專利名稱：一種可實(shí)現(xiàn)高原栽培的野生松杉靈芝的人工栽培方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種靈芝的人工栽培方法，尤其涉及一種可實(shí)現(xiàn)高原栽培的野生松杉靈芝的人工栽培方法。
背景技術(shù)：
松杉靈芝(Ganoderma tsugae Murr.),別名鐵杉靈芝、長(zhǎng)白山靈芝，生長(zhǎng)于落葉松的樹干基部，主要分布于黑龍江、吉林、甘肅等地，其收錄在我國中藥藥典中，與赤芝(Ganoderma lucidum)、紫芝(Ganoderma sinense Zhao, Xu et Zhang)一起廣泛應(yīng)用于抗腫瘤藥品及保健食品中。研究發(fā)現(xiàn)，松杉靈芝子實(shí)體的水提取液對(duì)小白鼠肉瘤180、小白鼠腺癌755有抑制作用，其子實(shí)體的氫氧化鈉提取部分對(duì)小白鼠肉瘤180的抑制率為77. 8%。松杉靈芝。 目前，關(guān)于靈芝栽培的發(fā)明，主要是涉及赤芝的人工栽培方法的研究，如靈芝栽培法(200910041707. 6)、一種野外靈芝栽培方法(200510044196. 5)、一種能大量減少木材消耗的靈芝栽培方法(200810219441. 5)、野生靈芝栽培用母種載體培養(yǎng)基及栽培方法(200910067506. 3)、一種靈芝栽培箱(200620058597. 6)等，基本都是關(guān)于赤芝的栽培方法或栽培赤芝所使用的培養(yǎng)基、栽培箱等。目前，還沒有野生松杉靈芝的栽培方法的發(fā)明，關(guān)于能在高原實(shí)現(xiàn)野生松杉靈芝的栽培方法更是沒有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種可實(shí)現(xiàn)高原栽培的野生松杉靈芝的人工栽培方法。一種可實(shí)現(xiàn)高原栽培的野生松杉靈芝的人工栽培方法，包括以下步驟
(1)制作母種采集野生松杉靈芝組織分離的菌種，將所述菌種無菌接至分離母種培養(yǎng)基中，置于25°c培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，待菌絲長(zhǎng)滿斜面后轉(zhuǎn)接至綜合PDA斜面，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿斜面即得生產(chǎn)母種，其中所述分離母種培養(yǎng)基的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為麥芽汁15%、瓊脂2%、青R木屑煮出液10% ；
(2)制作原種將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種，其中所述原種料的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為高粱75-79%、小米16-20%、CaC03l-2%、含水量55_60%，將所述將原種料裝入菌種袋中，制得原種袋；
(3)制作生產(chǎn)種將原種無菌接入生產(chǎn)種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得生產(chǎn)種，其中所述生產(chǎn)種料的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為棉籽殼87-89%、麩皮10-12%、CaC03l-2%、含水量55_60%，或棉籽殼48_52%、木屑25_30%、麩皮18_20%、碳酸鈣1-2%、硫酸鈣1-2%、含水量55-60%，將所述將生產(chǎn)種料裝入菌種袋中，制得生產(chǎn)種袋；
(4)接種栽培將生產(chǎn)種無菌接入栽培料袋中，在25°C±1°C、空氣相對(duì)濕度60-70%的培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)至菌絲完成后熟期，其中所述栽培料的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為木屑75-78 %、麩皮20-22%、CaC03l_2%、含水量60-65%，將所述將栽培料裝入菌種袋中，制得栽培袋；(5)出芝管理調(diào)節(jié)溫度為27 °C、濕度85-90%、光照100_2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上至長(zhǎng)出原基，調(diào)節(jié)溫度為26-28 °C、空氣相對(duì)濕度85_90%、光照約200-3001ux,不通氣，繼續(xù)保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，光照300-500lux，通氣，保持CO2含量小于1200ppm,至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘。其中，所述分離母種培養(yǎng)基的制作過程為，以水煮開野生松杉靈芝生長(zhǎng)的青岡樹屑8-12分鐘，按比例加入麥芽汁及瓊脂，分裝試管，高溫高壓濕熱滅菌。其中，所述綜合PDA的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為馬鈴薯20%、葡萄糖2%、瓊脂2%、磷酸二氫鉀O. 3%、硫酸鎂O. 15%及微量維生素BI。優(yōu)選的，所述原種袋為13 cmX25cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋，折合每袋裝干料
