專利名稱：一種防治密封組培瓶苗中薊馬的方法
技術領域：
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本發明涉及一種防治密封組培瓶苗中薊馬的方法，屬于生物技術領域。
背景技術：
植物組織培養技術是指在無菌條件下，利用植物體的一部分(組織器官或細胞等)，接種在人工制造的培養基上，在人工控制的環境下，使離體植物組織、器官或細胞長成完整植株的技術。以植物組織培養技術為基礎的植物快繁技術，是較為成熟，應用廣泛，成效極大的一種現代生物技術。但是由于我國組培發展較快，組培室與外界隔離不嚴，常引起微型蟲體侵入組培苗中，薊馬就是其中的一種。薊馬在大田作物生產過程中發生極為普遍，而在組培苗生產過程中較為少見。由于組培工廠的迅速發展，所處環境各異，組培室發生薊馬危害的情況越來越多。國外曾有因薊馬危害造成組培工廠化生產全軍覆沒的報道。我國目前有薊馬發生頻率增多，危害加重的趨勢，特別是在一些超過五年的老組培室更為常見。薊馬屬纓翅目昆蟲，成蟲體長約1mm，成蟲、若蟲多在葉脈間用銼吸式口器銼食葉肉，吸其汁液。因其體形微小，不易察覺。它一年四季均可發生，春夏秋三季主要發生在露地作物上，冬季主要發生在溫室大棚作物中。它雌性成蟲主要是孤雌生殖，偶有二性生殖，喜歡溫暖、干旱的天氣，其適宜生長溫度為23-28°C .
薊馬侵入培養瓶中危害瓶苗葉片及生長點，形成不規則綠色小黑斑，嚴重時斑點連成片，造成葉片干枯脫落，甚至造成瓶苗枯死，由于組培苗生長環境特殊，易形成較大蟲口密度，同時通過組培苗轉接，蟲體易擴散到組培苗中，可短時間危害整個組培室，另外還因薊馬活動引起細菌、真菌污染。由于組培瓶苗中薊馬的防治不能與普通大田防治一樣噴藥，滅蟲必須在無菌條件下進行，且整個組培室中的所有組培苗都要進行殺蟲處理，以保證徹底清除蟲體，因此防治技術上有一定的困難，專利申請號為201010620976. O的專利描述了一種防止組培薊馬污染的方法，其主要方法是1)在常規組培接種后培養容器蓋好蓋子，或培養容器塞好塞子；2)在蓋子下邊與培養容器接觸處或培養容器口與塞子接觸處涂抹或噴曬殺薊馬劑；3)在蓋子下邊與培養容器接觸處或培養容器口與塞子接觸處加封封口膜。但是該方法所用的殺蟲劑殺蟲的效率不高，只能夠防薊馬，而不能徹底殺死薊馬。

發明內容
本發明的目的在于克服上述不足，提供一種簡單徹底可以防治密封組培瓶苗中薊馬的方法。本發明的目的是這樣實現的
一種防治密封組培瓶苗中薊馬的方法，所述方法包括以下步驟
(1)、選擇適宜的殺蟲劑 選用5%丁硫克百威乳油；
(2)、制備含殺蟲劑的培養基在常規植物組培增殖、生根培養基配方中，僅增加有效成份5-10mg/L 丁硫克百威乳油到培養基中，再進行分裝，每瓶倒入50ml的培養基，然后在高壓滅菌鍋中121°C條件下，滅菌18-20min，冷卻凝固后備用；
(3)、無菌操作轉接組培苗
在超凈工作臺內將組培室所有的組培苗按增殖、生根要求剪切整理，轉接到制備的含殺蟲劑的培養基中，按增殖、生根要求接種；
(4)、培養室培養瓶苗
接種后轉入光照強度30001x、光照時間14-16小時、溫度25±2°C下培養30-40天，薊馬大部分被殺死。為了確保萬無一失，在第二次轉接時，再用同樣的方法處理一次，可徹底殺滅組培瓶苗中所有的薊馬。與現有技術相比，本發明的有益效果是
本發明一種防治密封組培瓶苗中薊馬的方法，在預防的基礎上可以徹底殺死薊馬，殺蟲效果好，另外對人體也沒有危害。
具體實施例方式 本發明一種防治密封組培瓶苗中薊馬的方法，其工藝步驟如下
I、選擇適宜的殺蟲劑
