專利名稱：一種誘蟲帶菌遷飛方法
技術領域：
本發明屬于害蟲生物防治領域，具體說來涉及采用蟲生真菌制劑防治 倉庫害蟲的方法。
背景技術：
j:因草甲〈丄^s7'o(ier/wa Se/r/co/-we FaZ)尸/c/us^和》因草砵分螺廣E/j/zasio J 是世界性貯煙害蟲，并危害多種農作物。據調查，煙草曱每年對我國貯存 煙草造成的損失達1. 64%。以往對煙草害蟲的防治主要有控制溫度、機械 殺蟲的物理法，使用農藥噴霧、熏蒸殺蟲的化學法，倉庫管理害蟲的監測 法，以及微生物殺蟲法。近年來，隨著人們生態環境保護意識的不斷4是高、 生物防治知識和經驗的積累，在大量化學藥品被禁用的情況下，迫切希望 應用害蟲的天敵以控制煙草甲和煙草粉螟。蘇云菌芽孢桿菌(Bt)對多種 害蟲具有高毒力，但目前還未篩選出對煙草甲和煙草粉螟具有高毒力的菌 抹。蟲生真菌主要是通過孢子萌發入侵昆蟲表皮和天然孔口，并在其體內 大量繁殖最后引起昆蟲死亡。據統計，全世界登記的真菌生物農藥的58個 產品中，就有24個來源于蟲生真菌的7個種。曾經有關于球孢白僵菌 CSeawve"'a 6aM/awa)對、猿葉曱fP/wec/o" Z ra^/cae J的致病力研究，和金 龜子綠僵菌〖她tor/ziz/麵朋/《0/ //一餘治挪心葉曱(5ra"fepa /o"g/雄'附(3 )的 報道。目前已有球孢白僵菌對煙草曱和煙草粉螟感染的實驗室效果報道]。 但用蟲生真菌防治倉儲害蟲的研究卻未見到任何信息。流行病對昆蟲的控 制力，不僅表現在致死效果上，還表現在昆蟲種群衰弱后取食量降低，感 病群體性比降低，以及產卵量降低等方面。要用真菌對倉儲害蟲達到持久 控制的效果，營造良好的生態平衡，首要解決的問題是將真菌病原引入蟲 群中。

發明內容
本發明的目的是克服上述缺點而提供一種對害蟲有持續性的控制作 用，能大大的降低其危害程度從而減少損失的誘蟲帶菌遷飛方法。。
本發明的一種誘蟲帶菌遷飛方法，包括下述步驟 (1)菌種的選擇白僵菌種(Beawven'a ) GZUIFR-GL5-08i，
在S氏培養基上25士rC培養14天時，菌落直徑為52 mm,菌落表面絨毛 狀菌絲致密，具有奶油黃色孢子粉復被，有孢子型角變，菌落背面淡黃色； 老培養體具有孢梗束，個體為合軸式產孢結構；分生孢子單生，光滑、透明、球形或近球形2 ~ 3 X 2 ~ 2.5pm;該菌種已于2008年11月5日保藏在 中國典型培養物保藏中心(地址中國武漢武漢大學)，名稱為白僵菌 種GZUIFR-GL5-08i,保藏號CCTCCM208202; (2 )孢子粉制備
培養基麩皮80%，玉米粉15%,黃豆粉5%，加水量l: 1.2 ， 1000ml; 在三角瓶中25 ± 1°C固態發酵，經黑暗、光照交替培養12天后，溫度為2 3 28。C開放式培養15 20天，并自然風干、磨粉、過IOO目網篩，制成4X101。 孢子/克，水分含量3. 7%，活孢率為84%的白僵菌孢子粉；
(3) 設置倉儲誘蟲箱在倉儲外及內放置有醇化煙葉或糧食、種子等 儲藏物的容器，于其中均勻撒施真菌孢子粉，并同時在其中掛害蟲性外信 息素誘芯和置清水一盆；
(4) 檢查害蟲帶菌遷飛情況于7、 14、 21和30天后在水盆中直接觀
察到害蟲感病遷飛距離和罹病死亡情況。
本發明的方法與現有技術相比，由以上技術可知，選擇的白僵菌種 (6e"Mvw/" Z)"^/"w" ) GZUIFR-GL5-08i在S氏培養基上30土1。C培養14
