本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種產生組成型和抗葡萄糖代謝阻遏的堿性β-甘露聚糖酶的嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2，同時涉及嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2的分離篩選方法，還涉及該菌株在苧麻脫膠中的應用。

背景技術：

苧麻是一種蕁麻科植物，其中纖維含量在60％以上，僅次于棉花。它的韌皮纖維長而結實，可以代替棉花、亞麻生產各種產品，因此是一種重要的紡織工業原料。然而苧麻纖維上粘附著大量的膠質，主要是果膠、半纖維素、木質素等，根據苧麻品種的不同，其含量可達24～45％。所以要得到工業上可利用的纖維，首先必須進行脫膠處理。從工業應用的目的看，隨著膠質含量的減少，苧麻纖維的物理、化學性能均得到改善。苧麻脫膠效果的好壞，將直接影響紗制產品的質量。

目前本領域中常采用的脫膠方法為化學燒堿高壓煮煉法。該方法耗用大量的酸堿，隨著酸堿原料大幅度漲價，導致成本成倍上漲；同時，化學法脫膠產生的大量酸堿廢水，可造成嚴重的環境污染。為此，本領域的許多研究人員一直努力尋找苧麻脫膠的新手段，特別是將注意力集中在生物脫膠上。

苧麻生物脫膠主要是利用微生物產生的高度特異性果膠酶、半纖維素酶類水解果膠、半纖維素類物質，以達到脫膠的目的。生物脫膠法減掉了大量的酸堿原料，因而與化學法相比，具有處理條件溫和(常壓、常溫)，成本低，纖維質量好，對環境污染小等優點。目前主要用于苧麻脫膠的微生物為真菌和中性細菌。1958年，Mchammad(Appl.Microb.6：87，1958)和Betrabet(Ibid，6，89，1958)分別報導了多粘芽孢桿菌和假單胞菌的浸解活性。藤重升永進而公開了一種利用微生物進行苧麻脫膠的方法(日本專利，特開昭51—149976)。真菌產生的脫膠酶中，多含有纖維素酶，并且最適作用pH多為酸性，而酸性pH條件則造成纖維強度的下降。另外真菌的生長速度慢，也導致脫膠周期長(一般為5～7天)。而中性細菌則容易污染雜菌，造成酶活力下降，脫膠效果不穩定。因此目前尚難以實現工業上實際應用的目的。目前用于苧麻生物脫膠技術的菌株均為真菌和細菌。

中國專利CN85104285，CN85104284中公開了使用中性芽孢桿菌屬的微生物，利用其產生果膠酶的能力進行生物脫膠的方法。中國專利CN89104529公開了利用芽孢桿菌進行苧麻生物脫膠的方法。但這些專利沒有說明所說的芽孢桿菌屬的種名及篩選方法，也沒有按照布達佩斯條約的規定保藏篩選到的微生物樣品，致使本領域技術人員不可能再現其發明。

從目前來看，許多生物脫膠法還無法應用于工業生產，主要是酶活力太低，酶脫膠后的原麻還含有較多的膠質，其作用也僅僅相當于化學脫膠的預處理工藝的效果(俞春華，馮新星，賈長蘭等.苧麻纖維高溫—酶聯合脫膠技術[J].紡織學報，2007，28(6)：79-82.蔡俠，熊和平，嚴理等，苧麻微生物—蒸汽爆破聯合脫膠技術[J].紡織學報，2011，32(7)：75-79.)。

本發明利用誘變育種的方法，篩選出一株雙突變的高產組成型和抗葡萄糖代謝阻遏的堿性β-甘露聚糖酶嗜堿芽孢桿菌菌株，應用于苧麻纖維的脫膠試驗中，取得了更好的效果；此嗜堿芽孢桿菌的出發菌株具有產生堿性β-堿性甘露聚糖酶的能力，但是其產生的β-堿性甘露聚糖酶屬于誘導酶，該酶的產生取決于誘導物或底物的結構類似物的存在；并且該酶還受葡萄糖的代謝阻遏，即當環境中存在葡萄糖時，即使同時存在有該酶的誘導物或底物的結構類似物，該酶也不會被誘導產生；本發明利用化學試劑亞硝基胍誘變，篩選利福平抗性突變株，及交替培養的方法，篩選出一株突變株NTT33C6D2，其特征是堿性β-甘露聚糖酶同時解除了對誘導物或底物的結構類似物的依賴和葡萄糖對其的代謝阻遏作用，即不存在誘導物或底物的結構類似物，并且有葡萄糖存在時，該突變株仍然可以高產率地產生β-堿性甘露聚糖酶；利用此突變菌株進行生物脫膠，可以大大縮短了菌株發酵周期和生物脫膠周期，提高膠質去除率；本發明提供的技術具有脫膠周期短，比此前本發明人的專利(申請號：CN97.109044)縮短脫膠周期1倍以上，脫膠效率高，菌種不易被污染，酶活力穩定，處理成本低，纖維質量好，污水處理極為容易等優點。

