專利名稱：紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖培養基的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種植物組培生根培養基，特別涉及紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖培養基。
背景技術：
獼猴桃是一種經濟價值較高的木質藤本植物，獼猴桃實肉厚汁多，酸甜適度，營養豐富，以其維生素C特高的營養價值而成為當前水果中之珍品，已經成為當今世界的新興栽培果樹。獼猴桃家族中的特色品種紅肉獼猴桃，果實子房鮮紅色，果肉黃綠色，果實中大，圓柱形，整齊度高，商品性能好，果皮綠褐包無毛，單果重92. 5克，最大150克。含糖量高，總糖13. 45%，總酸0. 49%，可溶性固形物19. 6% 24%，維生素C含量每100克135. 77毫克以上，具有極高的市場前景和開發利用價值。
獼猴桃屬雌雄異株，倍性復雜，雌雄株間花期不遇使種間雜交困難，育種周期長，且有不確定性，給育種工作帶來了難度，系統開展其組織培養研究具有重要的意義。通過嫁接繁殖優良苗木的速度有限，而利用種子繁殖的實生苗性狀不穩定，雌株不易獲得。隨著獼猴桃栽培的進一步興起和引種工作的進行，良種苗需要量急劇增加，而采用常規繁育方法周期長、成活率低，采用組織培養技術快速繁殖獼猴桃成為重要的良種繁育途徑。組織培養獲得的植株不僅品種性狀穩定，而且繁殖速度快，是現在普遍認同的良種繁育方法。中華獼猴桃、美味獼猴桃等許多品種都曾用作組織培養研究的材料進行品種推廣。組織培養是否成功，在很大程度上取決于對培養基的選擇。目前，植物組織培養普遍使用的培養基為MS培養基。其由大量元素(硝酸鉀、硝酸銨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和氯化鈣)、微量元素(碘化鉀、硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、鑰酸鈉、硫酸銅和氯化鈷)、鐵鹽(乙二胺四乙酸二鈉和硫酸亞鐵)、有機物(肌醇、甘氨酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇和煙酸)、激素(6-芐氨基嘌呤、萘乙酸和吲哚乙酸等)、蔗糖和瓊脂組成大量元素保證植株生長所需的礦質營養并加速愈傷組織的生長；微量元素、鐵鹽和有機物給予植株全面的營養保證，確保植株正常生長；激素的調控使植株在離體條件下快速健壯生長；蔗糖為植株生長提供必需的碳源并調節滲透壓；瓊脂對植株起支持和固定作用。紅肉獼猴桃組培工廠化育苗的技術問題還沒完全解決，采用MS培養基紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖培養時，常出現以下問題組培生根苗基部愈傷組織膨大，組培苗生長勢弱、葉片大、莖矮小、節間伸長生長慢、增殖系數低等現象等。

發明內容
有鑒于此，為克服現有技術的不足，本發明的目的在于對MS培養基進行改進，提供一種適合紅肉獼猴桃組培苗的培養基，更進一步地，本發明涉及一種適合紅肉獼猴桃組培苗連續繼代、快速、高效和/或穩定生長的增殖培養基。為達到此目的，本發明的紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖養基(ACT)，包括以下組分硝酸鐘 KNO31500-2400mg/L
硝酸銨 NH4NO31250-2050 mg/L
磷酸二氫鉀 KH2PO4300-440 mg/L
磷酸二氫納 NaH2PO4 . 2H20120-220 mg/L
硫酸鎂 MgSO4 . 7H20300-440 mg/L
硝酸釣 Ca (NO3) 2 . 4H20200-400 mg/L
石典化鐘 KI0. 63-1. 0 mg/L
硼酸 H3BO34-10 mg/L
硫酸錳 MnSO4 4H2018-26 mg/L
硫酸鋅 ZnSO4 . 7H206-10mg/L
鉬酸納 Na2MoO4 2H200. 15-0. 35 mg/L
硫酸銅 CuSO4 . 5H2O0. 015-0. 035 mg/L
氯化鈷 CoCl2. 6H200. 015-0. 035 mg/L
