本發(fā)明涉及蔬菜病害防治領(lǐng)域，具體地說(shuō)是一種以吡唑醚菌酯和乙蒜素為主要活性成分的生物殺菌劑組合物及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
吡唑醚菌酯，英文名稱Pyraclostrobin，制劑(有效含量為250g/L)為暗黃色、有萘味液體，熔點(diǎn)63.7～65.2℃，純品為白色至淺米色無(wú)味結(jié)晶體，蒸氣壓2.6×10-8Pa(20-25℃)，溶解度(20℃，g/100mL)：水(蒸餾水)0.00019，正庚烷0.37，甲醇10，乙腈≥50，甲苯、二氯甲烷≥57，丙酮、乙酸乙酯≥65.正辛醇2.4。吡唑醚菌酯原藥大鼠急性經(jīng)口LD5 000mg/kg.急性經(jīng)皮LD2 000mg/kg.急性吸入LC50(4h)0.3lmg/L；對(duì)兔眼睛、皮膚無(wú)刺激性，豚鼠皮膚致敏試驗(yàn)結(jié)果為無(wú)致敏性，25％吡唑醚菌酯乳油大鼠急性經(jīng)口LD50：雄性為500mg/kg，雌性為260mg/kg，急性經(jīng)皮LD4000mg/kg，急性吸入LC50：3.5lmg/kg；對(duì)兔眼睛和皮膚均有刺激性，豚鼠皮膚無(wú)致敏性。吡唑醚菌酯原藥和25％乳油均屬中等毒性，乳油對(duì)魚LC50(96h)：虹鱒魚0.01mg/L，藍(lán)鰓太陽(yáng)魚0.0316mg，L，鯉魚0.0316mg/L；水蚤L(zhǎng)C50(48h)15.71zg/L；北美鵪鶉LD2000mg/kg，野鴨LD5000mg/kg：蜜蜂LD50(48h)：經(jīng)口73.105txg/蜜蜂，接觸1001xg/只蜂；蚯蚓LC50565.9mg/kg干土。該制劑對(duì)魚劇毒。對(duì)鳥、蜜蜂、蚯蚓低毒。施藥殘液不得倒入水源和水體中；屬甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，屬線粒體呼吸抑制劑，作用機(jī)理通過(guò)與病原菌線粒體內(nèi)膜外壁上的細(xì)胞色素bc1復(fù)合體中細(xì)胞色素b的Qo中心位點(diǎn)結(jié)合，抑制細(xì)胞色素b與細(xì)胞色素C1間的電子傳遞，阻礙ATP的合成，切斷了真菌的能量循環(huán)而呈現(xiàn)抗菌活性；屬新型廣譜殺菌劑，對(duì)真菌(子囊菌、擔(dān)子菌、半知菌、卵菌)病害晚疫病、灰霉病、白粉病、霜霉病、黑星病、葉斑病、菌核病、炭疽病等有卓越的抗菌活性，但用藥成本高，不宜與其他化學(xué)農(nóng)藥混配，單一使用有高的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)。
乙蒜素，英文名稱:Ethylici，也稱乙基硫代磺酸乙酯，純品為無(wú)色或微黃色油狀液體，工業(yè)品為淡黃色透時(shí)油狀液，具有大蒜臭味，有揮發(fā)性。沸點(diǎn)56℃ /26.6Pa、80～81℃/66.7Pa、102℃/266.7Pa，相對(duì)密度1.1987(20℃)，折射率n20D1.4981。易溶于乙醇、乙醚、氯仿、乙酸等有機(jī)溶劑；稍溶于水(1.2％)。加溫(130～140℃)或遇鐵及堿性物質(zhì)易分解，有強(qiáng)腐蝕性，可燃。大鼠急性經(jīng)口LD50為140mg/kg。對(duì)兔皮膚和黏膜有較強(qiáng)的刺激作用，能通過(guò)食道和皮膚引起中毒，對(duì)大鼠無(wú)致畸、致癌和致突變性。屬于植物源仿生型殺菌劑，殺菌機(jī)理是其分子結(jié)構(gòu)中的(S-S＝O＝O)基團(tuán)與菌體分子中含-SH基的物質(zhì)反應(yīng)，從而抑制菌體正常代謝，達(dá)到防治病害的效果。具有高效廣譜殺菌功效，能防治真菌、細(xì)菌引起的晚疫病、灰霉病、霜霉病、立枯病、枯萎病，稻瘟病、白葉枯病、紋枯病、綿疫病、黑星病、軟腐病，但單一使用殺菌持效期短。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的技術(shù)任務(wù)是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種殺菌劑組合物。該組合物具有殺菌效果好、調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)、減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量和使用次數(shù)、不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)。