技術實現要素：

本發明的目的是在于提供了一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2，該菌株具有產生組成型和抗葡萄糖代謝阻遏的堿性β-甘露聚糖酶的能力，在適當的培養基和發酵條件下，可高產率產生堿性β-甘露聚糖酶。

本發明的另一個目的是在于提供了一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2的分離篩選方法，以篩選到的嗜堿芽孢桿菌NTT33為出發菌株，經誘變、初篩、復篩及交替培養篩選到一株雙突變的高產菌株NTT33C6D2。

本發明的再一個目的是在于提供了一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2在苧麻脫膠中的應用，顯著縮短了發酵周期和生物脫膠周期，提高了膠質組分去除率，提高了設備的利用率。

本發明還有一個目的是在于提供了一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2在苧麻生產中的應用，通過該菌株先對苧麻進行生物脫膠，并結合本發明提供的化學補充脫膠方法，再按照常規處理方法可得到符合國家質量標準的精苧麻。

為了實現上述的目的，本發明采用以下技術措施：

一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2的分離篩選方法，其步驟是：

1、樣品采集：將土壤樣品1g懸于無菌水中，混合均勻，上清液接入葡萄糖固體分離培養基中，28℃培養24-48小時；葡萄糖培養基成分為：葡萄糖10g；蛋白胨5g；酵母膏5g；K₂HPO₄ 1g；MgSO₄·7H₂O 0.2g；瓊脂18g；水1000mL；用Na₂CO₃調節pH 10-11。

2、分離純化：挑選分離培養基中單菌落轉入槐豆膠固體培養基中，28℃培養，選擇菌落周圍產生透明圈的菌株；將這些菌株在液體槐豆膠培養基中，28℃，振蕩培養24-48小時后，測定甘露聚糖酶活性；槐豆膠培養基成分為槐豆膠10g；酵母膏5g；蛋白胨5g；K₂HPO₄1g；MgSO₄·7H₂O 0.1g；水1000mL；用Na₂CO₃調節pH10-11；如是固體培養基，另加入瓊脂18g。

3、菌株鑒定：該菌種的菌體呈桿狀，外形大小為0.5～0.65×2.6～3.4μm，美藍染色均勻，有運動力，鞭毛側生，內生孢子呈橢圓形，孢子囊稍大，好氧；過氧化氫酶陽性，菌落呈圓形，表面光滑，有同心圓，生長于葡萄糖培養基中檢查不出酸的產生，該菌株分解淀粉，但不還原硝酸鹽。特別是該菌株在pH10-11的培養基中生長良好。基于這些菌學特征和理化性質，參照伯杰氏細菌鑒定手冊(Bergey's Manual of Determinative Bacteriology,9th Edition,the Williams&Wilkins Company,Baltimore,1992)，本發明人將該菌株確定為嗜堿芽孢桿菌(Bacillus alcalophilus)NTT33。

4、誘變：將嗜堿芽孢桿菌NTT33菌株接種至葡萄糖液體培養基中，于37℃振蕩，180rpm，培養24-48小時；將活化好的出發菌株NTT33涂布于平皿上，取約1mg的亞硝基胍(Nitrosoguanidine)點在平皿一側，于37℃培養24-48小時，待平皿上生長出菌苔。

5、初篩：在亞硝基胍顆粒產生的抑菌圈周圍挑取菌苔，接種于上述葡萄糖液體培養基，37℃培養24-48小時后，再于含有利福平(30μg/mL)槐豆膠平皿上涂布，37℃培養24小時后，獲得利福平抗性單菌落。