天時，其菌落直徑與25土rc相近，且分泌更多的紅色素，產孢量亦更大，
而且能在35±1QC下成活。此菌安全，能適應倉庫溫度、濕度，且有較高 產孢量。利用煙草曱和煙草粉螟成蟲的遷飛習性，誘蟲帶菌遷飛，這樣就 把致病菌帶到倉庫中的各個角落，引起害蟲的流行病。使倉儲害蟲感染真 菌之后再進入倉儲物品堆中，由于施用的真菌是于人絕對安全的真f，而 且因其在一定的恒溫恒濕環境中能較好地生長繁殖，所以對害蟲有持續性 的控制作用。這樣可以大大的降低危害程度減少損失。


圖1為實驗例3的倉庫1試驗紙箱擺放位置； 圖2為實驗例3的倉庫2試驗紙箱擺放位置； 圖3為實驗例3的倉庫3試驗紙箱擺放位置。
具體實施例方式
本發明的一種誘蟲帶菌遷飛方法，包括下述步驟 (1 )菌種的選擇從自然保護區分離 一林球孢白僵菌(B^wver/fl Z)"M/朋aJ GL5,經紫外線誘變獲得能在相對濕度較低環境下生長的突變抹 (5eam^/a kw^am^ GZUIFR-GL5-08i，在S氏培養基上25士1。C培養 14天時，菌落直徑為52mm,菌落表面絨毛狀菌絲致密，具有奶油黃色孢 子粉復被，有孢子型角變，菌落背面淡黃色；老培養體具有孢梗束，個體 為合軸式產孢結構；分生孢子單生，光滑、透明、球形或近球形2 3X2 2.5pm;此菌在S氏培養基上30土1。C培養14天時，其菌落直徑與25±1°C相近，且分泌更多的紅色素，產孢量亦更大，而且能在35士尸C下成活。 此菌安全，能適應倉庫溫度、濕度，且有較高產孢量。 (2 )孢子粉制備
培養基麩皮80%，玉米4分15%,黃豆粉5%,加水量l: 1.2 , 1000ml; 在三角瓶中25士rC固態發酵，經黑暗、光照交替培養12天后，室溫(23 28°C)開放式培養半個月至20天，并自然風干，磨粉、過100目網篩，制 成4Xl(T孢子/克，水分含量3. 7%,活孢率為84%的白僵菌孢子粉；
(3) 設置倉儲誘蟲箱在倉儲外及內放置有醇化煙葉或糧食、種子等 儲藏物的容器，于其中均勻撒施真菌孢子粉，并同時在其中掛害蟲性外信 息素誘芯和置清水一盆；
(4) 檢查害蟲帶菌遷飛情況于7、 14、 21和30天后在水盆中直接觀 察到害蟲感病遷飛距離和罹病死亡情況。
以下通過實驗例來進一步說明本發明的有益效果 實驗例l:倉庫外帶菌遷飛實驗l
在醇化庫的頂樓放置三個裝有2kg煙葉和有害蟲的紙箱 (1130x930x735mm)。 A紙箱作為CK空白對照，B和C紙箱中均勻的噴灑濃 度為4xl(T個孢子/g的孢子粉，5g每箱，然后每個箱子的內壁貼兩枚煙蟲 性外信息素的誘芯，再在箱內方史入一盆清水。AB,BC,CA間的距離均為5m, 經測定箱內溫度T: 35°C,濕度RH: 75°/。。
試驗結果表明，于處理后第7天從空白對照紙箱水盆中，觀察到漂浮 有煙草曱和煙草粉螟滿布白色菌絲的罹病尸體。首先，經對蟲尸粘片鏡檢，
確證為白僵菌感染致死；第二，說明感染菌的蟲子能遷飛；第三，表明使 用的菌林能耐較高溫和低濕的環境。而在B、 C處理箱中，感染致死的蟲尸 則明顯更多。隨著試驗時間的延長，直到40天對照箱中的罹病蟲尸還在繼 續增加，可見其真菌感染作用的長效性。 實驗例2:倉庫外帶菌遷飛實驗2
在煙廠技術中心實驗室內放置四個紙箱。A紙箱中具有被煙草甲蛀過的 香煙巻和煙絲，并見有許多煙草曱爬動，此紙箱作為蟲源。而B， C紙箱內 裝沒有蟲害的煙葉各O. 5kg， 紙箱(340 x320 x215mm)， D紙箱作為CK空 白對照；A,B和C紙箱中均勻的噴灑孢子3):分，0. 5g每箱，濃度為4xl0"個 孢子/g;于每個箱子內壁貼一枚煙蟲性外信息素的誘芯，再在箱內放入一 盆清水。A到CK距離為2m,經測定箱內溫度T: 30°C,濕度RH: 75%。
