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PCR反應(yīng)管及包含其的固相載具的制作方法

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PCR反應(yīng)管及包含其的固相載具的制造方法與工藝

本實(shí)用新型涉及酶學(xué)或微生物學(xué)裝置,具體涉及PCR反應(yīng)管及包含其的固相載具。



背景技術(shù):

PCR反應(yīng)管是PCR擴(kuò)增反應(yīng)實(shí)施中最普遍使用的一個(gè)反應(yīng)器皿,目前現(xiàn)有得PCR管僅由一個(gè)潔凈的PCR反應(yīng)管本體構(gòu)成,在使用其進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)時(shí),通常需要將引物、探針、緩沖鹽離子、酶混合物和模板分別加入PCR反應(yīng)管內(nèi),混合均勻后將PCR反應(yīng)管放入PCR儀上進(jìn)行PCR反應(yīng),上述過(guò)程中各物質(zhì)的添加量都有嚴(yán)格的要求,一旦添加量不符合標(biāo)準(zhǔn),便會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增反應(yīng)的失敗。因此操作人員在進(jìn)行上述物質(zhì)添加時(shí),都異常小心,從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)進(jìn)度緩慢,通常一個(gè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)實(shí)驗(yàn)需要超過(guò)一個(gè)小時(shí)。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

本實(shí)用新型要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種能夠提高PCR擴(kuò)增反應(yīng)實(shí)驗(yàn)速度的PCR反應(yīng)管及包含其的固相載具。

本實(shí)用新型一種PCR反應(yīng)管,包括:PCR反應(yīng)管本體;所述PCR反應(yīng)管本體的內(nèi)腔底端固定有預(yù)留反應(yīng)物;所述預(yù)留反應(yīng)物包含的物質(zhì)有緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針。

本實(shí)用新型一種PCR反應(yīng)管,其中所述預(yù)留反應(yīng)物為緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針的結(jié)晶混合物。

本實(shí)用新型一種PCR反應(yīng)管,其中所述預(yù)留反應(yīng)物包括自上而下依次貼合設(shè)置的隔離層和混合層;其中所述隔離層為緩沖鹽離子材質(zhì)的冰層;所述混合層為酶混合物、引物和探針的結(jié)晶混合物層。

本實(shí)用新型一種PCR反應(yīng)管,其中所述PCR反應(yīng)管本體的內(nèi)壁設(shè)置有卡槽;所述預(yù)留反應(yīng)物表面設(shè)有卡突;所述預(yù)留反應(yīng)物通過(guò)所述卡槽和所述卡突的配合固定設(shè)置于所述PCR反應(yīng)管本體的內(nèi)腔。

本實(shí)用新型一種固相載具,包括:承載板和多個(gè)所述的PCR反應(yīng)管;多個(gè)所述PCR反應(yīng)管矩形陣列排布,并分別固定于所述承載板上。

本實(shí)用新型一種固相載具,其中所述PCR反應(yīng)管的數(shù)量為48個(gè)、96個(gè)或384個(gè)。

本實(shí)用新型所提供的PCR反應(yīng)管,由于反應(yīng)管本體內(nèi)腔底端固定有預(yù)留反應(yīng)物,因此在進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)時(shí),只需要將待檢測(cè)的模板加入PCR反應(yīng)管本體內(nèi)腔即可,避免了添加預(yù)留反應(yīng)物的繁瑣程序,從而提高了PCR擴(kuò)增反應(yīng)的速度。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本實(shí)用新型具體實(shí)施方式或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案,下面將對(duì)具體實(shí)施方式或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹。在所有附圖中,類(lèi)似的元件或部分一般由類(lèi)似的附圖標(biāo)記標(biāo)識(shí)。附圖中,各元件或部分并不一定按照實(shí)際的比例繪制。

圖1為本實(shí)用新型一種PCR反應(yīng)管當(dāng)預(yù)留反應(yīng)物為緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針的固態(tài)混合物時(shí)的結(jié)構(gòu)示意圖;

圖2為本實(shí)用新型一種PCR反應(yīng)管當(dāng)預(yù)留反應(yīng)物為隔離層和混合層時(shí)的結(jié)構(gòu)示意圖;

圖3為本實(shí)用新型一種PCR反應(yīng)管中PCR反應(yīng)管本體的結(jié)構(gòu)示意圖;

圖4為圖3中P處的局部放大圖;

圖5為當(dāng)圖3所示的PCR反應(yīng)管本體內(nèi)存在預(yù)留反應(yīng)物時(shí)P處的局部放大圖;

圖6為本實(shí)用新型一種固相載具的結(jié)構(gòu)示意圖。

附圖標(biāo)記:

