專利名稱：一種達摩蘭快速繁殖方法
技術領域：
本發明屬于達摩蘭的植株再生及產業化快速生產技術，涉及一種達摩蘭快速繁殖方法。
背景技術：
達摩蘭是墨蘭的一種，花香純正幽遠，花7 9朵，紅色素心，花期I 3月，是一種珍貴的觀賞植物。但目前達摩蘭的現有生產技術存在母株稀缺，繁殖基數少，繁殖率低，分株速度慢，種子小，育種進程緩慢，出苗率低等難題，因此，很難獲得理想的發芽率和更多的鍵壯珍稀苗
發明內容
本發明目的是提供一種達摩蘭快速繁殖方法，該方法培養的苗健壯一致、增殖時間短、成苗移植后成活率高，成本低，花期一致，便于產業化統一管理和銷售時間的控制，具有顯著的經濟效益。本發明采取的技術方案如下
一種達摩蘭快速繁殖方法，具體步驟包括
1)取材、消毒選取達摩蘭原種苗，切取長度3 5厘米的側芽，沖洗干凈后，在水中剪去根及側芽外層I 2片葉梢，清洗、消毒處理，剝去外圍組織，切取莖尖，直接接種到原球莖誘導培養基上；
2)原球莖誘導所述原球莖誘導培養基的配方為基本培養基MS中加入6-BAO. 5mg/L ；NAA I. O mg/L ;香蕉果肉150 g/L ;蛋白胨3g/L ;白糖2% ;活性炭2g/L ;瓊脂6. 5g，培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx，誘導產生原球莖；
3)叢生芽誘導選取步驟2)生長良好的原球莖轉到叢生芽誘導培養基上，所述叢生芽誘導培養基的配方為基本培養基1/2 MS中加入6-BA 3. Omg/L ；NAA 1.0 mg/L ;蛋白胨2g/L ;花寶I號2 g/L ;活性炭2. O g/L;白糖3%;香蕉果肉150 g/L ;培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx ;誘導出叢生芽；
4)增殖培養將過步驟3)誘導產生的叢生芽切開，接種到增殖培養基中；每100 150g的增殖培養基接種3個；所述的增殖培養基的配方為基本培養基1/2 MS中加入6-BA
O.5mg/L ；NAA O. 5mg/L ;活性炭2. O g/L ;花寶2號2 g/ ;白糖3% ;香蕉果肉150 g/L ;培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx ；
5)誘導生根將步驟4)增殖培養出來的長至2cm高、3 4片葉的幼苗單株切下，轉接到生根培養基上，所述的生根培養基的配方為基本培養基1/2 MS中加入6-BA O. 3mg/L ；NAA 0.5 mg/L ；IBA 1.0 mg/L;活性炭2.0 g/L ;白糖3% ;培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx ；
6)試管苗完成當試管苗長至4 5cm，具3 4條根、4 5片葉時，完成達摩蘭試管苗培養；以上所述基本培養基1/2 MS指大量元素減半。將所述步驟6)完成的達摩蘭試管苗進行移栽，移栽前先在培養室外自然條件下煉苗4 5d，然后打開瓶蓋煉苗2 4天，煉苗后從瓶中取出幼苗，用清水洗凈附著幼苗根部的培養基，用水苔將根包好，移栽至珍珠巖、細石與樹皮的混合基質中，并用紗布包好3 5粒緩釋肥置于移栽盤中，注意不要直接放在根部。其中花寶I號成份比例N P K配比為(7 6 :19)，N, P, K分別指的是=NO3硝態氮、PO3氧化磷、KO3氧化鉀。本發明培養的苗健壯一致、增殖時間短、成苗移植后成活率高，成本低，花期一致，便于產業化統一管理和銷售時間的控制，具有顯著的經濟效益。


圖I為莖尖誘導形成的原球莖。 圖2為原球莖誘導形成的不定芽。圖3為增殖苗誘導形成的叢生芽。圖4為達摩蘭生根苗。圖5為試管移栽苗。
