本發(fā)明涉及中藥材人工種植技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種通過(guò)根尖培育良種玄參的方法。

背景技術(shù)：

玄參，又叫元參、浙玄參、黑參，為玄參科植物，拉丁名為FigwortRoot。主治:溫?zé)岵岷蜖I(yíng)血、身熱、煩渴、舌絳、發(fā)斑、骨蒸勞嗽、虛煩不寤、津傷便秘、目澀昏花、咽喉喉腫痛、瘰疬痰核、癰疽瘡毒。由于人們對(duì)該類(lèi)藥物的需求不斷增長(zhǎng)，而野生資源又不足，因此，采取人工種植的方法培育加工玄參是一種有效途徑。

人工栽培玄參有利用種子進(jìn)行有性繁殖方式和利用植物細(xì)胞的全能性無(wú)性繁殖方式，無(wú)性繁殖方式能保存優(yōu)質(zhì)品種和縮短栽培時(shí)間，但是由于缺乏品種的提純復(fù)壯，多年來(lái)無(wú)性繁殖下來(lái)病毒累積嚴(yán)重，使得玄參的病蟲(chóng)害發(fā)生率上升，產(chǎn)量下降。所以需要對(duì)玄參進(jìn)行無(wú)害化處理，培育出良種玄參進(jìn)行栽培。莖尖和根尖的分生組織中一般是無(wú)毒或僅含極低濃度的病毒粒子，利用細(xì)胞的全能性，通過(guò)莖尖或者根尖分裂分化可產(chǎn)生完整的、無(wú)病毒的植株。發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)CN105309311A（申請(qǐng)?zhí)柺?01510747917.2）公開(kāi)了一種通過(guò)莖尖培育的玄參良種繁育方法，對(duì)于通過(guò)根尖分裂分化培育的方法則沒(méi)有提及。同時(shí)，通過(guò)根尖分裂分化培育植株的方法幾乎沒(méi)有文獻(xiàn)記載。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種通過(guò)根尖培育良種玄參的方法，它可以解決玄參由于長(zhǎng)期無(wú)性繁殖引起的病毒累計(jì)嚴(yán)重的問(wèn)題。

為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：這種通過(guò)根尖培育良種玄參的方法，包括如下步驟：

A、植株篩選：在玄參成熟時(shí)或者萌芽時(shí)，選擇無(wú)病蟲(chóng)害的植株；

B、預(yù)處理和消毒：取步驟A所得植株的根尖1～2cm，用清水清洗干凈，再用70%的酒精漂洗30s，然后用0.1%的HgCl2溶液滅菌3min，無(wú)菌水洗3遍及以上；

C、將步驟B所得的根尖置于顯微鏡下，用酒精浸泡后，再用灼燒冷卻的鑷子和剪刀將根尖分生區(qū)細(xì)胞切成3～7個(gè)根尖小段，再用無(wú)菌水清洗3遍及以上；

D、培育：將步驟C所得根尖小段放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)15～25天，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L +萘乙酸1.0mg/L，得到預(yù)生根，將所述預(yù)生根的根尖1～2cm切成3～7個(gè)根尖小段接入所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)15～25天，重復(fù)上述步驟至得到適當(dāng)數(shù)量的預(yù)生根后，將所述預(yù)生根25～30個(gè)為一批，分批接入增殖培養(yǎng)基，所述增殖培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.5mg/L，培養(yǎng)至長(zhǎng)出3～4 cm叢生芽；

E、將步驟D所得長(zhǎng)葉長(zhǎng)根的幼苗放入陽(yáng)光下3～5天，取出幼苗，將其移栽至育苗床，行距5～6cm、株距5～6cm，開(kāi)深3～4cm，每處栽種一株幼苗，保持育苗床濕潤(rùn)；所述育苗床是由甘蔗葉作為基質(zhì)，混合有蔗糖廠(chǎng)濾泥和/或者魚(yú)塘淤泥、磷酸氫二鉀、花生麩、腐殖質(zhì)、硫酸錳、硫酸鋅發(fā)酵而得；當(dāng)幼苗長(zhǎng)出6～7片復(fù)葉，60%植株出現(xiàn)五出復(fù)葉時(shí)，將其移栽至大田，即可。

