(yàn)動物單獨(dú)飼養(yǎng)在Type 3 Macrolon籠子中。它們可隨意獲得標(biāo)準(zhǔn)飼料和水。
在早晨6:00點(diǎn)和在夜晚19:00點(diǎn)通過室內(nèi)照明輪換實(shí)驗(yàn)室中的日夜節(jié)律。
發(fā)射器植入
在初次試驗(yàn)前的至少14天，在實(shí)驗(yàn)動物中在無菌條件下手術(shù)植入所用TA11 PA – C40遙測發(fā)射器。在傷口愈合和植入物并入后，帶有這種儀器的動物可以再使用。
為了植入，用戊巴比妥（Nembutal，Sanofi：50 mg/kg i.p.）將禁食動物麻醉并在腹部的寬面積上刮毛和消毒。在沿白線打開腹腔后，在分叉點(diǎn)上方沿顱骨方向?qū)⒃撓到y(tǒng)的充滿液體的測量導(dǎo)管插入降主動脈中并用組織粘合劑（VetBonD TM，3M）固定。將發(fā)射器外殼在腹膜內(nèi)固定到腹壁肌肉系統(tǒng)上并逐層閉合傷口。
手術(shù)后，施加抗生素以防止感染（Tardomyocel COMP Bayer 1 ml/kg s.c.）。
物質(zhì)和溶液
除非另行描述，受試物質(zhì)在每種情況下通過胃管經(jīng)口給予一組動物（n = 6）。對應(yīng)于5毫升/千克體重的用量，將受試物質(zhì)溶解在合適的溶劑混合物中或懸浮在0.5% Tylose中。
用溶劑處理的一組動物用作對照。
試驗(yàn)程序
為24個動物構(gòu)造該遙測裝置。各試驗(yàn)記錄在試驗(yàn)號下（V年月日）。
生活在該裝置中的帶有儀器的大鼠各自配備它們專有的接收天線（1010 Receiver，DSI）。
植入的發(fā)射器可通過內(nèi)置磁開關(guān)從外激活。在試驗(yàn)開始時，將它們切換至發(fā)射。可通過數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)（Dataquest TM A.R.T. for WINDOWS，DSI）在線記錄發(fā)射的信號并適當(dāng)加工。數(shù)據(jù)在每種情況下儲存在為此打開的文件夾中，并帶有試驗(yàn)號。
在標(biāo)準(zhǔn)程序中，下列這些在每種情況下測量10秒：
? 收縮血壓（SBP）
? 舒張血壓（DBP）
? 平均動脈壓（MAP）
? 心率（HR）
? 活動力（ACT）。
在計算機(jī)控制下以5分鐘為間隔重復(fù)記錄測量值。在圖表中用當(dāng)前測得的氣壓（Ambient Pressure Reference Monitor；APR-1）校正作為絕對值記錄的源數(shù)據(jù)并儲存為獨(dú)立數(shù)據(jù)。可以在制造商（DSI）的大量文件中找到進(jìn)一步技術(shù)細(xì)節(jié)。
除非另行描述，在試驗(yàn)日在9:00點(diǎn)施用受試物質(zhì)。在施用后，測量上述參數(shù)24小時。
評測
在試驗(yàn)結(jié)束后，所記錄的各獨(dú)立數(shù)據(jù)用分析軟件（DATAQUEST TM A.R.T. TM ANALYSIS）分類。在此取施用前兩小時作為空白值，以使所選數(shù)據(jù)集包含從試驗(yàn)日的7:00點(diǎn)到第二天的9:00點(diǎn)的時期。
通過平均值測定（15分鐘平均值）對可預(yù)設(shè)的時間平滑數(shù)據(jù)并作為文本文件轉(zhuǎn)移到儲存介質(zhì)中。將預(yù)分類和壓縮的測量值轉(zhuǎn)移到Excel模板中并以表格形式呈現(xiàn)。每個試驗(yàn)日將記錄的數(shù)據(jù)儲存在帶有試驗(yàn)號的專用文件夾中。結(jié)果和試驗(yàn)程序歸檔在文件夾中，以紙件形式憑數(shù)字分類。
文獻(xiàn):
