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一種新型細胞培養液制備方法與流程

文檔序號:12411281閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種新型細胞培養液制備方法,其特征在于,包含以下步驟:

1)首先,進行100mg/mL Amp的配制:稱量50gAmp置于500mL容量瓶中,其后加入80mL滅菌水,充分混合溶解后,定容至500mL;用0.1μm厚度的濾膜過濾其中的除菌,用10個50ml的小瓶分裝后于在-20℃的恒溫下培養1至2個小時;

2)氨芐青霉素陽性液體培養基的配制;取胰蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl10g溶解于1000mL水中,進行分裝成20個50ml的小瓶,然后在121℃的高溫下滅菌20分鐘;待溫度降至40℃以下時,按照6μL/mL,加入氨卞青霉素貯存液,使其終濃度達到60μg/mL,即制備完成所述氨芐青霉素陽性液體培養基;

3)氨芐青霉素陽性固體培養基的配制:先按照上一步的步驟配制所述氨芐青霉素陽性液體培養基,然后在其中加入濃度為2.5g/100mL的瓊脂粉,進行高壓滅菌30分鐘,然后待溫度降至40℃以下時,按照6μL/mL加入氨芐青霉素貯存液,使終濃度達到60μg/mL,即制備完成所述氨芐青霉素陽性固體培養基;

4)將所述氨芐青霉素陽性液體培養基與所述氨芐青霉素陽性固體培養基進行混合,將第1)步制備所得100mg/mL Amp的加入,再溶解于180mL去離子水中,定容于500mL,用0.1μm厚度的濾膜過濾除菌,保存于-20℃待用。

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