專利名稱：一種蛹蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于生物學技術領域，具體涉及到ー種蛹蟲草菌絲體的生產(chǎn)エ藝。
背景技術：
北冬蟲夏草，又稱蛹蟲草，它是麥角菌科真菌冬蟲夏草Cordycrpssinensis (Berk. ) Sacc寄生在幼蟲蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復合體,是ー種傳統(tǒng)的名貴滋補中藥材，與天然人參、鹿茸并列為三大滋補品。它藥性溫和，一年四季均可食用，老、少、病、弱、虛者皆宜，比其他種類的滋補品有更廣泛的藥用價值。自古以來，人們都把其作為滋補品和藥用品。天然的野生冬蟲夏草主要生長在高海抜、高寒地區(qū)，生長環(huán)境的構成十分苛刻和復雜，加之人們對蟲草的需求量不斷増加及不合理的采挖，致使天然的冬蟲夏草自然資源逐步減少。因此，為了解決藥源，科技人員不得不通過人工栽培蛹蟲草來滿足市場需求，但多少年來，人工栽培的蛹蟲草生產(chǎn)エ藝復雜、生產(chǎn)周期長、產(chǎn)量低等一直困擾著人們。通過科研工作者的努力，一種全新的蛹蟲草產(chǎn)品——蛹蟲草菌絲體開發(fā)出來了，這種菌絲體就是使用生物深層發(fā)酵技術獲得的。安徽農(nóng)業(yè)大學曾經(jīng)對蛹蟲草菌絲體進行了有效成分的分析，其結果表明菌絲體中氨基酸種類和冬蟲夏草生藥一致，但氨基酸總量和必需氨基酸總量明顯高于冬蟲夏草生藥，必需氨基酸占總氨基酸的比例也高于后者，必需氨基酸中蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸的含量更遠遠高于后者，菌絲體中粗蛋白、總糖及甘露醇的含量均高于冬蟲夏草生藥；菌絲體的脂肪酸組成中，不飽和脂肪酸占脂肪酸組成的85. 38%，其中亞油酸、亞麻酸等多價不飽和脂肪酸占脂肪酸組成的58. 87%，而亞油酸的含量占整個脂肪酸組成的一半以上(51.04% );發(fā)酵菌絲體還含有豐富的對人體健康非常重要的Zn、Fe、Ca等金屬元素，尤以Ca的含量為高。用生物深層發(fā)酵技術來生產(chǎn)蛹蟲草菌絲體，其生產(chǎn)周期短、エ藝簡單、生產(chǎn)效率高、穩(wěn)定等特點，是人工培養(yǎng)蛹蟲草產(chǎn)品的主要發(fā)展方向。現(xiàn)有的技術中，專利申請?zhí)枮?2134573. 2的巴西蟲草菌絲體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法及專利申請?zhí)枮?3104709. 9的蟲草菌絲發(fā)酵生產(chǎn)エ藝，都是使用價格昂貴的發(fā)酵罐進行培養(yǎng)，發(fā)酵條件高，培養(yǎng)基所使用原料復雜、造價高。專利申請?zhí)枮?1141350. 6的ー種冬蟲草菌粉類綠色飼料添加劑采用的是固體發(fā)酵，生產(chǎn)エ藝簡單，但把菌絲培養(yǎng)好需要大概2個月的時間，生產(chǎn)周期長。上述エ藝所生產(chǎn)出來的菌絲體生理性能都不夠成熟，不含有蟲草特有的蟲草素、S0D、蟲草多糖等高活性物質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有的技術不足而通過調(diào)整生產(chǎn)エ藝及配方來改變現(xiàn)有技術中使用價格昂貴的發(fā)酵罐導致發(fā)酵條件高造價高、液體菌種培養(yǎng)條件高及培養(yǎng)基使用原料復雜等缺點；所提供的エ藝是ー種液體菌種在培養(yǎng)時不用造價昂貴的發(fā)酵罐，而是使用旋轉式搖床進行培養(yǎng)；使用的原料拋開價格昂貴的礦物元素，大多使用易得、廉價的農(nóng)作物下腳料；整個エ藝模式培養(yǎng)條件簡單、周期短、效率高、穩(wěn)定等。重要的是菌絲體通過培養(yǎng)至轉色后使其生理性能成熟，含有蟲草特有的蟲草素、SOD、蟲草多糖等高活性物質(zhì)。本發(fā)明是通過以下技術方案來實現(xiàn)的I、試管母種的配制方法(I)培養(yǎng)基配比馬鈴薯100克，玉米粉15克，黃豆粉12克，白糖20克，蠶蛹粉15克，瓊脂18克，水1000毫升 ；(2)配制エ藝將馬鈴薯刨皮后對1000毫升水打成漿，再依次按量添加入玉米粉、黃豆粉、白糖、蠶蛹粉、瓊脂，然后將溶液加熱至沸騰后分裝到試管中，分裝量為試管的1/4 ；將分裝好的試管放置于高壓容器里在I. 