專利名稱：紫海雜交扇貝新品種的培育方法
技術領域：
本發明屬于貝類水產養殖的育種技術，尤其是涉及一種紫海雜交扇貝新品種的培育方法。
背景技術：
海灣扇貝(Argopecten irradians irradians)原產于美國大西洋沿岸，于1982 年引入我國。海灣扇貝生長速度快，溫度適應范圍廣，抗逆性強，非常適合我國北方海域的養殖，目前產量和養殖面積占我國扇貝養殖的50%以上。由于引進后長期近交，海灣扇貝在養殖過程中種質退化嚴重，表現為商品貝規格越來越小，育苗養殖過程中死亡率較高，例如2007年海灣扇貝親貝死亡率高達約70%，因此扇貝養殖業迫切需要對海灣扇貝進行遺傳改良，其中雜交育種是最有效的方法之一。發明人自2007年首次從秘魯引進了紫扇貝(Argopecten purpuratus)。紫扇貝是原產于南太平洋的一種速生型中型扇貝，與海灣扇貝都屬于Argopecten屬，染色體數相同，且都是雌雄同體，但二者在個體大小、生長和溫度適應性等方面性狀互補，因此發明人又通過將紫扇貝卵子和海灣扇貝精子進行種間雜交，培育紫海雜交扇貝子一代。紫海雜交扇貝子一代生長較快，個體較大(王春德等，2009.紫扇貝與海灣扇貝種間雜交的研究。海洋科學，33(10) 84-87 ； Chunde Wang 等，2011. Introduction of the Peruvian scallop and its hybridization with the bay scallop in China, Aquaculture,2011,310 380-387)。大部分個體不產生可育的卵子和精子，但少部分為可育的雌雄同體個體。進一步研究表明，紫海雜交子一代雖然具有較大的雜種優勢，但在生產推廣上仍然存在以下缺點和障礙。1)由于雜交子一代遺傳不穩定，后代生長性狀出現分離，因而需要每年用紫扇貝和海灣扇貝制種，較為繁瑣；2)由于引進的紫扇貝的溫度適應范圍較窄，難以在同一海域度夏和越冬，且在我國海域生長緩慢，因此獲得用于培育雜交子一代的紫扇貝親貝較為相當困難。3)由于海灣扇貝和紫扇貝都是雌雄同體的扇貝，同時排放精子和卵子，精或卵容易受到同種的卵或精的污染，不易進行種間雜交，而導致所獲得的商品苗種中真正的雜交后代的比例大大降低，使產量的提高幅度大大受限。顯然，由于需要同時培育兩種親貝且不易實現兩種雌雄同體扇貝間的雜交，因而推廣存在著較大的困難。產業上迫切需要培育一種穩定遺傳、易于培育且性狀優良的新品種。

發明內容
本發明的目的是提供一種紫海雜交扇貝新品種的培育方法，以彌補現有技術的不足。本發明的構思利用了如下特點1)首先在親貝促熟方面摒棄了傳統的海灣扇貝從4°C開始培育，而且產卵前需要提高到19°C的常規方法，通過研究雜交子一代扇貝的溫度適應特性，專門選擇了從10°C開始培育雜交子一代親貝，到產卵前逐漸提高到17°C ；2)紫海雜交子一代中有少量個體為雌雄同體且自交可育；幻紫海雜交扇貝子一代的自交后代中約25%的個體外型與雜交子一代親本相似，且其體重比同期的海灣扇貝提高96. 5% ； 最后4)選擇雜交后代中的雌雄同體個體進行連續自交，可迅速純化種系，獲得穩定遺傳的新品種。本發明是采用以下技術方案首先利用紫扇貝卵子和海灣扇貝精子受精建立多個紫海雜交子一代家系，根據各雜交家系的表現型選擇優良雜交家系，然后從優良雜交家系中選擇雌雄同體的優良個體，促熟后分別自體受精建立多個自交家系；第二年從上述自交家系中再選擇優良家系，然后從優良家系中進一步選擇雌雄同體的優良個體繼續進行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續自交三代以上，即獲得穩定遺傳且生長快、個體大、溫度耐受范圍廣的紫海雜交扇貝新品種。本發明也可首先利用紫扇貝卵子和海灣扇貝精子受精建立紫海雜交子一代群體， 然后從雜交群體中選擇雌雄同體的優良個體，促熟后單獨產卵排精并自體受精，受精卵孵化后將幼蟲合在一起構成自交群體；第二年從上述自交群體中再選擇雌雄同體的優良個體繼續進行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續自交三代以上，即獲得穩定遺傳且生長快、個體大、溫度耐受范圍廣的紫海雜交扇貝新品種。本發明具有以下有益效果所獲得紫海雜交新品種同時具有海灣扇貝和紫扇貝的特點，生長快、個體大、溫度耐受范圍廣。本發明的紫海雜交扇貝新品種可以在青島和大連等北方海域養殖，產量比海灣扇貝提高30%以上。