1-PCR反應(yīng)管

11-PCR反應(yīng)管本體

111-卡槽

12-預(yù)留反應(yīng)物

121-混合層

122-隔離層

123-卡突

2-承載板

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型技術(shù)方案的實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。以下實(shí)施例僅用于更加清楚地說(shuō)明本實(shí)用新型的技術(shù)方案,因此只作為示例,而不能以此來(lái)限制本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。

需要注意的是,除非另有說(shuō)明,本申請(qǐng)使用的技術(shù)術(shù)語(yǔ)或者科學(xué)術(shù)語(yǔ)應(yīng)當(dāng)為本實(shí)用新型所屬領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的通常意義。

在本申請(qǐng)的描述中,需要理解的是,術(shù)語(yǔ)“中心”、“縱向”、“橫向”、“長(zhǎng)度”、“寬度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“頂”、“底”“內(nèi)”、“外”、“順時(shí)針”、“逆時(shí)針”、“軸向”、“徑向”、“周向”等指示的方位或位置關(guān)系為基于附圖所示的方位或位置關(guān)系,僅是為了便于描述本實(shí)用新型和簡(jiǎn)化描述,而不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構(gòu)造和操作,因此不能理解為對(duì)本實(shí)用新型的限制。

此外,術(shù)語(yǔ)“第一”、“第二”等僅用于描述目的,而不能理解為指示或暗示相對(duì)重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。在本實(shí)用新型的描述中,“多個(gè)”的含義是兩個(gè)以上,除非另有明確具體的限定。

在本申請(qǐng)中,除非另有明確的規(guī)定和限定,術(shù)語(yǔ)“安裝”、“相連”、“連接”、“固定”等術(shù)語(yǔ)應(yīng)做廣義理解,例如,可以是固定連接,也可以是可拆卸連接,或成一體;可以是機(jī)械連接,也可以是電連接;可以是直接相連,也可以通過(guò)中間媒介間接相連,可以是兩個(gè)元件內(nèi)部的連通或兩個(gè)元件的相互作用關(guān)系。對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言,可以根據(jù)具體情況理解上述術(shù)語(yǔ)在本實(shí)用新型中的具體含義。

在本申請(qǐng)中,除非另有明確的規(guī)定和限定,第一特征在第二特征“上”或“下”可以是第一和第二特征直接接觸,或第一和第二特征通過(guò)中間媒介間接接觸。而且,第一特征在第二特征“之上”、“上方”和“上面”可是第一特征在第二特征正上方或斜上方,或僅僅表示第一特征水平高度高于第二特征。第一特征在第二特征“之下”、“下方”和“下面”可以是第一特征在第二特征正下方或斜下方,或僅僅表示第一特征水平高度小于第二特征。

如圖4所示,在一種具體實(shí)施方式中,本實(shí)用新型固相載具包括承載板2和多個(gè)PCR反應(yīng)管1;多個(gè)PCR反應(yīng)管1矩形陣列排布,并分別固定于承載板2上。具體述PCR反應(yīng)管1的數(shù)量可以為48個(gè)、96個(gè)或384個(gè)。本實(shí)用新型固相載具中包含的PCR反應(yīng)管1有別于現(xiàn)有的PCR反應(yīng)管,具體而言:

如圖1所示,本實(shí)用新型中的PCR反應(yīng)管1,包括:PCR反應(yīng)管本體11;PCR反應(yīng)管本體11的內(nèi)腔底端固定有預(yù)留反應(yīng)物12,其中預(yù)留反應(yīng)物12包含的物質(zhì)有緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針。

更具體地,預(yù)留反應(yīng)物12包含的上述物質(zhì)既可以以如圖1所示的固態(tài)混合物形式存在,也可以以圖2所示的分層形式存在(自上而下依次貼合設(shè)置的隔離層122和混合層121)。其中:

預(yù)留反應(yīng)物以圖1所示的固態(tài)混合物存在的實(shí)現(xiàn)方式為:首先對(duì)引物單溶、探針單溶、緩沖鹽離子單溶和酶混合物分別精確取量并加入PCR管主體11的內(nèi)腔;然后將PCR管主體11放入離心機(jī)進(jìn)行短暫離心;然后將PCR管主體11放入烘箱中,將PCR管主體11內(nèi)腔的水分蒸干,從而緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針逐漸結(jié)晶并固定在PCR管主體11的內(nèi)腔底部,形成預(yù)留反應(yīng)物12。預(yù)留反應(yīng)物12以圖1所示的固態(tài)混合物存在的優(yōu)勢(shì)在于:對(duì)PCR反應(yīng)管1保存環(huán)境的溫度沒(méi)有特殊要求,但是由于預(yù)留反應(yīng)物12是通過(guò)結(jié)晶的形式固定于PCR管主體內(nèi)腔的,預(yù)留反應(yīng)物表面12與PCR管主體11的內(nèi)壁結(jié)合力不強(qiáng),因此在將PCR反應(yīng)管1倒置或傾斜時(shí),預(yù)留反應(yīng)物12很容易從PCR管主體11的內(nèi)腔脫離。為了避免該問(wèn)題的發(fā)生,如圖3-4所示,本實(shí)用新型于PCR反應(yīng)管本體11的內(nèi)壁設(shè)置有卡槽111;引物單溶、探針單溶、緩沖鹽離子單溶和酶混合物在PCR反應(yīng)管本體11的內(nèi)腔形成結(jié)晶的過(guò)程中,會(huì)于卡槽111內(nèi)形成與卡槽111相匹配的卡突123,從而通過(guò)卡槽111和卡突123的配合將預(yù)留反應(yīng)物12鎖止在PCR管主體11的內(nèi)腔;此時(shí),即使故意對(duì)PCR反應(yīng)管1倒置或傾斜,也不會(huì)導(dǎo)致預(yù)留反應(yīng)物12從PCR管主體11的內(nèi)腔脫離。