6、復篩：對獲得的利福平抗性單菌落突變株進行復篩，其方法是挑取含利福平的初篩槐豆膠平皿上周圍產生透明圈的單菌落，分別接種在槐豆膠液體培養基、槐豆膠液體培養基+葡萄糖培養基和葡萄糖液體培養基中，37℃振蕩培養，不同時間(每隔4h)取樣，離心，提取上清液為粗酶液，按Akino(Agr.Biol.Chem.,52:773-779，1988)的方法測定甘露聚糖酶活性；3種培養基中培養獲取的粗酶液均測到甘露聚糖酶活性者，為產組生成型和抗葡萄糖代謝阻遏的堿性β-甘露聚糖酶的突變株；本發明將該突變株記為嗜堿芽孢桿菌(Bacillus alcalophilus)NTT33C6D。

7、交替培養篩選雙突變高產菌株：將NTT33C6D進行交替培養，其方法是在槐豆膠培養基和葡萄糖培養基中交替培養6-10次，以富集組成型突變菌株；然后涂布葡萄糖平皿，挑取單菌落，分別接種在槐豆膠培養基、葡萄糖培養基和槐豆膠+葡萄糖混合培養基中培養，37℃，180rpm振蕩培養；不同時間取樣，離心(8000rpm×10分鐘)提取粗酶液，按Akino(Agr.Biol.Chem.,52:773-779,1988)的方法測定甘露聚糖酶活性；在3種培養基中培養獲取的粗酶液測定甘露聚糖酶的產酶進程曲線，篩選出產生組成型和抗葡萄糖代謝阻遏的堿性β-甘露聚糖酶的雙突變株嗜堿芽孢桿NTT33C6D2(圖1)；由圖2可知，NTT33C6D2菌株在葡萄糖培養基中酶活力峰值(9180U)出現在22h，而在槐豆膠培養基中出現兩個峰值12h為6510U，24h為9010U，混合培養基中與NTT33C6D酶活力峰值無太大區別；NTT33C6D2與NTT33C6D相比，在葡萄糖培養基酶活力高了2.56倍，在槐豆膠培養基中酶活力提高了1.64倍。

分離篩選得到一種雙突變的嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2，于2016年6月8日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地址為湖北省武漢市武漢大學，保藏編號為CCTCC NO.M2016317。

該嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2的菌體呈桿狀，外形大小為0.5～0.65×2.6～3.4μm，染色均勻，有運動力，鞭毛側生，內生孢子呈橢圓形，孢子囊稍大；好氧型，過氧化氫酶呈陽性；菌落呈圓形，表面光滑，有同心圓；生長于葡萄糖培養基上時，對葡萄糖的作用緩慢，并且在培養基中檢查不出酸的產生；該菌株分解淀粉，但不還原硝酸鹽；該菌株產生的β-甘露聚糖酶，經純化后分析，分子量為38900Da，等電點PI為3.0，酶反應最適pH為9.0～10.0，最適反應溫度為80℃，穩定溫度為60℃左右，金屬離子中Cu²⁺、Ba²⁺、Mg²⁺、Al²⁺、Co²⁺對該酶有一定的激活作用，而Ag⁺、Hg²⁺、Mn²⁺對該酶有明顯的抑制作用；該酶水解槐豆膠后產生葡萄糖、甘露糖以及低聚糖。

一株嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2在苧麻脫膠和苧麻生產中的應用，其步驟是：

1、將突變株NTT33C6D2于槐豆膠液體培養基中，37℃培養20-24小時活化；然后轉入含有苧麻的培養基中，37℃振蕩培養6-8小時；

2、脫膠后分散如棉花狀的苧麻水洗后，在含0.3-0.6％質量濃度的NaOH、0.1％質量濃度的三聚磷酸鈉溶液中，0.2Mpa，煮煉1-2小時；

3、按化學脫膠的一般處理方法(歐陽曙，姚綱，苧麻化學脫膠新技術的評述與應用[J].苧麻紡織科技,1993,16(1):30-32.)進行水洗、打麻、漂白(有效氯0.5-0.8g/L)、水洗、酸洗(pH2.5)、水洗、甩干、給油后，甩干、干燥，得到精干麻。