乙二胺四乙酸二鈉 Na2-EDTA . 2H2030-50mg/L
硫酸亞鐵 FeSO4 7H2020-40 mg/L
肌醇150-250 mg/L
甘氨酸1-3 mg/L鹽酸疏胺素VB10. 3-0. 7 mg/L
鹽酸吡哆醇VB60. 3-0. 7 mg/L
煙酸 VB5或 VPP0. 3-0. 7 mg/L
6-芐氨基嘌呤6-BA1-2 mg/L
吲咮乙酸 IBA0.1-0. 4 mg/L
庶糖1000G -50000mg/L
卡拉股2000 -8000mg/L本發明優選的培養基包括如下組分硝酸鉀 KNO31900 mg/L
硝酸銨 NH4NO31650 mg/L
磷酸二氫鉀 KH2PO4370 mg/L
磷酸二氫鈉 NaH2PO4 . 2H20170 mg/L
硫酸鎂 MgSO4 . 7H2O370 mg/L
硝酸鑰 Ca (NO3) 2 4H2O300 mg/L
碘化鉀 KI0. 83 mg/L硼酸 H3BO36. 2 mg/L
硫酸錳 MnSO4 . 4H2022. 3 mg/L
硫酸鋅 ZnSO4 . 7H208. 6 mg/L
相酸納 Na2MoO4 . 2H200. 25 mg/L
硫酸銅 CuSO4 5H2O0. 025 mg/L
氯化鈷 CoCl2. 6H200. 025 mg/L
乙二胺四乙酸二鈉 Na2-EDTA . 2H2037. 3 mg/L
硫酸亞鐵 FeSO4 7H2027. 8 mg/L
肌醇200 mg/L
甘氨酸2 mg/L鹽酸疏胺素VB10. 5 mg/L
鹽酸p比口多醇VB60. 5 mg/L
煙酸 VB5 或 VPP0. 5 mg/L
6-辛氣基票吟6-BAI. 5 mg/L
吲哚乙酸IBA0.3 mg/L
蔗糖30000 mg/L
卡拉膠6000 mg/L在本發明中，除非有特殊說明，當所述組分中含有結晶水時，所述的質量體積濃度是指帶有結晶水的質量體積濃度，所述的組分的中文名稱也是指帶有結晶水的組分名稱。
本發明的有益效果在于本發明的紅肉獼猴桃繼代增殖培養基，在MS培養基的基礎上，通過調整大量元素的種類和濃度和優化激素調控瓊脂濃度等，為紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖提供了均衡合理的營養需求，保證了其快速、高效、健壯生長，有效的促進了節間伸長，提高了增殖系數。


為了使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將結合附圖對本發明作進一步的詳細描述，其中圖I為以ACT培養基培養的紅肉獼猴桃組培苗照片。
具體實施例方式為了使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚，下面對本發明的優選實施例進行詳細的描述。 本發明以紅肉獼猴桃優良單株離體芽器官誘導培養擴繁而來的組培繼代苗為試驗材料，在MS培養基的基礎上，添加了 NaH2PO4 ·2Η20和Ca(NO3)2 ·4Η20，去掉了 CaC12 ·2Η20，調整了肌醇和鹽酸硫胺素的濃度，并優化激素調控和瓊脂濃度等。I、紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖基本培養基優化(I)材料與方法將紅肉獼猴桃優良單株離體芽器官誘導培養擴繁而來的組培繼代苗轉接到不同的培養基配方中進行增殖培養。增殖培養基分別以Β5、MS和ACT為基本培養基，均包含配比為6-ΒΑ1. 0mg/L+NAA0. 3mg/L的激素，培養溫度控制在25±1°C，光照時間12h/d，光照強度2000LuX-3000LuX。每個處理50個芽，25d后統計增殖后的苗高、總芽數、增殖系數、愈傷及芽苗的生長情況。(2)結果與分析植物的基本培養基是植物組培營養物質供給的基礎。由表3可知，試驗中所比較的3種基本培養基對紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖的影響明顯差異，其中以B5和MS為培養基的所有處理，繼代苗生勢弱于ACT的處理。以ACT為培養基的處理，在苗高、總芽數/株和增殖系數都優于B5和MS處理。綜合考慮，ACT培養基更適紅肉獼猴桃繼代增殖。表3不同激素濃度配比對灰氈毛忍冬‘渝蕾I號’芽苗繼代的影響
權利要求
