一種南方紅豆杉的培育方法
【專利摘要】一種南方紅豆杉的培育方法，先對南方紅豆杉進行組織培養，得到試管苗，再將試管苗經過煉苗后進行扦插。本發明的有益效果為：1、在組織培養基及營養土中加入硒元素，在組織培養過程和扦插過程中能夠有效地促進南方紅豆杉的成長。2、本發明的組織培養方法操作簡單，技術方案成熟，培育時間短，成本低廉，成活率高，生根率高，并能短時間內實現出瓶移栽。3、本發明的組織培養方法能夠保持原品種的優良性狀，為南方紅豆杉繁育和農業現代化奠定了良好的基礎。4、本發明的扦插方法操作步驟簡單、成活率高，在中國南方廣大地區均適用，具有良好的應用效果。
【專利說明】一種南方紅s_杉的培育方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物培育領域，具體地說是一種南方紅豆杉的培育方法。
【背景技術】
[0002]南方紅豆杉是常綠喬木，小枝秋天變成黃綠色或淡紅褐色，葉條形，雌雄異株，種子扁圓形。種子用來榨油，也可入藥。屬淺根植物，主根不明顯，側根發達，是世界上公認的瀕臨滅絕的天然珍稀抗癌植物，是經過了第四紀冰川遺留下來的古老樹種，在地球上已有250萬年的歷史。自然環境下，南方紅豆杉普遍存在生長速度緩慢、生長周期長、再生能力差、成活率低的問題，因此長時間以來，世界范圍內還沒有形成大規摸的南方紅豆杉原料林培育基地。

【發明內容】
[0003]本發明針對上述問題，提供一種操作簡單，培育時間短，成本低廉，成活率高的南方紅豆杉的培育方法。
[0004]一種南方紅豆杉的培育方法，其特征在于，先對南方紅豆杉進行組織培養，得到試管苗，再將試管苗經過煉苗后進行扦插，具體的培育步驟如下:
一、南方紅豆杉的組織培養
①采集南方紅豆杉當年生枝條，反復沖洗后進行水培，嫩芽長度長到1- 2cm用剪刀剪下放入燒杯中，燒杯口用紗布蓋住，清水滴澆2±0.2小時；取出嫩芽浸入濃度為75%的酒精中，30秒后取出，用無菌水沖洗3次，再放入濃度為4%的84消毒液中處理7分鐘，用無菌水清洗3 - 5次；吸干水分后無菌操作，將嫩芽上的葉片剪除，并將嫩芽的莖剪切成長度為I ±0.2厘米、帶有節間的莖段，將莖段接種于富硒MS培養基中，在溫度為25°C、每日光照16小時、光照強度為500-7501uX的環境中初始培養12天；
②將初始培養的無菌苗葉的葉柄切成0.5厘米X0.5厘米，轉移至每升含有1.0毫克6-芐氨基嘌呤和1.0毫克萘乙酸的MS培養基中26°C培養45天；然后將愈傷塊在無菌條件下切割成0.2厘米X0.2厘米X0.2厘米，轉移至每升含0.5毫克萘乙酸和1.0毫克6-芐氨基嘌呤的富硒MS培養基中25°C培養30天，長出幼芽；
③將步驟②中長出的幼芽移植每升含有1.0毫克萘乙酸和10毫克多效唑的1/2MS培養基中培養20天，得到南方紅豆杉試管苗，經過煉苗，即完成南方紅豆杉的組織培養；
二、南方紅豆杉的扦插
①搭建溫室扦插大棚:選擇四面環山，地勢較低的地帶搭建大棚，大棚周圍挖好排水溝做到能排能灌，用鋼管搭建兩邊高2米、中間高3.5米的圓拱形大棚，棚寬8米、長30米；棚外面修一個深1.5米，寬3米，長5米的水池，用PVC管在棚內安裝噴灌系統，噴灌用水泵在池子內抽水；
②整工:在棚內通過人工修整多個寬度為1.5米的土垅，每個土垅之間留有寬30厘米、深10厘米的溝渠；③準備營養土:南方紅豆杉營養土的配方腐殖土:松磷:黃土:有機肥:硒的質量比為 6-9:1-4:8-10:0.5-1.5:0.0005-0.001 ；
④裝杯:將準備好的營養土裝入10X8厘米的營養杯中，裝入的營養土低于杯口I厘米；將裝好土的營養杯整齊的擺放在事先準備的土垅上，擺緊、擺正；
⑤移栽:將完成煉苗的幼苗接種放入營養杯中進行培養，待枝條達到半木質化后，剪取8厘米的枝條用來扦插；