本發(fā)明另一個(gè)技術(shù)任務(wù)是提供上述殺菌劑組合物的應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)任務(wù)是按以下方式實(shí)現(xiàn)的：一種殺菌劑組合物，其特點(diǎn)是，包含吡唑醚菌酯和乙蒜素的重量比為1～30﹕2～40。
吡唑醚菌酯和乙蒜素的優(yōu)選重量比為4～10﹕7.4～23。
吡唑醚菌酯和乙蒜素的最佳重量比為5﹕7.4。
上述組合藥可與現(xiàn)有技術(shù)中的各種助劑組合配制成各種常規(guī)制劑，優(yōu)選為：
殺菌劑組合物乳油，包含有效量的權(quán)利要求1的組合物，以及一種或多種與吡唑醚菌酯、乙蒜素配成乳油的助劑、載體；
或：殺菌劑組合物懸浮劑，包含有效量的權(quán)利要求1的組合物，以及一種或多種與吡唑醚菌酯、乙蒜素配成懸浮劑的助劑、載體；
或：殺菌劑組合物水分散劑，包含有效量的權(quán)利要求1的組合物，以及一種或多種與吡唑醚菌酯、乙蒜素配成水分散劑的助劑、載體；
或殺菌劑組合物可濕性粉劑，包含有效量的權(quán)利要求1的組合物，以及一種或多種與吡唑醚菌酯、乙蒜素配成可濕性粉劑的助劑、載體。
所述助劑包括乳化劑、分散劑和潤(rùn)濕劑等，均可選用現(xiàn)有技術(shù)中的常用助劑。如脂肪酸聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚磺基琥珀酸酯、苯乙基苯酚甲醛樹酯聚氧乙烯醚等乳化劑；聚羧酸鹽、木質(zhì)素磺酸鹽、烷基酚聚氧乙烯醚等分 散劑；十二烷基磺酸鈉、十二烷基磺酸鈣、拉開粉BX、濕潤(rùn)滲透劑F、皂角粉，蠶沙等濕潤(rùn)劑。
所述溶劑可選用現(xiàn)有技術(shù)的各種常用溶劑，如選自脂肪烴類有機(jī)溶劑、芳香烴類有機(jī)溶劑、植物油類溶劑、醇類有機(jī)溶劑、脂類有機(jī)溶劑或酮類有機(jī)溶劑中。
經(jīng)申請(qǐng)人大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)，吡唑醚菌酯和乙蒜素殺菌劑組合物具有良好的殺菌效果及持效期，可應(yīng)用于防治瓜果和蔬菜病害，所述病害主要是防治子囊菌綱、擔(dān)子菌綱、卵菌綱和半知菌類真菌引起的馬鈴薯晚疫病、番茄晚疫病、辣椒疫病、番茄灰霉病、黃瓜霜霉病、番茄莖基腐病，尤其在防治晚疫病和灰霉病方面效果優(yōu)異。
使用吡唑醚菌酯和乙蒜素殺菌劑組合物防治瓜果和蔬菜病害時(shí)，所述殺菌劑組合物以800-1000重量倍的水稀釋后，均勻噴霧于葉片。
本發(fā)明的殺菌劑組合物與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下突出的有益效果：
(一)吡唑醚菌酯和乙蒜素相互混配不會(huì)產(chǎn)生抵觸，增效作用明顯，持效期長(zhǎng)，可大幅度減少農(nóng)藥使用量，高效安全，降低成本；
(二)無(wú)有害物質(zhì)殘留，還可調(diào)節(jié)作物生長(zhǎng)，改善品質(zhì)，滿足綠色食品、有機(jī)食品的標(biāo)準(zhǔn)。
具體實(shí)施方式
以具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的殺菌劑組合物及其應(yīng)用作以下詳細(xì)地說(shuō)明。
制備實(shí)施例一：
將重量比為4﹕10的吡唑醚菌酯與乙蒜素混合均勻，得到殺菌劑組合物成品。
制備實(shí)施例二：
將重量比為5﹕7.4的吡唑醚菌酯與乙蒜素混合均勻，得到殺菌劑組合物成品。
制備實(shí)施例三：
將重量比為10﹕23的吡唑醚菌酯與乙蒜素混合均勻，得到殺菌劑組合物成品。
制備實(shí)施例四：
將重量比為5﹕7.4﹕5﹕6﹕5﹕3﹕7﹕61.6的吡唑醚菌酯、乙蒜素、N、N- 二甲基甲酰胺、環(huán)己酮、苯乙基苯酚甲醛樹酯聚氧乙烯醚、十二烷基磺酸鈣、烷基酚聚氧乙烯醚、重芳香烴溶劑，按照常規(guī)乳油方式配制。
