專利名稱：絳紅褐鏈霉菌sp3菌株及其在紅豆杉土傳根病和紅豆杉促生上的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及微生物技術領域，尤其涉及的是ー種絳紅褐鏈霉菌SP3菌株及其在紅豆杉土傳根病和紅豆杉促生上的應用。
背景技術：
紅豆杉是第四紀冰川孑遺植物，被稱為植物王國里的“活化石”，因其資源稀少，被列為世界珍稀樹種加以保護。它是我國一級保護珍稀樹種，是集藥用、觀賞、緑化、特種優質用材為一體的珍貴樹種，其根、莖、葉可提取加工成全球緊俏的高新技術產品抗癌新藥——紫杉醇。其體內提取的紫杉醇是目前世界上最好的抗癌藥物之一，在資源植物中具有較突出的地位。由于天然紅豆杉資源極其有限，且為國家保護的珍稀樹種，所以人工種植紅豆杉成為提取紫杉醇的主要來源。此外，紅豆杉的樹形美麗，果實成熟后紅綠相映的顏色搭配令人陶酔，廣泛應用于水土保持及園藝觀賞林。房前屋后、道路兩旁也適宜種植，是改善生態環境和建設秀美山川的優良樹種。紅豆杉在園林綠化、室內盆景方面也有十分廣闊的發展前景。紅豆杉在生長過程中易發生根腐病，植株最直觀的表現就是根莖腐爛。在南方紅豆杉上，此病在植株根、莖上都有發生，屬于軟腐中的根腐和莖腐。地上部份是慢慢失水黃化枯死而不倒伏，也稱為立枯。一般表現為霉狀物，但在病部很難發現霉狀物。主根病斑是水潰狀小斑點，表面軟腐；側根發病后褐變而腐爛。紅豆杉根腐病發生后,植物生長緩慢，易死亡，有關這方面研究都還尚少。因此，對于紅豆杉根腐病的防治和促生方法也還處于發展探索當中，一般以化學農藥、化學肥料為主，但由于長時期施用化學農藥(肥料)易污染環境，破壞生態。

發明內容
本發明的絳紅褐鏈霉菌SP3菌株于2009年7月10日采用采用平板稀釋法分離于四川洪雅縣紅豆杉根際經鑒定為絳紅褐鏈霉菌，經抗菌譜研究，該菌對紅豆杉根腐病菌(Pythium sp.)抑菌率達到100%，已經于2012年7月19日保藏于中國科學院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址位于北京市朝陽區北辰西路I號院3號，保藏編號為CGMCC NO. 6383，分類命名為絳紅褐鏈霉菌Sti^ptomycespurpeofuscuso本發明篩選的生防菌絳紅褐鏈霉菌SP3新菌株具有防病、促生雙重功能，兼有生物防治和生物肥料特點，對土傳病害有特效，不僅能避免化學藥物(農藥、化肥)所造成的污染環境的嚴重后果，而且具有可持續、成本低的特點。
具體實施例方式以下結合具體實施例，對本發明進行詳細說明。
實施例I絳紅褐鏈霉菌SP3液體制劑的發酵①一級 斜面種子常規方法制作改良高氏一號斜面培養基(KNO3Ig, KH2PO4O. 5g，MgSO4. 7H20 O. 5g，NaClO. 5g，Fe2 (S04) 3. 7H20 0. Olg,可溶性淀粉 20g,瓊脂 17g，水1000ml)，接種SP3后在26-28°C下培養48小時制成一級斜面種子。②二級液體種子改良高氏一號培養液[KNO3Ig,KH2PO4O. 5g，MgSO4. 7H20 O. 5g，NaClO. 5g，Fe2(S04)3. 7H20 0. Olg，可溶性淀粉20g，紅豆杉根浸潰液1000ml (制備方法10克紅S·杉根在1000暈升水中煮沸30分鐘,保持水量1000暈升,過濾去除根殘洛為紅S·杉根浸潰液)，PH7. 2 7. 4]經高壓滅菌后，按IOOmL液體盛于300mL三角瓶比例(通氧控制)裝瓶，在無菌狀態接種SP3斜面種子，每瓶接種2支斜面種子，溫度26-28 V，初始pH值6. O，120r/min振蕩培養36h，制成SP3 二級液體種子。③液體發酵培養液(葡萄糖5g、甘油5g、黃豆餅粉3g、蛋白胨5g、NaCl 2. 5g、CaCO2 2g、蒸餾水IOOOmL)經高壓滅菌后，按IOOmL液體盛于300mL三角瓶比例(通氧控制)裝瓶，在無菌狀態接種上述SP3 二級液體種子，108cfu/mL孢子懸浮液接種量為1%(體積比)， 溫度26-28°C，初始pH值7. 0，140r/min振蕩培養96h，制成SP3液體制劑。平板法測定SP3對紅豆杉根腐病菌(Pythium sp.)抑菌率達到100%以上。(2)制劑保存瓶裝制劑常溫保存半年(1%甘油)或低溫(4度)I年半不影響防治和促生效果。(3)灌根方式施用①預防處理未發病紅豆杉用上述液體制劑200-600倍稀釋度(體積比)沿根系幅面灌根，每株100毫升，每年春季施用一次，可防病促生(地徑增加)。②防治處理發病紅豆杉按10-200倍體積比稀釋度沿根系幅面灌根及附近土壤淋灌，每株200毫升，春、夏各一次，連續三年，可治病促生(高生長)。實施例2試驗于2009年3月起在四川農業大學林木種質圃進行，紅豆杉生長期間進行常規管理，并定期輪換花盆的位置。試驗土壤采自四川省雅安市大興鎮林木育種基地，采樣深度為O 20 cm,砂壤土。土壤理化性質經測定為土壤pH 7. I,有機質含量10.43 g/kg,全氮含量0.80 g/kg,全磷含量0.34 g/kg,有效磷含量4.50 mg/kg。樣土風干后過I mm篩，并與過I _篩的河沙以3:1 (V:V)混合后用于盆栽試驗。待紅豆杉苗移栽成活后，分不同濃度沿根系幅面灌根上述液體菌劑IOOmL,重復6次，以每盆灌注培養液(不含菌)100mL對照。每年生長停止后統計發病率和測定地徑，結果見表I表I 絳紅褐鏈霉菌SP3灌根方式生防和促生功能參數紅豆杉(盆栽)
權利要求
1.絳紅褐鏈霉菌SP3菌株，保藏編號為CGMCCNO. 6383，分類命名為絳紅褐鏈霉菌btreptomyces purpeofuscus。
2.根據權利要求I所述的絳紅褐鏈霉菌SP3菌株在紅豆杉土傳根病和紅豆杉促生上的應用。
全文摘要
本發明公開了絳紅褐鏈霉菌SP3菌株，保藏編號為CGMCC No.6383，分類命名為絳紅褐鏈霉菌Streptomyces purpeofuscus。本發明篩選的生防菌絳紅褐鏈霉菌SP3新菌株具有防病、促生雙重功能，兼有生物防治和生物肥料特點，對土傳病害有特效，不僅能避免化學藥物(農藥、化肥)所造成的污染環境的嚴重后果，而且具有可持續、成本低的特點。
文檔編號A01P21/00GK102864110SQ201210367119
公開日2013年1月9日 申請日期2012年9月27日 優先權日2012年9月27日
發明者朱天輝, 張麗娜, 李姝江, 譙天敏, 樸春根, 韓珊 申請人:四川農業大學