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一種乳腺癌干細胞凍存保護劑及制成的凍存保護試劑盒的制作方法

文檔序號:11113518閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種乳腺癌干細胞凍存保護劑,用于凍存保護MCF-7乳腺癌干細胞,其特征在于:由無血清培養基凍干粉和胎牛血清FBS組成;所述無血清培養基凍干粉由如下方法制備:在DMEM/F12培養液中添加常規生長因子、加蘭他敏和石蒜堿,常規生長因子包括重組人表皮生長因子EGF、牛血清白蛋白BSA、胰島素和B27,配制成EGF濃度為15-25g/L、BSA濃度為3-5g/L、胰島素濃度為4-6mg/L、濃度為1.5-2.5%、加蘭他敏濃度為50-100nmol/L、石蒜堿濃度為50-100nmol/L的培養液,于37℃、5%CO2條件下搖床保存20-28h,冷凍干燥。

2.根據權利要求1所述的乳腺癌干細胞凍存保護劑,其特征在于:所述無血清凍干粉濃度為60-90g/L。

3.根據權利要求2所述的乳腺癌干細胞凍存保護劑,其特征在于:由無血清培養基凍干粉和胎牛血清FBS組成,無血清凍干粉濃度為75g/L;所述無血清培養基凍干粉由如下方法制備:在DMEM/F12培養液中添加常規生長因子、加蘭他敏和石蒜堿配制成EGF濃度為20g/L、BSA濃度為4g/L、胰島素濃度為5mg/L、濃度為2%、加蘭他敏濃度為75nmol/L、石蒜堿濃度為75nmol/L的培養液,于37℃、5%CO2條件下搖床保存24h,冷凍干燥。

4.一種乳腺癌干細胞凍存保護試劑盒,用于與胎牛血清FBS配合使用凍存保護MCF-7乳腺癌干細胞,其特征在于:包括分裝的無血清培養基凍干粉,無血清培養基凍干粉由如下方法制備:在DMEM/F12培養液中添加常規生長因子、加蘭他敏和石蒜堿配制成EGF濃度為20g/L、BSA濃度為4g/L、胰島素濃度為5mg/L、濃度為2%、加蘭他敏濃度為75nmol/L、石蒜堿濃度為75nmol/L的培養液,于37℃、5%CO2條件下搖床保存24h,冷凍干燥。

5.根據權利要求4所述的乳腺癌干細胞凍存保護試劑盒,其特征在于:還包括干燥劑或防腐劑或抗氧化劑。

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