具體實施例方式本發明可采用家系培育方法，具體操作步驟如下1.紫海雜交一代家系的培育選擇殼高5厘米以上的紫扇貝和海灣扇貝各50個， 在1月初納入育苗室水體內，蓄養密度為100個/m3，選擇從10°C開始培育親貝。每天分6 次投喂濃度為200-300萬細胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類，每次投喂15升/m3， 每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機連續充氣。在10°C培育10天性腺開始膨大后開始升溫，每天提高0.5°C，待升到17°C時性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達到性成熟。挑選性腺發育成熟的紫扇貝和海灣扇貝陰干刺激30分鐘，并且將單個扇貝置于預先加入23°C海水的2升塑料燒杯中，分別收集紫扇貝的卵子和海灣扇貝的精子。收集的精液在顯微鏡下立即觀察，若混有卵子則棄掉。收集的卵子放置20分鐘以后在顯微鏡下觀察，若已受精發育則棄掉。將獲得的紫扇貝卵子和海灣扇貝的精子授精，將受精卵置于黑暗環境下孵化，然后按照常規方法進行幼蟲培育、苗種中間培育和養成，即獲得紫海雜交子一代家系。2.紫海雜交子一代親貝的選擇和促熟從上述培育的若干紫海雜交子一代家系中根據家系的平均表型選擇優良家系，然后從優良家系中選擇個體大且雌雄同體的扇貝在 1月份納入育苗室，按照上述步驟進行性腺促熟，成熟后即可進行自交純化。3.自交純化選取成熟的雌雄同體的紫海雜交子一代親貝，陰干刺激30分鐘，將單個扇貝置于預先加入23°C海水的2升塑料燒杯中使其產卵排精。攪拌使來自同一個扇貝的精卵混合均勻，再按照常規方法進行幼蟲培育、苗種中間培育和養成，即獲得多個紫海雜交子一代扇貝的自交家系；收獲時測量每個家系的平均殼高、殼長、殼寬和總體重，根據各家系所有個體的表現選擇優良家系。從選擇的優良家系中選擇多個個體大且雌雄同體的扇貝作為下一年自交選育的親貝，用于品種培育。4.品種培育將以上選擇的個體大且雌雄同體的扇貝作為親貝按照以上方法連續自交三代以上，直到大部分個體表現均優良且一致，即獲得遺傳穩定的紫海雜交新品種。本發明也可采用群體培育的方法，具體操作步驟如下1.紫海雜交一代群體的培育選擇殼高5厘米以上的紫扇貝和海灣扇貝各50個， 在1月初納入育苗室水體內，蓄養密度為100個/m3，選擇從10°C開始培育親貝。每天分6 次投喂濃度為200-300萬細胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類，每次投喂15升/m3， 每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機連續充氣。在10°C培育10天性腺開始膨大后開始升溫，每天提高0.5°C，待升到17°C時性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達到性成熟。挑選性腺發育成熟的紫扇貝和海灣扇貝陰干刺激30分鐘，并且將單個扇貝置于預先加入23°C海水的2升塑料燒杯中，分別收集紫扇貝的卵子和海灣扇貝的精子。收集的精液在顯微鏡下立即觀察，若混有卵子則棄掉。收集的卵子放置20分鐘以后在顯微鏡下觀察，若已受精發育則棄掉。將獲得的來自多個紫扇貝的卵子和多個來自海灣扇貝的精子授精，將受精卵置于黑暗環境下孵化，然后按照常規方法進行幼蟲培育、苗種中間培育和養成，即獲得紫海雜交群體。2.