專利名稱：一種富集sod的靈芝產品及其生產方法
技術領域：
本發明屬于微生物領域，具體涉及一種富集SOD的靈芝產品及其生產方法。
背景技術：
:超氧化物歧化酶(SOD)是一種廣泛分布于動植物、微生物體內專一清除超氧陰離子自由基的金屬酶，能消除生物體在新陳代謝過程中產生的有害物質。對人體不斷地補充SOD具有抗衰老的特殊效果。SOD在預防氧中毒，抗輻射損傷以及抗衰老等方面起著重要的作用。SOD目前世界范圍內的開發，大都從動物血里提取，不但代價昂貴，而且動物性SOD的排他性、不易常溫保存、艾滋病等血液病毒的交叉感染及其它潛在危險，所以國際衛生組織呼吁:立刻停止動物性SOD的使用。SOD是中國衛生部批準的具有抗衰老、免疫調節、調節血脂、抗輻射、美容功能的物質之一，法定編號為ECl.15.1.1 ；CAS[905489] 0靈芝為我國名貴中藥材。在中藥書籍中記載其“味甘、性溫，可補心、肝、脾、肺五臟之氣，具有滋補強壯、扶正固本之功效”。現代藥理學研究證實，靈芝對于增強人體免疫力，調節血糖，控制血壓，輔助腫瘤放化療，保肝護肝，促進睡眠等方面均具有顯著療效，還具有止痛、鎮靜、抑制組織胺釋放、解毒、保肝、毒殺腫瘤細胞等功效，對人體無副作用。靈芝的生物活性成分也十分豐富，目前已分離到150余種活性成分，有多糖類、核苷類、生物堿類、三萜類、礦質元素、氨基酸蛋白質類和酶等。近年來，靈芝的開發利用越來越受到人們的重視，靈芝市場不斷地增長
發明內容
:本發明的目的是提供一種富含SOD的靈芝產品及其生產方法。本發明的富含SOD的靈芝產品是通過以下方法制備的，該方法包括以下步驟:a、將靈芝(Ganoderma Iucidum)麥粒種接種到富集SOD靈芝栽培培養基中,接種量為富集SOD靈芝栽培培養基質量的5 15%，于溫度22 35°C，相對濕度50% 85%下培菌房中培菌，暗培養4(T60d，至菌絲充滿培養基，再將溫度調至1(T15°C培養3 5d至長出原基，所述的富集sod靈芝栽培培養基是由栽培基料和銅鋅溶液按質量比1: 1.r1.4組成，所述的栽培基料，按總質量分數100%計，包括玉米芯30% 50%，木屑20% 40%，麩皮或米糠20% 30%，蔗糖1% 5%和石膏粉1% 3% ;所述的銅鋅溶液是在每25L水中加有甘氨酸銅I 3g、葡萄糖酸銅Hg、甘氨酸鋅2 5g和檸檬酸鋅Hg ；
b、原基于溫度20 35°C、相對濕度75% 90%、光照強度10(Tl0001uX下培育，每天通風f 2次，每次0.5^1h,至原基分化長出子實體，再保持濕度859^98%，每天通風2 3次，每次0.5 lh，逐漸分化為菌蓋后，光照強度增強到100(T20001UX、溫度2(T35°C，全天通風，促進靈芝生長至菌蓋和菌柄顏色加深，菌蓋邊緣淺色生長線消失，開始釋放孢子，加大光照強度到200(T50001ux，繼續培養5 10d，菌蓋顏色進一步加深，得到富集SOD的靈芝子實體，即為富含SOD的靈芝產品。所述的靈芝麥粒種可以通過以下方法制備:
(I)靈芝母種的制備:采集新鮮靈芝的子實體進行組織分離，按培養基質量29T5%接種量接種到斜面PDA培養基，于溫度22 25°C、濕度50% 75%下培養l(T30d，至菌絲長滿斜面，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株再次接種到斜面PDA培養基，重復上述步驟3次，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株作為靈芝母種；(2)靈芝麥粒種的制備:用PDA斜面培養基復活靈芝母種，靈芝母種復活培養IOd后菌絲長滿斜面，將含有氣生菌絲的斜面接入麥粒種培養基，于25°C培養10d，每隔3 4d搖動一次培養容器，以促使菌絲加快生長與防止結塊，經15d長結實后檢查菌種有無污染，無污染就得到靈芝麥粒種，所述麥粒種培養基由麥粒96%，石膏2%，麩皮2%組成，pH自然，121°C高壓滅菌30min。