專利名稱：蛇足石杉孢子的破壁方法
技術領域：
本發明涉及植物孢子破壁技術，尤其是一種蛇足石杉孢子的破壁方法。
背景技術：
蛇足石杉(Huperzia serrata(Thunb. )Thev.)為蕨類石杉科石杉屬蛇足石杉。以其有效成分石杉堿甲為母核開發出的“希普林”被譽為目前抗老年癡呆的最好藥物。由于來源為野生千層塔，而石杉堿甲含量又極低，因而導致資源緊缺。研究表明，千層塔的繁殖尚有很大的困難。蛇足石杉孢子數量非常大，這是進行蛇足石杉植株繁殖的有利條件，可是，其孢子繁殖要求條件復雜，萌發時間很長，在技術上亟待突破。目前對蛇足石杉孢子繁殖的研究甚少。孢子外壁的主要成分為孢粉素，據報道，孢粉素是一種能抗高溫、高壓的高分子氧化聚臺物，系孢粉的“骨髂”，在孢子的自我保護中發揮重要作用。由于蛇足石杉孢子壁的特殊結構，其孢子壁對孢子的萌發有一定的阻礙作用。

發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種方便、快速、有效的蛇足石杉孢子的破壁方法，以高效利用現有資源快速繁殖蛇足石杉，為開發其醫藥用途所需原料來源提供充分保障。為解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案蛇足石杉孢子的破壁方法，取蛇足石杉孢子，采用3mm碳化鎢的珠子、2ml試樣管，在頻率20 30HZ條件下，球磨儀粉碎I 5min。蛇足石杉孢子為成熟孢子。成熟孢子先干燥并刺破孢子囊。刺破孢子囊的成熟孢子不去囊,在頻率20HZ條件下,球磨儀粉碎3 4min。不去囊時，將蛇足石杉孢子粉碎至孢子破裂程度達到70 80%。刺破孢子囊的成熟孢子去囊,在頻率30HZ條件下,球磨儀粉碎I 3min。去囊時，將蛇足石杉孢子粉碎至孢子破裂程度達到80 90%。球磨儀為德國萊馳的麗200球磨儀。蛇足石杉孢子的取樣量為lg，每個試樣管放I個珠子。為有效地對蛇足石杉孢子的外壁進行破壁，發明人研究了球磨儀的破壁方法，結果表明采用德國萊馳麗200球磨儀，針對去囊或不去囊的孢子,通過不同頻率和時間的組合，可快速有效地將孢子粉碎成微裂狀態。如此，克服孢子壁阻礙孢子萌發的技術問題，力口速孢子萌發，提高其萌發率。應用本發明，為解決蛇足石杉野生資源日益減少和自然繁殖率低的問題提供了有益的研究基礎，更為深入開發其醫藥價值提供了有力的種源保障。
具體實施例方式實施例I
取蛇足石杉成熟孢子I. 02g,先干燥并刺破孢子囊,帶囊孢子,采用3mm碳化鶴的珠子、2ml試樣管，每個試樣管放I個珠子，在頻率20HZ條件下，德國萊馳的MM200球磨儀粉碎 2min。顯微鏡下觀察孢子未破裂，仍飽滿完整。實施例2取蛇足石杉成熟孢子I. 03g,先干燥并刺破孢子囊,帶囊孢子,采用3mm碳化鶴的珠子、2ml試樣管，每個試樣管放I個珠子，在頻率20HZ條件下 ，德國萊馳的MM200球磨儀粉碎 3min。顯微鏡下觀察可見孢子達到微裂(微裂指孢子沿著裂縫處開裂)，孢子破裂程度達到70 75%。實施例3取蛇足石杉成熟孢子I. Olg,先干燥并刺破孢子囊,帶囊孢子,采用3mm碳化鶴的珠子、2ml試樣管，每個試樣管放I個珠子，在頻率20HZ條件下，德國萊馳的MM200球磨儀粉碎 4min。顯微鏡下觀察可見孢子達到微裂，孢子破裂程度達到75 80%。實施例4取蛇足石杉成熟孢子I. 