5公斤/cm2壓力、溫度為121°C的高壓、高溫條件下維持消毒40分鐘；把消好毒的試管擺放、冷卻成斜面試管；(3)轉管篩選符合エ業(yè)化生產(chǎn)、菌絲生長旺盛、色澤正常并無感染的ー級蛹蟲草斜面母種，在無菌環(huán)境下轉接入消毒好的斜面試管，接入種塊大小為0. 3 0. 5cm2 ；(4)培養(yǎng)把轉接好種的試管放置在溫度為18 22で、相対濕度為75 85%的暗光環(huán)境下培養(yǎng)4 5天；(5)轉色當試管里的培養(yǎng)基面長滿菌絲時，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天,菌絲轉為桔紅色。2、液體菌種培養(yǎng)基的配制方法(I)培養(yǎng)基的配比馬鈴薯1000克，玉米粉50克，黃豆粉120克，面粉100克，白糖200克，酵母粉(膏)80克，蠶蛹粉150克，水10000毫升；(2)配制エ藝將馬鈴薯刨皮后對10000毫升水打成漿，再依次按量添加入玉米粉、黃豆粉、面粉、白糖、酵母粉(膏)、蠶蛹粉，然后將溶液加熱至沸騰后分裝到到耐高溫高壓的透明玻璃瓶中，裝入量為容具實際容量的一半，然后用棉花將瓶ロ塞紫；接下來放置于高壓容器里在I. 5公斤/cm2壓力、溫度為121°C的高壓、高溫條件下維持消毒60分鐘。3、液體菌種的培養(yǎng)方法(I)接種把消好毒的瓶裝液體培養(yǎng)基在無菌環(huán)境下接入轉過色的試管母種，每瓶接入4 6塊菌塊，并靜止培養(yǎng)3 5天；(2)培養(yǎng)把菌種萌發(fā)好、無污染的瓶裝液體培養(yǎng)基移到旋轉式搖床進行動態(tài)培養(yǎng)，搖床旋轉速度為150 300轉/分，搖床的轉動使液體培養(yǎng)基也隨之轉動，菌種在液體培養(yǎng)基的轉動及培養(yǎng)基里面的渣塊碰撞下不斷的被分撕成若干個菌球(片、絲)，3天后獲得有豐富菌球(片、絲)的液體菌種。4、固體菌絲體的配制方法(I)培養(yǎng)基的配比大米30斤、米糠30斤、麩皮30斤、玉米粉3斤、黃豆粉3斤、糖4斤、水130斤；(2)將上述各種物料混合均勻后分裝到塑料袋里，分裝量為塑料袋實際容量的一半，然后扎緊袋ロ ；接下來放置于高壓容器里在I. 5公斤/cm2壓力、溫度為121°C的高壓、高溫條件下維持消毒90分鐘；(3)把消好毒的袋裝培養(yǎng)基在無菌環(huán)境下接入培養(yǎng)好的液體菌種，液體菌種的接入量為固體料的3 5% ；
(4)把接好種的袋裝培養(yǎng)基放置在溫度為18 22°C、相対濕度為75 85%的暗光環(huán)境下培養(yǎng)4 5天；(5)當袋里的培養(yǎng)基被菌絲吃透后，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天，菌絲轉為桔紅色。5、菌絲體的處理方法將培養(yǎng)至轉色的菌絲體在60°C環(huán)境下自然或機械烘干至固體物含水量在10%以下，即得到優(yōu)質(zhì)的蛹蟲草菌絲體。與現(xiàn)有的技術相比，本發(fā)明既有如下優(yōu)點 1、本發(fā)明使用的原料簡單、易購、成本低。2、本發(fā)明使用的容具亦簡單、易購、成本低。3、本發(fā)明采用旋轉式搖床進行液體菌種培養(yǎng)，同時液體菌種在培養(yǎng)過程不需多級培養(yǎng)，不但縮短生產(chǎn)周期，同時也降低了因多級轉接菌種培養(yǎng)而容易感染之風險。4、本發(fā)明所培養(yǎng)的是菌絲體是通過培養(yǎng)至轉色后使其生理性能成熟，含有蟲草特有的蟲草素、S0D、蟲草多糖等高活性物質(zhì)。
具體實施例方式下面結合實施例對本發(fā)明的方法進ー步說明。ー種蛹蟲草菌絲體的生產(chǎn)エ藝，具體實施方式
