本發明屬于醫藥
技術領域：
，具體是一種巖白菜素提取及精制方法。
背景技術：
：巖白菜素(Bergenin，BG)屬于異香豆素類化合物。又稱巖白菜內酯、矮茶素。該化合物為白色針狀晶體,化學式為C14H16O9,分子量為328.27,熔點為236—238℃,氣微,味苦,遇光和熱變色,在甲醇中溶解,在水或乙醇中微溶。臨床上用于治療慢性支氣管炎、肺氣腫、支氣管哮喘等，并且療效顯著，副作用小已得到人們廣泛的關注和認可。現有技術中巖白菜素的提取工藝有很多種,如煎煮法、醇提法,飽和石灰水-乙醇提取法等。煎煮法操作復雜,需要結晶的次數較多,不利于巖白菜素最后的晶體析出；醇提法使用了大量的乙醇,結晶次數也多,提取收率也不高，提取及精制時間過長。現有技術中較多使用用飽和石灰水提取，操作簡單，使得藥材中的鞣質生成不溶于水的鈣鹽而方便除去，專利申請號為2010105108207公開的“一種巖白菜素的制備方法”同樣使用飽和石灰水提取，雖然操作簡單，但是所得的鞣質與鈣鹽生成的不溶性沉淀無法將鞣質再進行利用，研究表明，鞣質具有收斂性，內服可用于治療胃腸道出血，潰瘍和水瀉等癥；外用于創傷、灼傷，可使創傷后滲出物中蛋白質凝固，形成痂膜，可減少分泌和防止感染，鞣質能使創面的微血管收縮，有局部止血作用。鞣質能凝固微生物體內的原生質，故有抑菌作用，有些具抗病毒等作用，而七葉鬼燈檠等有些含有巖白菜素的藥材鞣質含量較高，而現有技術的提取方法均將提取的鞣質沒有進行合理的利用及回收，嚴重的造成了資源的浪費。同時現有技術中對于巖白菜素精制過程時間過長，造成了生產成本的增加。技術實現要素：本發明的目的在于針對現有技術存在的缺陷或不足，提供一種巖白菜素提取方法。另一種目的在于，提供上述巖白菜素粗品的精制方法。為了實現本發明的目的，本發明通過以下技術方案實現：一種巖白菜素提取方法，包括以下具體步驟：①原料前處理：選用盤龍七、多花落新婦或七葉鬼燈檠中的任一一種藥材，去除泥土、雜質及非藥用部位，凈洗，切至厚度0.2-0.4cm的薄片，放置于恒溫箱中干燥，并用紅外燈照射，恒定溫度為30-40℃，干燥至恒重即可；②原料粉碎處理：將預處理后的生藥材粉碎，過0.5mm篩網；③巖白菜素粗品提取：在25-30℃環境中，將粉碎處理后的生藥粉與質量濃度為0.5％明膠溶液、質量濃度為10％的醋酸鈉溶液按照質量比＝2:1:5的比例混合后置于攪拌裝置中，攪拌15-30min，過濾，得第一濾液和第一沉淀；將第一濾液加熱濃縮至原液體積的三分之一，加熱溫度范圍在80-90℃，得濃縮液，然后將濃縮液過濾，即得第二濾液；將第二濾液用濃鹽酸調pH為2-3，攪拌，75℃-80℃，加熱10-15min，放置，過濾，析出結晶，用流動水沖洗至無色，烘干，得巖白菜素粗結晶品；④粗品精制：取巖白菜素粗結晶品置于加熱攪拌裝置中，加熱溫度恒定范圍在90-100℃；然后將巖白菜粗結晶品重量4-12倍的質量濃度為85％的酒精均分為四等分，邊攪拌邊加，每隔20min加入四分之一的量，直至加完,繼續加熱攪拌30-40min，過濾，得第三濾液；將第三濾液減壓濃縮至體積為原液的二分之一，在-10℃至-20℃環境中靜置30-60min，然后用160-200目的濾網過濾，回收酒精，得巖白菜素初