紫海雜交子一代親貝的選擇和促熟從上述培育的紫海雜交子一代群體中選擇個體大且雌雄同體的扇貝在1月份納入育苗室，按照上述步驟進行性腺促熟，成熟后即可進行自交純化。3.自交純化選取成熟的雌雄同體的紫海雜交子一代親貝，陰干刺激30分鐘，將單個扇貝置于預先加入23°C海水的2升塑料燒杯中使其產卵排精。攪拌使來自同一個扇貝的精卵混合均勻，受精卵孵化后將幼蟲合在一起構成自交群體，按照常規方法進行幼蟲培育、苗種中間培育和養成，即獲得紫海雜交子一代扇貝的自交群體；收獲時選擇雌雄同體的優良個體作為下一年自交選育的親貝，用于品種培育；4.品種培育將以上選擇的個體大且雌雄同體的扇貝作為親貝按照以上方法連續自交三代以上，直到大部分個體表現均優良且一致，即獲得遺傳穩定的紫海雜交新品種。實施例1從2009年培育的紫海雜交子一代家系中選擇優良家系，從中選擇個體較大且雌雄同體的個體，在2010年1月份納入育苗室中，用以上方法對親貝促熟，用自交家系的方法培育后代，到十一月上旬所獲得的自交子二代中有約25%的個體(類Fl子二代)殼色與其親本相同，但個體比同期培育的海灣扇貝群體殼高大約31.5%，體重大96.5%，柱重大 183. 6%;所獲得的自交子二代中有約75%的個體(類海灣子二代)殼色與海灣扇貝相似， 但個體比同期培育的海灣扇貝群體殼高大約13. 5%，體重大36. 6%，柱重大99. 3%。結果如表1所示。表1紫海雜交子二代與同期海灣扇貝大小的比較(n = 30)
類Fl子二代類海灣子二代海灣扇貝殼局59. 00±6. 0150. 95±2. 8244. 88±5. 0權利要求
1.一種紫海雜交扇貝新品種的家系培育方法，其特征在于首先利用紫扇貝卵子和海灣扇貝精子受精建立多個紫海雜交子一代家系，根據各雜交家系的表現型選擇優良雜交家系，然后從優良雜交家系中選擇雌雄同體的優良個體，促熟后分別自體受精建立多個自交家系；第二年從上述自交家系中再選擇優良家系，然后從優良家系中進一步選擇雌雄同體的優良個體繼續進行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續自交三代以上，即獲得穩定遺傳且生長快、個體大、溫度耐受范圍廣的紫海雜交扇貝新品種。
2.一種紫海雜交扇貝新品種的家系培育方法，具體操作步驟如下1)紫海雜交一代家系的培育選擇殼高5厘米以上的紫扇貝和海灣扇貝各50個，在1 月初納入育苗室水體內，蓄養密度為100個/ m3，選擇從10°C開始培育親貝；每天分6次投喂濃度為200-300萬細胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類，每次投喂15升/ m3，每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機連續充氣；在10°C培育10天性腺開始膨大后開始升溫，每天提高0. 5°C，待升到17°C時性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達到性成熟；挑選性腺發育成熟的紫扇貝和海灣扇貝陰干刺激30分鐘，并且將單個扇貝置于預先加入23°C海水的2升塑料燒杯中，分別收集紫扇貝的卵子和海灣扇貝的精子； 收集的精液在顯微鏡下立即觀察，若混有卵子則棄掉；收集的卵子放置20分鐘以后在顯微鏡下觀察，若已受精發育則棄掉；將獲得的紫扇貝卵子和海灣扇貝的精子授精，將受精卵置于黑暗環境下孵化，然后按照常規方法進行幼蟲培育、苗種中間培育和養成，即獲得紫海雜交子一代家系；2)紫海雜交子一代親貝的選擇和促熟從上述培育的若干紫海雜交子一代家系中根據家系的平均表型選擇優良家系，然后從優良家系中選擇個體大且雌雄同體的扇貝在1月份納入育苗室，按照上述步驟進行性腺促熟，成熟后即可進行自交純化；3)自交純化選取成熟的雌雄同體的紫海雜交子一代親貝，陰干刺激30分鐘，將單個扇貝置于預先加入23°C海水的2升塑料燒杯中使其產卵排精；攪拌使來自同一個扇貝的精卵混合均勻，再按照常規方法進行幼蟲培育、苗種中間培育和養成，即獲得多個紫海雜交子一代扇貝的自交家系；收獲時測量每個家系的平均殼高、殼長、殼寬和總體重，根據各家系所有個體的表現選擇優良家系；從選擇的優良家系中選擇多個個體大且雌雄同體的扇貝作為下一年自交選育的親貝，用于品種培育；4)品種培育將以上選擇的個體大且雌雄同體的扇貝作為親貝按照以上方法連續自交三代以上，直到大部分個體表現均優良且一致，即獲得遺傳穩定的紫海雜交新品種。
