專利名稱：草莓增殖培養基的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種草本植物培養基，更具體的講涉及一種草莓增值培養基，屬于植物生物學技術領域。
背景技術：
草莓以其突出的經濟價值和生態功能在我國得到大面積的推廣種植。而面對生產需要和現有的生產條件，草莓在產量、品質及抗性等方面都有待于進一步改良。將生物技術與常規育種方法結合起來進行草莓新品種培育，是提高育種草莓效率的有效途徑。傳統的草莓增殖培養基為MSM基本培養基+ 0. I 0. 5mg/L 6-BA + 100 200mg/ L谷氨酰胺+ 20 30 g/L白糖+ 5_9g/L瓊脂，pH值為5. 5 6. O。首先，在 組成上，MSM基本培養基中有機物的含量比較低，且不含有組分肌醇，不利于植物的助長發育，其次，組分瓊脂在植物組織培養中具有無法克服的固有缺陷，影響了培養基的整體效果。

發明內容
為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種可有效提高草莓增值培養效果的草莓增殖培養基。本發明是通過以下技術方案來實現的
一種草莓增殖培養基，其特征在于，包括1/2改良MS + 0. 2 0. 5mg/L 6-BA + 100 200mg/ L 谷氨酰胺 + 30 50 g/L 白糖 + I. 5 2. 5g/L phytagel, pH 在 5. 5 6. 0 之間。進一步，所述的改良MS培養基包括常量營養兀素、微量營養兀素和有機試劑。其中，所述的常量營養元素的組分和其對應的濃度如下
硝酸鉀1850 mg/L ；
硝酸銨1600 mg/L ；
七水硫酸鎂420 mg/L ；
無水磷酸二氫鉀170 mg/L ；
二水氯化鈣450 mg/L ；
乙二胺四乙酸二鈉35. 2 mg/L ；
七水硫酸亞鐵27. 8 mg/Lo所述的微量營養元素的組分和其對應的濃度如下
四水硫酸錳20. 2 mg/L ；
硫酸鋅5. 5 mg/L ；
硼酸5. 0 mg/L ；
碘化鉀0. 83 mg/L ；
鑰酸鈉0. I mg/L ；
硫酸銅0. 025 mg/L ；氯化鈷o. 15 mg/Lo而所述的有機試劑的組分和其對應的濃度如下
鹽酸硫胺素 8 mg/L ；
煙酸2. 5 mg/L ；
鹽酸卩比唆醇 2. 5 mg/L ；
肌醇100mg/L。
本發明的有益效果是本發明通過選擇改良MS作為草莓培養基的基礎培養基，大大增加了本發明所述的培養基的有機物尤其是肌醇的含量，而通過用phytagel代替瓊脂，有效地克服了傳統瓊脂在植物組織培養中的固有缺陷，有效地克服了草莓高頻體胚再生培養中基因型限制問題，大幅度提高體細胞胚發生頻率和再生植株頻率，提高了育種效率。
具體實施例方式下面將結合具體實施例，詳細說明本發明的
具體實施例方式 實施例I
1/2改良MS + 0. 2mg/L 6-BA + 150mg/ L谷氨酰胺 + 30g/L 白糖 + I. 5g/L phytagel ,pH在5. 8左右。實施例2
1/2 改良 MS + 0. 3mg/L 6-BA + IOOmg/ L 谷氨酰胺 + 50 g/L 白糖 + 2. Og/Lphytagel, pH 在 5. 5 左右。實施例3
1/2 改良 MS + 0. 5mg/L 6-BA + 200mg/ L 谷氨酰胺 + 45g/L 白糖 + 2. 5g/Lphytagel, pH 在 5. 9 左右。實施例4
1/2 改良 MS + 0. 3mg/L 6-BA + 120mg/ L 谷氨酰胺 + 35 g/L 白糖 + I. 5g/Lphytagel, pH 在 5. 5 左右。實施例5
