一種穩定血液樣品細胞的試劑的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種穩定血液樣品細胞的試劑,其包括以下濃度的物料:100μmol/Lβ-環糊精、100μmol/L二鈉色甘酸、0.05%重鉻酸鉀、50μmol/L三氟柳、100μmol/L特魯曲班、11mmol/L檸檬酸鈉、1.5mmol/L茶堿、20μmol/L雙嘧達莫、0.37mmol/L腺苷、20mmol/L葡萄糖、1.25mmol/LPEG。本發明能穩定血細胞并防止血小板聚集且使血細胞穩定至少36小時,經處理的血液樣品不會影響后續樣品分子分析,除可廣泛應用于血液樣品分子分析及檢測外,還特別適用于對樣品細胞有嚴格要求的細胞或分子檢測以及分析技術平臺,如微流控技術、流式細胞儀等。
【專利說明】一種穩定血液樣品細胞的試劑
【技術領域】
[0001]本發明涉及血液保鮮試劑【技術領域】,尤其涉及一種穩定血液樣品細胞的試劑。
【背景技術】
[0002]穩定血液樣品對于血樣品的運輸和臨床試驗流程的操作極為重要,有一些檢測技術和方法,例如富集和分析稀有循環細胞(循環腫瘤細胞、循環胎兒細胞、循環干細胞以及循環血管內皮細胞)或者檢測血液中的病原菌等等,通常需要多步驟和復雜的富集處理過程,穩定血細胞和富集的目標細胞能經受富集處理過程細胞不溶解是成功研發這類產品的關鍵環節。
[0003]福而馬林作為組織和細胞的保鮮試劑已經應用近百年,其中,福而馬林是一種會引起蛋白交聯的防腐劑,其會掩蓋或損壞細胞表面蛋白受體或其他目標抗原以及造成核酸和核蛋白交聯,這些會干擾樣品細胞和分子分析。
[0004]需進一步指出,對于檢測血細胞的精細系統而言,例如微流控平臺以及流式血細胞分離儀器等,需要能夠防止血細胞聚集和血凝固,即需要避免血液樣品堵塞;然而,目前市場并沒有有效的抗凝保鮮試劑。另外,在對血液樣品進行直接細胞分析的過程中,一般采用普通的抗凝劑來保持樣品新鮮,且必須在6小時內對樣品進行處理。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在于提供一種穩定血液樣品細胞的試劑,該穩定血液樣品細胞的試劑能夠有效地穩定血細胞并防止血小板聚集,且能夠使血細胞(紅血球、白血球以及血小板)穩定至少36小時,經處理的血液樣品不會影響后續的樣品分子分析,除可以廣泛應用于血液樣品分子分析以及檢測外,還特別適用于對樣品細胞有嚴格要求的細胞或分子檢測以及分析技術平臺,例如微流控技術、流式細胞儀等。
[0006]為達到上述目的,本發明通過以下技術方案來實現。
[0007]一種穩定血液樣品細胞的試劑,包括有以下濃度的物料,具體為: β -環糊精100Mmol/L
二鈉色甘酸100Mmol/L
重鉻酸鉀0.05%
三氟柳50Mmol/L
特魯曲班100Mmol/L
檸檬酸鈉11 mmol/L
茶喊1.5 mmol /I,
雙11密達莫20Mmol/L
腺苷0.37 mmol/L
葡萄糖20 mmol/L
PEG1.25 mmol/L。
[0008]其中,所述PEG 為 PEG-1000。
[0009]本發明的有益效果為:本發明所述的一種穩定血液樣品細胞的試劑,其包括有以下濃度的物料:lOOMmol/L0-環糊精、100Mmol/L二鈉色甘酸、0.05%重鉻酸鉀、50Mmol/L三氟柳、100Mmol/L特魯曲班、11 mmol/L朽1檬酸鈉、1.5 mmol/L茶堿、20Mmol/L雙卩密達莫、0.37mmol/L腺苷、20 mmol/L葡萄糖、1.25 mmol/L PEG。通過上述物料配比,本發明能夠有效地穩定血細胞并防止血小板聚集,且能夠使血細胞(紅血球、白血球以及血小板)穩定至少36小時,經處理的血液樣品不會影響后續的樣品分子分析,除可以廣泛應用于血液樣品分子分析以及檢測外,還特別適用于對樣品細胞有嚴格要求的細胞或分子檢測以及分析技術平臺,例如微流控技術、流式細胞儀等。