與現有技術相比，本發明具有以下優點和有益效果：

1、該菌株的優良特性及產酶優點：

該突變株將對降解膠質成分中含量最高的甘露聚糖的β-甘露聚糖酶由誘導型和受葡萄糖代謝阻遏性質，轉變成組成型和抗葡萄糖代謝阻遏的酶，并提高了酶活力，導致其菌種發酵生產周期由原來的36-48小時，縮短至20-24小時，縮短發酵周期50％以上；在苧麻生物脫膠應用中，也顯著縮短了生物脫膠周期，由原來的脫膠周期16小時，縮短至6-8小時；同時提高了膠質組分去除率；這些性質都起到了提高設備的利用率巨大優勢(曹軍衛、陳漱涢，鄭連爽，專利CN97109044)。

2、與現有的生物脫膠技術相比，該菌株在生物脫膠中的優點：

1)國內外首創采用嗜堿芽孢桿菌組成型和抗葡萄糖代謝阻遏雙突變株進行苧麻生物脫膠研究，生產穩定性極高，采用嗜堿細菌進行脫膠可以保護好麻纖維在整個脫膠過程中不受破壞，并且由于脫膠堿性環境的存在，降低了其它雜菌污染的可能，使菌種可以的長期穩定地用于大規模生產。

2)其他生物脫膠技術對原麻刮質有必須極優的要求，麻皮、麻殼等雜質對生物脫膠有極為不利的影響；而本發明得到的突變株用于生物脫膠，適用于市場上所有品種和品質等級的原麻。

3)微生物生長所需碳源完全來自原麻膠質，不需添加任何營養有機物，僅輔以少量無機鹽，克服了培養細菌還需使用的大量有機原料(如黃豆粉、玉米淀粉、白糖等)，同時也避免了這些有機物沒完全降解被排放所帶來的“二次污染”。

4)脫膠菌種可反復使用10次以上，大大減低了菌種生產成本。

3、與現有的化學脫膠技術相比，該菌株在脫膠中的優點：

1)比化學脫膠降低60％以上的化工原料消耗；

2)比化學脫膠技術節水40％以上；

3)需處理的廢水量比化學脫膠減少90％，廢水處理后COD_Cr濃度可達到國家1級許可排放標準。

4、利用本發明提供的脫膠方法在大大縮短菌種發酵周期和生物脫膠周期的基礎上，制得的精干麻仍然可以達到以下國家一級指標：殘膠率＜2.0％，硬條率＜1％，束纖維強度＞5.5cN/dtex，回潮率8.6％，伸長率6-9％；外觀質量：脫膠均勻，纖維松散。柔軟，富有光澤，硬條、硬塊、夾生少。

附圖說明

圖1為一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2的顯微照片圖。

圖2為一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2在不同培養基中的產酶進程曲線圖。

具體實施方式

實施例1

一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2的分離篩選方法，其步驟是：

1)樣品采集

從中國內蒙古自治區哲里木盟地區進行土壤取樣，將土壤樣品1g懸于無菌水中，混合均勻，上清液接入葡萄糖培養基中，其成分為：葡萄糖10g；蛋白胨5g；酵母膏5g；K₂HPO₄1g；MgSO₄·7H₂O 0.2g；瓊脂18g；水1000mL；用Na₂CO₃調節pH10-11；28℃培養24-48小時。

2)分離及純化

挑選上述培養基中單菌落轉入槐豆膠固體培養基中，其成分為：槐豆膠10g，酵母膏5g，蛋白胨5g，K₂HPO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O 0.1g，瓊脂18g，水1000mL，用Na₂CO₃調節pH10-11；28℃培養24-36小時，選擇菌落周圍產生透明圈的菌株；將這些菌株在槐豆膠液體培養基(除不加瓊脂外，其余成分與槐豆膠固體培養基相同)中，28℃，180rpm振蕩培養24-48小時后，測定甘露聚糖酶活性(Akino，Agr.Biol.Chem.,52:773-779,1988)。

3)菌株鑒定

經形態學觀察，該菌體呈桿狀，外形大小為0.5～0.65×2.6～3.4μm，美藍染色均勻，有運動力，鞭毛側生，內生孢子呈橢圓形，孢子囊稍大。

經培養發現，該菌株好氧，過氧化氫酶為陽性；菌落呈圓形，表面光滑，有同心圓；生長于葡萄糖培養基中檢查不出酸的產生；該菌株分解淀粉，但不還原硝酸鹽；在pH10-11的培養基中生長良好。

