專利名稱：利用根誘導原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法
技術領域：
本發明屬植物細胞工程技術領域，涉及一種利用根誘導原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法。
背景技術：
大花蕙蘭(Cymbidium hybridium)為蘭科蘭屬多年生草本植物,是近幾年在國際花卉市場上流行的高檔室內盆栽花卉及高檔切花，因其花色艷美，花期較長(2-3月)，又在冬春節日期間開放，所以具有極高的觀賞價值。大花蕙蘭多為雜交品種，種子繁殖無法保持其品種特性，且結實率也相對較低。故傳統栽培靠分株繁殖，因而周期長，繁殖系數低，繁殖速度慢，遠遠不能滿足商品化生產的要求。目前，國外已將組織培養技術應用于大花蕙蘭的繁殖與生產。國內也有許多研究者對大花蕙蘭的組織培養技術進行了大量的研究，并用于商品化生產。
大花蕙蘭的組織培養始于20世紀60年代，Morel采用大花蕙蘭的莖尖，在含有細胞分裂素的KC培養基上進行培養，莖尖分生組織膨大形成類原球莖，并分化出根和葉，首次獲得蘭花無病毒小植株Morel G. Producing virus free Cymbidium. Am [J] Orchid Soc Bull，1990 (9) :495_497。Wimber 對 Morel 的方法進行了改進，采用液體振蕩培養的方法大大加快了原球莖的增殖速度，短期內可以獲得大量再生植株Whimber D
D.Clonalmultiplicatication of Cymbidium through t issueculture of the shootmeristem. Am [J], Orchid Soc Bull，1963，32:105-107，此后組織培養技術在蘭花生產上得到了廣泛的應用。在我國，大花蕙蘭的組織培養快繁技術研究起步較晚。一般來說，大花蕙蘭組織培養過程包括以下兩種方法⑴原球莖途徑外植體的導入體胚誘導，原球莖形成原球莖，增殖芽的誘導分化，根的誘導分化，出苗。該方法的優點是增殖系數高，但易產生變異，植株生長弱。⑵直接誘導叢生芽途徑外植體的導入，直接誘導叢生芽，叢生芽增殖，根的誘導分化，出苗。該方法縮短了培養時間，降低了成本，植株生長健壯，但其增殖系數不高。迄今為止，大花蕙蘭組織培養的過程均存在比較繁瑣，成本高等缺點，要想提高效率，降低成本并進行快速繁殖，今后的研究重點應該是簡化繁殖過程，盡量避免誘導、繼代、育苗和生根4個階段用不同的培養基，探討能減少變異又能提高增殖系數，且再生植株生長健壯的大花蕙蘭組織培養方法。
發明內容
本發明所要解決的技術問題在于提供一種利用根誘導原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法。本發明通過采用改良后含有特殊成分(6-BA、PIC和水解酪蛋白)的MS培養基進行原球莖的誘導，針對大花蕙蘭根外植體，采用特定培養方法，使大花蕙蘭根誘導原球莖，誘導率達100%，培養45天后每個根外植體原球莖數達50個，原球莖成活率95%，植株生長健壯，可直接生根。
所述的利用根誘導原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法，包括以下步驟I)選取大花蕙蘭無菌苗的根，接種于培養基中，進行暗培養，培養室溫度為25±2°C。2)將暗培養獲得的原球莖轉到光下進行培養，每天10-16小時光照，溫度為25±2°C。 3)原球莖變綠，轉接到上述不含特殊成分的培養基中，逐漸發育成正常植株，同時生根。4)室溫，打開瓶蓋煉苗，I周后種植于溫室穴盤中。所述的培養基組分用量為MS基本培養基IL ;蔗糖30000mg/L ;瓊脂粉5000mg/L ；以及由6-BA 0. 5mg/L, PIC 0. 5mg/L和水解酪蛋白500mg/L組成的特殊成分。其中，所述的MS基本培養基配方如下表I所示，mg/L表示每升MS培養基中含各成分的暈克數。表I
權利要求
1.ー種利用根誘導原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法，其特征在干， 1)選取大花蕙蘭無菌苗的根，接種于培養基中，進行暗培養，培養室溫度為25±2°C； 2)將暗培養獲得的原球莖轉到光下進行培養，每天10-16小時光照，溫度為25±2°C； 3)原球莖變綠，轉接到步驟I)不含特殊成分的培養基中，逐漸發育成正常植株，同時生根； 4)室溫，打開瓶蓋煉苗，I周后種植于溫室穴盤中。
2.根據權利要求I所述的方法，其特征在于，所述的培養基組分用量為MS基本培養基1L，蔗糖30000mg/L，瓊脂粉5000mg/L，以及由6-BAO. 5mg/L，PIC 0. 5mg/L和水解酪蛋白500mg/L組成的特殊成分。
全文摘要
本發明公開了一種利用根誘導原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法，采用改良后含有特殊成分(6-BA、PIC和水解酪蛋白)的MS培養基進行原球莖的誘導，針對大花蕙蘭根外植體，采用特定培養方法，使大花蕙蘭根誘導原球莖，誘導率達100%，培養45天后每段根外植體原球莖數達50個，原球莖成活率95%，植株生長健壯，直接生根。
文檔編號A01H4/00GK102754599SQ20121024481
公開日2012年10月31日 申請日期2012年7月16日 優先權日2012年7月16日
發明者周音, 張建軍, 殷麗青, 謝紀紅 申請人:上海市農業科學院