結晶品；將巖白菜處制品與質量濃度為40％的甲醇溶液，按質量：體積＝1:2的比例混合后，煎煮30-40min，用600目的濾油紙過濾，得第四濾液，將第四濾液迅速轉入溫度為0-4℃環境中靜置20-30min,析出結晶，烘干，得精制的巖白菜素，回收甲醇；⑤鞣質回收處理：取第一沉淀，加入5-10倍量的步驟④回收的甲醇溶液浸漬放置12-20小時,然后進行滲漉循環提取，循環次數為3次，滲漉速度為1-3ml/min，將最后一次滲漉液過濾得提取液，回收甲醇，得鞣質。與現有技術相比.本發明有益效果在于：1、本發明根據巖白菜素的特性，采用的提取方法，粗品提取及精制效率提高，縮短了提取及精制時間，并且所得產品符合藥品要求。2、本發明在巖白菜素粗制過程中不僅提高了巖白菜素在堿性條件下水溶液中的溶解度，保證了溶解效果，而且將藥材中的鞣質利用回收的溶劑溶解回收利用，合理的利用了資源，降低了能耗與成本。具體實施方式以下通過實施例來進一步描述本發明，應該理解的是，這些實施例僅用于例證的目的，絕不限于本發明。實施例1一種巖白菜素提取方法，包括以下具體步驟：①原料前處理：選用盤龍七藥材，去除泥土、雜質及非藥用部位，凈洗，切至厚度0.2cm的薄片，放置于恒溫箱中干燥，并用紅外燈照射，恒定溫度為30℃，干燥至恒重即可；②原料粉碎處理：將預處理后的生藥材粉碎，過0.5mm篩網；③巖白菜素粗品提取：在25℃環境中，將粉碎處理后的生藥粉與質量濃度為0.5％明膠溶液、質量濃度為10％的醋酸鈉溶液按照質量比＝2:1:5的比例混合后置于攪拌裝置中，攪拌15min，過濾，得第一濾液和第一沉淀；將第一濾液加熱濃縮至原液體積的三分之一，加熱溫度范圍在80℃，得濃縮液，然后將濃縮液過濾，即得第二濾液；將第二濾液用濃鹽酸調pH為2，攪拌，75℃，加熱10min，放置，過濾，析出結晶，用流動水沖洗至無色，烘干，得巖白菜素粗結晶品；④粗品精制：取巖白菜素粗結晶品置于加熱攪拌裝置中，加熱溫度恒定在90℃；然后將巖白菜粗結晶品重量4倍的質量濃度為85％的酒精均分為四等分，邊攪拌邊加，每隔20min加入四分之一的量，直至加完,繼續加熱攪30min，過濾，得第三濾液；將第三濾液減壓濃縮至體積為原液的二分之一，在-10℃環境中靜置30min，然后用160目的濾網過濾，回收酒精，得巖白菜素初結晶品；將巖白菜處制品與質量濃度為40％的甲醇溶液，按質量：體積＝1:2的比例混合后，煎煮30min，用600目的濾油紙過濾，得第四濾液，將第四濾液迅速轉入溫度為0℃環境中靜置20min,析出結晶，烘干，得精制的巖白菜素，回收甲醇；所述的酒精為質量濃度為85％的酒精；⑤鞣質回收處理：取第一沉淀，加入5倍量的步驟④回收的甲醇溶液浸漬放置12小時,然后進行滲漉循環提取，循環次數為3次，滲漉速度為1ml/min，將最后一次滲漉液過濾得提取液，回收甲醇，得鞣質。