一種菊花離體育種方法
【專利摘要】一種菊花離體育種方法，本發明屬于生物技術育種領域，具體涉及一種針對菊花的離體育種方法，它要解決現有處于開花期的菊花易受環境影響導致不結實的問題。育種方法：一、向MS培養液中加入NAA溶液和6-BA溶液配制育種培養液；二、對處于開花期的菊花莖段進行處理，使用清水沖洗后消毒，得到處理后的菊花莖段；三、菊花莖段放入裝有育種培養液的培養箱中，控制光照強度和光照時間，沾取花粉進行人工授粉；四、采集成熟的種子自然陰干，完成菊花的離體育種。由于育種過程是在培養箱中進行，避免了外界地理條件，菊花離體培養的結實率為5%。本發明主要應用于菊花的育種。
【專利說明】一種菊花罔體育種方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物技術育種領域，具體涉及一種針對菊花的離體育種方法。
【背景技術】
[0002]菊花(Dendranthema grandiflourm Kitam)原產自我國，由于花色豐富，品種多樣，而深受大眾喜愛，廣泛的在世界各地種植。當今世界菊花品種達7000多個，我國的菊花品種也有3000多個，由于花卉市場的發展和人們觀賞水平的提高，對菊花的品種需求也表現出多樣化，要求人們不斷培育新的品種，而全新的育種技術在新品種的選育中也起著越來越重要的作用，傳統育種手段已經無法滿足市場的需要，誘變育種、分子育種以及組織培養技術等育種方法不斷涌現，成為近年來育種的主要手段。
[0003]雜交育種方法是在菊花授粉期間不同品種的菊花自然傳播花粉獲得種子，或者人為干預授粉過程獲得種子，選育新的花卉品種；芽變育種是利用自然栽培過程中的個別枝或植株的某一枝段或根部發生了變異的部分進行離體培養培育成的植株，從而獲得新品種；誘變育種利用物理、化學和生物等因素誘導菊花的遺傳性發生變異，然后根據育種目標進行選擇，從而培育出新的品種，誘變育種包括物理誘變、化學誘變等方式；組織培養育種主要是通過原生質體培養、體細胞雜交、體細胞遺傳變異以及單倍體的誘導與利用等途徑來實現；分子育種是以分子遺傳學為理論基礎，采用生物技術的手段，將各種外源基因導入植物細胞，通過篩選獲得植物新品種。然而無論是哪種育種方式都有自己的優點和不足，并且在后期的繁殖推廣過程中都顯示出了其自身的局限性，長期的無性繁殖會使品種的優勢退化，抗病性減弱，生長勢不強。有性繁殖種子的獲得又受到地理條件、氣候等多方面原因的影響。

【發明內容】

[0004]本發明的目的是為了解決現有處于開花期的菊花易受環境影響導致不結實的問題，而提供一種菊花離體育種方法。
[0005]本發明菊花離體育種方法按下列步驟實現:
[0006]一、向MS培養液中加入NAA (萘乙酸)溶液和6_BA (6_芐氨基腺嘌呤)溶液，經消毒處理后得到育種培養液；
[0007]二、對處于開花期的菊花莖段進行處理，保留兩個飽滿的花頭，保留菊花莖段的3片葉子,菊花莖段的長度裁剪為10±0.5cm，使用清水沖洗后消毒，得到處理后的菊花莖段；
[0008]三、向培養箱中通入氧氣,然后將處理后的菊花莖段放入裝有育種培養液的培養箱中，在光照強度為2000~3000LX，光照時間為10~12h/d，溫度為20~24°C的條件下培養，培養期間用毛筆沾取花粉進行人工輔助授粉，并每隔7天更換一次育種培養液，每次換液時剪去Icm處理后的菊花莖段；
[0009]四、待種子成熟，采集成熟的種子，放在通風處自然陰干，完成菊花的離體育種。[0010]本發明菊花離體育種方法簡便易行，所使用的育種培養液配方簡單，利于其在菊花育種上的廣泛應用，由于育種過程是在培養箱中進行，相對于自然育種避免了外界地理條件、氣候等因素的影響，尤其適用于北方寒地區域的育種，如在東北林業大學試驗田進行測試，神農香菊在自然生長條件下的結實率為0，而經本發明的離體培養結實率為5%。
【具體實施方式】
[0011]【具體實施方式】一:本實施方式菊花離體育種方法按下列步驟實施:
[0012]一、向MS培養液中加入NAA (萘乙酸)溶液和6_BA (6_芐氨基腺嘌呤)溶液，經消毒處理后得到育種培養液；
[0013]二、對處于開花期的菊花莖段進行處理，保留兩個飽滿的花頭，保留菊花莖段的3片葉子,菊花莖段的長度裁剪為10±0.5cm，使用清水沖洗后消毒，得到處理后的菊花莖段；
[0014]三、向培養箱中通入氧氣,然后將處理后的菊花莖段放入裝有育種培養液的培養箱中，在光照強度為2000~3000 LX，光照時間為10~12h/d，溫度為20~24°C的條件下培養，培養期間用毛筆沾取花粉進行人工輔助授粉，并每隔7天更換一次育種培養液，每次換液時剪去Icm處理后的菊花莖段；
[0015]四、待種子成熟，采集成熟的種子，放在通風處自然陰干，完成菊花的離體育種。
