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愈傷組織繼代培養(yǎng)基及其制備方法、使用方法與流程

文檔序號:12138473閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.愈傷組織繼代培養(yǎng)基,其特征在于:培養(yǎng)基原料包括6-芐氨基腺嘌呤、玉米素、吲哚-3-乙酸、維生素C、蔗糖、瓊脂粉、水解酪蛋白,以及改良MS培養(yǎng)基;

所述改良MS培養(yǎng)基pH值為5.5~5.8;

所述改良MS培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ),在其它成分不變的條件下,調(diào)整肌醇、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇和煙酸的含量分別為:1~5mg/L、3~6mg/L、0.5~2mg/L、0.5~3mg/L。

2.如權(quán)利要求1所述的愈傷組織繼代培養(yǎng)基,其特征在于:所述6-芐氨基腺嘌呤的濃度為2.0mg/L、玉米素1.0mg/L、吲哚-3-乙酸0.3mg/L、維生素C50mg/L、瓊脂粉7g/L、水解酪蛋白200~500g/l、蔗糖25-30g/L。

3.如權(quán)利要求1所述的愈傷組織繼代培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于:包括以下步驟:

步驟一:將6-芐氨基腺嘌呤、玉米素、吲哚-3-乙酸、維生素C、蔗糖、瓊脂粉、水解酪蛋白分別滅菌,3-5℃保存?zhèn)溆茫?/p>

步驟二:將愈傷組織繼代基礎(chǔ)培養(yǎng)基原料溶解,加入6-芐氨基腺嘌呤、玉米素、吲哚-3-乙酸、維生素C、蔗糖、瓊脂粉、水解酪蛋白溶液,定容至1L;

步驟三:將定容好的的培養(yǎng)基PH調(diào)到5.5-5.8。

步驟四:將配制好的培養(yǎng)基進行高溫滅菌,制得愈傷組織繼代培養(yǎng)基。

4.如權(quán)利要求3所述的愈傷組織繼代培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于:所述步驟四中的滅菌方法為抽濾滅菌或高溫滅菌;滅菌完成后20-25℃放置。

5.如權(quán)利要求3所述的愈傷組織繼代培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于:所述步驟四中高溫滅菌的溫度為121℃,滅菌時間為30min。

6.一種愈傷組織繼代培養(yǎng)基的使用方法:將綠蘿的愈傷組織在無菌條件下轉(zhuǎn)接到愈傷組織繼代培養(yǎng)基中,進行愈傷組織的繼代培養(yǎng)。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的愈傷組織繼代培養(yǎng)基的使用方法,其特征在于,所述繼代增殖的步驟包括:

利用愈傷組織繼代培養(yǎng)基在溫度為23~25℃、濕度為50~65%的條件下,光照下條件下進行愈傷組織的繼代培養(yǎng),獲得新一代的愈傷組織。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的愈傷組織繼代培養(yǎng)基的使用方法,其特征在于,所述光照條件的光照強度為1500~20001x。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的愈傷組織繼代培養(yǎng)基的使用方法,其特征在于,所述光照條件的光照時間為12小時。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的愈傷組織繼代培養(yǎng)基的使用方法,其特征在于,愈傷組織的繼代培養(yǎng)時長為40天。

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