一種新型榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系選育的方法
【專利摘要】本發明公開了一種新型榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系選育的方法，通過蕓薹屬內不同種間遠緣雜交和連續回交，將榨菜不育源轉育到甘藍型油菜中，得到榨菜胞質甘藍型油菜CMS“93-12A”。通對雜交和連續回交的手段對榨菜胞質甘藍型油菜CMS“93-12A”進行改良，得到了一份新的穩定雙低不育系材料“嘉油58A”；榨菜胞質CMS恢保關系鑒定表明“嘉油58A”與Pol?CMS和陜2A?CMS具有不同的恢保關系，同時篩選到1份恢復材料，對其進行改良獲得5份雙單倍體恢復系材料；特異引物PCR鑒定表明，“93-12A”、“嘉油58A”與芥菜CMS的不育源相同；“嘉油58A”與不同恢復系材料的雜交配組產量鑒定結果表明，部分組合具有較好的增產潛力，“嘉油58A”具有較好的配合力。本發明專利可應用在生產上油菜品種的選育和油菜的種植。
【專利說明】一種新型榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系選育的方法
【技術領域】:
[0001]本發明專利是一種植物新品種的選育方法。
【背景技術】:
[0002]甘藍型油菜具有很強的雜種優勢[1]，油菜雜種優勢的利用是提高單產、增加經濟收入的重要途徑，而利用優良的細胞質雄性不育系(CMS)進行三系配套生產雜交種是目前國內外油菜雜種優勢利用的主要途徑。我國在甘藍型油菜CMS的應用及相關研究上處于國際領先水平，目前國內多數油菜主產區主推品種均以雜交種為主，同時“雙低+雜優”品質改良與雜種優勢利用緊密結合，品質和產量同步改良。目前國內外研究的比較多并應用于大面積育種實踐的甘藍型油菜細胞質雄性不育系主要有陜2A CMS,Pol CMS和Ogu CMS。通過近些年生產上大面積推廣應用的品種“華雜3號”、“秦油2號”、“寧雜I號”等種植情況來看，陜2A CMS,Pol CMS都存在一定的微量花粉，導致雜交種出現數量不等的不育株問題，影響了雜種的純度，給生產上帶來了較大風險[2];而Ogu CMS早期由于恢復系的問題一直沒有得到很好的大面積應用，近年來，歐洲通過細胞工程等生物技術得到了其穩定的恢復系，并實現了三系配套[3’4]，但其受專利保護很難被我們應用，國內Ogu恢復系的選育工作近年來也取得重大進展，但目前仍未在生產上應用[5]。新型甘藍型油菜不育系的發現和開發利用一直來是油菜育種工作者的目標。董振生等利用低溫落蕾的特性選育了陜212A、陜203A等無微粉細胞質雄性不育系[6’7]，張濤等選育的溫敏不育系160S等M都為油菜雜種優勢的利用提供了新途徑。
[0003]榨菜胞質甘藍型油菜CMS “93-12A”，是本研究組以浙江大學引進榨菜細胞質雄性不育系為不育胞質來源，通過連續回交，初步轉育成功的甘藍型油菜細胞質雄性不育系，其表現為不育徹底，不育率和`不育度都為100% [9]，但該不育系由于最初回交父本在產量性狀、品質性狀以及配合力等方面均存在較大缺陷，同時其恢復系材料較難發現，很難在生產上加以利用，對其進行產量、品質性狀改良和三系配套研究將對其育種利用起到至關重要的作用。本研究以“93-12A”為不育源轉育母本，以優質高產油菜常規品種和育種材料為轉育父本，通過連續回交的方法，選育優質的榨菜胞質甘藍型油菜不育系材料，并對其進行雜交配組，篩選其恢復系材料，進行初步雜交配組。

【發明內容】
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[0004]本發明專利的目的是提供一種新型榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系的選育的方法，通過蕓薹屬內不同種間遠緣雜交和連續回交，將榨菜不育源轉育到甘藍型油菜中，得到榨菜胞質甘藍型油菜CMS“93-12A”，并對通對雜交和連續回交的手段對榨菜胞質甘藍型油菜CMS “93-12A”進行改良，得到了一份新的穩定雙低不育系材料“嘉油58A”，從而進一步進行三系配套研究。
【專利附圖】

【附圖說明】:[0005]本圖是榨菜細胞質新型油菜胞質雄性不育系選育的流程圖【具體實施方式】:
[0006]圖中I為榨菜雄性不育材料為母本，甘藍型油菜92-58系為父本進行雜交；圖中2為圖中I所示的雜交得到Fl后繼續與甘藍型油菜92-58進行雜交；圖中3為圖中2所示的雜交組合得到的后代進行連續回交后得到的材料“93-12A”;圖中4所示為以“93-12A”為母本，優質甘藍型油菜自交系“022058”為父本進行雜交；圖中5所示為“93-12A”和“022058”自交系進行雜交得到的后代與“022058”自交系連續回交；圖中6所示為最終獲得改良不育系材料“嘉油5 8A”。
【權利要求】
1.一種新型榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系的選育方法，通對蕓薹屬內不同種間的遠緣雜交和連續回交的手段，將榨菜細胞質雄性不育源轉育到甘藍型油菜中，獲得榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系“93-12A”，并通過雜交和連續回交的選育方法對榨菜胞質甘藍型油菜CMS “93-12A”進行改良，得到一份新的穩定雙低不育系材料“嘉油58A”，該材料與與PolCMS和陜2A CMS具有不同的恢保關系，部分組合具有較好的增產潛力，“嘉油58A”具有較好的配合力。
2.根據權利要求1所述的新型榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系的選育方法，其特征是，不育系選育采用遠緣雜交和連續回交的方法，不育系改良采用雜交配組、測交鑒定、回交加固的方法，以不育系“93-12A”為轉育親本不育源，以自行選育的高世代自交系材料及引進常規油菜品種為父本，進行廣泛雜交配組，并結合連續回交和定向選擇，進行不育系改良。
3.根據權利要求1所述的新型榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系的選育方法，其特征是，“93-12A”和改良的不育系“嘉油58A”通過特異引物擴增，可得到一條長度為600-700堿基的條帶，通過測序，該條帶與芥菜不育基因orf220基因序列具有100%同源性，說明榨菜胞質甘藍型油菜CMS “93-12A”、“嘉油58A”的不育源與葉用芥菜CMS的不育源相同。
4.根據權利要求1和2所述的新型榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系的選育方法，其特征是，以“93-12A”為母本，進行廣泛系統的恢復系測配，通過Fl代育性來確定不育性恢復性狀，篩選恢復系材料，同時通過常規轉育結合小孢子培養技術，對恢復系材料進行改良。
5.根據權利要求1和2所述的新型榨菜胞質甘藍型油菜雄性不育系的選育方法，其特征是，“嘉油58A”花瓣長度介于轉育親本和保持系之間，而花瓣寬度略小于“93-12A”，不育系花的花瓣較保持系相比，花瓣明顯變窄，未見保持系疊瓣現象。不育系同時表現出柱頭外露，花藥與花絲退化明顯的特征，花藥退化，呈水潰狀絲狀，部分花朵柱頭微彎曲，少量柱頭貼萼片，功能正常，蜜腺發育健全。`
【文檔編號】A01H1/02GK103766209SQ201310377037
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2013年8月27日 優先權日:2013年8月27日
【發明者】姚祥坦, 徐素琴, 王潤屹 申請人:浙江省嘉興市農業科學研究院（所）