本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，尤其是涉及一種化合物在制備抑制激肽釋放酶KLK7的藥物上的應(yīng)用及其合成方法。

背景技術(shù)：

特應(yīng)性皮炎(Atopic Dermatitis,AD)是一種廣泛傳播的慢性炎癥性皮膚病，特點(diǎn)是干燥、鱗狀皮膚、炎癥、皮膚滲透性增加，AD病人的皮膚對(duì)環(huán)境中常見(jiàn)的而對(duì)正常人無(wú)害的因素也會(huì)很敏感從而易于受到表面感染。在過(guò)去的30年間工業(yè)化國(guó)家的特應(yīng)性皮炎的發(fā)病率增長(zhǎng)了2到3倍，據(jù)估計(jì)兒童的特應(yīng)性皮炎患病率達(dá)到了15-30％，成人的特應(yīng)性皮炎患病率達(dá)到了2-10％。由于發(fā)病機(jī)制的復(fù)雜性，對(duì)AD的發(fā)病機(jī)制了解得不多，但皮膚屏障功能紊亂已經(jīng)被證實(shí)是AD發(fā)展過(guò)程中的關(guān)鍵因素之一。皮膚屏障的穩(wěn)定依賴(lài)于顆粒層的角質(zhì)形成細(xì)胞分化為角質(zhì)細(xì)胞和皮膚表層角質(zhì)細(xì)胞脫落(即脫屑)之間的平衡，皮膚的脫屑過(guò)程包括由KLKs參與的橋粒的降解，由于橋粒是角質(zhì)細(xì)胞的粘連蛋白，橋粒的降解則會(huì)導(dǎo)致角質(zhì)細(xì)胞脫落而致皮膚脫屑。證據(jù)顯示，局部或暫時(shí)性的KLKs活性控制的失調(diào)，是AD病人皮膚屏障穩(wěn)定缺失的主要原因之一。

KLKs(Kallikreins，激肽釋放酶)是具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶特異性的絲氨酸蛋白酶，其編碼基因定位于19q13.4，編碼15個(gè)分泌型絲氨酸蛋白酶KLK 1-KLK15。已經(jīng)證明，KLKs存在于正常人的角質(zhì)層細(xì)胞中，目前發(fā)現(xiàn)，至少有8種KLK(KLK5,KLK 6,KLK 7,KLK 8,KLK10,KLK 11,KLK13和KLK14)存在于人的角質(zhì)層和汗液中，其中KLK7占總量的40％。KLK7可能是皮膚損傷的一個(gè)關(guān)鍵酶，而且在AD病人中它可能參與一個(gè)系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)，在AD的角質(zhì)層KLK7升高最為突出，這提示KLK7在AD的發(fā)病機(jī)制上可能是至關(guān)重要的，因此，抑制KLK7的活性對(duì)于AD的治療顯得最為重要。

LEKTI(Lympho-epithelial Kazal-type-related inhibitor,LEKTI)是由SPINK5基因編碼的絲氨酸蛋白酶抑制劑家族的成員，LEKTI前體包含一個(gè)信號(hào)肽和彼此隔開(kāi)的15個(gè)絲氨酸蛋白酶抑制域(D1-D15)，表達(dá)后迅速被弗林蛋白酶水解為幾個(gè)蛋白片段，其中包含D6-D9抑制域的LEKTI能抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、KLK5和KLK7等酶的活性。LEKTI的內(nèi)源靶至少包括KLK5、KLK7和KLK14，它們共同參與皮膚的脫屑過(guò)程。在AD病人，LEKTI表達(dá)水平嚴(yán)重降低，導(dǎo)致了KLK7活性的異常升高。盡管LEKTI是表皮內(nèi)KLK7的天然抑制劑，但作為治療AD的外用藥，其不能透過(guò)皮膚角質(zhì)層，而且其大分子蛋白質(zhì)的特性也會(huì)導(dǎo)致吸收擴(kuò)散速度過(guò)慢、降解速度過(guò)快的問(wèn)題，因而作用非常有限。到目前為止，還沒(méi)有一種有效的KLK7抑制劑應(yīng)用于臨床。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