試驗結果表明，于7、 14、 21和30天檢查發現，與蟲源接近的空白D 紙箱水盆中的蟲尸明顯多于B，C紙箱。而且，在噴灑真菌孢子粉試驗之后 的屋子，再未見到蟲子猖獗。
實驗例3:倉庫內帶菌遷飛實驗在煙廠醇化倉庫三樓選取三個同樣規格的倉庫單元。每單元使用孢子
粉的總量均為5g。試驗紙箱擺放位置見圖1-3,圖中黑色表示紙箱中噴施 了孢子粉。于每個箱子內壁貼一枚煙蟲性外信息素的誘芯，再在箱內放入 一盆清水。本實驗可得施用不同孢子粉濃度的效果和蟲體遷飛距離的信息。
倉庫1試驗紙箱擺放位置見圖1,圖中EA，EB，EC,ED距離為20cm; 孢子粉用量為5. OOg
倉庫2試驗紙箱擺放位置見圖2,圖中CA,CE,CD之間距離皆是20cm; 而CB的距離則是40cm，孢子粉用量為5. OOg。
倉庫2試驗紙箱擺放位置見圖2，圖中EA，EB,EC,ED距離均是20cm; 每箱孢子粉用量為1. 25g。
試驗結果表明，試驗后的第1周就發現倉庫1中，距離E處理箱20cm 的空白對照箱的水盆里有感染死亡蟲尸；第2周時所設置的15個紙箱水盆 中均有覆被白色菌絲的煙草曱和煙草粉螟的尸體。感染真菌的害蟲能遷飛 40cm遠的距離，是倉庫中最長的對角線距離即倉庫2中C至B距離。
實驗例4:管道害蟲感染實驗
倉庫中的管道是害蟲躲藏之處，是化學農藥熏蒸和物理方法清掃不到 的死角，在倉庫中的上部和下部通風管道口 ，噴施真菌制劑，并》丈入一'J、 盆清水，以便直觀檢測煙草甲和粉虱的感染罹病情況。
實驗得結果表明，管道下的水盆里亦有感染死亡的害蟲。
權利要求
1、一種誘蟲帶菌遷飛方法，包括下述步驟(1)菌種的選擇白僵菌種(Beauveria bassiana)GZUIFR-GL5-08i，CCTCC No.M208202；(2)孢子粉制備培養基麩皮80％，玉米粉15％，黃豆粉5％，加水量1∶1.2，1000ml；在三角瓶中25±1℃固態發酵，經黑暗、光照交替培養12天后，溫度為23～28℃開放式培養15～20天，并自然風干、磨粉、過100目網篩，制成4X1010孢子/克，水分含量3.7％，活孢率為84％的白僵菌孢子粉；(3)設置倉儲誘蟲箱在倉儲外及內放置有醇化煙葉或糧食、種子等儲藏物的容器，于其中均勻撒施真菌孢子粉，并同時在其中掛害蟲性外信息素誘芯和置清水一盆；(4)檢查害蟲帶菌遷飛情況水盆中直接觀察到害蟲感病遷飛距離和罹病死亡情況。
全文摘要
本發明公開了一種誘蟲帶菌遷飛方法，包括下述步驟(1)菌種的選擇白僵菌種(Beauveria bassiana)GZUIFR-GL5-08i，CCTCCNo.M208202；(2)孢子粉制備(3)設置倉儲誘蟲箱在倉儲外及內放置有醇化煙葉或糧食、種子等儲藏物的容器，于其中均勻撒施真菌孢子粉，并同時在其中掛害蟲性外信息素誘芯和置清水一盆；(4)檢查害蟲帶菌遷飛情況。本發明對害蟲有持續性的控制作用，能大大的降低其危害程度從而減少損失。
文檔編號A01M1/02GK101422142SQ200810069028
公開日2009年5月6日 申請日期2008年12月9日 優先權日2008年12月9日
發明者劉愛英, 吳玉平, 吳讓新, 張曉敏, 鳴 施, 輝 楊, 梁宗琦, 力 羅, 胡海燕, 曉 鄒 申請人:貴州大學