上述技術(shù)方案中，更具體的技術(shù)方案還可以是：所述培育階段的培養(yǎng)條件為溫度23～28℃，光照強(qiáng)度1500～1800LUX。

進(jìn)一步的：所述育苗床的各成分比重為甘蔗葉60～75重量份、蔗糖廠(chǎng)濾泥和/或者魚(yú)塘淤泥20～25重量份、磷酸氫二鉀5～10重量份、腐殖質(zhì)5～10重量份、硫酸錳1～5重量份、硫酸鋅1～5重量份、花生麩1～2重量份。

由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下有益效果：

1、本發(fā)明提出了根尖培養(yǎng)的方式，獲得優(yōu)良無(wú)病毒的玄參幼苗，將其進(jìn)行種植，植株生長(zhǎng)健壯，長(zhǎng)勢(shì)一致，病蟲(chóng)害發(fā)生率只有8%左右，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于普通無(wú)性繁殖35%左右的病蟲(chóng)害發(fā)生率。

2、用本發(fā)明培育的良種幼苗進(jìn)行栽種，玄參的產(chǎn)量能增加30%左右，并能保持野生玄參的所有優(yōu)良特性及有效中藥成分含量。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述：

這種通過(guò)根尖培育玄參良種的方法如下：

A、植株篩選：在在9月底至11月上旬玄參成熟時(shí)或者3月份萌芽時(shí)，選擇無(wú)病蟲(chóng)害的植株；

B、預(yù)處理和消毒：取步驟A所得植株的根尖1～2cm，用清水清洗干凈，再用70%的酒精漂洗30s，然后用0.1%的HgCl2溶液滅菌3min，無(wú)菌水洗3遍；

C、將步驟B所得的根尖置于顯微鏡下，用酒精浸泡后，再用灼燒冷卻的鑷子和剪刀將根尖分生區(qū)細(xì)胞切成5個(gè)根尖小段，再用無(wú)菌水清洗3遍；

D、培育：將步驟C所得根尖小段放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)15天，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L +萘乙酸1.0mg/L，得到預(yù)生根，將所述預(yù)生根的根尖1～2cm切成5個(gè)根尖小段接入所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)15～25天，重復(fù)上述步驟至得到適當(dāng)數(shù)量的預(yù)生根后，將所述預(yù)生根30個(gè)為一批，分批接入增殖培養(yǎng)基，所述增殖培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.5mg/L，培養(yǎng)至長(zhǎng)出3～4 cm叢生芽；

以上培養(yǎng)條件為溫度23～28℃，光照強(qiáng)度1500～1800LUX；

E、將步驟D所得長(zhǎng)葉長(zhǎng)根的幼苗放入陽(yáng)光下3～5天，取出幼苗，將其移栽至育苗床，行距5～6cm、株距5～6cm，開(kāi)深3～4cm，每處栽種一株幼苗，保持育苗床濕潤(rùn)；所述育苗床是由甘蔗葉作為基質(zhì)，混合有濾泥、磷酸氫二鉀、腐殖質(zhì)、硫酸錳、硫酸鋅、花生麩發(fā)酵而得；其中甘蔗葉60～75重量份、魚(yú)塘淤泥20～25重量份、磷酸氫二鉀5～10重量份、腐殖質(zhì)5～10重量份、硫酸錳1～5重量份、硫酸鋅1～5重量份、花生麩1～2重量份；當(dāng)幼苗長(zhǎng)出6～7片復(fù)葉，60%植株出現(xiàn)五出復(fù)葉時(shí)，將其移栽至大田，即可。