專利名稱：一種養殖或屠宰環境中甲砜霉素和氟苯尼考殘留量的測定方法
技術領域：
本發明涉及一種養殖或屠宰環境中甲砜霉素和氟苯尼考殘留量的測定方法，具體是對牛、羊、豬、雞、魚或蝦的養殖或屠宰環境的土壤和水體中甲砜霉素和氟苯尼考藥物殘留量的測定。
背景技術：
目前，甲砜霉素和氟苯尼考這兩類抗生素因在家畜、水產，特別是牛、羊、豬、雞、魚或蝦養殖過程中不規范使用甚至大量濫用，不可避免地在相應的養殖環境和屠宰環境的土壤或水體中存在藥物殘留。甲砜霉素和氟苯尼考在環境中的殘留首先會破壞生態環境，其次在環境中殘留后，經與微生物作用后，環境中易產生耐藥菌株，從而加速了動物自身對甲砜霉素和氟苯尼考的耐藥性，進而又影響了甲砜霉素和氟苯尼考的用量，形成惡性循環。為確保環境水和土壤的安全性，需針對水體和土壤的藥物殘留進行檢測，但目前甲砜霉素和氟苯尼考殘留檢測法主要都是針對動物源性食品本身，如肌肉組織等，尚沒有適合水或土壤中藥物殘留的檢測方法。

發明內容
本發明的目的在于提供一種可有效地檢測牛、羊、豬、雞、魚和蝦養殖和屠宰環境中甲砜霉素和氟苯尼考殘留量的分析檢測方法，本方法對樣品的前處理過程快速簡便，檢測結果可靠靈敏。本發明方法包括以下步驟(1)樣本水直接加到平衡好的免疫親和柱(IAC)柱，或土壤樣本加甲醇混勻，離心，上清液加PBS混合后加入IAC柱，自然流出，依次用PBS液、水洗滌柱子，最后用甲醇洗脫，收集洗脫液，用氮氣吹干洗脫液，再用甲醇復溶，過0. 22 μ m有機微孔濾膜；(2)用液相-質譜/質譜進行分析測試，測得樣品的色譜峰；(3)將測得的色譜峰與各已知藥物的標準色譜峰對照，準定所檢出藥物的具體品種。本發明用免疫親和柱對水或土壤樣品進行前處理，再以高效液相色譜與質譜的聯用的方法測定養殖或屠宰環境中甲砜霉素和氟苯尼考殘留量。樣品前處理過程快速簡便， 處理后的樣品檢測結果可靠靈敏。
具體實施例方式(1)標準溶液的配制甲砜霉素和氟苯尼考標準品用體積濃度為30%的甲醇溶液配制成濃度為lmg/mL 的標準儲備溶液，4°C保存；再用甲醇溶液逐級稀釋成濃度梯度為Iy g/mL的系列標準工作溶液。
(2)樣品前處理A. 土壤樣本前處理取土壤樣本2士O.Olg，加甲醇6mL混勻，離心取上清液，與25mL PBS混合，加至免疫親和柱(IAC柱)，自然流出，依次用IOmL PBS液、30mL水洗滌柱子，最后用3mL甲醇洗脫， 收集洗脫液，將洗脫液用氮氣吹干。用ImL的甲醇復溶，過0.22 μ m有機微孔濾膜。B.水樣本前處理取20mL樣本水，直接加到平衡好的IAC柱上，自然流出，依次用IOmL PBS緩沖液和 20mL超純水洗滌柱子，最后用3mL甲醇洗脫，收集洗脫液，并用氮氣吹干，加體積濃度20% 的甲醇溶液定容至1. OmL,過0. 22 μ m有機微孔濾膜。進HPLC-MS/MS儀測定。(3)液相-質譜/質譜測定前處理后的樣品，進液相-質譜/質譜儀(HPLC-MS/MS)測定。HPLC-MS/MS儀器參數與測定條件如下A.梯度洗脫程序如表1:表 權利要求
1. 一種養殖或屠宰環境中甲砜霉素和氟苯尼考殘留量的測定方法，包括以下步驟(1)樣本水直接加到平衡好的免疫親和柱(IAC)柱，或土壤樣本加甲醇混勻，離心，上清液加PBS混合后加入IAC柱，自然流出，依次用PBS液、水洗滌柱子，最后用甲醇洗脫，收集洗脫液，用氮氣吹干洗脫液，再用甲醇復溶，過0. 22 μ m有機微孔濾膜；(2)用液相-質譜/質譜進行分析測試，測得樣品的色譜峰；(3)將測得的色譜峰與各已知藥物的標準色譜峰對照，準定所檢出藥物的具體品種。
全文摘要
本發明涉及一種養殖或屠宰環境中甲砜霉素和氟苯尼考殘留量的測定方法。從牛、羊、豬、雞、魚或蝦的養殖或屠宰環境采取水體或土壤樣本，通過免疫親和柱處理，過0.22μm有機微孔濾膜，用液相-質譜/質譜進行分析測試，測得樣品的色譜峰；將測得的色譜峰與各已知藥物的標準色譜峰對照，準定所檢出藥物的具體品種。樣品前處理過程快速簡便，處理后的樣品檢測結果可靠靈敏。
文檔編號G01N30/02GK102520078SQ20111036377
公開日2012年6月27日 申請日期2011年11月15日 優先權日2011年11月15日
發明者丁濤, 張睿, 蔣原, 薛峰 申請人:江蘇中測檢測服務有限公司, 江蘇出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心