一種蛋白粉新鮮度的測定方法
【專利摘要】本發明公開了一種蛋白粉新鮮度的測定方法，該方法先將蛋白粉樣品加入到鹽酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均勻后，在氮氣氛圍中將溶液加熱，然后冷卻至室溫，過濾，取濾液作為供試品溶液；然后將糠氨酸標準品溶液和供試品溶液分別注入高效液相色譜儀中進行檢測，得到供試品溶液中糠氨酸的含量，以供試品溶液中糠氨酸的含量作為蛋白粉新鮮度的評價指標。本發明的方法采用化學法前期處理和反相離子對色譜法的創新結合，用以測定蛋白粉中糠氨酸的含量，用此方法來確定蛋白粉的產品質量和新鮮度具有準確、快速、簡單、重復性好的特點，適用于蛋白粉中糠氨酸的定量分析，可用以判斷蛋白粉的新鮮度和質量。
【專利說明】一種蛋白粉新鮮度的測定方法

【技術領域】
[0001] 本發明屬于含量測定【技術領域】，具體涉及一種蛋白粉新鮮度的測定方法。

【背景技術】
[0002] 蛋白粉是采用提純的大豆蛋白或乳清蛋白，通過加工制作成粉劑，為缺乏蛋白 質的人群補充蛋白質，具有提高機體免疫力和緩解體力疲勞的保健功能，被廣泛應用到 保健食品和食品添加劑中。蛋白粉分為乳清蛋白粉和大豆蛋白粉，其中的蛋白質含量在 2. 6g/100kJ?8. 5g/100kJ的范圍內，平均在4. 4g/100kJ?5. 4g/100kJ，蛋白粉在烘干、壓 榨、制粉的加工過程，以及包裝、貯藏的過程中，由于條件不恰當，將會降低其營養價值及品 位，直接影響到其經濟價值。因此，探求和確立能如實反應蛋白粉新鮮度品質的指標，有效 監控蛋白粉質量，需要不斷改進、完善蛋白粉品質標準的檢測方法和手段。
[0003] 糠氨酸（furosine)是美拉德反應產物Amadori化合物的水解產物，糠氨酸是美 拉德反應前期評價營養損失程度的一個重要指標，被廣泛應用于評價奶制品、焙烤食品、蜂 蜜、雞蛋等在熱處理和貯存過程中的營養損失的程度。由于蛋白粉中的蛋白質及碳水化合 物含量豐富，在一定條件下會發生美拉德反應。
[0004] 現有的糠氨酸檢測方法有離子交換色譜法、表面熒光方法、HPLC梯度洗脫、反相離 子對色譜法等，這些測定方法常用于對奶制品中的糠氨酸的測試，由于奶制品具有成分單 一、純凈、易溶解的特點，以上測試方法的準確度高。但蛋白粉則不同，主要是其成分較為復 雜，不夠純凈，有些蛋白粉中還添加其他補充人體需要的物質，成為是一種集多種有機物和 無機物的混合物，同時蛋白粉的粘性大，蛋白質含量高，若單純采用上述檢測方法，測定的 干擾大，導致對蛋白質中的糠氨酸無法進行準確分析，其精密度、準確度和檢出限等誤差較 大。


【發明內容】

[0005] 本發明的目的是提供一種蛋白粉新鮮度的測定方法，該方法采用化學法前期處理 和反相離子對色譜法的創新結合，用以測定蛋白粉中糠氨酸的含量，用此方法來確定蛋白 粉的產品質量和新鮮度具有準確、快速、簡單、重復性好的特點，適用于蛋白粉中糠氨酸的 定量分析，可用以判斷蛋白粉的新鮮度和質量。
[0006] -種蛋白粉新鮮度的測定方法，包括以下步驟：
[0007] 步驟1，糠氨酸標準品溶液制備；
[0008] 步驟2,樣品前處理：將蛋白粉樣品加入到鹽酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混 合均勻后，在氮氣氛圍中將溶液加熱，然后冷卻至室溫，過濾，取濾液作為供試品溶液；
[0009] 步驟3,將步驟1所得糠氨酸標準品溶液和步驟2所得供試品溶液分別注入高效液 相色譜儀中進行檢測，得到供試品溶液中糠氨酸的含量，以供試品溶液中糠氨酸的含量作 為蛋白粉新鮮度的評價指標。。
[0010] 作為上述發明的進一步改進，步驟1中用0. lmol/L的鹽酸溶液作溶劑配制糠氨酸 標準品溶液。
[0011] 作為上述發明的進一步改進，步驟2中蛋白粉樣品的加入量為0.35g，混合溶液的 用量為6mL。
[0012] 作為上述發明的進一步改進，所述混合溶液中鹽酸溶液、草酸溶液的體積比為 8:1。
[0013] 作為上述發明的進一步改進，所述混合溶液中鹽酸溶液的濃度為10. 2mol/L，草酸 溶液的濃度為〇· 5mol/L。
[0014] 作為上述發明的進一步改進，步驟2中溶液的加熱方法為在110°C烘箱內放置24 小時。
[0015] 作為上述發明的進一步改進，步驟3中高效液相色譜儀的固定相為碳十八烷基鍵 合硅膠；流動相為乙腈-5mmol/L庚烷磺酸鈉水溶液-甲酸，體積比為20:80:0. 2 ;流速為 0. 8mL/min ;檢測器波長為280nm ;柱溫為26°C ;進樣量為5 μ L。
[0016] 本發明與現有技術相比，其顯著優點在于：第一，選用鹽酸溶液、草酸溶液和超純 水的混合溶液對蛋白粉樣品進行前處理，可去除蛋白粉中的雜質干擾，并使蛋白粉中的糠 氨酸得到充分溶解；第二，用反相離子對色譜法測定蛋白粉中糠氨酸的含量，方法具有準 確、快速、簡單、重復性好的特點，適用于蛋白粉中糠氨酸的定量分析，可用以判斷蛋白粉的 新鮮度和質量。