Klaus Witte，Kai Hu，Johanna Swiatek，Claudia Müssig，Georg Ertl和Bj?rn Lemmer: Experimental Heart Failure in rats: effects on cardiovascular circadian rhythms and on myocardial β-adrenergic signaling. Cardiovasc Res 47 (2): 203-405，2000; Kozo Okamoto: Spontaneous hypertension in rats. Int Rev Exp Pathol 7: 227- 270，1969; Maarten van den Buuse: Circadian Rhythms of Blood Pressure，Heart Rate，and Locomotor Activity in Spontaneously Hypertensive Rats as Measured With Radio-Telemetry. Physiology & Behavior 55(4): 783-787，1994。
B-6. 靜脈和口服給藥后的藥代動力學(xué)參數(shù)的測定
在雄性CD-1小鼠、雄性Wistar大鼠和雌性比格犬中測定本發(fā)明的化合物的藥代動力學(xué)參數(shù)。在小鼠和大鼠的情況中借助物種特異性的血漿/DMSO制劑，在狗的情況中借助水/PEG400/乙醇制劑進(jìn)行靜脈給藥。在所有物種中，基于水/PEG400/乙醇制劑，通過管飼法進(jìn)行溶解物質(zhì)的口服給藥。為簡化采血，在物質(zhì)給藥前將有機(jī)硅導(dǎo)管插入大鼠右頸外靜脈中。在實(shí)驗(yàn)前至少一天用異氟烷麻醉進(jìn)行手術(shù)并給予止痛劑（阿托品/Rimadyl (3/1) 0.1 ml s.c.）。在包括物質(zhì)給藥后至少24至最多72小時的終端時間點(diǎn)的時間范圍內(nèi)采血（通常大于10個時間點(diǎn)）。在采樣時，將其送入肝素化的管中。然后通過離心獲得血漿并任選儲存在-20℃下直至進(jìn)一步加工。
將內(nèi)標(biāo)（其也可以是化學(xué)無關(guān)的物質(zhì)）添加到本發(fā)明的化合物的樣品、校準(zhǔn)樣品和限定物（Qualifier）中，然后借助過量乙腈沉淀蛋白質(zhì)。在添加與LC條件匹配的緩沖液和隨后渦旋后，以1000 g離心。使用C18反相柱和可變-流動相-混合物借助LC-MS/MS測量上清液。通過來自特定選擇的離子監(jiān)測實(shí)驗(yàn)的提取離子色譜圖的峰高度和-面積量化物質(zhì)。
由測得的血漿濃度/時間曲線圖，借助核準(zhǔn)的藥代動力學(xué)計算程序計算藥代動力學(xué)參數(shù)，如AUC、Cmax、t1/2（終末半衰期）、F（生物利用度）、MRT（平均停留時間）和CL（清除率）。
由于在血漿中進(jìn)行物質(zhì)量化，必須測定該物質(zhì)的血液/血漿分布，以能相應(yīng)地調(diào)節(jié)藥代動力學(xué)參數(shù)。為此，在翻滾混合機(jī)（Taumelrollenmischer）中將指定量的物質(zhì)在相應(yīng)物種的肝素化全血中培養(yǎng)20分鐘。在以1000 g離心后，測量（借助LC-MS/MS；見上文）和通過計算C血液/C血漿值的比率來測定血漿濃度。
B-7. 代謝研究
為了測定本發(fā)明的化合物的代謝狀況，用來自各種動物物種（例如大鼠、狗）以及人類來源的重組人細(xì)胞色素P450（CYP）酶、肝微粒體或用原發(fā)性新鮮肝細(xì)胞培養(yǎng)它們，以獲得和比較關(guān)于盡可能完整的肝期I-和肝期II-代謝和關(guān)于參與代謝的酶的信息。