1/2 改良 MS + 0. 5mg/L 6-BA + 160mg/ L 谷氨酰胺 + 40g/L 白糖 + 2. 2g/Lphytagel, pH 在 6. 0 左右。在上述實施例1-5中，改良MS培養基包括常量營養兀素、微量營養兀素和有機試齊U。其中，所述的常量營養元素的組分和其對應的濃度如下硝酸鉀1850 mg/L;硝酸銨1600 mg/L ;七水硫酸鎂420 mg/L ;無水磷酸二氫鉀170 mg/L ;二水氯化韓450 mg/L ;乙二胺四乙酸二鈉35. 2 mg/L;七水硫酸亞鐵27. 8 mg/L。所述的微量營養元素的組分和其對應的濃度如下四水硫酸錳20. 2 mg/L ;硫酸鋅5. 5 mg/L ;硼酸5. 0 mg/L ;碘化鉀0. 83 mg/L ；鑰酸鈉0. I mg/L ;硫酸銅0. 025 mg/L ;氯化鈷0. 15 mg/L。而所述的有機試劑的組分和其對應的濃度如下鹽酸硫胺素8 mg/L ;煙酸2. 5 mg/L ;鹽酸批卩多醇2. 5 mg/L ;肌醇IOOmg/L0將380個外植體分別在5個實施例所述的培養基上進行培養，培養過程如下割取草莓I. 5 3. 0高的草莓無菌苗接種到上述的5個培養基上進行培養，培養條件為在室溫27±2°C，16小時光照，光照強度10 30Mm2. s—1 ;在溫度為20±2°C，暗培養8 10小時，上述光照和暗培養交替進行。結果為2 3周后得到了大量不定牙，增殖倍數為8-15倍，莖葉伸展，葉片嫩綠，植株健壯。而傳統的增殖培養基的增殖倍數在5 10倍，且容易出現基因型障礙，不能正長增殖，或者出現葉片發黃，植株畸形化的問題。因此可以得出通過選擇適宜外植體、改良基本培養基及成分、調整培養條件等配套措施，有效地克服了苜蓿高頻體胚再生培養中不同品種及基因型障礙問題，大幅度提高體細胞胚胎發生頻率和再生植株頻率的結論。本發明通過選擇改良MS作為草莓培養基的基礎培養基，大大增加了本發明所述的培養基的有機物尤其是肌醇的含量，而通過用phytagel代替瓊脂，有效地克服了傳統瓊脂在植物組織培養中的固有缺陷，有效地克服了草莓高頻體胚再生培養中基因型限制問題，大幅度提高體細胞胚發生頻率和再生植株頻率，提高了育種效率。
以上已以較佳實施例公開了本發明，然其并非用以限制本發明，凡采用等同替換或者等效變換方式所獲得的技術方案，均落在本發明的保護范圍之內。
權利要求
1.ー種草莓增殖培養基，其特征在于，包括1/2改良MS + O. 2 O. 5mg/L 6-BA +100 200mg/ L 谷氛酸胺 + 30 50 g/L 白糖 + I. 5-2. 5g/L phytagel,pH 在 5. 5 6. O之間。
2.根據權利要求I所述的草莓增殖培養基，其特征在于，所述的改良MS培養基包括常量營養兀素、微量營養兀素和有機試劑。
3.根據權利要求2所述的草莓增殖培養基，其特征在于，所述的常量營養元素的組分和其對應的濃度如下 硝酸鉀1850 mg/L ； 硝酸銨1600 mg/L ； 七水硫酸鎂420 mg/L ； 無水磷酸ニ氫鉀170 mg/L ； ニ水氯化鈣450 mg/L ； こニ胺四こ酸ニ鈉35. 2 mg/L ； 七水硫酸亞鐵27. 8 mg/L ο
4.根據權利要求2所述的草莓增殖培養基，其特征在干，所述的微量營養元素的組分和其對應的濃度如下 四水硫酸錳20. 2 mg/L ； 硫酸鋅5. 5 mg/L ； 硼酸5. O mg/L ； 碘化鉀O. 83 mg/L ； 鑰酸鈉O. I mg/L ； 硫酸銅O. 025 mg/L ； 氯化鈷O. 15 mg/L ο
5.根據權利要求2所述的草莓增殖培養基，其特征在于，所述的有機試劑的組分和其對應的濃度如下 鹽酸硫胺素 8 mg/L ； 煙酸2. 5 mg/L ； 鹽酸卩比B多醇 2. 5 mg/L ； 肌醇100mg/L。
全文摘要
本發明公開了一種草莓增殖培養基，包括1/2改良MS+0.2～0.5mg/L6-BA+100～200mg/L谷氨酰胺+30～50g/L白糖+0.35%phytagel，pH在5.5～6.0之間。本發明通過選擇改良MS作為草莓培養基的基礎培養基，大大增加了本發明所述的培養基的有機物尤其是肌醇的含量，而通過用phytagel代替瓊脂，有效地克服了傳統瓊脂在植物組織培養中的固有缺陷，有效地克服了草莓高頻體胚再生培養中基因型限制問題，大幅度提高體細胞胚發生頻率和再生植株頻率，提高了育種效率。
文檔編號A01H4/00GK102668987SQ20121017472
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月31日 優先權日2012年5月31日
發明者唐山遠, 朱延慶, 朱靜, 笪榮根, 紀榮喜 申請人:句容市白兔鎮云兔草莓專業合作社