該菌株產生的組成型和抗葡萄糖代謝阻遏的β-甘露聚糖酶，經純化后分析，分子量為38900Da，等電點PI為3.0，酶反應最適pH為10.0～11.0，最適反應溫度為80℃，穩定溫度為60℃左右，金屬離子中Cu²⁺、Ba²⁺、Mg²⁺、Al²⁺、Co²⁺對該酶有一定的激活作用，而Ag⁺、Hg²⁺、Mn²⁺對該酶有明顯的抑制作用，該酶水解魔芋粉后產生葡萄糖、甘露糖以及低聚糖。

基于上述菌學特征和理化性質，并參照伯杰氏細菌鑒定手冊(Bergey's Manual of Determinative Bacteriology,9th Edition,the Williams&Wilkins Company,Baltimore,1992)，本發明人將該菌株確定為嗜堿芽孢桿菌(Bacillus alcalophilus)NTT33。

4)誘變

葡萄糖液體培養基作為活化培養基，葡萄糖液體培養基的成分為每升含有葡萄糖10g，酵母膏10g，蛋白胨5g，K₂HPO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O 0.1g，用Na₂CO₃調節pH至10-11，滅菌；將嗜堿芽孢桿菌NTT33菌株接種至上述葡萄糖液體培養基中，于37℃振蕩，180rpm，培養24-48小時活化；將活化好的出發菌株NTT33涂布于平皿上，取約1mg的亞硝基胍(Nitrosoguanidine)點在平皿一側，于37℃培養24-48小時，待平皿上生長出菌苔。

5)突變株的初篩

利福平是一類作用于核酸轉錄和翻譯水平的抗生素，用利福平做為突變株初篩的標記，是由于抗利福平突變，往往會伴有其他基因突變產生，因此可以用此抗性突變做為基因突變的遺傳標記，有利于提高突變株篩選的選擇性。

在亞硝基胍顆粒產生的抑菌圈周圍挑取菌苔，接種于上述葡萄糖液體培養基，37℃，180rpm震蕩培養24-48小時后，再于含有利福平的槐豆膠培養基平皿上涂布，37℃培養24小時后，獲得利福平抗性單菌落；含有利福平的槐豆膠平板培養基成分為每升含有槐豆膠5g，酵母膏1g，K₂HPO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，瓊脂粉1.2～1.5g，并用Na₂CO₃調pH至10-11，滅菌后，加入利福平至終濃度30μg/mL，倒平皿。

6)突變株的復篩

對獲得的單菌落突變株進行復篩的方法是挑取含有利福平的槐豆膠平皿上產生透明圈周圍的單菌落，分別接種在槐豆膠液體培養基、槐豆膠+葡萄糖液體培養基和葡萄糖液體培養基中，37℃，180rpm振蕩培養，不同時間(每隔4小時)取樣，離心(8000rpmX10分鐘)提取上清液為粗酶液，按Akino(Agr.Biol.Chem.,52:773-779，1988)的方法測定甘露聚糖酶活性；槐豆膠+葡萄糖液體培養基成分為每升含有槐豆膠5g，葡萄糖5g，酵母膏1g，K₂HPO₄1g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，并用Na₂CO₃調pH至10-11；在3種培養基中培養獲取的粗酶液均檢測到甘露聚糖酶活性者，為產生組成型和抗葡萄糖代謝阻遏甘露聚糖酶的突變株；本發明將該突變株記為嗜堿芽孢桿菌(Bacillus alcalophilus)NTT33C6D。

7)交替培養篩選雙突變高產菌株

將NTT33C6D進行交替培養，其方法是首先接種在槐豆膠液體培養基中，37℃，180rpm振蕩培養20小時左右，再轉接至葡萄糖液體培養基中，180rpm振蕩培養20小時左右，如此在槐豆膠培養基和葡萄糖培養基中交替培養6-10次，以富集組成型突變菌株；然后涂布葡萄糖平皿，挑取單菌落，分別接種在槐豆膠培養基、葡萄糖培養基和槐豆膠+葡萄糖混合培養基中培養，37℃，180rpm振蕩培養；每隔4小時取樣，離心(8000rpm×10分鐘)提取粗酶液，按Akino(Agr.Biol.Chem.,52:773-779,1988)的方法測定甘露聚糖酶活性；一個酶活力單位定義為在本實驗條件下，每分鐘釋放1μg甘露糖的量，計算公式為：

