專利名稱：白首烏通過組織培養的快速繁苗方法
技術領域：
本發明涉及白首烏的繁苗方法，尤其是一種白首烏通過組織培養的快速繁苗方法技術背景白首烏(Cynanch auriculatum Royle ex wight)為蘿蘑科鵝絨藤屬多年生草本植物。白首烏為常用中藥何首烏的地區品種之一，何首烏始載于宋《開寶本草》。馬志曰“有赤、白二種，赤者雄，白者雌……”“春秋采其根，雌雄并用”。明李中梓指出“白者入氣，赤者入血，赤白合用，氣血交培。”《本草綱目》收載的以何首烏為主藥的補益方，均按赤白何首烏各半的原則炮制和配伍。可見自古以來何首烏就有赤白之分，并有赤白合用的傳統。白首烏主要有效成分為磷脂類及C21甾甙，還含有豐富的淀粉、蛋白質、多種維生素和多種礦物質等。白首烏味甘、微苦，性微溫。具安神補血、收斂精氣、養陰補虛、健脾益氣的功效；可用于失眠健忘、神經衰弱、陽萎、遺精、筋骨不健、消化不良及少白頭等癥。近代研究認為表明白首烏含有人體必須各種氨基酸微量元素、無機鹽、維生素和其他營養成分，且無毒，具補血、補氣、抗衰老、降血脂、降膽固醇及促進毛發生長的作用，并且對體外癌細胞有一定的殺傷作用，體內試驗證實對艾氏實體瘤有一定抑制作用。可使細胞免疫和體液免疫逐步恢復正常。
白首烏野生于河北、河南、江蘇、安徽、山東等十多個省(自治區)，在香港及東南亞等地深受歡迎，產量供不應求。近年來，在江蘇、山東等省已開始人工栽培。2002年下半年以來，韓國客商開始從我國進口大量鮮品，無論是家栽產品，還是野生產品均供不應求。此外，我國江蘇濱海等地也有以白首烏為原料的保健品廠，其原料的供應也是供不應求，因此擴大白首烏的生產勢在必行。
傳統的自首烏繁殖方法主要采用藤蔓扦插和種子播種的繁殖方法，繁殖周期長、繁殖系數較低，不能滿足生產快速發展的需要。

發明內容
本發明的目的在于針對傳統的白首烏繁殖方法存在的問題，提供一種通過組織培養的快速繁苗方法。
本發明的目的是這樣實現的一種白首烏通過組織培養的快速繁苗方法，其特征在于白首烏接種在生芽培養基上萌發小植株；將白首烏萌發小植株的莖尖、莖段在增殖培養基上繼代增殖；白首烏繼代增殖后的小苗在生根培養基上生根；將具有4～7條根的白首烏幼苗移栽于由珍株巖、泥炭土和園土三者按體積比1∶1∶1的比例配制的基質中，移栽成活的幼苗定植于大田中。
本發明的優點在于應用組織培養的手段，克服白首烏常規育苗周期長、繁殖系數低等缺點，達到工廠化快速育苗，以適應生產上對白首烏的大量需求。同時，由于組織培養時直接選取白首烏的根、莖段、莖尖，拓寬了白首烏組培快繁的取材范圍，組織培養中能對每個環節實施監控，大大提高了繁殖速度和移栽成活率。
具體實施例方式
實施例一將白首烏塊根在自來水下沖洗干凈，將塊根切成5cm左右長度的根段，置于1升的燒杯中，用75％酒精浸泡1分鐘，無菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無菌水水洗六次。用無菌濾紙汲干表面水分，然后將塊根切成0.2cm2左右大小的帶皮小塊，帶皮面朝上接種于MS培養基上。約半個月左右白首烏小植株從根塊上萌發。
實施例二將白首烏莖段在自來水下沖洗干凈，將莖段切成5cm左右長的大小，置于1升的燒杯中，用75％酒精浸泡30秒，無菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無菌水水洗五次。用無菌濾紙汲干表面水分，莖段切成每節一小莖段后接種于MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養基上，1周左右小莖段的側芽萌發形成小植株。
實施例三將白首烏莖尖在自來水下沖洗干凈，置于1升的燒杯中，用75％酒精浸泡30秒，無菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無菌水水洗四次。用無菌濾紙汲干表面水分，剝去莖尖外部葉片后接種于MS+ZT2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養基上，1周左右莖尖萌發形成小植株。
實施例四把實施例1～3培養形成的小植株的莖段切成每節一小莖段和莖尖后，將小莖段及莖尖接種于MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L增殖培養基上，白首烏的小莖段及莖尖在此增殖培養基上快速繼代增殖，形成白首烏小苗。白首烏小莖段及莖尖在增殖培養基上培養，平均月增殖倍數可達4.14倍以上。
