專利名稱：一種用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的制備及使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種生物益生菌制劑，具體地說是ー種用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的制備及使用方法，屬于生物益生菌制劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
食品動物生產(chǎn)中經(jīng)常用抗生素來治療和預(yù)防傳染性疾病或促進(jìn)生長。這些抗生素許多與人類使用的藥物相同或相近，長期食用含有抗生素的“有抗食品”，輕可致人出現(xiàn)過敏性癥狀，重則可誘發(fā)各類毒副作用，并可能誘導(dǎo)人類耐藥性增強(qiáng)。耐藥性產(chǎn)生主要是生產(chǎn) 養(yǎng)殖中抗生素的使用以及動物、動物生產(chǎn)和環(huán)境中細(xì)菌耐藥基因的次生轉(zhuǎn)移。在動物生產(chǎn)中，人畜共患的沙門氏菌、彎曲桿菌、耶爾森氏菌、ー些如大腸桿菌菌株(血清型0157 H7)以及共生菌(如腸球菌)，值得人們的特別關(guān)注。因為這些細(xì)菌是最有可能通過食物鏈轉(zhuǎn)移到人體。細(xì)菌對抗生素的耐藥性是生物體在抗菌藥物存在下進(jìn)化選擇的反應(yīng)。尋找ー種替代抗生素的益生菌菌劑成為當(dāng)務(wù)之急。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題，本發(fā)明設(shè)計了ー種用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的制備及使用方法，該生物益生菌制劑能夠替代養(yǎng)殖場中抗生素，而且能夠起到很好的抗菌抑菌效果，解決了抗生素濫用的問題，且成本低。本發(fā)明的技術(shù)方案為一種用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的制備方法，包括以下步驟(I)菌株培養(yǎng)將解淀粉芽孢桿菌在固體培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)進(jìn)行活化，然后取單菌落接種到液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；最后以I : 50的體積比例接種到用發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵
培養(yǎng)；所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為葡萄糖10g、玉米粉13g、大豆粉15g、蒸餾水1000ml，發(fā)酵溫度25-30°C，搖床轉(zhuǎn)速180rpm，發(fā)酵時間36小時；所述的固體培養(yǎng)基為LB固體培養(yǎng)基；所述的擴(kuò)大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基為LB液體培養(yǎng)基，溫度為30°C，搖床轉(zhuǎn)速為200rpmo(2)提取菌發(fā)酵完畢后，取發(fā)酵液用離心機(jī)4800rpm離心0. 5小時，收集上清液，加入鹽酸調(diào)節(jié)pH值至pH = 2,4°C下12000rpm離心0. 5小時,去上清液,加入pH = 7的甲醇，混勻、萃取，然后在4°C下離心，取上清液，用過濾膜偏氟こ烯膜過濾得到益生菌制劑。ー種上述用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的使用方法，包括以下步驟將上述生物益生菌制劑與養(yǎng)殖飼料混合，混合重量比例為I : 1000;每天用2次。本發(fā)明的優(yōu)點在于該生物益生菌制劑能夠替代養(yǎng)殖場中抗生素，而且能夠起到很好的抗菌抑菌效果，解決了抗生素濫用的問題，且使用成本低。
具體實施例方式以下對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進(jìn)行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實施例僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用干限定本發(fā)明。實施例I一種用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的制備方法，包括以下步驟(I)菌株培養(yǎng)將解淀粉芽孢桿菌在固體培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)進(jìn)行活化，然后取單菌落接種到液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；最后以I : 50的體積比例接種到用發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵
培養(yǎng)；所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為葡萄糖10g、玉米粉13g、大豆粉15g、蒸餾水1000ml，發(fā)酵溫度25-30°C，搖床轉(zhuǎn)速180rpm，發(fā)酵時間36小時；所述的固體培養(yǎng)基為LB固體培養(yǎng)基；所述的擴(kuò)大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基為LB液體培養(yǎng)基，溫度為30°C，搖床轉(zhuǎn)速為200rpmo(2)提取菌發(fā)酵完畢后，取發(fā)酵液用離心機(jī)4800rpm離心0.5小時，收集上清液，加入鹽酸調(diào)節(jié)pH值至pH = 2,4°C下12000rpm離心0. 5小時,去上清液,加入pH = 7的甲醇，混勻、萃取，然后在4°C下離心，取上清液，用過濾膜偏氟こ烯膜過濾得到益生菌制劑。上述用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的使用方法，包括以下步驟將上述生物益生菌制劑與養(yǎng)殖飼料混合，混合重量比例為I : 1000 ;每天用2次。本發(fā)明實施例采用的解淀粉芽孢桿菌為芽孢桿菌，由國家增產(chǎn)菌技術(shù)研究及推廣中心提供。除非另有說明，本發(fā)明中所采用的百分?jǐn)?shù)均為重量百分?jǐn)?shù)。最后應(yīng)說明的是以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)菌株培養(yǎng)將解淀粉芽孢桿菌在固體培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)進(jìn)行活化，然后取單菌落接種到液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；最后以I :50的體積比例接種到用發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng); (2)提取菌發(fā)酵完畢后，取發(fā)酵液用離心機(jī)4800rpm離心O.5小時，收集上清液，加入鹽酸調(diào)節(jié)pH值至pH = 2,4°C下12000rpm離心O. 5小時,去上清液,加入pH = 7的甲醇,混勻、萃取，然后在4°C下離心，取上清液，用過濾膜偏氟乙烯膜過濾得到益生菌制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為葡萄糖10g、玉米粉13g、大豆粉15g、蒸懼水1000ml,發(fā)酵溫度25_30°C,搖床轉(zhuǎn)速180rpm,發(fā)酵時間36小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述的固體培養(yǎng)基為LB固體培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述的擴(kuò)大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基為LB液體培養(yǎng)基，溫度為30°C，搖床轉(zhuǎn)速為200rpm。
5.一種權(quán)利要求I所述用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的使用方法，其特征在于將上述生物益生菌制劑與養(yǎng)殖飼料混合，混合重量比例為I : 1000;每天用2次。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于替代養(yǎng)殖場中抗生素的生物益生菌制劑的制備及使用方法，制備方法包括菌株培養(yǎng)和提取等步驟，使用方法為與養(yǎng)殖飼料混合，混合重量比例為1∶1000；每天用2次；本發(fā)明的優(yōu)點在于該生物益生菌制劑能夠替代養(yǎng)殖場中抗生素，而且能夠起到很好的抗菌抑菌效果，解決了抗生素濫用的問題，且成本低。
文檔編號A23K1/16GK102766659SQ20121025449
公開日2012年11月7日 申請日期2012年7月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月23日
發(fā)明者曾憲梅, 王婕, 王洪全, 馬振宇 申請人:湖北宏全生物科技有限公司