250-300go優(yōu)選的，所述生產(chǎn)種袋為15cmX30cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋，折合每袋裝干料 350-400。優(yōu)選的，所述栽培袋為17cmX35cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋，折合每袋裝干料450_500g。優(yōu)選的，所述原種袋、生產(chǎn)種袋、栽培袋的制作方法是分別將原種料、生產(chǎn)種料、栽培料裝入相應(yīng)的菌種袋，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子。優(yōu)選的，所述步驟(4)中后熟培養(yǎng)至菌絲完成后熟期后，切下套環(huán)及老種塊。優(yōu)選的，所述步驟(5)中長(zhǎng)出原基后8d第一次修芝，16d第二次修芝。本發(fā)明中所栽培的松杉靈芝，具有以下的形態(tài)特征
菌蓋15-20X7-10cm，近柄處厚2_3cm，腎形或扇形，基部常連結(jié)在一起；蓋表面近紅色至紅褐色，邊緣新生部分呈白色至淡黃色，成熟個(gè)體菌蓋近柄處顏色由黃漸變成紅褐、深紅褐至略紫或暗紅褐色，漆樣光澤由微至強(qiáng)，光滑，成熟個(gè)體的邊緣通常有同心環(huán)帶的褶皺，軟肉質(zhì)但表面覆蓋一層薄硬皮，邊緣鈍。菌孔面白色至奶白色，傷變淡褐色；5-6個(gè)孔/mm,菌孔近圓形；菌管長(zhǎng)4_6mm,不分層，赭黃色至淺灰褐色。近柄處或基部菌肉厚約2. 2cm,干時(shí)呈白色至近奶白色，軟纖維質(zhì)或軟木質(zhì)。菌柄長(zhǎng)5-8cm，粗3. 5-5. 5cm,圓柱形或略扁，呈微紅至紫褐色的革質(zhì)，菌柄的菌肉組織白色，纖維質(zhì)至木質(zhì)。菌絲系統(tǒng)三型生殖菌絲直徑4. 0-5. OMffl，無色，薄壁，有鎖狀聯(lián)合結(jié)構(gòu)；骨架菌絲粗2. 5-5. 無色，厚壁，不分枝或末端有少量分枝；聯(lián)絡(luò)菌絲無色，厚壁，多分枝，約
I.0~2. OMm 寬ο擔(dān)孢子大小10-13X7_9Mm，卵形或?qū)挋E圓形，通常有一端較尖細(xì)，頂端平截，內(nèi)壁有明顯小刺，褐色。皮殼構(gòu)造呈直立的柵欄狀，褐色，組成菌絲棍棒狀，厚壁，由骨架菌絲形成的，皮層末端細(xì)胞 40-70 X 8-15. O μ m。本發(fā)明的方法可實(shí)現(xiàn)野生松杉靈芝在海拔3000米以上的高原進(jìn)行人工栽培，使得栽培地點(diǎn)不受限制，應(yīng)用更為廣泛。由于高原氧氣稀薄，光照較強(qiáng)，早晚溫差較大，因此，使用本發(fā)明在高原進(jìn)行人工栽培過程中，應(yīng)注意通風(fēng)及遮蓋，防止溫度過低。
本發(fā)明的人工栽培方法的總體生物轉(zhuǎn)化率可達(dá)到55-85%，得到的松杉靈芝口感口感較苦，具有赤芝的味道，具有提高免疫力，抗癌等作用，其人工栽培可滿足大范圍需要。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明。實(shí)施例I :使用本發(fā)明進(jìn)行野生松杉靈芝的人工栽培
O以水煮開野生松杉靈芝生長(zhǎng)的青R樹屑10分鐘，按麥芽汁15%、瓊脂2%、青R木屑煮出液10%的比例加入麥芽汁及瓊脂，分裝試管，O. IlMPa大氣壓、121 °C高溫高壓濕熱滅菌30min ；
2)按質(zhì)量百分比計(jì)為馬鈴薯20%、葡萄糖2%、瓊脂2%、磷酸二氫鉀O.3%、硫酸鎂O. 15%及微量維生素BI的原料組成常規(guī)制作綜合PDA斜面，O. IlMPa大氣壓、121°C高溫高壓濕熱 滅菌30min ；
3)按質(zhì)量百分比計(jì)為高粱78%、小米20%、CaC032%的原料組成，含水量60%，制作原種料，將原種料裝入13 cmX25cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得原種袋，折合每原種袋裝干料300g ；
4)按質(zhì)量百分比計(jì)為棉籽殼89%、麩皮10%、CaC03l%的原料組成，含水量55%，制作生產(chǎn)種料，將生產(chǎn)種料裝入15cmX30cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得生產(chǎn)種袋，折合每生產(chǎn)種袋裝干料350g ；
5)按質(zhì)量百分比計(jì)為木屑78%、麩皮20%、CaC032%的原料組成，含水量60%，制作栽培料，將栽培料裝入17cmX35cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得栽培袋，折合每袋裝干料500g ；