1.紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖培養基，其特征在于包含以下濃度的組分硝酸鉀 KNO31500-2400mg/L硝酸銨 NH4NO31250-2050 mg/L磷酸二氫鉀 KH2PO4300-440 mg/L鱗酸二氫鈉 NaH2PO4 · 2H20120-220 mg/L硫酸鎂 MgSO4 . 7H20300-440 mg/L硝酸釣 Ca (NO3) 2 · 4H20200-400 mg/L破化鉀 KIO. 63-1. O mg/L硼酸 H3BO34-10 mg/L疏酸猛 MnSO4 . 4H2O18-26 mg/L硫酸鋅 ZnSO4 · 7H2O6-10mg/L鉬酸納 Na2MoO4 . 2H20O. 15-0. 35 mg/L硫酸銅 CuSO4 . 5H200. 015-0. 035 mg/L氯化鈷 CoCl2. 6H200. 015-0. 035 mg/L乙二胺四乙酸二鈉 Na2-EDTA · 2H2030-50mg/L硫酸亞鐵 FeSO4 · 7H2020-40 mg/L肌醇150-250 mg/L甘氨酸1-3 mg/L鹽酸疏胺素VB10. 3-0. 7 mg/L鹽酸吡哆醇VB6O. 3-0. 7 mg/L煙酸 VB5* VPPO. 3-0. 7 mg/L6-千氣基嗓吟6-BA1-2 mg/L吲咮乙酸 IBAO. 1-0. 4 mg/L蔗糖10000 -50000mg/L卡拉膠2000 -8000mg/L
2.根據權利要求I所述的紅肉獼猴桃組培苗增殖培養基，其特征在于所述NaH2PO4 · 2H20 的濃度為 170mg/L，Ca(NO3)2· 4H20 的濃度為 300mg/L，肌醇的濃度為 200mg/L,鹽酸硫胺素的濃度為O. 5mg/L, 6-BA濃度I. 5mg/L, IBA濃度O. 1-0. 3mg/L,優選為O. 3mg/L0
3.根據權利要求I所述的紅肉獼猴桃組培苗增殖培養基，其特征在于包含以下濃度的組分 硝酸鉀 KNO31900 mg/L 硝酸銨 NH4NO31650 mg/L 鱗酸二氫鉀 KH2PO4370 mg/L 鱗酸二氫鈉 NaH2PO4 . 2H20170 mg/L硫酸鎂 MgSO4 · 7H20370 mg/L 硝酸4弓 Ca (NO3) 2 · 4H20300 mg/L 碘化鉀 KIO. 83 mg/L 硼酸 H3BO36. 2 mg/L疏酸錳 MnSO4 · 4H2022. 3 mg/L硫酸鋅 ZnSO4 · 7H208. 6 mg/L 相酸鈉 Na2MoO4 . 2H200. 25 mg/L 硫酸銅 CuSO4 · 5H2O0. 025 mg/L氯化鈷 CoCl2. 6H200. 025 mg/L 乙二胺四乙酸二鈉Na廠EDTA . 2H2037. 3 mg/L 硫酸亞鐵 FeSO4 · 7H2027. 8 mg/L 肌醇200 mg/L 甘氨酸2 mg/L 鹽酸疏胺素VB10. 5 mg/L鹽酸p比哆醇VB6O. 5 mg/L 煙酸 VB5 或 VPPO. 5 mg/L6-芐氨基嘌呤6-BAI. 5 mg/L吲咮乙酸IBAO. 3 mg/L蔗糖30000 mg/L卡拉膠6000 mg/L
4.一種紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖方法，其特征在于以權利要求1-3任意一項所述的培養基為培養基。
5.根據權利要求4所述的增殖方法，其特征在于所述的組培苗以紅肉獼猴桃優良單株離體芽器官誘導培養擴繁而來的組培繼代苗進行增值培養。
全文摘要
本發明公開了一種紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖培養基，在MS培養基的基礎上，通過調整大量元素的種類和濃度和優化激素調控瓊脂濃度等，為紅肉獼猴桃組培苗繼代增殖提供了均衡合理的營養需求，保證了其快速、高效、健壯生長，有效的促進了節間伸長，提高了增殖系數。
文檔編號A01H4/00GK102823498SQ20121034962
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月20日 優先權日2012年9月20日
發明者唐建民, 劉奕清, 陳澤雄, 廖林正, 黃科, 黃登艷, 袁海英 申請人:重慶文理學院