如下I、試管母種的配制方法(I)培養(yǎng)基配比馬鈴薯100克，玉米粉15克，黃豆粉12克，白糖20克，蠶蛹粉15克，瓊脂18克，水1000毫升；(2)配制エ藝將馬鈴薯刨皮后對1000毫升水打成漿，再依次按量添加入玉米粉、黃豆粉、白糖、蠶蛹粉、瓊脂，然后將溶液加熱至沸騰后分裝到試管中，分裝量為試管的1/4 ；將分裝好的試管放置于高壓容器里在I. 5公斤/cm2壓力、溫度為121°C的高壓、高溫條件下維持消毒40分鐘；把消好毒的試管擺放、冷卻成斜面試管；(3)轉管篩選符合エ業(yè)化生產(chǎn)、菌絲生長旺盛、色澤正常并無感染的ー級蛹蟲草斜面母種，在無菌環(huán)境下轉接入消毒好的斜面試管，接入種塊大小為0. 3 0. 5cm2 ；(4)培養(yǎng)把轉接好種的試管放置在溫度為18 22で、相対濕度為75 85%的暗光環(huán)境下培養(yǎng)4 5天；(5)轉色當試管里的培養(yǎng)基面長滿菌絲時，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天,菌絲轉為桔紅色。2、液體菌種培養(yǎng)基的配制方法(I)培養(yǎng)基的配比馬鈴薯1000克，玉米粉50克，黃豆粉120克，面粉100克，白糖200克，酵母粉(膏)80克，蠶蛹粉150克，水10000毫升；(2)配制エ藝將馬鈴薯刨皮后對10000毫升水打成漿，再依次按量添加入玉米粉、黃豆粉、面粉、白糖、酵母粉(膏)、蠶蛹粉，然后將溶液加熱至沸騰后分裝到到耐高溫高壓的透明玻璃瓶中，裝入量為容具實際容量的一半，然后用棉花將瓶ロ塞緊；接下來放置于高壓容器里在I. 5公斤/cm2壓力、溫度為121°C的高壓、高溫條件下維持消毒60分鐘。3、液體菌種的培養(yǎng)方法
(I)接種把消好毒的瓶裝液體培養(yǎng)基在無菌環(huán)境下接入轉過色的試管母種，每瓶接入4 6塊菌塊，并靜止培養(yǎng)3 5天；(2)培養(yǎng)把菌種萌發(fā)好、無污染的瓶裝液體培養(yǎng)基移到旋轉式搖床進行動態(tài)培養(yǎng)，搖床旋轉速度為150 300轉/分，搖床的轉動使液體培養(yǎng)基也隨之轉動，菌種在液體培養(yǎng)基的轉動及培養(yǎng)基里面的渣塊碰撞下不斷的被分撕成若干個菌球(片、絲)，3天后獲得有豐富菌球(片、絲)的液體菌種。
4、固體菌絲體的配制方法(I)培養(yǎng)基的配比大米30斤、米糠30斤、麩皮30斤、玉米粉3斤、黃豆粉3斤、糖4斤、水130斤；(2)將上述各種物料混合均勻后分裝到塑料袋里，分裝量為塑料袋實際容量的一半，然后扎緊袋ロ ；接下來放置于高壓容器里在I. 5公斤/cm2壓力、溫度為121 °C的高壓、高溫條件下維持消毒90分鐘；(3)把消好毒的袋裝培養(yǎng)基在無菌環(huán)境下接入培養(yǎng)好的液體菌種，液體菌種的接入量為固體料的3 5% ；(4)把接好種的袋裝培養(yǎng)基放置在溫度為18 22°C、相対濕度為75 85%的暗光環(huán)境下培養(yǎng)4 5天；(5)當袋里的培養(yǎng)基被菌絲吃透后，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天，菌絲轉為桔紅色。5、菌絲體的處理方法將培養(yǎng)至轉色的菌絲體在60°C環(huán)境下自然或機械烘干至固體物含水量在10%以下，即得到優(yōu)質(zhì)的蛹蟲草菌絲體。
權利要求
1.一種蛹蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝，其特征在于試管母種的配制方法如下 (1)培養(yǎng)基配比馬鈴薯100克，玉米粉15克，黃豆粉12克，白糖20克，蠶蛹粉15克，瓊脂18克，水1000毫升； (2)配制工藝將馬鈴薯刨皮后對1000毫升水打成漿，再依次按量添加入玉米粉、黃豆粉、白糖、蠶蛹粉、瓊脂，然后將溶液加熱至沸騰后分裝到試管中，分裝量為試管的1/4 ;將分裝好的試管放置于高壓容器 里在I. 5公斤/cm2壓力、溫度為121°C的高壓、高溫條件下維持消毒40分鐘；把消好毒的試管擺放、冷卻成斜面試管； (3)轉管篩選符合工業(yè)化生產(chǎn)、菌絲生長旺盛、色澤正常并無感染的一級蛹蟲草斜面母種，在無菌環(huán)境下轉接入消毒好的斜面試管，接入種塊大小為0. 3 0. 5cm2 (4)培養(yǎng)把轉接好種的試管放置在溫度為18 22°C、相對濕度為75 85%的暗光環(huán)境下培養(yǎng)4 5天； (5)轉色當試管里的培養(yǎng)基面長滿菌絲時，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天，菌絲轉為桔紅色。