6)制作母種采集野生松杉靈芝組織分離的菌種，將所述菌種無菌接至分離母種培養(yǎng)基中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，待菌絲長(zhǎng)滿斜面后轉(zhuǎn)接至綜合PDA斜面，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿斜面即得生產(chǎn)母種；
7)制作原種將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，接種時(shí)確保母種料塊埋入原種料中，然后置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種；
8)制作生產(chǎn)種將原種無菌接入生產(chǎn)種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得生產(chǎn)種；
9)接種栽培將生產(chǎn)種無菌接入栽培料袋中，在25°C土 1°C、空氣相對(duì)濕度60-70%的培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)15d至菌絲完成后熟期，切下套環(huán)及老種塊；
10)出芝管理調(diào)節(jié)溫度為27°C、濕度85-90%、光照100_2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上5d至長(zhǎng)出原基，調(diào)節(jié)溫度為26-28 °C、空氣相對(duì)濕度85_90%、光照約200-3001ux,不通氣，繼續(xù)保持CO2含量在2000ppm以上，長(zhǎng)出原基后8d第一次修芝，16d第二次修芝，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，光照300-5001ux，通氣，保持CO2含量小于1200ppm，至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘，每個(gè)菇袋每潮出芝30-40克。
實(shí)施例2 :使用本發(fā)明進(jìn)行野生松杉靈芝的人工栽培
O以水煮開野生松杉靈芝生長(zhǎng)的青R樹屑12分鐘，按麥芽汁15%、瓊脂2%、青R木屑煮出液10%的比例加入麥芽汁及瓊脂，分裝試管，O. IlMPa大氣壓、121 °C高溫高壓濕熱滅菌30min ；
2)按質(zhì)量百分比計(jì)為馬鈴薯20%、葡萄糖2%、瓊脂2%、磷酸二氫鉀O.3%、硫酸鎂O. 15%及微量維生素BI的原料組成常規(guī)制作綜合PDA斜面，O. IlMPa大氣壓、121°C高溫高壓濕熱滅菌30min ；
3)按質(zhì)量百分比計(jì)為高粱75%、小米23%、CaC032%、含水量55%的原料組成制作原種料，將原種料裝入13 cmX25cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得原種袋，折合每原種袋裝干料250g ；
4)按質(zhì)量百分比計(jì)為棉籽殼48%、木屑30%、麩皮20%、碳酸鈣1%、硫酸鈣1%的原料組成，含水量60%，制作生產(chǎn)種料，將生產(chǎn)種料裝入15cmX30cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得生產(chǎn)種袋，折合每生產(chǎn)種袋裝干料400g ；
5)按質(zhì)量百分比計(jì)為木屑75%、麩皮23%、CaC032%的原料組成，含水量65%，制作栽培料，將栽培料裝入17cmX35cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得栽培袋，折合每袋裝干料450g ；
6)制作母種采集野生松杉靈芝組織分離的菌種，將所述菌種無菌接至分離母種培養(yǎng)基中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，待菌絲長(zhǎng)滿斜面后轉(zhuǎn)接至綜合PDA斜面，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿斜面即得生產(chǎn)母種；
7)制作原種將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，接種時(shí)確保母種料塊埋入原種料中，然后置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種；
8)制作生產(chǎn)種將原種無菌接入生產(chǎn)種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得生產(chǎn)種；
9)接種栽培將生產(chǎn)種無菌接入栽培料袋中，在25°C土 1°C、空氣相對(duì)濕度60-70%的培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)15d至菌絲完成后熟期，切下套環(huán)及老種塊；