實施例2一種巖白菜素提取方法，包括以下具體步驟：①原料前處理：選用多花落新婦藥材，去除泥土、雜質及非藥用部位，凈洗，切至厚度0.4cm的薄片，放置于恒溫箱中干燥，并用紅外燈照射，恒定溫度40℃，干燥至恒重即可；②原料粉碎處理：將預處理后的生藥材粉碎，過0.5mm篩網；③巖白菜素粗品提取：在30℃環境中，將粉碎處理后的生藥粉與質量濃度為0.5％明膠溶液、質量濃度為10％的醋酸鈉溶液按照質量比＝2:1:5的比例混合后置于攪拌裝置中，攪拌30min，過濾，得第一濾液和第一沉淀；將第一濾液加熱濃縮至原液體積的三分之一，加熱溫度范圍在90℃，得濃縮液，然后將濃縮液過濾，即得第二濾液；將第二濾液用濃鹽酸調pH為3，攪拌，80℃，加熱15min，放置，過濾，析出結晶，用流動水沖洗至無色，烘干，得巖白菜素粗結晶品；④粗品精制：取巖白菜粗結晶品置于加熱攪拌裝置中，加熱溫度恒定溫度為100℃；然后將巖白菜粗結晶品重量8倍的質量濃度為85％的酒精均分為四等分，邊攪拌邊加，每隔20min加入四分之一的量，直至加完,繼續加熱攪40min，過濾，得第三濾液；將第三濾液減壓濃縮至體積為原液的二分之一，在-20℃環境中靜置60min，然后用200目的濾網過濾，回收酒精，得巖白菜素初結晶品；將巖白菜處制品與質量濃度為40％的甲醇溶液，按質量：體積＝1:2的比例混合后，煎煮40min，用600目的濾油紙過濾，得第四濾液，將第四濾液迅速轉入溫度為4℃環境中靜置30min,析出結晶，烘干，得精制的巖白菜素，回收甲醇；所述的酒精為質量濃度為85％的酒精；⑤鞣質回收處理：取第一沉淀，加入10倍量的步驟④回收的甲醇溶液浸漬放置20小時,然后進行滲漉循環提取，循環次數為3次，滲漉速度為3ml/min，將最后一次滲漉液過濾得提取液，回收甲醇，得鞣質。實施例3一種巖白菜素提取方法，包括以下具體步驟：①原料前處理：選用七葉鬼燈檠藥材，去除泥土、雜質及非藥用部位，凈洗，切至厚度0.3cm的薄片，放置于恒溫箱中干燥，并用紅外燈照射，恒定溫度為35℃，干燥至恒重即可；②原料粉碎處理：將預處理后的生藥材粉碎，過0.5mm篩網；③巖白菜素粗品提取：在28℃環境中，將粉碎處理后的生藥粉與質量濃度為0.5％明膠溶液、質量濃度為10％的醋酸鈉溶液按照質量比＝2:1:5的比例混合后置于攪拌裝置中，攪拌20min，過濾，得第一濾液和第一沉淀；將第一濾液加熱濃縮至原液體積的三分之一，加熱溫度范圍在85℃，得濃縮液，然后將濃縮液過濾，即得第二濾液；將第二濾液用濃鹽酸調pH為2-3，攪拌，76℃，加熱12min，放置，過濾，析出結晶，用流動水沖洗至無色，烘干，得巖白菜素粗結晶品；④粗品精制：取巖白菜粗結晶品置于加熱攪拌裝置中，加熱溫度恒定為95℃；然后將巖白菜粗結晶品重量12倍的質量濃度為85％的酒精均分為四等分，邊攪拌邊加，每隔20min加入四分之一的量，直至加完,繼續加熱攪35min，過濾，得第三濾液；將第三濾液減壓濃縮至體積為原液的二分之一，在-15℃環境中靜置45min，然后用180目的濾網過濾，回收酒精，得巖白菜素初結晶品；將巖白菜處制品與質量濃度為40％的甲醇溶液，按質量：體積＝1:2的比例混合后，煎煮35min，用600目的濾油紙過濾，得第四濾液，將第四濾液迅速轉入溫度為2℃環境中靜置25min,析出結晶，烘干，得精制的巖白菜素，回收甲醇；所述的酒精為質量濃度為85％的酒精；⑤鞣質回收處理：取第一沉淀，加入7倍量的步驟④回收的甲醇溶液浸漬放置15小時,然后進行滲漉循環提取，循環次數為3次，滲漉速度為2ml/min，將最后一次滲漉液過濾得提取液，回收甲醇，得鞣質。