⑥扦插:按照步驟③和④重新準備營養土，扦插前先澆水，將扦插枝條扦入營養杯中的土中，扦插深度為5厘米，每杯扦插3-5根；
⑦覆蓋:扦插完畢后將土垅采用塑料膜進行封蓋，封蓋高度為30-50厘米，中間用竹方支撐；
⑧日常管理:按照南方紅豆杉常用的日常管理方法進行日常管理即成。
[0005]所述的富硒MS培養基為在傳統MS培養基中加入十萬分之一的無機硒元素制備而成。
[0006]所述南方紅豆杉營養土的優選配方為:腐殖土:松磷:黃土:有機肥:硒質量比為 7:3:10:1.0:0.0008。
[0007]與現有技術相比，本發明的有益效果為:1、在組織培養基及營養土中加入硒元素，在組織培養過程和扦插過程中能夠有效地促進南方紅豆杉的成長。2、本發明的組織培養方法操作簡單，技術方案成熟，培育時間短，成本低廉，成活率高，生根率高，并能短時間內實現出瓶移栽。3、本發明的組織培養方法能夠保持原品種的優良性狀，為南方紅豆杉繁育和農業現代化奠定了良好的基礎。4、本發明的扦插方法操作步驟簡單、成活率高，在中國南方廣大地區均適用，具有良好的應用效果。
【具體實施方式】
[0008]下面結合實施例進一步闡述本發明的培育方法。
實施例
[0009]一、南方紅豆杉的組織培養
①采集南方紅豆杉當年生枝條，反復沖洗后進行水培，嫩芽長度長到1- 2cm用剪刀剪下放入燒杯中，燒杯口用紗布蓋住，清水滴澆2.2小時；取出嫩芽浸入濃度為75%的酒精中，30秒后取出，用無菌水沖洗3次，再放入濃度為4%的84消毒液中處理7分鐘,用無菌水清洗5次；吸干水分后無菌操作，將嫩芽上的葉片剪除，并將嫩芽的莖剪切成長度為1.2厘米、帶有節間的莖段，將莖段接種于富硒MS培養基中，在溫度為25 °C、每日光照16小時、光照強度為7501ux的環境中初始培養12天，富硒MS培養基為在傳統MS培養基中加入十萬分之一的無機硒元素制備而成；
②將初始培養的無菌苗葉的葉柄切成0.5厘米X0.5厘米，轉移至每升含有1.0毫克6-芐氨基嘌呤和1.0毫克萘乙酸的MS培養基中26°C培養45天；然后將愈傷塊在無菌條件下切割成0.2厘米X0.2厘米X0.2厘米，轉移至每升含0.5毫克萘乙酸和1.0毫克6-芐氨基嘌呤的富硒MS培養基中25°C培養30天，長出幼芽；
③將步驟②中長出的幼芽移植每升含有1.0毫克萘乙酸和10毫克多效唑的1/2MS培養基中培養20天，得到南方紅豆杉試管苗，經過煉苗，即完成南方紅豆杉的組織培養；
二、南方紅豆杉的扦插
①搭建溫室扦插大棚:選擇四面環山，地勢較低的地帶搭建大棚，大棚周圍挖好排水溝做到能排能灌，用鋼管搭建兩邊高2米、中間高3.5米的圓拱形大棚，棚寬8米、長30米；棚外面修一個深1.5米，寬3米，長5米的水池，用PVC管在棚內安裝噴灌系統，噴灌用水泵在池子內抽水；
②整工:在棚內通過人工修整多個寬度為1.5米的土垅，每個土垅之間留有寬30厘米、深10厘米的溝渠，下雨用來排澇，平時可以用來走路，土垅土塊整碎整平；
③準備營養土:南方紅豆杉營養土的配方腐殖土:松磷:黃土:有機肥:硒的質量比為 7:3:10:1.0:0.0008 ；
④裝杯:將準備好的營養土裝入10X8厘米的營養杯中，裝入的營養土低于杯口I厘米；將裝好土的營養杯整齊的擺放在事先準備的土垅上，擺緊、擺正；
⑤移栽:將完成煉苗的幼苗接種放入營養杯中進行培養，待枝條達到半木質化后，剪取8厘米的枝條用來扦插；
⑥扦插:按照步驟③和④重新準備營養土，扦插前先澆水，將扦插枝條扦入營養杯中的土中，扦插深度為5厘米，每杯扦插5根；
⑦覆蓋:扦插完畢后將土垅采用塑料膜進行封蓋，封蓋高度為50厘米，中間用竹方支
撐；
⑧日常管理:按照南方紅豆杉常用的日常管理方法進行日常管理即成。