U＝y×n×1/10

式中：U—酶活力單位；

y—還原糖的微克數；

n—酶液稀釋倍數；

10—反應時間為10min。

根據上述方法測得的數據，以時間為橫坐標，以酶活力為縱坐標，繪制產酶進程曲線；通過在3種培養基中培養獲取的粗酶液測定甘露聚糖酶的產酶進程曲線，在多個菌株中篩選出一株高產組成型和抗葡萄糖代謝阻遏甘露聚糖酶的雙突變株嗜堿芽孢桿NTT33C6D2(圖1)；由圖2可知，NTT33C6D2菌株在槐豆膠培養基中培養24h時，最高酶活力為811.02U；在葡萄糖培養基中培養22h時，最高酶活力可達到826.5U。混合培養基中與NTT33C6D酶活力峰值無太大區別；NTT33C6D2與NTT33C6D相比，在葡萄糖培養基酶活力高了2.56倍，在槐豆膠培養基中酶活力提高了1.64倍；與專利CN97109044比較，此菌株解除了對底物或底物的結構類似物的依賴，并且不再受到葡萄糖或內源產生的其他單糖(如甘露糖)的分解代謝阻遏，使產酶高峰明顯提前，而有助于縮短生物脫膠周期。

實施例2：

一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2在苧麻生產中的應用，其步驟是：

1)將突變株NTT33C6D2于槐豆膠液體培養基中，37℃培養20-24小時活化；然后轉入含有苧麻的培養基中，37℃，180rpm振蕩培養，不同時間(每隔4小時)取樣觀察其纖維分散情況，并測定殘膠率(表1)，測定分析方法如中華人民共和國《苧麻化學成分定量分析方法》(GB5889-86)；含有苧麻的培養基成分為苧麻10g，(NH₄)₂SO₄ 1.5g，K₂HPO₄ 0.2g，MgSO₄·7H₂O 0.25g，水150mL，用Na₂CO₃調節pH至10-11，滅菌后接種。

表1苧麻生物脫膠殘膠率測定

2)該突變株用于去除麻皮苧麻的生物脫膠，6-8小時脫膠率達65％以上，用于未去除麻皮的苧麻生物脫膠6-8小時脫膠率達80％以上。生物脫膠殘膠率在11～14％之間，均對后續處理無太大影響，故生物脫膠周期定為6-8小時。

實施例3

一種嗜堿芽孢桿菌NTT33C6D2在苧麻生產中的應用及效果評估，其步驟是：

1)按照實施例2中步驟1)所述方法對苧麻進行生物脫膠6-8小時；

2)脫膠后分散如棉花狀的苧麻水洗1次后，在含0.3-0.5％質量濃度的NaOH、0.1％質量濃度的三聚磷酸鈉溶液中，0.2Mpa，煮煉1-2小時；

3)按化學脫膠的一般處理方法(歐陽曙，姚綱，苧麻化學脫膠新技術的評述與應用[J].苧麻紡織科技,1993,16(1):30-32.)進行水洗、打麻、漂白(有效氯0.5-0.8g/L)、水洗、酸洗(pH2.5)、水洗、甩干、給油后，甩干、干燥，得到精干麻，獲得的精干麻達到如表2所示的質量標準，測定分析方法如中華人民共和國《苧麻化學成分定量分析方法》(GB5889-86)。

表2苧麻精干麻質量分析

4)對步驟2)中的脫膠廢液進行化學耗氧量(COD_Cr)測定(國家環保局，水和廢水監測分析方法編委會水和廢水監測分析方法[M].北京：中國環境出版社，1989.)，結果表明COD_Cr約為5000mg/mL；雖然廢液的COD_Cr值較高，但主要是含有高濃度菌體蛋白的污水，屬于極容易利用生物法處理的污水。

5)采用本發明生物脫膠工藝，經濟效益明顯，比化學脫膠降低60％以上的化工原料消耗；比化學脫膠技術節水40％以上；需處理的廢水量比化學脫膠減少90％，廢水處理后COD_Cr濃度可達到國家1級許可排放標準。

本技術可在全國麻紡脫膠行業范圍內推廣，除用于苧麻脫膠行業，還在黃麻、劍麻、羅布麻、竹原纖維等的生物脫膠實驗中取得了顯著效果。