預(yù)留反應(yīng)物以圖2所示的分層形式存在的實(shí)現(xiàn)方式為:首先將引物單溶、探針單溶和酶混合物分別精確量取并加入PCR管主體11的內(nèi)腔;然后將PCR管主體11放入離心機(jī)進(jìn)行短暫離心;然后將PCR管主體11放入烘箱中,將PCR管主體11內(nèi)腔的水分蒸干,從而酶混合物、引物和探針結(jié)晶并固定在PCR管主體的內(nèi)腔底部,形成混合層121;然后對(duì)溫度低于0℃的緩沖鹽離子單溶精確取量并加入PCR管主體11的內(nèi)腔;然后將PCR管主體11放入冰箱中,使得緩沖鹽離子單溶在混合層上方結(jié)冰形成隔離層122,此時(shí)隔離層122邊緣與PCR管主體11的內(nèi)壁之間存在應(yīng)力,對(duì)混合層起到固定作用;此時(shí)即使將PCR反應(yīng)管倒置或傾斜,隔離層122既不會(huì)沿PCR管主體11的內(nèi)壁移動(dòng),更不會(huì)從PCR管主體11的內(nèi)腔滑出,進(jìn)而避免了混合層122從PCR管主體11的內(nèi)腔滑出的風(fēng)險(xiǎn);當(dāng)然為了進(jìn)一步保證混合層121的牢固性,PCR管主體11也可以進(jìn)一步采用如圖3-4所示的結(jié)構(gòu)。需要注意的是,當(dāng)預(yù)留反應(yīng)物12以圖2所示的分層形式存在時(shí),需要保證PCR反應(yīng)管1保存環(huán)境的溫度低于或等于緩沖鹽離子單溶的冰點(diǎn),否則緩沖鹽離子單溶會(huì)因融化而失去對(duì)混合層的固定作用。

本實(shí)用新型所提供的PCR反應(yīng)管,由于反應(yīng)管本體內(nèi)腔底端固定有預(yù)留反應(yīng)物,因此在進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)時(shí),只需要將待檢測(cè)的模板加入PCR反應(yīng)管本體內(nèi)腔即可,避免了添加預(yù)留反應(yīng)物的繁瑣程序,從而提高了PCR擴(kuò)增反應(yīng)的速度。

本實(shí)用新型的說(shuō)明書(shū)中,說(shuō)明了大量具體細(xì)節(jié)。然而,能夠理解,本實(shí)用新型的實(shí)施例可以在沒(méi)有這些具體細(xì)節(jié)的情況下實(shí)踐。在一些實(shí)例中,并未詳細(xì)示出公知的方法、結(jié)構(gòu)和技術(shù),以便不模糊對(duì)本說(shuō)明書(shū)的理解。

在本說(shuō)明書(shū)的描述中,參考術(shù)語(yǔ)“一個(gè)實(shí)施例”、“一些實(shí)施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實(shí)施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)包含于本實(shí)用新型的至少一個(gè)實(shí)施例或示例中。在本說(shuō)明書(shū)中,對(duì)上述術(shù)語(yǔ)的示意性表述不必須針對(duì)的是相同的實(shí)施例或示例。而且,描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)可以在任一個(gè)或多個(gè)實(shí)施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外,在不相互矛盾的情況下,本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說(shuō)明書(shū)中描述的不同實(shí)施例或示例以及不同實(shí)施例或示例的特征進(jìn)行結(jié)合和組合。

最后應(yīng)說(shuō)明的是:以上各實(shí)施例僅用以說(shuō)明本實(shí)用新型的技術(shù)方案,而非對(duì)其限制;盡管參照前述各實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解:其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改,或者對(duì)其中部分或者全部技術(shù)特征進(jìn)行等同替換;而這些修改或者替換,并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本實(shí)用新型各實(shí)施例技術(shù)方案的范圍,其均應(yīng)涵蓋在本實(shí)用新型的權(quán)利要求和說(shuō)明書(shū)的范圍當(dāng)中。

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