3.一種紫海雜交扇貝新品種的群體培育方法，其特征在于首先利用紫扇貝卵子和海灣扇貝精子受精建立紫海雜交子一代群體，然后從雜交群體中選擇雌雄同體的優良個體，促熟后單獨產卵排精并自體受精，受精卵孵化后將幼蟲合在一起構成自交群體；第二年從上述自交群體中再選擇雌雄同體的優良個體繼續進行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續自交三代以上，即獲得穩定遺傳且生長快、個體大、溫度耐受范圍廣的紫海雜交扇貝新品種。
4.一種紫海雜交扇貝新品種的群體培育的方法，其特征在于具體操作步驟如下1)紫海雜交一代群體的培育選擇殼高5厘米以上的紫扇貝和海灣扇貝各50個，在1 月初納入育苗室水體內，蓄養密度為100個/ m3，選擇從10°C開始培育親貝；每天分6次投喂濃度為200-300萬細胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等單胞藻類，每次投喂15升/ m3，每天換水三分之一，每6天倒一次池，用空氣壓縮機連續充氣；在10°C培育10天性腺開始膨大后開始升溫，每天提高0. 5°C，待升到17°C時性腺接近成熟，逐漸增加餌料的投喂量直到扇貝達到性成熟；挑選性腺發育成熟的紫扇貝和海灣扇貝陰干刺激30分鐘，并且將單個扇貝置于預先加入23°C海水的2升塑料燒杯中，分別收集紫扇貝的卵子和海灣扇貝的精子； 收集的精液在顯微鏡下立即觀察，若混有卵子則棄掉；收集的卵子放置20分鐘以后在顯微鏡下觀察，若已受精發育則棄掉；將獲得的來自多個紫扇貝的卵子和多個來自海灣扇貝的精子授精，將受精卵置于黑暗環境下孵化，然后按照常規方法進行幼蟲培育、苗種中間培育和養成，即獲得紫海雜交群體；2)紫海雜交子一代親貝的選擇和促熟從上述培育的紫海雜交子一代群體中選擇個體大且雌雄同體的扇貝在1月份納入育苗室，按照上述步驟進行性腺促熟，成熟后即可進行自交純化；3)自交純化選取成熟的雌雄同體的紫海雜交子一代親貝，陰干刺激30分鐘，將單個扇貝置于預先加入23°C海水的2升塑料燒杯中使其產卵排精；攪拌使來自同一個扇貝的精卵混合均勻，受精卵孵化后將幼蟲合在一起構成自交群體，按照常規方法進行幼蟲培育、 苗種中間培育和養成，即獲得紫海雜交子一代扇貝的自交群體；收獲時選擇雌雄同體的優良個體作為下一年自交選育的親貝，用于品種培育；4)品種培育將以上選擇的個體大且雌雄同體的扇貝作為親貝按照以上方法連續自交三代以上，直到大部分個體表現均優良且一致，即獲得遺傳穩定的紫海雜交新品種。
全文摘要
本發明涉及一種紫海雜交扇貝新品種的培育方法。首先利用紫扇貝卵子和海灣扇貝精子受精建立多個紫海雜交子一代家系，根據各雜交家系的表現型選擇優良雜交家系，然后從優良雜交家系中選擇雌雄同體的優良個體，促熟后分別自體受精建立多個自交家系；第二年從上述自交家系中再選擇優良家系，然后從優良家系中進一步選擇雌雄同體的優良個體繼續進行自交、選擇；這樣按同樣的方法連續自交三代以上，即獲得穩定遺傳且生長快、個體大、溫度耐受范圍廣的紫海雜交扇貝新品種。本發明同樣也可采用群體培育的方法實現。鑒于本發明的紫海雜交新品種同時具有海灣扇貝和紫扇貝的優良特點，因此實現了在青島和大連等北方海域養殖，產量比海灣扇貝提高30％以上。
文檔編號A01K61/00GK102301971SQ201110223358
公開日2012年1月4日 申請日期2011年8月5日 優先權日2011年8月5日
發明者劉保忠, 李建立, 李繼強, 杜厚寬, 王文琪, 王春德 申請人:青島農業大學