本發明人發現靈芝能夠吸收培養基中的銅、鋅等金屬元素，利用這個特點，通過在靈芝的培養基中添加甘氨酸銅、葡萄糖酸銅、甘氨酸鋅、檸檬酸鋅，為靈芝提供了在生長過程中轉化合成SOD必需的物質基礎，再經合適的培養方法使得培育出的靈芝子實體SOD含量大大高于普通栽培靈芝的子實體SOD含量(18IU/mg)，達到30IU/mg以上，從而獲得了富含SOD的靈芝產品，為進一步開發和利用靈芝創造了條件。
具體實施方式
:以下實施例是對本發明的進一步說明，而不是對本發明的限制。以下實施例中的麥粒、石膏、麩皮購自廣東省林中寶食用菌有限公司。甘氨酸銅、甘氨酸鋅購自武漢市福德精細化工有限公司，葡萄糖酸銅、檸檬酸鋅購自上海研拓生物科技有限公司。玉米芯、木屑、麩皮、米糠、蔗糖、石膏粉購自廣東省林中寶食用菌有限公司。實施例11、靈芝母種的制備:采集新鮮靈芝(Ganoderma Iucidum)的子實體進行組織分離，按培養基質量2%的接種量 接種到斜面PDA培養基，于溫度22°C、濕度50%時培養25d，至菌絲長滿斜面，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株再次接種到斜面PDA培養基，重復上述步驟3次，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株作為靈芝母種。2、靈芝麥粒種的制備:按照總質量分數100%計，將麥粒96%，石膏2%，麩皮2%，混合攪拌均勻，PH自然，121°C高壓滅菌30min，得到麥粒種培養基。將靈芝母種菌株接種于用PDA斜面培養基上于溫度22°C、濕度50%時復活培養，復活培養IOd后菌絲長滿試管斜面，選氣生菌絲少的斜面接入三角瓶裝麥粒種培養基，250C，培養10d，菌絲能長滿三角瓶，在菌絲長滿培養基表面后應隔3-4d搖動一次瓶子，以促使菌絲加快生長與防止結塊，約經15d長結實，檢查菌種有無污染雜菌，無污染雜菌的，即為靈芝麥粒種用于下述步驟中。3、銅鋅溶液的制備:稱取甘氨酸銅lg、葡萄糖酸銅lg、甘氨酸鋅2g、檸檬酸鋅1.5g，溶解于25L水中，得到銅鋅溶液。4、富集SOD靈芝栽培培養基的制備，其由栽培基料和銅鋅溶液按質量比1: 1.1混合攪拌均勻而成。所述的栽培基料按總質量分數100%計，將玉米芯30%，木屑40%，米糠22%，蔗糖5%和石膏粉3%混合攪拌均勻得到栽培基料。5、接種:將步驟(2)得到的靈芝麥粒種接種至步驟(4)的富集SOD靈芝栽培培養基中，接種量為富集SOD靈芝栽培培養基質量的10%，于溫度25°C，相對濕度75%的培菌房中培菌，暗培養45d，至菌絲充滿培養基。
6、培養:將步驟(5)獲得的長滿菌絲的培養基，在12°C培養5d至出現白色狀高Icm的原基，原基在溫度25°C，相對濕度85%，光照強度5001ux下培育，每天通風f 2次，每次0.5^1h,至原基分化長出子實體(菌柄)，然后保持濕度859^98%，每天通風2 3次，每次