以大約0.1-10 μM的濃度培養(yǎng)本發(fā)明的化合物。為此，制備具有0.01-1 mM濃度的本發(fā)明的化合物在乙腈中的原液，然后以1:100稀釋度吸移到培養(yǎng)混合物中。肝微粒體和重組酶在37℃下在含和不含由1 mM NADP+、10 mM 6-磷酸葡萄糖和1單位6-磷酸葡萄糖脫氫酶構(gòu)成的NADPH生成體系的50 mM磷酸鉀緩沖液pH 7.4中培養(yǎng)。原發(fā)性肝細(xì)胞同樣在37℃下懸浮在Williams E培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在0-4小時培養(yǎng)時間后，用乙腈（最終濃度大約30%）終止該培養(yǎng)混合物，并以大約15 000 x g離心出蛋白質(zhì)。由此終止的樣品直接分析或儲存在-20℃直至分析。
借助在紫外線和質(zhì)譜檢測下的高效液相色譜法（HPLC-UV-MS/MS）進(jìn)行分析。為此，培養(yǎng)樣品的上清液用合適的C18反相柱和由乙腈與10 mM甲酸銨水溶液或0.05%甲酸構(gòu)成的可變流動相混合物色譜分離。與質(zhì)譜數(shù)據(jù)聯(lián)合的UV色譜圖用于代謝物的識別、結(jié)構(gòu)解析和定量估測以及用于本發(fā)明的化合物在培養(yǎng)混合物中的定量代謝評估。
B-8. Caco-2滲透性試驗(yàn)
借助Caco-2細(xì)胞系——已建立的胃腸屏障滲透性預(yù)測的體外模型（Artursson，P.和Karlsson，J. (1991) Correlation between oral drug absorption in humans and apparent drug permeability coefficients in human intestinal epithelial (Caco-2) cells. Biochem. Biophys.175 (3)，880-885）測定受試物質(zhì)的滲透性。將CaCo-2細(xì)胞（ACC No. 169，DSMZ，Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen，Braunschweig，德國）播種在帶有插件的24孔板中并培養(yǎng)14至16天。對于滲透性研究，將受試物質(zhì)溶解在DMSO中并用轉(zhuǎn)移緩沖液（Hanks Buffered Salt Solution，Gibco/Invitrogen，含19.9 mM葡萄糖和9.8 mM HEPES）稀釋至最終試驗(yàn)濃度。為了測定受試物質(zhì)從頂端到基底外側(cè)的滲透性（PappA-B），將包含受試物質(zhì)的溶液置于Caco-2細(xì)胞單層的頂面上，并將轉(zhuǎn)移緩沖液置于基底外側(cè)面上。為了測定受試物質(zhì)從基底外側(cè)到頂端的滲透性（PappB-A），將帶有受試物質(zhì)的溶液置于Caco-2細(xì)胞單層的基底外側(cè)面上，并將轉(zhuǎn)移緩沖液置于頂面上。在實(shí)驗(yàn)開始時，從各自的供體隔室中取樣以確保質(zhì)量平衡。在37℃下培養(yǎng)2小時后，從兩個隔室中取樣。通過LC-MS/MS分析樣品并計算表觀滲透系數(shù)（Papp）。對于各細(xì)胞單層，測定熒光黃的滲透性以確保細(xì)胞層完整性。在各試驗(yàn)流程中，也測定阿替洛爾（低滲透性的標(biāo)記物）和柳氮磺胺吡啶（主動外排的標(biāo)記物）的滲透性作為定性對照。
B-9. hERG鉀電流實(shí)驗(yàn)
所謂的hERG（人類ether-A-go-go相關(guān)基因）鉀電流對人心臟動作電位的復(fù)極有顯著貢獻(xiàn)(Scheel等人，2011)。在極少數(shù)情況下，通過藥物抑制此電流可以導(dǎo)致潛在的致命的心律失常，并因此在該藥物開發(fā)期間的早期階段進(jìn)行研究。
