專利名稱：一種建立2型糖尿病動物模型的方法及其在篩選降血糖藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種制備2型糖尿病動物模型的方法及其在糖尿病藥物篩選中的應用，具體涉及ー種用于分析2型糖尿病發病機理的動物模型制備方法及其在進行2型糖尿病相關藥物篩選的動物模型中的應用。
背景技術：
糖尿病，中醫稱之為消渴病，是由于體內胰島素絕對或相對分泌不足而引起的以糖、脂肪、蛋白質等代謝紊亂為主的ー種內分泌疾病，可累及全身各器官和組織，導致糖尿病并發癥，是嚴重危害社會和人類健康的慢性疾病之一。
近年來糖尿病發病率呈上升趨勢，據世界衛生組織統計，1998年糖尿病發病數達
I.35億，2000年達到I. 6億，到2004年達到2. 4億。據最近的流行病學調查顯示，我國的糖尿病發病率已由15年前的O. 67%上升到近年來的3. 2%，其中非胰島素依賴型的2型糖尿病患者占總數的90%以上?，F有的降血糖研究包括分子水平，細胞水平，活體水平；其中以活體研究意義最大?；铙w動物模型主要包括自發型糖尿病動物模型，比如ob/ob小鼠；化學藥物引起的糖尿病動物模型，比如鏈脲佐菌素引起的小鼠或大鼠糖尿病模型，這些動物模型都是模擬人類糖尿病的特征。另外，還有高脂高糖聯合化學藥物建立糖尿病動物模型。有研究表明ニ型糖尿病與飲食和飲酒有重要的關聯，上述模型中不能反應出飲食和酒精對2型糖尿病致病的影響。曾有報道做過高脂高糖和酒精聯合建造2型糖尿病動物模型，由于其高脂高糖配方存在缺陷，缺少膽酸鈉(促進鼠類動物膽固醇和脂肪吸收)，導致動物模型中部分指標無統計學意義，建模未成功。
發明內容
本發明的目的是提供一種構建2型糖尿病動物模型的方法，該方法模擬人類2型糖尿病的發病過程，所制備的動物模型出現高空腹血糖、高胰島素血癥、高血脂、糖耐量減低等2型糖尿病的典型特征，適合于2型糖尿病激勵研究和進行大量的藥物篩選。本發明方法的特征在于高脂高糖飼料喂養動物一段時間，同時給動物灌服一定濃度酒精，使動物血糖升高、血脂升高，發生胰島素血癥及胰島素抵抗。本發明方法包括以下步驟
通過自由攝食，用高脂高糖飼料持續喂養模型動物2-10周，同時灌胃體積分數10%-60%的食用酒精1-20毫升/千克。本發明方法中，高脂高糖飼料由基礎飼料、蔗糖、油脂、膽固醇、膽酸鈉、蛋黃粉組成。其中，油脂可以為豬油，或者牛油。高脂高糖飼料的比例為基礎飼料50%-70% ;鹿糖10%_20% ;油脂10%_20% ;膽固醇1%-5% ;膽酸鈉 O. 5%-2% ;蛋黃粉 5%-10%。模型動物包括野生型小鼠，如C57BL/6J小鼠，BALB/c小鼠，ICR小鼠，KM小鼠；野生型大鼠，如Wistar大鼠，SD大鼠等。模型動物在喂養4至20周后，白天空腹，即早上6 00開始斷食不斷水，晚上18 00處死取血，自動生化分析儀檢測血液中各項指標,如血糖,胰島素,血脂,膽固醇,低密度脂蛋白，高密度脂蛋白。
圖I為大鼠OGTT試驗結果，·表示實驗組數據，▲表示正常組實驗數據，*表示與正常組對比，P〈0. 05。
具體實施例方式I、小鼠試驗
C57BL小鼠，30只，隨機分為兩組，各15只。正常組，喂養正常飼料，自由進食飲水；試驗組，喂養聞脂聞糖詞料，自由飲水，甸天灌胃O. 2 ml 30%食用酒精。高脂高糖飼料的比例為基礎飼料60% ;蔗糖15% ;油脂15% ;膽固醇3% ;膽酸鈉
0.5% ;蛋黃粉 6. 5%ο飼養8周后，白天空腹，即早上6:00空腹，晚上18點斷頭取血，分離血清，自動生化分析儀檢測血液中各項指標。統計學軟件分析數據顯著性。結果如表I所示，與正常組對比，試驗組小鼠的空腹血糖、胰島素、膽固醇、甘油三酷、低密度脂蛋白顯著增加，高密度脂蛋白顯著降低，與人類2型糖尿病患者的血液指標趨勢一致，建模成功。
權利要求
1.ー種2型糖尿病動物模型的制備方法及其在篩選降血糖藥物中的應用，其特征在于喂養高脂高糖飼料，同時灌胃食用酒精，得到2型糖尿病動物模型，其中高脂高糖飼料的配方為基礎飼料50%-70%，蔗糖10%-20%，油脂10%-20%，膽固醇1%_5%，膽酸鈉O. 5%_2%，蛋黃粉5%-10% ;灌胃的食用酒精濃度為體積分數10%至40%，灌胃體積為O. I毫升至2毫升。
2.根據權利要求I所述的2型糖尿病動物模型的制備方法，其特征在于飼養動物周期為4至20周。
3.根據權利要求I所述的2型糖尿病動物模型的制備方法，其特征在于使用的動物包括C57BL小鼠，BALB/c小鼠，ICR小鼠，KM小鼠，Wistar大鼠，SD大鼠。
4.根據權利要求I所述的2型糖尿病動物模型的制備方法，其特征在于模型動物在喂養一段時間后，取血前白天空腹12小時，即早上6 :00開始斷食不斷水，晚上18 00處死取血，檢測糖尿病相關血液指標。
全文摘要
本發明提供一種構建2型糖尿病動物模型的方法，高脂高糖飼料喂養動物一段時間，同時給動物灌服一定濃度酒精。該方法模擬人類2型糖尿病的發病過程，所制備的動物模型出現高空腹血糖、高胰島素血癥、高血脂、糖耐量減低等2型糖尿病的典型特征，適合于2型糖尿病機理研究和進行大量的藥物篩選。
文檔編號A01K67/02GK102812921SQ201210321809
公開日2012年12月12日 申請日期2012年9月4日 優先權日2012年9月4日
發明者孫成新, 范玉瑩, 李新志 申請人:東北師范大學