具體實施例方式下面結合實施實例對本發明作進一步說明，但是本發明不僅限于此。實施例I
本發明選取達摩蘭原種苗無病蟲害的健壯母株上切取長度3 5厘米的側芽為外植體材料，經過莖尖誘導培養，20d后周圍出現許多白色顆粒狀愈傷組織，繼續培養逐漸轉為綠色，25天后即可形成大量原球莖；再經過分化培養基進行不定芽誘導，30 40d開始分化，逐步誘導出叢生芽，增殖到一定數量后再進行生根培養，生根后可煉苗移栽。從而擴大繁殖系數，縮短育苗周期，滿足市場需求，為珍稀物種達摩蘭大量繁殖進行產業化生產提供技術支持。培養基
MS基本培養基采用1986，北京高等教育出版社出版，陳正華主編的《木本植物組織培養及其應用》中的配方進行配制的。原球莖誘導培養基為基本培養基MS中加入6-BA O. 5mg/L ；NAA I. O mg/L ;香蕉果肉150 g/L ;蛋白胨3g/L ;白糖2% ;活性炭2g/L;瓊脂6. 5g。叢生芽誘導培養基為基本培養基1/2 MS (大量元素減半)中加入6-BA 3. Omg/L ；NAA 1.0 mg/L ；AC 2. Og/L ;香蕉肉 150 g/L ;蛋白胨 2g/L ;花寶 I 號 2 g/L ；AC 2.0 g/L ;白
糖3%。增殖培養基為基本培養基1/2 MS (大量元素減半)中加入；6-BA O. 5mg/L ；NAA
O.5mg/L ；AC 2. 0 g/L ;花寶 2 號 2 g/ ;白糖 3% ;香蕉肉 150 g/L。生根培養基為基本培養基1/2 MS(大量元素減半)中加入6-BA O. 3mg/L ；NAA O. 5mg/L ；IBA I. 0 mg/L ；AC 2. 0 g/L ；白糖 3%。基本培養基1/2MS是指MS基本培養基中大量元素減半，其他成分不變。
材料消毒處理先對材料進行適當清洗，用剪刀截取2 3cm長帶腋芽莖段，在水中剪去根及側芽外層I 2片葉梢，用洗衣粉清洗表面，流水沖洗30min左右，置于超凈工作臺上，用75%酒精浸泡3min，然后用O. 1%升汞消毒8min，無菌水沖洗3 4次后用利福平(70 75mg/L)浸泡3min，并用無菌水沖洗I次，剝去外圍組織，切取莖尖，直接接種到原球莖誘導培養基上。原球莖誘導培養條件培養室溫度為25±2°C,光照時間12h/d,光照強度1000 1500Lx ;誘導25d左右，如圖I所示，平均誘導原球莖7 8個，誘導率達96%以上。叢生芽誘導將所述經過步驟2)誘導產生的原球莖重復培養后，選取生長良好的原球莖轉到叢生芽誘導培養基上，所述的培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx ;40d左右開始分化，誘導出叢生芽，如圖2芽誘導分化率高，健壯，深綠。增殖培養將所述經過步驟3)誘導產生的叢生芽切開，分別接種在增殖培養基中；100 150g的增殖培養基接種3個；所述的培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時 間12h/d，光照強度1000 1500Lx，如圖4所示，叢生芽萌動形成大量植株，芽健壯，增殖率聞。誘導生根將所述經過步驟4)培養出來的長至2cm高、3 4片葉的幼苗單株切下，轉接到不同生根培養基上，每瓶5株，所述的培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx，生根率達90%以上，如圖4所示。試管苗完成當試管苗長至4 5cm，具3 4條根時，4 5片葉時，完成達摩蘭植株再生及產業化生產關鍵技術試管苗培養，如圖5所示。所述步驟6)完成的達摩蘭試管苗進行移栽，移栽前先在培養室外煉苗一周左右。然后從瓶中取出，洗凈附著的培養基，用水苔將根包好，移栽至珍珠巖、細石與樹皮的混合基質中，并用紗布包好3 5粒緩釋肥置于移栽盤中，注意不要直接放在根部，移栽后保持一定的溫度和濕度。