基于此，本發(fā)明提供化合物在制備抑制激肽釋放酶KLK7的藥物上的應(yīng)用及其合成方法。

本發(fā)明技術(shù)方案為：

一種化合物在制備抑制激肽釋放酶KLK7的藥物上的應(yīng)用，該化合物的結(jié)構(gòu)式為：

合成所述的化合物的方法，所述合成路線(xiàn)如下：

其中：

物質(zhì)十二的合成：將物質(zhì)十、物質(zhì)十一、POCl₃加入裝有回流冷凝管的圓底燒瓶中，將圓底燒瓶放置于超聲清洗儀中反應(yīng)，減壓蒸出剩余的POCl₃，殘余物傾倒于碎冰中，碎冰質(zhì)量為殘余物的20～50倍，析出沉淀,抽濾，固體用1％～5％的NaOH溶液洗滌，水洗至中性，得物質(zhì)十二；

物質(zhì)十三的合成：反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷和物質(zhì)十二，鹽冰浴冷卻至-15℃，避光，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，逐滴加入20wt％三溴化硼的無(wú)水二氯甲烷溶液，滴加完后，升溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，冰水的質(zhì)量為反應(yīng)液的5-15倍，分出有機(jī)相，水相用乙酸乙酯萃取三次，每次乙酸乙酯的體積為水相的0.5～5倍，合并有機(jī)相，有機(jī)相用硫酸鈉干燥，蒸出溶劑，得物質(zhì)十三；

物質(zhì)十四的合成：將氯乙酸與5～20wt％氫氧化鈉水溶液混合得溶液A，將物質(zhì)十三與5～20wt％氫氧化鈉水溶液混合得溶液B，將溶液A加入到反應(yīng)瓶中，再滴加溶液B，滴加完畢，升溫反應(yīng)，冷卻，加5～20wt％鹽酸酸化至pH＝1～2，過(guò)濾、洗滌、干燥得物質(zhì)十四；

物質(zhì)十五的合成：在反應(yīng)瓶中裝有攪拌棒、溫度計(jì)，回流冷凝管，其回流冷凝管連接氯化氫吸收裝置，依次加入氯化亞砜和物質(zhì)十四，攪拌升溫反應(yīng)，減壓蒸出低沸物，瓶?jī)?nèi)殘余物即為物質(zhì)十五，不經(jīng)分離直接用于下步反應(yīng)；

化合物II的合成：在反應(yīng)瓶中加入上步制得的物質(zhì)十五，再加入三乙胺、二氯甲烷和物質(zhì)十六，攪拌反應(yīng)，減壓蒸出溶劑，冷卻，過(guò)濾，水洗，丙酮洗得化合物II。

優(yōu)選地，所述物質(zhì)十、物質(zhì)十一、POCl₃的質(zhì)量比為1.0:1.0～1.5:30～50，超聲清洗儀中反應(yīng)溫度為50～70℃，功率為350W，超聲作用60～120分鐘。

優(yōu)選地，所述二氯甲烷、物質(zhì)十二、20wt％三溴化硼的二氯甲烷溶液的質(zhì)量比為20～40:1:6～15，升溫至25℃，25℃反應(yīng)2～4小時(shí)。

優(yōu)選地，所述溶液A中氯乙酸與氫氧化鈉的摩爾比為1:1.0～2.0，所述溶液B中物質(zhì)十三與氫氧化鈉的摩爾比為1:1.0～2.0，將溶液A加入到反應(yīng)瓶中，再滴加溶液B，加入到反應(yīng)瓶中的物質(zhì)十三與氯乙酸的摩爾比為1:1.0～2.0，升溫反應(yīng)，冷卻。

優(yōu)選地，升溫至60～90℃反應(yīng)1～6小時(shí)，冷卻至25℃。

優(yōu)選地，所述物質(zhì)十四與氯化亞砜的摩爾比為1:1.0～4.0，攪拌升溫至60～78℃，在60～78℃下反應(yīng)5～10小時(shí)。

優(yōu)選地，所述物質(zhì)十五、物質(zhì)十六、三乙胺和二氯甲烷的摩爾比1.0:1:0～2.0:1.0～3.0:5.0～30，在0～25℃攪拌2小時(shí)。

所述化合物或所述方法在制備抑制激肽釋放酶KLK7的藥物上的應(yīng)用，其特征在于，所述制備抑制激肽釋放酶KLK7的藥物上的應(yīng)用的藥物包括：

中的一種或幾種的混合物。

優(yōu)選地，所述制備抑制激肽釋放酶KLK7的藥物上的應(yīng)用的藥物包括：化合物I、化合物II、化合物III、化合物IV和化合物V的摩爾比為1:1～4:1～5：1～3：1～2。