10)出芝管理調(diào)節(jié)溫度為27°C、濕度85-90%、光照100_2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上5d至長(zhǎng)出原基，調(diào)節(jié)溫度為26-28 °C、空氣相對(duì)濕度85_90%、光照約200-3001ux,不通氣，繼續(xù)保持CO2含量在2000ppm以上，長(zhǎng)出原基后8d第一次修芝，16d第二次修芝，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，光照300-5001ux，通氣，保持CO2含量小于1200ppm，至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘，每個(gè)菇袋每潮出芝30-40克。實(shí)施例3 :使用本發(fā)明進(jìn)行野生松杉靈芝的人工栽培
O以水煮開野生松杉靈芝生長(zhǎng)的青R樹屑8分鐘，按麥芽汁15%、瓊脂2%、青R木屑煮出液10%的比例加入麥芽汁及瓊脂，分裝試管，O. IlMPa大氣壓、121 °C高溫高壓濕熱滅菌30min ；
2)按質(zhì)量百分比計(jì)為馬鈴薯20%、葡萄糖2%、瓊脂2%、磷酸二氫鉀O. 3%、硫酸鎂O. 15%及微量維生素BI的原料組成常規(guī)制作綜合PDA斜面，O. IlMPa大氣壓、121°C高溫高壓濕熱滅菌30min ；
3)按質(zhì)量百分比計(jì)為高粱79%、小米20%、CaC03l%、含水量58%的原料組成制作原種料，將原種料裝入13 cmX25cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得原種袋，折合每原種袋裝干料280g ；
4)按質(zhì)量百分比計(jì)為棉籽殼52%、木屑25%、麩皮19%、碳酸鈣2%、硫酸鈣2%的原料組成，含水量58%，制作生產(chǎn)種料，將生產(chǎn)種料裝入15cmX30cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得生產(chǎn)種袋，折合每生產(chǎn)種袋裝干料390g ；
5)按質(zhì)量百分比計(jì)為木屑77%、麩皮22%、CaCO31%的原料組成，含水量62%，制作栽培料，將栽培料裝入17cmX35cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得栽培袋，折合每袋裝干料480g ； 6)制作母種采集野生松杉靈芝組織分離的菌種，將所述菌種無菌接至分離母種培養(yǎng)基中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，待菌絲長(zhǎng)滿斜面后轉(zhuǎn)接至綜合PDA斜面，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿斜面即得生產(chǎn)母種；
7)制作原種將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，接種時(shí)確保母種料塊埋入原種料中，然后置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種；
8)制作生產(chǎn)種將原種無菌接入生產(chǎn)種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得生產(chǎn)種；
9)接種栽培將生產(chǎn)種無菌接入栽培料袋中，在25°C±1°C、空氣相對(duì)濕度60-70%的培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)15d至菌絲完成后熟期，切下套環(huán)及老種塊；
10)出芝管理調(diào)節(jié)溫度為27°C、濕度85-90%、光照100_2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上5d至長(zhǎng)出原基，調(diào)節(jié)溫度為26-28 °C、空氣相對(duì)濕度85_90%、光照約200-3001ux,不通氣，繼續(xù)保持CO2含量在2000ppm以上，長(zhǎng)出原基后8d第一次修芝，16d第二次修芝，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，光照300-5001ux，通氣，保持CO2含量小于1200ppm，至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘，每個(gè)菇袋每潮出芝30-40克。實(shí)施例4 使用本發(fā)明進(jìn)行野生松杉靈芝的人工栽培
O以水煮開野生松杉靈芝生長(zhǎng)的青R樹屑11分鐘，按麥芽汁15%、瓊脂2%、青R木屑煮出液10%的比例加入麥芽汁及瓊脂，分裝試管，O. IlMPa大氣壓、121 °C高溫高壓濕熱滅菌30min ；
2)按質(zhì)量百分比計(jì)為馬鈴薯20%、葡萄糖2%、瓊脂2%、磷酸二氫鉀O.3%、硫酸鎂O. 15%及微量維生素BI的原料組成常規(guī)制作綜合PDA斜面，O. IlMPa大氣壓、121°C高溫高壓濕熱滅菌30min ；
