一種檢測海藻生物質(zhì)內(nèi)還原性糖類物質(zhì)的方法
【專利摘要】本發(fā)明提出了一種檢測海藻生物質(zhì)中還原性糖類物質(zhì)的方法，其包括：（1）將所述海藻生物質(zhì)粉碎，以便獲得樣品粉末；（2）利用酸對所述樣品粉末進行水解處理，以便得到含有所述還原性糖類物質(zhì)的水解液；（3）從所述水解液中純化所述還原性糖類物質(zhì)，以便得到待檢測樣品；以及（4）采用高效液相色譜法，通過蒸發(fā)光散射檢測器檢測所述待測樣品中的所述還原性糖類物質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明的實施例，利用本發(fā)明的方法能夠準(zhǔn)確、高效地檢測海藻生物質(zhì)內(nèi)還原性糖類物質(zhì)。
【專利說明】一種檢測海藻生物質(zhì)內(nèi)還原性糖類物質(zhì)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測海藻生物質(zhì)內(nèi)還原性糖類物質(zhì)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來，利用非耕地養(yǎng)殖的海藻生物質(zhì)來生產(chǎn)第三代生物能源，成為生物能源領(lǐng)域的熱點。由于海藻中高含量的碳水化合物經(jīng)過處理可被微生物利用，以其為原料產(chǎn)生物燃料的研究進展迅速。表1給出了干海帶、干江蘺中的基本組分。從表1中可以看出，粗纖維和總糖即碳水化合物的含量非常高，因此水解后可產(chǎn)生大量發(fā)酵性糖，可被微生物利用進行發(fā)酵。
[0003]表1干海帶、干江蘺的基本組分(単位:％)
【權(quán)利要求】
1.一種檢測海藻生物質(zhì)中還原性糖類物質(zhì)的方法，其特征在于，包括: (1)將所述海藻生物質(zhì)粉碎，以便獲得樣品粉末； (2)利用酸對所述樣品粉末進行水解處理，以便得到含有所述還原性糖類物質(zhì)的水解液； (3)從所述水解液中純化所述還原性糖類物質(zhì)，以便得到待檢測樣品；以及 (4)采用高效液相色譜法，通過蒸發(fā)光散射檢測器檢測所述待測樣品中的所述還原性糖類物質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述海藻生物質(zhì)為選自海帶、馬尾藻、江蘺以及石花菜中的至少ー種， 所述還原性糖類物質(zhì)為選自海藻糖、葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖和甘露醇的至少ー種。
3.根據(jù)權(quán)利2所述的方法，其特征在于，在步驟(1)中，所述樣品粉末的粒度為177~840微米范圍內(nèi)， 其中，當(dāng)所述海藻生物質(zhì)為海帶時，在進行粉碎之前，預(yù)先對其依次進行洗浄、去鹽和風(fēng)干處理， 當(dāng)所述海藻生物質(zhì)為江蘺時，將其干燥后直接進行粉碎。
4.根據(jù)權(quán)利I所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，所述酸為濃度為廣3重量％的稀硫酸，所述水解處理是在1KT130攝氏度下進行3(T60分鐘，并且所述稀硫酸與所述樣品粉末的液固比為100:1~5。
5.根據(jù)權(quán)利I所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，所述水解處理是在110攝氏度下進行60分鐘，并且在所述水解處理過程中施加微波進行輔助水解。
6.根據(jù)權(quán)利I所述的方法，其特征在于，在步驟(3)中，從所述水解液中純化所述還原性糖類物質(zhì)進ー步包括: 對所述含有還原性糖類物質(zhì)的水解液依次進行中和、離心去除沉淀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、水提醇沉、離心去除沉淀和蒸發(fā)こ醇預(yù)處理，以便得到所述待檢測樣品。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在干，所述中和包括使用碳酸鈣將所述水解液的pH值調(diào)節(jié)至7。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)包括: 在55飛5攝氏度的溫度下，在100~200 mbar的真空度下，將所述水解液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至液態(tài)體積小于I mL，以便得到濃縮液。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在干，所述水提醇沉包括: 向經(jīng)過所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后得到的濃縮液中，加入95(v/v)%的こ醇，其中，所述濃縮液與所述こ醇的體積比為1:4飛。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述蒸發(fā)光散射檢測器的載氣為氮氣，漂移管溫度為105 °C，載氣流速2.5 L/min,色譜柱為Benson BP-1OOPb++碳水化合物分析柱，流動相為純水，流速0.4 mL/min,以及進樣量10 u L，柱溫90°C。
【文檔編號】G01N30/14GK103604884SQ201310593952
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月21日
【發(fā)明者】李暉, 陳祎, 曹遜, 肖乾坤, 韋萍, 歐陽平凱 申請人:南京工業(yè)大學(xué)