本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)：

1、明提供的抑制激肽釋放酶KLK7的化合物能夠有效的抑制KLK7的活性，其合成方法簡(jiǎn)單易行，加入適當(dāng)?shù)妮o料和助劑可制備成抑制KLK7活性的藥物制劑。

2、采用本發(fā)明合成方法副產(chǎn)物產(chǎn)生的少，雜質(zhì)含量低至0.05％～0.08％。

3、本發(fā)明化合物和其他化合物聯(lián)用，對(duì)于激肽釋放酶KLK7的活性抑制效率更高。

4、在皮膚中主要表達(dá)的絲氨酸蛋白酶還包括KLK5，KLK14，Matriptase與Elastase2。本發(fā)明化合物合物對(duì)上述絲氨酸蛋白酶在100μM的濃度下均不變現(xiàn)出抑制活性，表明式其KLK7具有良好特異性。

5、本發(fā)明化合物在pH8，150mM NaCl，37℃的緩沖液中孵育72h，其對(duì)KLK7的抑制活性維持不變，表明本發(fā)明化合物的抑制效率高，活性強(qiáng)，并且其抑制效果穩(wěn)定。

附圖說(shuō)明

圖1：本發(fā)明實(shí)施例式化合物II所示的濃度與抑制率的關(guān)系曲線(xiàn)；

圖2：本發(fā)明化合物II的H¹核磁圖；

圖3：本發(fā)明化合物II的C¹³核磁圖；

圖4：實(shí)施例7合化合物濃度與抑制率的關(guān)系曲線(xiàn)。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于實(shí)施例表述的范圍。

實(shí)施例1

化合物在制備抑制激肽釋放酶KLK7的藥物上的應(yīng)用，該化合物的結(jié)構(gòu)式為：

實(shí)施例2

合成實(shí)施例1所述的化合物的方法，所述合成路線(xiàn)如下：

其中：

物質(zhì)十二的合成：將物質(zhì)十、物質(zhì)十一、POCl₃加入裝有回流冷凝管的圓底燒瓶中，將圓底燒瓶放置于超聲清洗儀中反應(yīng)，減壓蒸出剩余的POCl₃，殘余物傾倒于碎冰中，碎冰質(zhì)量為殘余物的20倍，析出沉淀,抽濾，固體用1％～5％的NaOH溶液洗滌，水洗至中性，得物質(zhì)十二；

物質(zhì)十三的合成：反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷和物質(zhì)十二，鹽冰浴冷卻至-15℃，避光，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，逐滴加入20wt％三溴化硼的無(wú)水二氯甲烷溶液，滴加完后，升溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，冰水的質(zhì)量為反應(yīng)液的5倍，分出有機(jī)相，水相用乙酸乙酯萃取三次，每次乙酸乙酯的體積為水相的0.5倍，合并有機(jī)相，有機(jī)相用硫酸鈉干燥，蒸出溶劑，得物質(zhì)十三；

物質(zhì)十四的合成：將氯乙酸與5wt％氫氧化鈉水溶液混合得溶液A，將物質(zhì)十三與5wt％氫氧化鈉水溶液混合得溶液B，將溶液A加入到反應(yīng)瓶中，再滴加溶液B，滴加完畢，升溫反應(yīng)，冷卻，加5wt％鹽酸酸化至pH＝1，過(guò)濾、洗滌、干燥得物質(zhì)十四；

物質(zhì)十五的合成：在反應(yīng)瓶中裝有攪拌棒、溫度計(jì)，回流冷凝管，其回流冷凝管連接氯化氫吸收裝置，依次加入氯化亞砜和物質(zhì)十四，攪拌升溫反應(yīng)，減壓蒸出低沸物，瓶?jī)?nèi)殘余物即為物質(zhì)十五，不經(jīng)分離直接用于下步反應(yīng)；

化合物II的合成：在反應(yīng)瓶中加入上步制得的物質(zhì)十五，再加入三乙胺、二氯甲烷和物質(zhì)十六，攪拌反應(yīng)，減壓蒸出溶劑，冷卻，過(guò)濾，水洗，丙酮洗得化合物II。