制備實(shí)施例五：
將重量比為5﹕7.4﹕8﹕7.5﹕9﹕5.6﹕9.5﹕48的吡唑醚菌酯、乙蒜素、N、N-二甲基甲酰胺、環(huán)己酮、苯乙基苯酚甲醛樹酯聚氧乙烯醚、十二烷基磺酸鈣、烷基酚聚氧乙烯醚、重芳香烴溶劑，按照常規(guī)乳油方式配制。
試驗(yàn)例一：制備實(shí)施例一、二和三所得殺菌劑組合物對(duì)馬鈴薯晚疫病菌室內(nèi)藥效試驗(yàn)
將吡唑醚菌酯和乙蒜素組合物按照4﹕10、5﹕7.4、10﹕23的重量比得到殺菌劑組合物。
菌絲生長(zhǎng)法測(cè)定，分別將組合物、250g/L吡唑醚菌酯和80％乙蒜素分別配制成濃度為100、80、50、40、20、10、1μg/ml的藥液；按照1﹕9的體積比與黑麥瓊脂培養(yǎng)基均勻混合，倒入培養(yǎng)皿(直徑9cm)中制成培養(yǎng)基平板，滅菌水作對(duì)照，每濃度3次重復(fù)。在預(yù)培養(yǎng)7天的馬鈴薯晚疫病菌菌落邊緣打取菌餅(直徑0.5cm)，挑出置于平板中間，18℃的黑暗條件下培養(yǎng)7-10天，采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，計(jì)算抑制率和EC50。
表1殺菌劑組合物對(duì)晚疫病菌菌絲的抑制情況
由表可以看出，重量比為4﹕10、5﹕7.4、10﹕23的吡唑醚菌酯和乙蒜素組合物對(duì)馬鈴薯晚疫病菌室內(nèi)藥效試驗(yàn)中，EC50值分別為3.4911μg/ml、0.914μg/ml和1.3126μg/ml，250g/L吡唑醚菌酯乳油與80％乙蒜素乳油的EC50值分別為9.0168μg/ml和18.897μg/ml，說(shuō)明吡唑醚菌酯和乙蒜素組合物對(duì)晚疫病菌有顯著的抑制作用，并且具有增效作用。
葉盤法測(cè)定，用喉頭噴霧器在0.1mPa的壓力下將濃度為100、80、50、40、 20、10、1μg/ml的藥液均勻噴到馬鈴薯離體葉片背面上，每濃度噴20ml，對(duì)照噴滅菌水溶液，取出自然晾干后，用打孔器打取直徑為15mm的葉盤，背面朝上置于鋪有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，每皿15片葉盤，每片葉盤中央滴10μl(1×105個(gè)孢子囊/ml)孢子囊懸浮液，置于18℃光照培養(yǎng)箱中(每天16小時(shí)光照)，培養(yǎng)4-5天，根據(jù)每片葉盤上的產(chǎn)孢面積占葉盤面積的百分率，計(jì)算抑制率和EC50
表2殺菌劑組合物對(duì)晚疫病菌的抑制情況
由表可以看出，重量比為4﹕10、5﹕7.4、10﹕23的吡唑醚菌酯和乙蒜素組合物對(duì)馬鈴薯晚疫病菌室內(nèi)藥效試驗(yàn)中，EC50值分別為5.5273μg/ml、2.2424μg/ml和2.7678μg/ml，250g/L吡唑醚菌酯乳油與80％乙蒜素乳油的EC50值分別為9.5192μg/ml和15.3498μg/ml，說(shuō)明吡唑醚菌酯和乙蒜素組合物對(duì)晚疫病菌有顯著的抑制作用，并且具有增效作用。
試驗(yàn)例二：制備實(shí)施例四所得乳油對(duì)馬鈴薯晚疫病田間藥效試驗(yàn)
將吡唑醚菌酯、乙蒜素、N、N-二甲基甲酰胺、環(huán)己酮、苯乙基苯酚甲醛樹酯聚氧乙烯醚、十二烷基磺酸鈣、烷基酚聚氧乙烯醚、重芳香烴溶劑，按照5﹕7.4﹕5﹕6﹕5﹕3﹕7﹕61.6的重量比配制乳油成品。
2014年3月-2014年12月在山東省滕州市姜屯鎮(zhèn)洪西村進(jìn)行馬鈴薯晚疫病田間藥效試驗(yàn)，設(shè)置該乳油800倍液、1000倍液、1500倍液，藥劑對(duì)照為250g/L吡唑醚菌酯乳油1500倍液與80％乙蒜素乳油1500倍液，空白對(duì)照為清水噴霧，分別在春季和秋季兩季馬鈴薯上，試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組排列，小區(qū)面積約12.5m2，每個(gè)處理重復(fù)3次，分別在施藥前，施藥后7d、14d調(diào)查病情指數(shù)和防治效果。