[0010]由于硒 是動植物生長的必需元素，是谷胱甘肽過氧化物歧化酶和P-蛋白的組成部分；如果不加入硒元素，就容易導致缺乏該元素，組培苗長成后抗病蟲害能力差，植入土壤中后，成活率只有60%-70% ;本發明培育方法將硒元素加入MS培養基中，培養出的組培苗健壯、抗病蟲害能力強，植入土壤后，成活率90%以上；在富硒的營養土中進行扦插成活率達到98%以上，大大提高了扦插的成活率。
【權利要求】
1.一種南方紅豆杉的培育方法，其特征在于，先對南方紅豆杉進行組織培養，得到試管苗，再將試管苗經過煉苗后進行扦插，具體的培育步驟如下: 一、南方紅豆杉的組織培養 ①采集南方紅豆杉當年生枝條，反復沖洗后進行水培，嫩芽長度長到1- 2cm用剪刀剪下放入燒杯中，燒杯口用紗布蓋住，清水滴澆2±0.2小時；取出嫩芽浸入濃度為75%的酒精中，30秒后取出，用無菌水沖洗3次，再放入濃度為4%的84消毒液中處理7分鐘，用無菌水清洗3 - 5次；吸干水分后無菌操作，將嫩芽上的葉片剪除，并將嫩芽的莖剪切成長度為.1 ±0.2厘米、帶有節間的莖段，將莖段接種于富硒MS培養基中，在溫度為25°C、每日光照.16小時、光照強度為500-7501uX的環境中初始培養12天； ②將初始培養的無菌苗葉的葉柄切成0.5厘米X0.5厘米，轉移至每升含有1.0毫克.6-芐氨基嘌呤和1.0毫克萘乙酸的MS培養基中26°C培養45天；然后將愈傷塊在無菌條件下切割成0.2厘米X0.2厘米X0.2厘米，轉移至每升含0.5毫克萘乙酸和1.0毫克.6-芐氨基嘌呤的富硒MS培養基中25°C培養30天，長出幼芽； ③將步驟②中長出的幼芽移植每升含有1.0毫克萘乙酸和10毫克多效唑的1/2MS培養基中培養20天，得到南方紅豆杉試管苗，經過煉苗，即完成南方紅豆杉的組織培養； 二、南方紅豆杉的扦插 ①搭建溫室扦插大棚:選擇四面環山，地勢較低的地帶搭建大棚，大棚周圍挖好排水溝做到能排能灌，用鋼管搭建兩邊高2米、中間高3.5米的圓拱形大棚，棚寬8米、長30米；棚外面修一個深1.5米，寬3米，長5米的水池，用PVC管在棚內安裝噴灌系統，噴灌用水泵在池子內抽水； ②整工:在棚內通過人工修整多個寬度為1.5米的土垅，每個土垅之間留有寬30厘米、深10厘米的溝渠； ③準備營養土:南方紅豆杉營養土的配方腐殖土:松磷:黃土:有機肥:硒的質量比為 6-9:1-4:8-10:0.5-1.5:0.0005-0.001 ； ④裝杯:將準備好的營養土裝入10X8厘米的營養杯中，裝入的營養土低于杯口I厘米；將裝好土的營養杯整齊的擺放在事先準備的土垅上，擺緊、擺正； ⑤移栽:將完成煉苗的幼苗接種放入營養杯中進行培養，待枝條達到半木質化后，剪取8厘米的枝條用來扦插；. ⑥扦插:按照步驟③和④重新準備營養土，扦插前先澆水，將扦插枝條扦入營養杯中的土中，扦插深度為5厘米，每杯扦插3-5根； ⑦覆蓋:扦插完畢后將土垅采用塑料膜進行封蓋，封蓋高度為30-50厘米，中間用竹方支撐； ⑧日常管理:按照南方紅豆杉常用的日常管理方法進行日常管理即成。
2.根據權利要求1所述的一種南方紅豆杉的培育方法，其特征在于，所述的富硒MS培養基為在傳統MS培養基中加入十萬分之一的無機硒元素制備而成。
3.根據權利要求1所述的一種南方紅豆杉的培育方法，其特征在于，所述南方紅豆杉營養土的優選配方為:腐殖土:松磷:黃土:有機肥:硒質量比為7:3:10:1.0:0.0008。
【文檔編號】A01G1/00GK103891620SQ201410168400
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2014年4月25日 優先權日:2014年4月25日
【發明者】楊江波 申請人:湖南綠博農業綜合開發有限公司