所述物質(zhì)十、物質(zhì)十一、POCl₃的質(zhì)量比為1:1:3，超聲清洗儀中反應(yīng)溫度為50℃，功率為350W，超聲作用60分鐘。

所述二氯甲烷、物質(zhì)十二、20wt％三溴化硼的二氯甲烷溶液的質(zhì)量比為20:1:6，升溫至25℃，25℃下反應(yīng)2小時(shí)。

所述溶液A中氯乙酸與氫氧化鈉的摩爾比為1:1，所述溶液B中物質(zhì)十三與氫氧化鈉的摩爾比為1:1，將溶液A加入到反應(yīng)瓶中，再滴加溶液B，加入到反應(yīng)瓶中的物質(zhì)十三與氯乙酸的摩爾比為1:1，升溫至60℃反應(yīng)1小時(shí)，冷卻至25℃。

所述物質(zhì)十四與氯化亞砜的摩爾比為1:1，攪拌升溫至60℃，在60℃下反應(yīng)5小時(shí)。

所述物質(zhì)十五、物質(zhì)十六、三乙胺和二氯甲烷的摩爾比1:1:1:5，在0～25℃攪拌2小時(shí)。

實(shí)施例3

合成實(shí)施例1所述的化合物的方法，所述合成路線(xiàn)為實(shí)施例2所述：

物質(zhì)十二的合成：將物質(zhì)十、物質(zhì)十一、POCl₃加入裝有回流冷凝管的圓底燒瓶中，將圓底燒瓶放置于超聲清洗儀中反應(yīng)，減壓蒸出剩余的POCl₃，殘余物傾倒于碎冰中，碎冰質(zhì)量為殘余物的50倍，析出沉淀,抽濾，固體用5％的NaOH溶液洗滌，水洗至中性，得物質(zhì)十二；

物質(zhì)十三的合成：反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷和物質(zhì)十二，鹽冰浴冷卻至-15℃，避光，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，逐滴加入20wt％三溴化硼的無(wú)水二氯甲烷溶液，滴加完后，升溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，冰水的質(zhì)量為反應(yīng)液的15倍，分出有機(jī)相，水相用乙酸乙酯萃取三次，每次乙酸乙酯的體積為水相的0.5～5倍，合并有機(jī)相，有機(jī)相用硫酸鈉干燥，蒸出溶劑，得物質(zhì)十三；

物質(zhì)十四的合成：將氯乙酸與20wt％氫氧化鈉水溶液混合得溶液A，將物質(zhì)十三與20wt％氫氧化鈉水溶液混合得溶液B，將溶液A加入到反應(yīng)瓶中，再滴加溶液B，滴加完畢，升溫反應(yīng)，冷卻，加20wt％鹽酸酸化至pH＝2，過(guò)濾、洗滌、干燥得物質(zhì)十四；

物質(zhì)十五的合成：在反應(yīng)瓶中裝有攪拌棒、溫度計(jì)，回流冷凝管，其回流冷凝管連接氯化氫吸收裝置，依次加入氯化亞砜和物質(zhì)十四，攪拌升溫反應(yīng)，減壓蒸出低沸物，瓶?jī)?nèi)殘余物即為物質(zhì)十五，不經(jīng)分離直接用于下步反應(yīng)；

化合物II的合成：在反應(yīng)瓶中加入上步制得的物質(zhì)十五，再加入三乙胺、二氯甲烷和物質(zhì)十六，攪拌反應(yīng)，減壓蒸出溶劑，冷卻，過(guò)濾，水洗，丙酮洗得化合物II。

所述物質(zhì)十、物質(zhì)十一、POCl₃的質(zhì)量比為1:1.5:50，超聲清洗儀中反應(yīng)溫度為70℃，功率為350W，超聲作用120分鐘。

所述二氯甲烷、物質(zhì)十二、20wt％三溴化硼的二氯甲烷溶液的質(zhì)量比為40:1:15，升溫至25℃，25℃下反應(yīng)4小時(shí)。

所述溶液A中氯乙酸與氫氧化鈉的摩爾比為1:2，所述溶液B中物質(zhì)十三與氫氧化鈉的摩爾比為1:2，將溶液A加入到反應(yīng)瓶中，再滴加溶液B，加入到反應(yīng)瓶中的物質(zhì)十三與氯乙酸的摩爾比為1:2，升溫至90℃反應(yīng)6小時(shí)，冷卻至25℃。