【具體實施方式】
[0017] 實施例1
[0018] 精密度實驗
[0019] 步驟1，糠氨酸標準品溶液制備：稱取糠氨酸標準樣品2. 5mg，用0. lmol/L的鹽酸 溶解于25mL容量瓶中，其濃度為100mg/L，作為標準貯備液，放置于-20°C冰箱中保存。分 別吸取2. 0、4. 0、6. 0、8. 0ml糠氨酸標準貯備液于10ml容量瓶中，用0. lmol/L的鹽酸稀釋 至刻度搖勻。
[0020] 步驟2,樣品前處理：將0. 35g蛋白粉樣品加入到6mL鹽酸溶液和草酸溶液的混合 溶液中，混合均勻，在溶液中通入高純氮氣，放入ll〇°C烘箱內24小時，取出后冷卻至室溫， 過濾，取濾液作供試品溶液，其中混合溶液中鹽酸溶液、草酸溶液的體積比為8:1、鹽酸溶液 的濃度為10. 2mol/L、草酸溶液的濃度為0· 5mol/L ;
[0021] 步驟3,將步驟所得糠氨酸標準品溶液和步驟2所得供試品溶液分別注入高效 液相色譜儀中進行檢測，高效液相色譜儀的固定相為碳十八烷基鍵合硅膠；流動相為乙 腈-5mmol/L庚烷磺酸鈉水溶液-甲酸，體積比為20:80:0. 2 ;流速為0. 8mL/min ;檢測器波 長為280nm ;柱溫為26°C ;進樣量為5 μ L。
[0022] 精確取6份蛋白粉樣品，經處理后測定，結果如下，方法精密度較好。
[0023]

【權利要求】
1. 一種蛋白粉新鮮度的測定方法，其特征在于：包括以下步驟： 步驟1，糠氨酸標準品溶液制備； 步驟2,樣品前處理：將蛋白粉樣品加入到鹽酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均 勻后，在氮氣氛圍中將溶液加熱，然后冷卻至室溫，過濾，取濾液作為供試品溶液； 步驟3,將步驟1所得糠氨酸標準品溶液和步驟2所得供試品溶液分別注入高效液相色 譜儀中進行檢測，得到供試品溶液中糠氨酸的含量，以供試品溶液中糠氨酸的含量作為蛋 白粉新鮮度的評價指標。
2. 根據權利要求1所述的蛋白粉新鮮度的測定方法，其特征在于：步驟1中用0. lmol/ L的鹽酸溶液作溶劑配制糠氨酸標準品溶液。
3. 根據權利要求1所述的蛋白粉新鮮度的測定方法，其特征在于：步驟2中蛋白粉樣 品的加入量為〇. 35g，混合溶液的用量為6mL。
4. 根據權利要求3所述的蛋白粉新鮮度的測定方法，其特征在于：所述混合溶液中鹽 酸溶液、草酸溶液的體積比為8:1。
5. 根據權利要求4所述的蛋白粉新鮮度的測定方法，其特征在于：所述混合溶液中鹽 酸溶液的濃度為10. 2mol/L，草酸溶液的濃度為0. 5mol/L。
6. 根據權利要求1所述的蛋白粉新鮮度的測定方法，其特征在于：步驟2中溶液的加 熱方法為在ll〇°C烘箱內放置24小時。
7. 根據權利要求1所述的蛋白粉新鮮度的測定方法，其特征在于：步驟3中高效液相 色譜儀的固定相為碳十八烷基鍵合硅膠；流動相為乙腈-5mmol/L庚烷磺酸鈉水溶液-甲 酸，體積比為20:80:0. 2 ;流速為0. 8mL/min ;檢測器波長為280nm ;柱溫為26°C ;進樣量為 5 μ L〇
【文檔編號】G01N30/89GK104297412SQ201410555280
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年10月17日 優先權日:2014年10月17日
【發明者】梁峙, 梁驍, 馬捷, 梁瑛 申請人:徐州工程學院