由于組培瓶苗的特點和特殊環境，適宜的殺蟲劑必須符合以下幾點
一是用量要少；二是殺蟲劑成分不能與培養基發生化學反應；三是具有觸殺和內吸性；四是經高溫高壓滅菌不破壞殺蟲性能；五是不影響組培苗的正常生長；六是對人及環境安全。經發明人三年的試驗篩選，5%丁硫克百威乳油符合上述條件，且殺蟲效果極好。2、制備含殺蟲劑的培養基
在常規植物組培增殖、生根培養基配方中，僅增加有效成份5-10mg/L 丁硫克百威乳油到培養瓶中，在高壓滅菌鍋中121°C條件下，滅菌20-30min，然后冷卻凝固后備用。3、無菌操作轉接組培苗
在超凈臺內將組培室所有的組培苗按增殖、生根要求剪切整理，轉接到制備的含殺蟲劑的培養基中，按增殖、生根要求接種。4、培養室培養瓶苗
接種后轉入光照強度30001x、光照時間14-16小時、溫度25±2°C下培養30-40天，薊馬大部分被殺死。為了確保萬無一失，在第二次轉接時，再用同樣的方法處理一次，可徹底殺死滅組培中所有的薊馬。
實施例以紅葉石楠組培密封瓶苗中薊馬的防治為例
I、選用5%丁硫克百威乳油每瓶20ml裝。2、配制含丁硫克百威殺蟲劑的培養基。以IL增殖培養基為例在電飯煲內加入IL去離子水，再加入30g白糖和5g瓊脂加熱溶解，再加MS培養基母液，lmg/ml的6-BA lml、lmg/ml的IBA O. I ml進行煮沸,用ImolNAOH調pH值為6. O,再加入5%丁硫克百威0，2ml攪拌均勻，趁熱分裝每培養瓶50ml，蓋好瓶蓋，在高壓滅菌鍋中121°C滅菌20min，冷卻凝固后備用。
3、無菌操作轉接組培苗
在超凈臺內，將組培紅葉石楠瓶苗用鑷子夾出，放在超凈臺內的無菌紙上，剪去葉片，剪成I. 5-2cm長的莖芽，接種到含丁硫克百威殺蟲劑的培養基中，每瓶接種5-6個芽，直至組培室所有的紅葉石楠瓶苗全部轉接完畢。
4、培養室培養瓶苗
接種完后轉入光照強度30001x，每天光照16小時，溫度27°C條件下，培養40-45天，每個芽增殖到2-3個I. 5-2. Ocm芽，薊馬被殺死，瓶苗恢復正常生長。為了確保萬無一失，在第二次繼代時再用上述同樣的方法進行處理一次，可徹底殺滅組培室瓶苗中所有的薊馬，生產恢復正常。
權利要求
1. 一種防治密封組培瓶苗中薊馬的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟 (1)、選擇適宜的殺蟲劑 選用5%丁硫克百威乳油； (2)、制備含殺蟲劑的培養基 在常規植物組培增殖、生根培養基配方中，僅增加有效成份5-10mg/L 丁硫克百威乳油到培養瓶中，在高壓滅菌鍋中121°C條件下，滅菌20-30min，然后冷卻凝固后備用； (3)、無菌操作轉接組培苗 在超凈臺內將組培室所有的組培苗通過剪切整理，轉接到制備的含殺蟲劑的培養基中，按增殖、生根要求接種； (4)、培養室培養瓶 苗 接種后轉入光照強度30001x、光照時間14-16小時、溫度25±2°C下培養30-40天，薊馬大部分被殺死；為了確保萬無一失，在第二次轉接時，再用同樣的方法處理一次，可徹底殺死滅組培中所有的薊馬。
全文摘要
本發明涉及一種防治密封組培瓶苗中薊馬的方法，包括選擇適宜的殺蟲劑、制備含殺蟲劑的培養基、無菌操作轉接組培苗和培養室培養瓶苗幾個步驟。本發明一種防治密封組培瓶苗中薊馬的方法，在預防的基礎上可以徹底殺死薊馬，殺蟲效果好，另外對人體也沒有危害。
文檔編號A01H4/00GK102771390SQ20121023524
公開日2012年11月14日 申請日期2012年7月9日 優先權日2012年7月9日
發明者劉喚英, 吳有光, 胡中義 申請人:江西省喜果綠化有限公司