將具有4片葉的白首烏小苗接種在MS+IBA 0.05mg/L的生根培養基上，10天左右開始有不定根萌發，30天左右平均每株根數達到7.95條左右，形成白首烏幼苗，即可進行移栽。
將苗高8cm左右，具有4～7條根的白首烏幼苗移栽于由珍株巖、泥炭土和園土三者按體積比1∶1∶1的比例配制的基質中，移栽成活率可以達到95％。移栽1個月左右即可將白首烏幼苗移植于大田。
權利要求
1.一種白首烏通過組織培養的快速繁苗方法，其特征在于a)白首烏接種在生芽培養基上萌發小植株；b)將白首烏萌發小植株的莖尖、莖段在增殖培養基上繼代增殖；c)白首烏繼代增殖后的小苗在生根培養基上生根；d)將具有4～7條根的白首烏幼苗移栽于由珍株巖、泥炭土和園土三者按體積比1∶1∶1比例配制的基質中，移栽成活的幼苗定植于大田中。
2.根據權利要求1所述的白首烏通過組織培養的快速繁苗方法，其特征在于生芽培養基選擇MS基本培養基，所述的白首烏接種在生芽培養基上萌發小植株，是將白首烏的根塊接種在MS基本培養基上萌發小植株。
3.根據權利要求2所述的白首烏通過組織培養基的快速繁苗方法，其特征在于所述的將白首烏的根塊接種在MS基本培養基上，是將白首烏塊根在自來水下沖洗干凈，將塊根切成4～6cm長度的根段，用75％酒精浸泡1分鐘，無菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無菌水水洗后，用無菌濾紙汲干表面水分，然后將塊根切成0.15～0.25cm2的帶皮小塊，帶皮面朝上接種于MS培養基上。
4.據權利要求1所述的白首烏通過組織培養的快速繁苗方法，其特征在于生芽培養基選擇MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養基，所述的白首烏接種在生芽培養基上萌發小植株，是將白首烏的莖尖或莖段接種在MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養基上萌發小植株。
5.根據權利要求4所述的白首烏通過組織培養的快速繁苗方法，其特征在于所述的將白首烏的莖尖或莖段接種在MS+ZT 2.0mg/L+NAA0.01mg/L培養基上，是將白首烏莖尖或切成2～6cm的莖段在自來水下沖洗干凈，置于1升的燒杯中，用75％酒精浸泡30秒，無菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無菌水水洗后，用無菌濾紙汲干表面水分；莖尖剝去外部葉片后接種于MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養基上，或將2～6cm的莖段再切成每節一小莖段接種于MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養基上。
6.根據權利要求1所述的白首烏通過組織培養基的快速繁苗方法，其特征在于所述的增殖培養基為MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L，所述的生根培養基為MS+IBA 0.05mg/L。
全文摘要
本發明涉及一種白首烏通過組織培養的快速繁苗方法。白首烏接種在生芽培養基上萌發小植株；將白首烏萌發小植株的莖尖、莖段在增殖培養基上繼代增殖；白首烏繼代增殖后的小苗在生根培養基上生根；將具有4～7條根的白首烏幼苗移栽于由珍株巖、泥炭土和園土配制的基質中，移栽成活的幼苗定植于大田中。本發明的優點在于應用組織培養的手段，克服白首烏常規育苗周期長、繁殖系數低等缺點，達到工廠化快速育苗，以適應生產上對白首烏的大量需求。同時，由于組織培養時直接選取白首烏的根、莖段、莖尖，拓寬了白首烏組培快繁的取材范圍，組織培養中能對每個環節實施監控，大大提高了繁殖速度和移栽成活率。
文檔編號A01H4/00GK1559193SQ200410014110
公開日2005年1月5日 申請日期2004年2月20日 優先權日2004年2月20日
發明者余桂紅, 馬鴻翔, 周淼平, 陸維忠, 張大棟, 黃益洪, 任麗娟, 張旭 申請人:江蘇省農業科學院