所述物質(zhì)十四與氯化亞砜的摩爾比為1:4，攪拌升溫至78℃，在78℃下反應(yīng)10小時(shí)。

所述物質(zhì)十五、物質(zhì)十六、三乙胺和二氯甲烷的摩爾比1:2:3:30，在25℃攪拌2小時(shí)。

實(shí)施例4

合成實(shí)施例1所述的化合物的方法，所述合成路線(xiàn)為實(shí)施例2所述：

物質(zhì)十二的合成：將物質(zhì)十、物質(zhì)十一、POCl₃加入裝有回流冷凝管的圓底燒瓶中，將圓底燒瓶放置于超聲清洗儀中反應(yīng)，減壓蒸出剩余的POCl₃，殘余物傾倒于碎冰中，碎冰質(zhì)量為殘余物的30倍，析出沉淀,抽濾，固體用3％的NaOH溶液洗滌，水洗至中性，得物質(zhì)十二；

物質(zhì)十三的合成：反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷和物質(zhì)十二，鹽冰浴冷卻至-15℃，避光，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，逐滴加入20wt％三溴化硼的無(wú)水二氯甲烷溶液，滴加完后，升溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，冰水的質(zhì)量為反應(yīng)液的10倍，分出有機(jī)相，水相用乙酸乙酯萃取三次，每次乙酸乙酯的體積為水相的0.3倍，合并有機(jī)相，有機(jī)相用硫酸鈉干燥，蒸出溶劑，得物質(zhì)十三；

物質(zhì)十四的合成：將氯乙酸與15wt％氫氧化鈉水溶液混合得溶液A，將物質(zhì)十三與15wt％氫氧化鈉水溶液混合得溶液B，將溶液A加入到反應(yīng)瓶中，再滴加溶液B，滴加完畢，升溫反應(yīng)，冷卻，加15wt％鹽酸酸化至pH＝1，過(guò)濾、洗滌、干燥得物質(zhì)十四；

物質(zhì)十五的合成：在反應(yīng)瓶中裝有攪拌棒、溫度計(jì)，回流冷凝管，其回流冷凝管連接氯化氫吸收裝置，依次加入氯化亞砜和物質(zhì)十四，攪拌升溫反應(yīng)，減壓蒸出低沸物，瓶?jī)?nèi)殘余物即為物質(zhì)十五，不經(jīng)分離直接用于下步反應(yīng)；

化合物II的合成：在反應(yīng)瓶中加入上步制得的物質(zhì)十五，再加入三乙胺、二氯甲烷和物質(zhì)十六，攪拌反應(yīng)，減壓蒸出溶劑，冷卻，過(guò)濾，水洗，丙酮洗得化合物II。

所述物質(zhì)十、物質(zhì)十一、POCl₃的質(zhì)量比為1:1.2:40，超聲清洗儀中反應(yīng)溫度為60℃，功率為350W，超聲作用100分鐘。

所述二氯甲烷、物質(zhì)十二、20wt％三溴化硼的二氯甲烷溶液的質(zhì)量比為30:1:10，升溫至25℃，25℃下反應(yīng)3小時(shí)。

所述溶液A中氯乙酸與氫氧化鈉的摩爾比為1:1.5，所述溶液B中物質(zhì)十三與氫氧化鈉的摩爾比為1:1.5，將溶液A加入到反應(yīng)瓶中，再滴加溶液B，加入到反應(yīng)瓶中的物質(zhì)十三與氯乙酸的摩爾比為1:1.5，升溫至80℃反應(yīng)4小時(shí)，冷卻至25℃。

所述物質(zhì)十四與氯化亞砜的摩爾比為1:3，攪拌升溫至70℃，在70℃下反應(yīng)8小時(shí)。

所述物質(zhì)十五、物質(zhì)十六、三乙胺和二氯甲烷的摩爾比1:1:5:2:3，在20℃攪拌2小時(shí)。

實(shí)施例5

1)將化合物II溶解在DMSO中，配置成濃度10mM的母液；

2)在KLK7活性緩沖液中加入化合物II，配制成6.25μM,12.5μM,25μM,50μM,100μM,200μM的溶液，并在37℃作用15分鐘；

3)加入熒光底物MCa-R-P-K-P-V-E-Nval-W-R-K(Dnp)-NH₂，在37℃下測(cè)KLK7的活性15分鐘，采用熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)熒光值，根據(jù)熒光值的大小計(jì)算KLK7的活性。