參照農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥田間試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑防治馬鈴薯晚疫病殺菌劑的方法進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計(jì)分析。
表3殺菌劑組合物防治馬鈴薯晚疫病田間試驗(yàn)病情指數(shù)
①各處理病情指數(shù)均為3次重復(fù)平均值；②差異顯著性測(cè)定采用“DMRT”法進(jìn)行；③差異顯著性比較采用字母表示法，凡相同字母者表示在同一水平上差異不顯著。
表4殺菌劑組合物對(duì)馬鈴薯晚疫病田間試驗(yàn)防治效果
①各處理防治效果均為3次重復(fù)平均值；②差異顯著性測(cè)定采用“DMRT”法進(jìn)行；③差異顯著性比較采用字母表示法，凡相同字母者表示在同一水平上差異不顯著。
由表可以看出，吡唑醚菌酯和乙蒜素組合物對(duì)春茬和秋茬馬鈴薯晚疫病防治中，濃度為800倍液在施藥后14天的病情指數(shù)分別為18.22(春季馬鈴薯)和16.53(秋季馬鈴薯)，防治效果分別為71.21％(春季馬鈴薯)和68.91％(秋季馬鈴薯)，濃度為1000倍液在施藥后14天的病情指數(shù)分別為19.71(春季馬鈴 薯)和20.36(秋季馬鈴薯)，防治效果分別為74.13％(春季馬鈴薯)和67.84％(秋季馬鈴薯)，與同等水平的對(duì)照藥劑相比，顯著優(yōu)于對(duì)照藥劑250g/L吡唑醚菌酯和80％乙蒜素，防效顯著提高。
試驗(yàn)例三：制備實(shí)施例五所得乳油對(duì)番茄灰霉病田間藥效試驗(yàn)
將吡唑醚菌酯、乙蒜素、N、N-二甲基甲酰胺、環(huán)己酮、苯乙基苯酚甲醛樹酯聚氧乙烯醚、十二烷基磺酸鈣、烷基酚聚氧乙烯醚、重芳香烴溶劑，按照5﹕7.4﹕8﹕7.5﹕9﹕5.6﹕9.5﹕48的重量比配制乳油成品。
2013年11月-2014年5月在濟(jì)陽(yáng)縣崔寨鎮(zhèn)蔡馬村冬暖式大棚中進(jìn)行番茄灰霉病田間藥效試驗(yàn)，設(shè)置該乳油800倍液、1000倍液、1500倍液，藥劑對(duì)照為250g/L吡唑醚菌酯乳油1500倍液與80％乙蒜素乳油1500倍液，空白對(duì)照為清水噴霧，分別在春茬和秋茬兩季番茄上，試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組排列，小區(qū)面積約10.3m2，每個(gè)處理重復(fù)3次，分別在施藥前，施藥后7d、14d調(diào)查病情指數(shù)和防治效果。
參照農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥田間試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑防治番茄晚疫病殺菌劑的的方法進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計(jì)分析。
表5殺菌劑組合物防治番茄灰霉病田間試驗(yàn)病情指數(shù)
①各處理病情指數(shù)均為3次重復(fù)平均值；②差異顯著性測(cè)定采用“DMRT”法進(jìn)行；③差異顯著性比較采用字母表示法，凡相同字母者表示在同一水平上差異不顯著。
表6殺菌劑組合物對(duì)番茄灰霉病田間試驗(yàn)防治效果
①各處理防治效果均為3次重復(fù)平均值；②差異顯著性測(cè)定采用“DMRT”法進(jìn)行；③差異顯著性比較采用字母表示法，凡相同字母者表示在同一水平上差異不顯著。
由表可以看出，吡唑醚菌酯和乙蒜素組合物對(duì)春茬和秋茬番茄灰霉病防治中，濃度為800倍液在施藥后14天的病情指數(shù)分別為26.37(春茬番茄)和21.73(秋茬番茄)，防治效果分別為66.75％(春茬番茄)和72.41％(秋茬番茄)，濃度為1000倍液在施藥后14天的病情指數(shù)分別為30.21(春茬番茄)和23.43(秋茬番茄)，防治效果分別為65.89％(春茬番茄)和70.31％(秋茬番茄)，與同等水平的對(duì)照藥劑相比，顯著優(yōu)于對(duì)照藥劑250g/L吡唑醚菌酯和80％乙蒜素，防效顯著提高。
本發(fā)明的殺菌劑組合物具有明顯的增效作用，在使用時(shí)以800-1000倍液濃度為宜，防治周期間隔不要超過(guò)21天。