此處所用的功能性hERG實(shí)驗(yàn)基于穩(wěn)定表達(dá)KCNH2（HERG）基因(Zhou等人，1998)的重組HEK293細(xì)胞系。借助“全細(xì)胞-電壓鉗”技術(shù)(Hamill等人，1981)在自動化體系(PatchlinerTM; Nanion，慕尼黑，德國)中研究這些細(xì)胞，其控制膜電壓并在室溫下測量hERG鉀電流。軟件PatchControlHTTM（Nanion）控制Patchliner系統(tǒng)、數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)分析。電壓控制通過2 EPC-10 quadro放大器在PatchMasterProTM軟件的控制下進(jìn)行(兩者：HEKA Elektronik，Lambrecht，德國)。具有中等電阻的NPC-16芯片(~2 MΩ; Nanion)充當(dāng)用于電壓鉗實(shí)驗(yàn)的平面基底。
NPC-16芯片被填充以細(xì)胞內(nèi)-和細(xì)胞外溶液（參見Himmel，2007）以及細(xì)胞懸浮液。在形成千兆歐姆密封和建立全細(xì)胞模式（包括多種自動品質(zhì)控制步驟）之后，將細(xì)胞膜夾緊在-80mV保持電位上。隨后的電壓鉗協(xié)議改變指令電壓到+20mV（1000ms）、-120mV（500 ms），并返回到-80mV保持電位；這每12秒重復(fù)一次。在初始穩(wěn)定階段（大約5-6分鐘）之后，將受試物質(zhì)溶液通過移液管移至升高的濃度（例如0.1、1和10μmol/l）（曝露大約5-6分鐘每個濃度），隨后多個洗滌步驟。
通過將電位從+20 mV改變至-120mV所產(chǎn)生的向上的“尾”電流的振幅用于hERG鉀電流的定量，并被描述為時間的函數(shù)（IgorProTM 軟件）。在不同的時間段結(jié)束時的電流振幅（例如測試物質(zhì)的穩(wěn)定階段，測試物質(zhì)的第一/第二/第三濃度）用于完成濃度-效應(yīng)-曲線，從該曲線計算試驗(yàn)物質(zhì)的半最大抑制濃度IC50。
C. 藥物組合物的示例性實(shí)施方案
本發(fā)明的化合物可以以下列方式轉(zhuǎn)化成藥物制品：
片劑:
組成:
100 mg根據(jù)本發(fā)明的化合物，50 mg乳糖(一水合物)，50 mg玉米淀粉(天然的)，10 mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25) (得自BASF，Ludwigshafen，德國)，和2 mg硬脂酸鎂。
片劑重量212毫克，直徑8毫米，曲率半徑12毫米。
生產(chǎn):
使用5%的PVPs在水中的溶液(m/m)，將根據(jù)本發(fā)明的化合物、乳糖和淀粉的混合物造粒。干燥后將該顆粒與硬脂酸鎂混合5分鐘。用常規(guī)壓片機(jī)壓制該混合物(關(guān)于片劑的形式，參見上面)。用于壓制的標(biāo)準(zhǔn)值使用15 kN的壓力。
可口服的混懸劑:
組成:
1000 mg根據(jù)本發(fā)明的化合物，1000 mg乙醇(96%)，400 mg Rhodigel?(黃原膠，得自FMC，Pennsylvania，USA)，和99 g水。
10 ml口服混懸液相當(dāng)于100 mg根據(jù)本發(fā)明的化合物的單次劑量。
生產(chǎn):
將Rhodigel懸浮于乙醇中，將根據(jù)本發(fā)明的化合物加入所述懸浮液中。在攪拌下，加入水。將所述混合物攪拌約6 h，直到Rhodigel溶脹結(jié)束。
可口服的溶液:
組成:
500 mg根據(jù)本發(fā)明的化合物，2.5 g聚山梨酯和97 g聚乙二醇400。20 g口服液相當(dāng)于100 mg根據(jù)本發(fā)明的化合物的單次劑量。
生產(chǎn):
在攪拌下，將根據(jù)本發(fā)明的化合物懸浮于聚乙二醇和聚山梨酯的混合物中。攪拌過程持續(xù)至根據(jù)本發(fā)明的化合物已經(jīng)完全溶解。
i.v.溶液:
以低于在生理上耐受的溶劑(例如等滲鹽水、5% 葡萄糖溶液和/或30% PEG 400溶液)中的飽和溶解度的濃度，溶解根據(jù)本發(fā)明的化合物。將所述溶液無菌過濾，并填充于無菌的且無熱原的注射容器中。