試驗例1、粉碎粒度巖白菜素粗品提取效率的影響試驗方法:取多花落新婦藥材，去除泥土、雜質及非藥用部位，凈洗，切至厚度0.3cm的薄片，放置于恒溫箱中干燥，并用紅外燈照射，恒定溫度為35℃，干燥至恒重后取1000g，隨機將1000g生藥材分成6組，編號為1-6，每組200g,然后五個試驗組的生藥材分別粉碎，過0.1mm、0.3mm、0.5mm、0.7mm、0.9mm、1.0mm篩網，將粉碎后的生藥粉按照實施例2所述的巖白菜素粗品提取步驟，進行巖白菜素粗品的提取，稱量粗品量，計算巖白菜提取率,測定結果見表1。表1組別篩網孔徑巖白菜素粗品量(g)提取率％第1組0.1mm16.428.21第2組0.3mm17.58.75第3組0.5mm20.4210.21第4組0.7mm15.927.96第5組0.9mm16.028.01第6組1.0mm14.97.45由表1可知，經過對原藥材進行不同程度的粉碎，原料被粉碎過0.5mm時，提取效率最高，因此可知，經過試驗本發明的原料粒度，有利于巖白菜素粗品的提取，提取率高。2、不同精制方法對巖白菜素精品提取量的影響試驗方法:取巖白菜素粗品150g,均分為3組，每組50g,具體按照以下方案進行試驗。第1組：按照本發明實施例1步驟④所述的精制方法進行精制。第2組：按照傳統的精制方法進行用乙醇精制，具體是將粗晶溶于95％乙醇中,加活性炭煮沸15min,趁熱過濾,用旋轉蒸發儀回收部分乙醇,室溫放置48h之后再進行抽濾,水洗烘干,得巖白菜素精品。第3組：按照傳統的精制方法進行水精制，具體是將將粗晶溶于水中,加熱煮沸至粗品全部溶解，再加入活性炭(粗品的3％)，繼續煮沸15min后趁熱過濾，濾液冷卻放置48h結晶，離心分離，得巖白菜素精品。測定結果見表2表2由表2可知，與傳統巖白菜素粗品水精制和乙醇精制方法相比，本發明的酒精-甲醇聯合精制方法，不僅減少了酒精的用量，而且提取效率顯著提高，純度較高，而且精制時間大大縮短，提高了生產效率，降低了生產成本。3、巖白菜素提取過程對副產物鞣質回收的影響取七葉鬼燈檠藥材，去除泥土、雜質及非藥用部位，凈洗，切至厚度0.3cm的薄片，放置于恒溫箱中干燥，并用紅外燈照射，恒定溫度為35℃，干燥至恒重后取200g，隨機將200g生藥材分成2組，編號為1-2，每組100g,然后六個試驗組的生藥材分別粉碎，過0.5mm篩網，具體按照以下方案進行試驗：第1組：按照實施例3所述的鞣質提取方法，具體為：在25℃環境中，將粉碎處理后的七葉鬼燈檠生藥粉與質量濃度為0.5％明膠溶液、質量濃度為10％的醋酸鈉溶液按照質量：體積的＝2:1:5的比例混合后置于攪拌裝置中，攪拌15min，過濾，得第一沉淀，并按照步驟⑤進行處理并提取鞣質。第2組：按照傳統鞣質處理方法：是加入粉碎后的七葉鬼燈檠加生藥粗粉量10倍的飽和石灰水使溶液pH調至11,回餾加熱提取3次,每次4h,合并沉淀物。所述的七葉鬼燈檠生藥材處理及粉碎同實施例3所述的原料處理及粉碎方法一致。測定結果見表3表3由表3可知，與傳統方法去除鞣質不能二次利用相比，本發明采用的明膠堿溶液去除鞣質，去除率高，并且可以通過回收進行二次利用，節約了資源，實現了資源的合理利用。當前第1頁1 2 3