3)按質(zhì)量百分比計(jì)為高粱77%、小米21%、CaC032%的原料組成，含水量56%，制作原種料，將原種料裝入13 cmX25cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得原種袋，折合每原種袋裝干料260g；
4)按質(zhì)量百分比計(jì)為棉籽殼87%、麩皮12%、CaC03l%的原料組成，含水量60%，制作生產(chǎn)種料，將生產(chǎn)種料裝入15cmX30cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得生產(chǎn)種袋，折合每生產(chǎn)種袋裝干料370g ；
5)按質(zhì)量百分比計(jì)為木屑77%、麩皮21%、CaC032%的原料組成，含水量60%，制作栽培料，將栽培料裝入17cmX35cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋中，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子，制得栽培袋，折合每袋裝干料460g ；
6)制作母種采集野生松杉靈芝組織分離的菌種，將所述菌種無菌接至分離母種培養(yǎng)基中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，待菌絲長(zhǎng)滿斜面后轉(zhuǎn)接至綜合PDA斜面，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿斜面即得生產(chǎn)母種；
7)制作原種將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，接種時(shí)確保母種料塊埋入原種料中，然后置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種； 8)制作生產(chǎn)種將原種無菌接入生產(chǎn)種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得生產(chǎn)種；
9)接種栽培將生產(chǎn)種無菌接入栽培料袋中，在25°C土 1°C、空氣相對(duì)濕度60-70%的培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)15d至菌絲完成后熟期，切下套環(huán)及老種塊；
10)出芝管理調(diào)節(jié)溫度為27°C、濕度85-90%、光照100_2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上5d至長(zhǎng)出原基，調(diào)節(jié)溫度為26-28 °C、空氣相對(duì)濕度85_90%、光照約200-3001ux,不通氣，繼續(xù)保持CO2含量在2000ppm以上，長(zhǎng)出原基后8d第一次修芝，16d第二次修芝，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，光照300-5001ux，通氣，保持CO2含量小于1200ppm，至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘，每個(gè)菇袋每潮出芝30-40克。
權(quán)利要求
1.一種可實(shí)現(xiàn)高原栽培的野生松杉靈芝的人工栽培方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)制作母種采集野生松杉靈芝組織分離的菌種，將所述菌種無菌接至分離母種培養(yǎng)基中，置于25°c培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，待菌絲長(zhǎng)滿斜面后轉(zhuǎn)接至綜合PDA斜面，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，直至菌絲長(zhǎng)滿斜面即得生產(chǎn)母種，其中所述分離母種培養(yǎng)基的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為麥芽汁15%、瓊脂2%、青R木屑煮出液10% ； (2)制作原種將生產(chǎn)母種無菌接入原種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得原種，其中所述原種料的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為高粱75-79%、小米20-23%、CaC03l-2%,含水量55_60%，將所述將原種料裝入菌種袋中，制得原種袋； (3)制作生產(chǎn)種將原種無菌接入生產(chǎn)種袋中，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫暗培養(yǎng)，至菌絲吃滿料后即得生產(chǎn)種，其中所述生產(chǎn)種料的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為棉籽殼87-89%、麩皮10-12%、CaC03l-2%或棉籽殼48-52%、木屑25-30%、麩皮18-20%、碳酸鈣1_2%、硫酸鈣1-2%，含水量55-60%，將所述將生產(chǎn)種料裝入菌種袋中，制得生產(chǎn)種袋； (4)接種栽培將生產(chǎn)種無菌接入栽培料袋中，在25°C±1°C、空氣相對(duì)濕度60-70%的培養(yǎng)室中避光培養(yǎng)，待栽培袋中的菌絲長(zhǎng)滿栽培料后，繼續(xù)遮光后熟培養(yǎng)至菌絲完成后熟期，其中所述栽培料的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為木屑75-78 %、麩皮20-23%、CaC03l_2%，含水量60-65%，將所述將栽培料裝入菌種袋中，制得栽培袋； (5)出芝管理調(diào)節(jié)溫度為27°C、濕度85-90%、光照100_2001ux，不通氣，保持CO2含量在2000ppm以上至長(zhǎng)出原基，調(diào)節(jié)溫度為26-28 °C、空氣相對(duì)濕度85_90%、光照約200-3001ux,不通氣，繼續(xù)保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸長(zhǎng)期結(jié)束并進(jìn)入菌蓋生長(zhǎng)期時(shí)，通氣，調(diào)整溫度為26-28°C，濕度85-95%，光照300-500lux，通氣，保持CO2含量小于1200ppm,至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種野生松杉靈芝的人工栽培方法，其特征在于，所述分離母種培養(yǎng)基的制作過程為，以水煮開野生松杉靈芝生長(zhǎng)的青R樹屑8-12分鐘，按比例加入麥芽汁及瓊脂，分裝試管，高溫高壓濕熱滅菌。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述一種野生松杉靈芝的人工栽培方法，其特征在于，所述綜合PDA的原料組成按質(zhì)量百分比計(jì)為馬鈴薯20%、葡萄糖2%、瓊脂2%、磷酸二氫鉀O. 3%、硫酸鎂O.15%及微量維生素BI。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述一種野生松杉靈芝的人工栽培方法，其特征在于，所述原種袋為13 cmX25cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋,折合每袋裝干料250-300g。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述一種野生松杉靈芝的人工栽培方法，其特征在于，所述生產(chǎn)種袋為15cmX30cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋,折合每袋裝干料350-400。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種野生松杉靈芝的人工栽培方法，其特征在于，所述栽培袋為17cmX35cm的耐高溫透明聚丙烯菌種袋,折合每袋裝干料450_500g。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述一種野生松杉靈芝的人工栽培方法，其特征在于，所述原種袋、生產(chǎn)種袋、栽培袋的制作方法是分別將原種料、生產(chǎn)種料、栽培料裝入相應(yīng)的菌種袋，用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，再在袋口套上塑料環(huán)，并扣上配套的蓋子。
8.根據(jù)權(quán)利要求I或7所述一種野生松杉靈芝的人工栽培方法，其特征在于，所述步驟(4)中后熟培養(yǎng)至囷絲完成后熟期后，切下套環(huán)及老種塊。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述一種野生松杉靈芝的人工栽培方法，其特征在于，所述步驟(5)中長(zhǎng)出原基后8d第一次修芝，16d第二次修芝。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種靈芝的人工栽培方法，尤其涉及一種可實(shí)現(xiàn)高原栽培的野生松杉靈芝的人工栽培方法。其包括以下步驟(1)制作母種；(2)制作原種；(3)制作生產(chǎn)種；(4)接種栽培；(5)出芝管理至菌蓋的白邊完全變黃時(shí)，采摘。本發(fā)明人工栽培方法的總體生物轉(zhuǎn)化率可達(dá)到55-85%，得到的松杉靈芝口感較苦，具有赤芝的味道，具有提高免疫力，抗癌等作用，其人工栽培可滿足大范圍需要。
文檔編號(hào)A01G1/04GK102870595SQ20121033650
公開日2013年1月16日 申請(qǐng)日期2012年9月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月13日
發(fā)明者胡惠萍, 旦真次仁, 楊小兵, 張一帆, 周振輝, 邵滿超, 陳多揚(yáng) 申請(qǐng)人:廣東省微生物研究所, 廣東粵微食用菌技術(shù)有限公司