陰性對(duì)照組：在KLK7的活性緩沖液中加入DMSO，其它操作條件均與實(shí)驗(yàn)組相同。

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)組和陰性對(duì)照組獲得的KLK7的活性計(jì)算化合物II對(duì)KLK7的抑制率，計(jì)算抑制率的公式為％inhibition＝(1-a/b)×100％，計(jì)算結(jié)果如表1所示；其中，a為待測(cè)樣品的酶活，b為陰性對(duì)照的酶活。

表1為化合物II在不同濃度下對(duì)KLK7活性的抑制率，根據(jù)表1所示的結(jié)果繪制化合物II的濃度與抑制率的關(guān)系圖，采用KaleidaGraph軟件進(jìn)行曲線(xiàn)擬合得到化合物II的濃度與抑制率的關(guān)系曲線(xiàn)，如圖1所示。

由表1和圖1的結(jié)果可以看出，隨著化合物II濃度的增加，對(duì)KLK7活性的抑制率逐漸增高，式化合物II的濃度為200μM時(shí)，對(duì)KLK7活性的抑制率達(dá)到100％。

因此，式化合物II對(duì)KLK7具有優(yōu)異的抑制效果，該化合物作為活性組分加入適當(dāng)?shù)妮o料和助劑可制備成抑制KLK7活性的藥物制劑。

化合物II在不同濃度下對(duì)KLK7活性的抑制率

由上述描述可以看出，本發(fā)明提供的抑制激肽釋放酶KLK7的化合物的制備方法簡(jiǎn)單易行，能夠有效的抑制KLK7的活性，加入適當(dāng)?shù)妮o料和助劑可制備成抑制KLK7活性的藥物制劑。

實(shí)施例6

所述制備抑制激肽釋放酶KLK7的藥物上的應(yīng)用的藥物包括：

所述化合物I、化合物II、化合物III、化合物IV和化合物V的質(zhì)量比為1:1～2:1～2.5：2～3：1～2。

實(shí)施例7

實(shí)施例6組合物的中按摩爾比為1:1:1：1：1混合后，按照實(shí)施例5的方法測(cè)試不同濃度下對(duì)KLK7活性的抑制率，結(jié)果見(jiàn)表2和圖4

表2混合物在不同濃度下對(duì)KLK7活性的抑制率

由表2結(jié)果證明，式化合物I、化合物II、化合物III、化合物IV和化合物V聯(lián)用效果要比單獨(dú)使用效果更加顯著，同樣的添加量情況下，混合物的藥效要比單獨(dú)使用時(shí)對(duì)KLK7活性抑制率更高。

實(shí)施例8

合成化合物I的方法，所述合成路線(xiàn)如下：

其中：

物質(zhì)三的合成：向反應(yīng)瓶中加入乙醇、物質(zhì)一、質(zhì)量濃度37％的甲醛水溶液、氫氧化鈉以及物質(zhì)二，反應(yīng)，反應(yīng)完畢，乙酸乙酯萃取三次，每次乙酸乙酯的用量為前述乙醇體積的1～5倍，合并有機(jī)相，蒸餾，冷卻，過(guò)濾，水洗，乙醇洗，干燥得物質(zhì)三；

物質(zhì)四的合成：向反應(yīng)瓶中加入物質(zhì)三、醋酐，控制溫度為-12℃，滴加質(zhì)量濃度為90％的發(fā)煙硝酸反應(yīng)，反應(yīng)完畢，升至25℃，倒入冰水中，冰水的體積為反應(yīng)液5-10倍，過(guò)濾，先用1～5％碳酸氫鈉溶液洗，再用冰水洗，干燥得物質(zhì)四；

物質(zhì)五的合成：向反應(yīng)瓶中加入乙醇、水、醋酸、鐵粉、氯化銨和物質(zhì)四，回流反應(yīng)，再加入乙醇，第二次加入乙醇的質(zhì)量為物質(zhì)四的5倍，趁熱過(guò)濾，濾液冷卻至25℃，倒入冰水中，冰水的體積為濾液的10倍，過(guò)濾，水洗，干燥得物質(zhì)五；

物質(zhì)七的合成：向反應(yīng)瓶中加入物質(zhì)五、物質(zhì)六、二甲基甲酰胺、碳酸鉀，反應(yīng)，冷卻至25℃，將反應(yīng)液加入到冰水中，冰水的質(zhì)量為反應(yīng)液的10倍，過(guò)濾，水洗，干燥得物質(zhì)七。