03g,先干燥并刺破孢子囊,帶囊孢子，采用3_碳化鶴的珠子、2ml試樣管，每個試樣管放I個珠子，在頻率25HZ條件下，德國萊馳的MM200球磨儀粉碎 4min。顯微鏡下觀察，孢子多碎裂(孢子粉碎成碎片)，孢子破裂程度達到100%。實施例5取蛇足石杉成熟孢子I. Olg,先干燥并刺破孢子囊,去囊孢子,采用3mm碳化鶴的珠子、2ml試樣管，每個試樣管放I個珠子，在頻率20HZ條件下，德國萊馳的MM200球磨儀粉碎 3min。顯微鏡下觀察孢子未破裂，仍飽滿完整。實施例6取蛇足石杉成熟孢子I. 02g,先干燥并刺破孢子囊,去囊孢子，采用3_碳化鶴的珠子、2ml試樣管，每個試樣管放I個珠子，在頻率30HZ條件下，德國萊馳的MM200球磨儀粉碎 lmin。顯微鏡下觀察，孢子達到微裂，孢子破裂程度達到80 85%。實施例7取蛇足石杉成熟孢子I. OOg,先干燥并刺破孢子囊,去囊孢子，采用3_碳化鶴的珠子、2ml試樣管，每個試樣管放I個珠子，在頻率30HZ條件下，德國萊馳的MM200球磨儀粉碎 3min。顯微鏡下觀察，孢子多碎裂，孢子破裂程度達到85 90%。為便于比較，發明人采用傳統的直播法、組培法對未破壁的蛇足石杉孢子以及本發明處理后破壁的蛇足石杉孢子進行萌發比較試驗。以60粒孢子重復3次試驗，以一年觀察時間為限，結果如下。表I蛇足石杉孢子萌發比較試驗
權利要求
1.一種蛇足石杉孢子的破壁方法，其特征在于取蛇足石杉孢子，采用3_碳化鎢的珠子、2ml試樣管，在頻率20 30HZ條件下，球磨儀粉碎I 5min。
2.根據權利要求I所述的蛇足石杉孢子的破壁方法，其特征在于所述蛇足石杉孢子為成熟孢子。
3.根據權利要求2所述的蛇足石杉孢子的破壁方法，其特征在于所述成熟孢子先干燥并刺破孢子囊。
4.根據權利要求3所述的蛇足石杉孢子的破壁方法，其特征在于所述刺破孢子囊的成熟孢子不去囊，在頻率20HZ條件下,球磨儀粉碎3 4min。
5.根據權利要求4所述的蛇足石杉孢子的破壁方法，其特征在于將蛇足石杉孢子粉碎至孢子破裂程度達到70 80%。
6.根據權利要求3所述的蛇足石杉孢子的破壁方法，其特征在于所述刺破孢子囊的成熟孢子去囊，在頻率30HZ條件下,球磨儀粉碎I 3min。
7.根據權利要求6所述的蛇足石杉孢子的破壁方法，其特征在于將蛇足石杉孢子粉碎至孢子破裂程度達到80 90%。
8.根據權利要求I至7任一所述的蛇足石杉孢子的破壁方法，其特征在于所述球磨儀為德國萊馳的麗200球磨儀。
9.根據權利要求8所述的蛇足石杉孢子的破壁方法，其特征在于所述蛇足石杉孢子的取樣量為lg，每個試樣管放I個珠子。
全文摘要
本發明公開了一種蛇足石杉孢子的破壁方法，該法采用球磨儀，針對去囊或不去囊的孢子，通過不同頻率和時間的組合，可快速有效地將孢子粉碎成微裂狀態，克服孢子壁阻礙孢子萌發的技術難題，加速孢子萌發，提高其萌發率。應用本發明，為解決蛇足石杉野生資源日益減少和自然繁殖率低的問題提供了有益的研究基礎，更為深入開發其醫藥價值提供了有力的種源保障。
文檔編號B02C17/14GK102814214SQ20121029553
公開日2012年12月12日 申請日期2012年8月20日 優先權日2012年8月20日
發明者閆志剛, 馬小軍, 涂冬萍, 馮世鑫, 袁經權 申請人:廣西壯族自治區藥用植物園