0.5 lh，逐漸分化為菌蓋后，室內光照強度增強到16001uX，溫度25°C，全天通風，促進靈芝生長使菌蓋和菌柄顏色加深，菌蓋邊緣淺色生長線消失，開始釋放孢子，加大室內光照強度到40001uX，繼續培養8d，菌蓋顏色進一步加深，則得到富集SOD的靈芝子實體，即為富含SOD的靈芝產品，子實體中SOD的含量為30IU/mg。實施例21、靈芝母種的制備:采集新鮮靈芝(Ganoderma Iucidum)的子實體進行組織分離，按培養基質量5%接種量接種到斜面PDA培養基，于溫度24°C、濕度60%時培養18d，至菌絲長滿斜面，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株再次接種到斜面PDA培養基，重復上述步驟3次，挑取生長旺盛、粗壯 均一的菌株作為靈芝母種。2、靈芝麥粒種的制備:按照總質量分數100%計，將麥粒96%，石膏2%，麩皮2%，混合攪拌均勻，PH自然，121°C高壓滅菌30min，得到麥粒種培養基。將靈芝母種菌株接種于用PDA斜面培養基上于溫度22°C、濕度50%時復活培養，復活培養IOd后菌絲長滿試管斜面，選氣生菌絲少的斜面接入三角瓶裝麥粒種培養基。250C，培養10d，菌絲能長滿三角瓶，在菌絲長滿培養基表面后應隔3-4d搖動一次瓶子，以促使菌絲加快生長與防止結塊。約經15d長結實，檢查菌種有無污染雜菌，無污染雜菌的，即為靈芝麥粒種，用于下述步驟中。3、銅鋅溶液的制備:稱取甘氨酸銅2g、葡萄糖酸銅2g、甘氨酸鋅3g、檸檬酸鋅lg，溶解于25L水中，得到銅鋅溶液。4、富集SOD靈芝栽培培養基的制備，其由栽培基料和銅鋅溶液按質量比1: 1.4混合攪拌均勻而成。所述的栽培基料按總質量分數100%計，將玉米芯50%，木屑20%，麩皮25%，蔗糖3%和石膏粉2%混合攪拌均勻得到栽培基料。5、接種:將步驟(2)得到的靈芝麥粒種接種至步驟(4)的富集SOD靈芝栽培培養基中，接種量為富集SOD靈芝栽培培養基質量的10%，于溫度28°C，相對濕度70%的培菌房中培菌，暗培養50d，至菌絲充滿培養基。6、培養:將步驟(5)獲得的長滿菌絲的培養基，在12°C培養5d直至出現白色狀高Icm的原基，原基在溫度28°C，相對濕度85%，光照強度8001ux下培育，每天通風1 2次，每次0.5^1h,至原基分化長出子實體(菌柄)，再保持濕度859^98%，每天通風2 3次，每次
0.5 lh，逐漸分化為菌蓋后，室內光照強度增強到16001uX，溫度28°C，全天通風，促進靈芝生長使菌蓋和菌柄顏色加深，菌蓋邊緣淺色生長線消失，開始釋放孢子，加大室內光照強度到38001uX，繼續培養8d，菌蓋顏色進一步加深，則得到富集SOD的靈芝子實體，即為富含SOD的靈芝產品，子實體中SOD的含量為34IU/mg。實施例31、靈芝母種的制備:采集新鮮靈芝(Ganoderma Iucidum)的子實體進行組織分離，按培養基質量5%接種量接種到斜面PDA培養基，于溫度25°C、濕度75%時培養10d，至菌絲長滿斜面，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株再次接種到斜面PDA培養基，重復上述步驟3次，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株作為靈芝母種。2、靈芝麥粒種的制備:按照總質量分數100%計，將麥粒96%，石膏2%，麩皮2%，混合攪拌均勻，pH自然，121°C高壓滅菌30min，得到麥粒種培養基。將靈芝母種菌株接種于用PDA斜面培養基上于溫度22°C、濕度50%時復活培養，復活培養IOd后菌絲長滿試管斜面，選氣生菌絲少的斜面接入三角瓶裝麥粒種培養基。250C，培養10d，菌絲能長滿三角瓶，在菌絲長滿培養基表面后應隔3-4d搖動一次瓶子，以促使菌絲加快生長與防止結塊。