[0016]本實施方式步驟二所述的菊花莖段選取花苞已經形成，舌狀花即將展開的莖段，以縮短其離體培養周期，所采的花朵要飽滿，保證種子的質量，用清水沖洗要徹底，以減少細菌的滋生。步驟三中通入氧氣是為了使莖段的底部形成有氧的環境減少厭氧菌的滋生，有利于莖段對養分的吸收；本步驟中剪去Icm的菊花莖段的過程是在培養液中進行的。
[0017]【具體實施方式】二:本實施方式與【具體實施方式】一不同的是步驟一所述的育種培養液的制備方法是向1000~2000mll/2MS培養液中加入2~5ml濃度為0.5mg/L的NAA(萘乙酸)溶液和2~5ml濃度為2.0mg/L的6-BA (6-芐氨基腺嘌呤)溶液。其它步驟及參數與【具體實施方式】一相同。
[0018]本實施方式所述的MS培養液配方簡單，并且其所含營養物質足以維持離體的菊花莖段生長。
[0019]【具體實施方式】三:本實施方式與【具體實施方式】一或二不同的是步驟一中所述的消毒處理方式是采用高壓蒸汽滅菌消毒。其它步驟及參數與【具體實施方式】一或二相同。
[0020]【具體實施方式】四:本實施方式與【具體實施方式】一至三之一不同的是步驟二所述的消毒方式是采用次氯酸鈉的水溶液浸泡消毒。其它步驟及參數與【具體實施方式】一至三之一相同。
[0021]【具體實施方式】五:本實施方式與【具體實施方式】一至四之一不同的是步驟三在光照強度為2000LX，光照時間為12h/d，培養溫度為24°C的條件下培養。其它步驟及參數與【具體實施方式】一至四之一相同。
[0022]本實施方式控制育種期光照、溫度等培養條件容易達到，一般的溫室就可以達到育種要求，這樣可以提高菊花育種的環境限制。
[0023]實施例一:本實施例菊花離體育種方法按下列步驟實施:
[0024]一、向1000mll/2MS培養液中加入3ml濃度為0.5mg/L NAA (萘乙酸)溶液和2ml濃度為2.0mg/L6-BA (6-芐氨基腺嘌呤)溶液，經消毒處理后得到育種培養液；
[0025]二、對處于開花期的神農香菊(Dendranthema indicum var.aromaticum)莖段進行處理，保留兩個飽滿的花頭，保留菊花莖段的3片葉子，菊花莖段的長度裁剪為10cm，使用清水沖洗后使用質量濃度為2%的次氯酸鈉水溶液浸泡消毒,得到處理后的菊花莖段；
[0026]三、向培養箱中通入氧氣,然后將處理后的菊花莖段放入裝有育種培養液的培養箱中，在光照強度為2000LX，光照時間為12h/d，溫度為24°C的條件下培養，培養期間用毛筆沾取花粉進行人工輔助授粉，并每隔7天更換一次育種培養液，每次換液時剪去Icm處理后的菊花莖段；
[0027]四、待種子成熟，采集成熟的種子，放在通風處自然陰干，完成菊花的離體育種。
[0028]本實施例步驟四采集種子的過程是將已經落花的植株從培養液中拿出，將花朵剪下放在容器中，保持通風良好， 自然風干。神農香菊在自然條件下生長季平均降水量330毫米左右，開花季節要求平均氣溫為10°C，通過在東北林業大學試驗田的測試可知，如在該試驗田自然生長神農香菊的結實率為0，經本實施例離體培養結實率為5%。
【權利要求】
1.一種菊花離體育種方法，其特征在于菊花離體育種方法按下列步驟實現: 一、向MS培養液中加入NAA溶液和6-BA溶液，經消毒處理后得到育種培養液； 二、對處于開花期的菊花莖段進行處理，保留兩個花頭，保留菊花莖段的3片葉子，菊花莖段的長度裁剪為10±0.5cm，使用清水沖洗后消毒，得到處理后的菊花莖段； 三、向培養箱中通入氧氣，然后將處理后的菊花莖段放入裝有育種培養液的培養箱中，在光照強度為2000~3000LX，光照時間為10~12h/d，溫度為20~24°C的條件下培養，培養期間用毛筆沾取花粉進行人工輔助授粉，并每隔7天更換一次育種培養液，每次換液時剪去1cm處理后的菊花莖段； 四、待種子成熟，采集成熟的種子，放在通風處自然陰干，完成菊花的離體育種。
2.根據權利要求1所述的一種菊花離體育種方法，其特征在于步驟一所述的育種培養液的制備方法是向1000~2000mll/2MS培養液中加入2~5ml濃度為0.5mg/L的NAA溶液和2~5ml濃度為2.0mg/L的6-BA溶液。
3.根據權利要求1所述的一種菊花離體育種方法，其特征在于步驟一中所述的消毒處理方式是采用高壓蒸汽滅菌消毒。
4.根據權利要求1所述的一種菊花離體育種方法，其特征在于步驟二所述的消毒方式是采用次氯酸鈉的水溶液浸泡消毒。
5.根據權利要求1所述的一種菊花離體育種方法，其特征在于步驟三在光照強度為2000LX，光照時間為12h/d，培養溫度為24°C的條件下培養。
【文檔編號】A01H5/00GK103828718SQ201410083025
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年3月7日 優先權日:2014年3月7日
【發明者】何淼, 李海芯, 高文杰, 徐鵬飛, 焦宏彬, 劉穎竹, 李強, 孫穎, 周蘊薇 申請人:東北林業大學