2.根據(jù)權利要求I所述的一種蛹蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝，其特征在于液體菌種培養(yǎng)基的配制方法如下 (1)培養(yǎng)基的配比馬鈴薯1000克，玉米粉50克，黃豆粉120克，面粉100克，白糖200克，酵母粉(膏)80克，蠶蛹粉150克，水10000毫升； (2)配制工藝將馬鈴薯刨皮后對10000毫升水打成漿，再依次按量添加入玉米粉、黃豆粉、面粉、白糖、酵母粉(膏)、蠶蛹粉，然后將溶液加熱至沸騰后分裝到到耐高溫高壓的透明玻璃瓶中，裝入量為容具實際容量的一半，然后用棉花將瓶口塞緊；接下來放置于高壓容器里在I. 5公斤/cm2壓力、溫度為121°C的高壓、高溫條件下維持消毒60分鐘。
3.根據(jù)權利要求I所述的一種蛹蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝,其特征在于液體菌種的培養(yǎng)方法如下 (1)接種把消好毒的瓶裝液體培養(yǎng)基在無菌環(huán)境下接入轉過色的試管母種，每瓶接入4 6塊菌塊，并靜止培養(yǎng)3 5天； (2)培養(yǎng)把菌種萌發(fā)好、無污染的瓶裝液體培養(yǎng)基移到旋轉式搖床進行動態(tài)培養(yǎng)，搖床旋轉速度為150 300轉/分，搖床的轉動使液體培養(yǎng)基也隨之轉動，菌種在液體培養(yǎng)基的轉動及培養(yǎng)基里面的渣塊碰撞下不斷的被分撕成若干個菌球(片、絲)，3天后獲得有豐富菌球(片、絲)的液體菌種。
4.根據(jù)權利要求I所述的一種蛹蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝,其特征在于固體菌絲體的配制方法如下 (1)培養(yǎng)基的配比大米30斤、米糠30斤、麩皮30斤、玉米粉3斤、黃豆粉3斤、糖4斤、水130斤； (2)將上述各種物料混合均勻后分裝到塑料袋里，分裝量為塑料袋實際容量的一半，然后扎緊袋口 ；接下來放置于高壓容器里在I. 5公斤/cm2壓力、溫度為121°C的高壓、高溫條件下維持消毒90分鐘； (3)把消好毒的袋裝培養(yǎng)基在無菌環(huán)境下接入培養(yǎng)好的液體菌種，液體菌種的接入量為固體料的3 5% ； (4)把接好種的袋裝培養(yǎng)基放置在溫度為18 22°C、相對濕度為75 85%的暗光環(huán)境下培養(yǎng)4 5天； (5)當袋里的培養(yǎng)基被菌絲吃透后，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天,菌絲轉為桔紅色。
5.根據(jù)權利要求I所述的一種蛹蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝,其特征在于菌絲體的處理方法如下 將培養(yǎng)至轉色的菌絲體在60°C環(huán)境下自然或機械烘干至固體物含水量在10%以下，即得到優(yōu)質(zhì)的蛹蟲草菌絲體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蛹蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝，它主要包括試管母種的配制、液體菌種的培養(yǎng)基配制及培養(yǎng)方式、菌絲體的培養(yǎng)基配制及培養(yǎng)方式等工序。本發(fā)明主要解決的是通過調(diào)整配方及工藝來改變現(xiàn)有技術中培養(yǎng)基使用原料復雜、造價高及液體菌種培養(yǎng)條件高等缺點；菌絲體通過培養(yǎng)至轉色后，使其主要成分、藥理與天然蛹蟲草更接近。該工藝方法簡單、生產(chǎn)綜合成本底，可進行大規(guī)模生產(chǎn)，具有較高的開發(fā)價值。
文檔編號C05G1/00GK102612985SQ20121006986
公開日2012年8月1日 申請日期2012年3月2日 優(yōu)先權日2011年8月29日
發(fā)明者何寒, 吳烈秋 申請人:何寒, 吳烈秋