物質(zhì)八的合成：向反應(yīng)瓶中加入物質(zhì)七和吡啶的混合物，再滴加三氯氧磷，升溫反應(yīng)，將反應(yīng)液冷卻，加入氯仿，攪拌，冷卻，加入冷水，分出有機(jī)相，冷水洗氯仿層為中性，濃縮除去氯仿，干燥得物質(zhì)八。

化合物I的合成：將二甲基甲酰胺、物質(zhì)八、碳酸鉀和物質(zhì)九依次加到反應(yīng)瓶中，加熱反應(yīng)，冷卻，將反應(yīng)液倒入水中，抽濾，濾餅用水淋洗，干燥得化合物I。

所述物質(zhì)二、質(zhì)量濃度37％的甲醛水溶液、物質(zhì)一、氫氧化鈉和乙醇的質(zhì)量比為1:1:1:1:5，25℃下反應(yīng)2時(shí)。

所述物質(zhì)三、醋酐、硝酸的質(zhì)量比為1:0.5:0.5，在-5℃下反應(yīng)4小時(shí)。

所述物質(zhì)四、乙醇、水、醋酸、鐵粉、氯化銨質(zhì)量比為1:2.5:2:0.05:1:0.02，回流反應(yīng)2小時(shí)。

所述物質(zhì)五、物質(zhì)六、碳酸鉀、二甲基甲酰胺的摩爾比為1:1:1:10，升溫至80℃反應(yīng)4小時(shí)。

所述物質(zhì)七、吡啶、三氯氧磷的摩爾比為1:1:1.5，加畢，升溫至100℃反應(yīng)3小時(shí)，將反應(yīng)液冷卻至50℃，加入氯仿，氯仿的體積為吡啶的40倍，攪拌1小時(shí)，冷卻至0℃，加入5℃的冷水，冷水的體積為氯仿的0.6倍，分出有機(jī)相，冷水洗氯仿層為中性，濃縮除去氯仿，干燥得物質(zhì)八。

所述物質(zhì)八、物質(zhì)九、碳酸鉀、二甲基甲酰胺的摩爾比為1:2:2:20，加熱至50℃，反應(yīng)1h，冷卻，將反應(yīng)液倒入水中，水的體積為反應(yīng)液的10倍，抽濾，濾餅用水淋洗，干燥得化合物I。

實(shí)施例9

合成化合物III的方法，所述合成路線(xiàn)如下：

其中：

物質(zhì)十八的合成：將物質(zhì)十七、KOH、水、二硫化碳加入到反應(yīng)瓶，，加熱至回流，反應(yīng)2小時(shí)，冷至25℃，過(guò)濾，濾液用1wt％鹽酸調(diào)節(jié)pH值析出物質(zhì)十八，過(guò)濾、洗滌、干燥得物質(zhì)十八；

物質(zhì)二十的合成：向反應(yīng)瓶中加入物質(zhì)十八、物質(zhì)十九、甲苯和碳酸鉀，回流反應(yīng)，冷卻過(guò)濾，用二氯甲烷洗固體，濾液減壓濃縮，殘留物用硅膠層析，己烷-乙酸乙酯洗脫，得物質(zhì)二十。

化合物III的合成：向反應(yīng)瓶中加入物質(zhì)二十、4-氟芐氯、NaOH、乙腈，回流反應(yīng)，冷卻，減壓蒸出溶劑得殘留物，殘留物用乙酸乙酯萃取三次，每次乙酸乙酯的體積為殘留物的2倍，有機(jī)相水洗，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濾液減壓蒸出溶劑得粗品，粗品以乙腈重結(jié)晶得化合物III。

所述物質(zhì)十七、二硫化碳、KOH、水的摩爾比為1:1:1:5。

所述物質(zhì)十八、物質(zhì)十九、碳酸鉀、甲苯的摩爾比為1:1:1:5，回流反應(yīng)，冷卻，所述己烷-乙酸乙酯體積比為2:1。

所述物質(zhì)二十合成中回流反應(yīng)時(shí)間為4小時(shí)，冷卻至25℃。

所述物質(zhì)二十、4-氟芐氯、NaOH、乙腈的摩爾比為1:1:1:10，回流反應(yīng)4小時(shí)。

實(shí)施例10

合成化合物Ⅳ的方法，所述合成路線(xiàn)如下：

其中：

物質(zhì)二十三的合成：將物質(zhì)二十一、物質(zhì)二十二、冰醋酸加入到反應(yīng)瓶，加熱至回流反應(yīng)4-～8小時(shí)，冷卻，過(guò)濾，水洗，二氯甲烷洗，得物質(zhì)二十三；