約經15d長結實，檢查菌種有無污染雜菌，無污染雜菌的，即為靈芝麥粒種，用于下述步驟中。3、銅鋅溶液的制備:稱取甘氨酸銅3g、葡萄糖酸銅3g、甘氨酸鋅5g、檸檬酸鋅3g，溶解于25L水中，得到銅鋅溶液。4、富集SOD靈芝栽培培養基的制備，其由栽培基料和銅鋅溶液按質量比1: 1.2混合攪拌均勻而成。所述的栽培基料按總質量分數100%計，將玉米芯48%，木屑20%,麩皮30%，蔗糖1%和石膏粉 1%混合攪拌均勻得到栽培基料。5、接種:將步驟(2)得到的靈芝麥粒種接種至步驟(4)的富集SOD靈芝栽培培養基中，接種量為富集SOD靈芝栽培培養基質量的5%，于溫度22°C，相對濕度50%的培菌房中培菌，暗培養60d，至菌絲充滿培養基。6、培養:將步驟(5)獲得的長滿菌絲的培養基，在10°C培養3d直至出現白色狀高Icm的原基，原基在溫度35°C，相對濕度75%，光照強度IOOIux下培育，每天通風1 2次，每次0.5^1h,至原基分化長出子實體(菌柄)，再保持濕度859^98%，每天通風2 3次，每次
0.5 lh，逐漸分化為菌蓋后，室內光照強度增強到lOOOlux，溫度35°C，全天通風，促進靈芝生長使菌蓋和菌柄顏色加深，菌蓋邊緣淺色生長線消失，開始釋放孢子，加大室內光照強度到20001UX，繼續培養10d，菌蓋顏色進一步加深，則得到富集SOD的靈芝子實體，即為富含SOD的靈芝產品，子實體中SOD的含量為40IU/mg。實施例41、靈芝母種的制備:采集新鮮靈芝(Ganoderma Iucidum)的子實體進行組織分離，按培養基質量5%接種量接種到斜面PDA培養基，于溫度24°C、濕度60%時培養30d，至菌絲長滿斜面，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株再次接種到斜面PDA培養基，重復上述步驟3次，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株作為靈芝母種。2、靈芝麥粒種的制備:按照總質量分數100%計，將麥粒96%，石膏2%，麩皮2%，混合攪拌均勻，PH自然，121°C高壓滅菌30min，得到麥粒種培養基。將靈芝母種菌株接種于用PDA斜面培養基上于溫度22°C、濕度50%時復活培養，復活培養IOd后菌絲長滿試管斜面，選氣生菌絲少的斜面接入三角瓶裝麥粒種培養基。250C，培養10d，菌絲能長滿三角瓶，在菌絲長滿培養基表面后應隔3-4d搖動一次瓶子，以促使菌絲加快生長與防止結塊。約經15d長結實，檢查菌種有無污染雜菌，無污染雜菌的，即為靈芝麥粒種，用于下述步驟中。3、銅鋅溶液的制備:稱取甘氨酸銅3g、葡萄糖酸銅3g、甘氨酸鋅3g、檸檬酸鋅lg，溶解于25L水中，得到銅鋅溶液。4、富集SOD靈芝栽培培養基的制備，其由栽培基料和銅鋅溶液按質量比1: 1.3混合攪拌均勻而成。所述的栽培基料按總質量分數100%計，將玉米芯50%，木屑25%，麩皮20%，蔗糖3%和石膏粉2%混合攪拌均勻得到栽培基料。5、接種:將步驟(2)得到的靈芝麥粒種接種至步驟(4)的富集SOD靈芝栽培培養基中，接種量為富集SOD靈芝栽培培養基質量的15%，于溫度35°C，相對濕度85%的培菌房中培菌，暗培養40d，至菌絲充滿培養基。
6、培養:將步驟(5)獲得的長滿菌絲的培養基，在15°C培養4d直至出現白色狀高Icm的原基，原基在溫度20°C，相對濕度90%，光照強度lOOOlux下培育，每天通風廣2次，每次0.5^1h,至原基分化長出子實體(菌柄)，再保持濕度859^98%，每天通風2 3次，每次