【具體實施方式】
[0010]下面結合具體的實施方式來對本發明進行說明。
[0011]一種穩定血液樣品細胞的試劑,包括有以下濃度的物料,具體為: β -環糊精100Mmol/L
二鈉色甘酸100Mmol/L
重鉻酸鉀0.05%
三氟柳50Mmol/L
特魯曲班100Mmol/L
檸檬酸鈉11 mmol/L
茶喊1.5 mmol /I,
雙11密達莫20Mmol/L
腺苷0.37 mmol/L
葡萄糖20 mmol/L
PEG1.25 mmol/L。
[0012]需進一步解釋,本發明的PEG為PEG-1000。
[0013]其中,對于本發明的穩定血液樣品細胞的試劑而言,β-環糊精、二鈉色甘酸、重鉻酸鉀能夠直接穩定血細胞膜,三氟柳、特魯曲班、茶堿、雙嘧達莫能夠有效地保護血小板并抑制血小板聚集,腺苷、葡萄糖能夠有效地保護血紅細胞。
[0014]使用時,本發明的穩定血液樣品細胞的試劑和血液抗凝試劑混合一起加入至真空采血管,因此使用上與普通抗凝采血管在采集全血樣品、運輸以及儲存方面沒有大的區別。
[0015]通過上述物料配比,本發明能夠有效地穩定血細胞并防止血小板聚集,且能夠使血細胞(紅血球、白血球以及血小板)穩定至少36小時,經處理的血液樣品不會影響后續的樣品分子分析,除可以廣泛應用于血液樣品分子分析以及檢測外,還特別適用于對樣品細胞有嚴格要求的細胞或分子檢測以及分析技術平臺,例如微流控技術、流式細胞儀等。
[0016]在將本發明的試劑與現有的普通血液抗凝試劑(EDTA)進行對比的過程中,具體過程如下:1、將全血樣品分別抽取到含有普通血液抗凝試劑(EDTA)的試劑管以及含有本發明的穩定血液樣品細胞的試劑的試劑管內;2、將血紅細胞溶解試劑(15 mmol/L NH4C1、12 mmol/L NaHC03和0.1 mmol/L EDTA)加人樣品中;3、混合均勻后放置室溫5分鐘,其中,含有本發明的穩定血液樣品細胞試劑的試劑管內的全血樣品呈紅色,而含有普通血液抗凝試劑(EDTA)的試劑管內的全血樣品呈淡色。通過上述對比分析可知,本發明能夠有效地穩定血細胞。
[0017]以上內容僅為本發明的較佳實施例,對于本領域的普通技術人員,依據本發明的思想,在【具體實施方式】及應用范圍上均會有改變之處,本說明書內容不應理解為對本發明的限制。
【權利要求】
1.一種穩定血液樣品細胞的試劑,其特征在于,包括有以下濃度的物料,具體為: β -環糊精100Mmol/L 二鈉色甘酸100Mmol/L 重鉻酸鉀0.05% 三氟柳50Mmol/L 特魯曲班100Mmol/L 檸檬酸鈉11 mmol/L 茶喊1.5 mmol /I, 雙11密達莫20Mmol/L 腺苷0.37 mmol/L 葡萄糖20 mmol/L PEG1.25 mmol/L。
2.根據權利要求1所述的一種穩定血液樣品細胞的試劑,其特征在于:所述PEG為PEG-1000。
【文檔編號】A01N1/02GK104381245SQ201410534999
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年10月13日 優先權日:2014年10月13日
【發明者】鄧杏飛 申請人:鄧杏飛