物質(zhì)二十四的合成：向反應(yīng)瓶中加入物質(zhì)二十三和吡啶的混合物，再滴加三氯氧磷，加畢，升溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液冷卻至50℃，加入氯仿，攪拌反應(yīng)，冷卻至5℃，加入冷水，分出有機(jī)相，冷水洗氯仿層為中性，濃縮除去氯仿，干燥得物質(zhì)二十四；

化合物Ⅳ的合成：向反應(yīng)瓶中加入物質(zhì)二十四、物質(zhì)二十五、甲苯、碳酸鉀，回流反應(yīng)4小時(shí)，冷至25℃，過(guò)濾，用二氯甲烷洗固體，濾液減壓濃縮得粗品，粗品以氯仿重結(jié)晶得化合物Ⅳ。

所述物質(zhì)二十一、物質(zhì)二十二、冰醋酸的摩爾比為1:1:1.5，回流反應(yīng)4小時(shí)，冷卻至25℃。

所述物質(zhì)二十三、吡啶、三氯氧磷的摩爾比為1:1:1.5，升溫至110℃反應(yīng)2小時(shí)，將反應(yīng)液冷卻至50℃，加入氯仿，所述氯仿的體積為吡啶的30倍，攪拌反應(yīng)1小時(shí)，冷卻至0℃，加入5℃的冷水，冷水的體積為氯仿的0.5倍。

實(shí)施例11

合成化合物V的工藝，所述合成路線(xiàn)如下：

其中：

物質(zhì)二十八的合成：將物質(zhì)二十六和物質(zhì)二十七加入干燥圓底燒瓶中，升溫進(jìn)行攪拌反應(yīng)，薄層色譜跟蹤反應(yīng)至原料消失，將混合物冷卻至25℃，倒入冰水混合物中，過(guò)濾，水洗，氯仿洗，得物質(zhì)二十八；

物質(zhì)二十九的合成:反應(yīng)瓶中加入依次乙醚、氫化鋰鋁，攪拌溶解，冰水浴冷卻至0℃，再緩慢加入物質(zhì)二十八，加料完畢，冰水浴下反應(yīng)，將反應(yīng)液倒入冰水中，靜置讓沉淀物停在底部，過(guò)濾，氯仿洗濾渣，濾液分出有機(jī)相，水相以氯仿萃取三次，有機(jī)相合并，減壓濃縮得物質(zhì)二十九。

化合物V的合成：在反應(yīng)中加入物質(zhì)二十九、三乙胺、二氯甲烷和物質(zhì)三十，攪拌反應(yīng)，濃縮除去二氯甲烷，然后加水，加水質(zhì)量為濃縮物的10倍，用氯仿萃取三次，萃取劑氯仿每次用量為前述所加水的體積的1倍，有機(jī)相合并，減壓濃縮得粗品，粗品用氯仿重結(jié)晶得化合物V。

所述物質(zhì)二十六、物質(zhì)二十七的摩爾比為1:1.，升至80℃進(jìn)行攪拌反應(yīng)，所述冰水混合物的質(zhì)量為物質(zhì)二十六的5倍。

所述物質(zhì)二十八、氫化鋰鋁、乙醚的質(zhì)量比為1:0.5:15，加料速度以微回流為宜，所述冰水浴下反應(yīng)1.5小時(shí)，將反應(yīng)液倒入冰水中，冰水的體積為反應(yīng)液的1倍，萃取劑氯仿每次用量為水相體積的1倍。

所述物質(zhì)二十九、物質(zhì)三十、三乙胺和二氯甲烷的摩爾比為1:1:1:10，25℃攪拌1.5小時(shí)。

上述的實(shí)施例僅為本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案，而不應(yīng)視為對(duì)于本發(fā)明的限制，本申請(qǐng)中的實(shí)施例及實(shí)施例中的特征在不沖突的情況下，可以相互任意組合。本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)以權(quán)利要求記載的技術(shù)方案，包括權(quán)利要求記載的技術(shù)方案中技術(shù)特征的等同替換方案為保護(hù)范圍。即在此范圍內(nèi)的等同替換改進(jìn)，也在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。