0.5 lh，逐漸分化為菌蓋后，室內光照強度增強到20001UX，溫度20°C，全天通風，促進靈芝生長使菌蓋和菌柄顏色加深，菌蓋邊緣淺色生長線消失，開始釋放孢子，加大室內光照強度到50001UX，繼續培養5d，菌蓋顏色進一步加深，則得到富集SOD的靈芝子實體，即為富含SOD的靈芝產品，子實 體中SOD的含量為36IU/mg。
權利要求
1.一種富含SOD的靈芝產品的生產方法，其特征在于，包括以下步驟: a、將靈芝(GanodermaIucidum)麥粒種接種到富集SOD靈芝栽培培養基中，接種量為富集SOD靈芝栽培培養基質量的5 15%，于溫度22 35°C，相對濕度50% 85%下培菌房中培菌，暗培養4(T60d，至菌絲充滿培養基，再將溫度調至1(T15°C培養3 5d至長出原基，所述的富集sod靈芝栽培培養基是由栽培基料和銅鋅溶液按質量比1: 1.n.4組成，所述的栽培基料，按總質量分數100%計，包括玉米芯30% 50%，木屑20% 40%，麩皮或米糠20% 30%，蔗糖19T5%和石膏粉19T3% ;所述的銅鋅溶液是在每25L水中加有甘氨酸銅Hg、葡萄糖酸銅f 3g、甘氨酸鋅2 5g和檸檬酸鋅f 3g ； b、原基于溫度2(T35°C、相對濕度75% 90%、光照強度10(Tl0001uX下培育，每天通風r2次，每次0.5^1h,至原基分化長出子實體，再保持濕度859^98%，每天通風2 3次，每次0.5 lh，逐漸分化為菌蓋后，光照強度增強到100(T20001UX、溫度2(T35°C，全天通風，促進靈芝生長至菌蓋和菌柄顏色加深，菌蓋邊緣淺色生長線消失，開始釋放孢子，加大光照強度到200(T50001ux，繼續培養5 10d，菌蓋顏色進一步加深，得到富集SOD的靈芝子實體，即為富含SOD的靈芝產品。
2.根據權利要求1所述的生產方法，其特征在于，所述的靈芝麥粒種是通過以下方法制備: (1)靈芝母種的制備:采集新鮮 靈芝的子實體進行組織分離，按培養基質量29T5%接種量接種到斜面PDA培養基，于溫度22 25°C、濕度50% 75%下培養l(T30d，至菌絲長滿斜面，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株再次接種到斜面PDA培養基，重復上述步驟3次，挑取生長旺盛、粗壯均一的菌株作為靈芝母種； (2)靈芝麥粒種的制備:用PDA斜面培養基復活靈芝母種，靈芝母種復活培養IOd后菌絲長滿斜面，將含有氣生菌絲的斜面接入麥粒種培養基，于25°C培養10d，每隔3 4d搖動一次培養容器，以促使菌絲加快生長與防止結塊，經15d長結實后檢查菌種有無污染，無污染就得到靈芝麥粒種，所述麥粒種培養基由麥粒96%，石膏2%，麩皮2%組成，pH自然，121°C高壓滅菌30min。
3.一種按照權利要求1或2所述的生產方法生產得到的富含SOD的靈芝產品。
全文摘要
本發明公開了一種富含SOD的靈芝產品及其生產方法。本發明通過在靈芝的培養基中添加甘氨酸銅、葡萄糖酸銅、甘氨酸鋅、檸檬酸鋅，再經合適的培養方法使得培育出的靈芝子實體SOD含量大大高于普通栽培靈芝的子實體SOD含量(18IU/mg)，達到30IU/mg以上，從而獲得了富含SOD的靈芝產品，為進一步開發和利用靈芝創造了條件。
文檔編號C05F5/00GK103168618SQ20131006064
公開日2013年6月26日 申請日期2013年2月26日 優先權日2013年2月26日
發明者李挺, 宋斌, 李海添, 李泰輝, 沈亞恒 申請人:河源市東江一品農業科技發展有限公司, 河源市順景食用菌種植專業合作社