權利要求
1.一種達摩蘭快速繁殖方法，其特征在于所述方法的具體步驟包括 O取材、消毒選取達摩蘭原種苗，切取長度3 5厘米的側芽，沖洗干凈后，在水中剪去根及側芽外層I 2片葉梢，清洗、消毒處理，剝去外圍組織，切取莖尖，直接接種到原球莖誘導培養基上； 2)原球莖誘導所述原球莖誘導培養基的配方為基本培養基MS中加入6-BAO. 5mg/L ；NAA I. O mg/L ;香蕉果肉 150 g/L ;蛋白胨3g/L ;白糖 2% ;活性炭 2g/L ;瓊脂6. 5g,培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx，誘導產生原球莖； 3)叢生芽誘導選取步驟2)生長良好的原球莖轉到叢生芽誘導培養基上，所述叢生芽誘導培養基的配方為基本培養基1/2 MS中加入6-BA 3. Omg/L ；NAA I. O mg/L ;蛋白胨2g/L ;花寶I號2 g/L ;活性炭2. O g/L ；白糖3% ;香蕉果肉150 g/L ;培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx ;誘導出叢生芽； 4)增殖培養將過步驟3)誘導產生的叢生芽切開，接種到增殖培養基中；每100 150g的增殖培養基接種3個；所述的增殖培養基的配方為基本培養基1/2 MS中加入6-BAO. 5mg/L ；NAA O. 5mg/L ;活性炭2. O g/L ;花寶2號2 g/ ;白糖3% ;香蕉果肉150 g/L ;培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx ； 5)誘導生根將步驟4)增殖培養出來的長至2cm高、3 4片葉的幼苗單株切下，轉接到生根培養基上，所述的生根培養基的配方為基本培養基1/2 MS中加入6-BA O. 3mg/L5NAA 0.5 mg/L； IBA 1.0 mg/L;活性炭2. O g/L ;白糖3% ;培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1000 1500Lx ； 6)試管苗完成當試管苗長至4 5cm，具3 4條根、4 5片葉時，完成達摩蘭試管苗培養；以上所述基本培養基1/2 MS指大量元素減半。
2.根據權利要求I所述的達摩蘭快速繁殖方法，其特征在于將所述步驟6)完成的達摩蘭試管苗進行移栽，移栽前先在培養室外自然條件下煉苗4 5d，然后打開瓶蓋煉苗2 4天，煉苗后從瓶中取出幼苗，用清水洗凈附著幼苗根部的培養基，用水苔將根包好，移栽至珍珠巖、細石與樹皮的混合基質中，并用紗布包好3 5粒緩釋肥置于移栽盤中，注意不要直接放在根部。
全文摘要
本發明提供一種達摩蘭快速繁殖方法，屬于達摩蘭的植株再生及產業化快速生產技術。解決現有技術中母株稀缺，繁殖基數少，繁殖率低，分株速度慢，種子小，育種進程緩慢，出苗率低等難題。本發明選取達摩蘭原種苗無病蟲害的健壯母株上切取長度3～5厘米的側芽為外植體材料，經過莖尖誘導培養，20d后周圍出現許多白色顆粒狀愈傷組織，繼續培養逐漸轉為綠色，25天后即可形成大量原球莖；再經過分化培養基進行不定芽誘導，30～40d開始分化，逐步誘導出叢生芽，增殖到一定數量后再進行生根培養，生根后可煉苗移栽。從而擴大繁殖系數，縮短育苗周期，滿足市場需求，為珍稀物種達摩蘭大量繁殖進行產業化生產提供技術支持。
文檔編號A01H4/00GK102696485SQ201210221460
公開日2012年10月3日 申請日期2012年6月30日 優先權日2012年6月30日
發明者何官榕, 何碧珠, 彭彪, 鄒雙全 申請人:福建農林大學