本發明涉及獼猴桃新品系的培育方法，尤其涉及一種超高維生素c獼猴桃新品系的培育方法。

背景技術：

維生素c（vitaminc，vc）是生物體內必需的抗氧化劑和酶的輔因子，與植物生長發育、抗逆及人類健康密切相關。但人類已經喪失了合成vc的能力，必須從新鮮水果、蔬菜中獲取vc。獼猴桃果實富含vc，被稱為‘vc之王’，是一種廣受消費者歡迎的營養保健水果。然而，商品化的獼猴桃品種間營養成分差異化巨大，如中華獼猴桃（actinidiachinensiscomplex）不同品種vc含量差異顯著：50-420mg/100g鮮果重。目前，消費群體對獼猴桃果品提出了更高的營養健康需求，如何利用獼猴桃屬植物所具有的高vc含量的特點，拓展育種方法，開發出更高維生素c含量的新品系，是獼猴桃科研及育種領域所關注的重點。

研究表明，獼猴桃屬植物物種間和物種內果實vc含量表現出顯著的差異：①物種內不同品種果實的vc含量呈現一定幅度波動，例如不同類型軟棗獼猴桃果實vc含量從37-385mg/100g鮮果重不等；②物種間果實vc含量差異極其顯著，例如闊葉獼猴桃（a.latifolia，671-2140mg/100g鮮果重）和毛花獼猴桃（a.eriantha，500-1379mg/100g鮮果重）的果實vc含量，與蒙自獼猴桃（a.henryi）、山梨獼猴桃（a.rufa）及糙葉獼猴桃（a.rudis）（小于10mg/100g鮮果重）等相差可達500倍。③目前商業化的獼猴桃品種屬于中華獼猴桃復合體，具有味道甜美、果實大的特點，但果實vc含量不如毛花獼猴桃等物種突出。

獼猴桃物種果實vc含量的多樣化特征（物種種性特征）為選育高vc新品種提供了材料基礎。申請人所在課題組基于獼猴桃國家種質資源圃平臺，開展了獼猴桃物種vc含量的綜合評價，在此基礎上發現收集的毛花獼猴桃中具有很高的維生素c含量（500-1379mg/100g鮮果重），但同時毛花獼猴桃具有特殊的氣味（如青草氣味），不被消費者所喜好；此外，現有中華獼猴桃味道甜美，但維生素c含量介于30-250mg/100g鮮果重之間，仍有很大提高空間。因此，本發明擬開發出一種新的育種方法，培育出兼具美味（無特殊氣味）和高營養含量的獼猴桃新品系，為大幅度改善獼猴桃性狀，創新獼猴桃育種提供技術支撐。

技術實現要素：

本發明的目的就在于克服現有技術存在的缺點和不足，提供一種超高維生素c獼猴桃新品系的培育方法，應用于創制新的獼猴桃品系，推動我國獼猴桃育種創新。

本發明的目的是這樣實現的。

具體地說，本方法包括下列步驟：

①確定第一代雜交親本

選定大果型、高維生素c的物種—毛花獼猴桃為母本，其典型特征為維生素c含量是600mg/100g鮮果重，是普通獼猴桃的十倍；選定中華獼猴桃雄株為父本，其雜交后代具有果實較大，大于60g,果實無毛且味道甜美的特點；

②開展第一代種間雜交

收集父本中華獼猴桃的花粉，與毛花獼猴桃母本開展種間雜交，獲得雜交種子，進一步在中國科學院武漢植物園開展雜交種子播種和培育，經過3年培育獲得了f1代群體；

③f1代高維生素c的雄株選育

通過測定f1代實生群體葉片和部分果實維生素c含量，發現f1代群體的維生素c含量出現了分離；我們從中選育出的高維生素c含量、長勢旺盛的雄株f1-ch；

④開展種間回交

采用高維生素c含量的雄株f1-ch作為父本，與中華獼猴桃品種‘豐悅’開展雜交，獲得雜交種子，在四川育種基地播種，經過三年培育，獲得f2代群體；

⑤f2代群體系統評測

對獲得的f2代群體結果株開展評測，具體包括獼猴桃果實的維生素c含量及涉及風味的指標（糖、酸和可溶性固形物等）測定；

⑥獲得超高維生素c新品系f2-ec。

評測f2代結果群體，獲得超高維生素c新品系f2-ec，其所述特定性狀為：果實的維生素c含量為500mg/gfw以上，為普通獼猴桃品種的5-10倍；

超高維生素c新品系f2-ec保存在農業部國家獼猴桃種質資源圃（武漢），

保存號為：kiwi20150635。

所述的中華獼猴桃和毛花獼猴桃為獼猴桃屬的兩個物種，其中中華獼猴桃品種‘豐悅’是目前商業化栽培的種，其果皮無毛、果肉黃色、味道甜美；毛花獼猴桃是獼猴桃屬中可作為育種應用的一個種，長勢旺盛、維生素c含量極高。

與現有技術相比，本發明具有下列優點和積極效果：

①因獼猴桃為雌雄異株，雄性植株無果實，導致種內雜交父本選擇盲目性高、育種效率極低和品種改良極其緩慢；本發明基于獼猴桃不同物種的vc含量差異，根據雜交后代vc分離變異穩定的遺傳特征為依據，開展高vc種間雜交育種技術創新和育種體系構建，克服了雌雄異株植物的育種障礙。

②與傳統雜交相比，本方法大幅提高獼猴桃果實維生素c含量，是獼猴桃育種的創新，對今后獼猴桃育種具有極大的借鑒意義。

③本方法利用獼猴桃物種高維生素c特點，采用種間雜交和回交的辦法，培育品質優良、超高維生素c含量的獼猴桃新品系，是突破我國獼猴桃傳統育種局限、實現獼猴桃性狀多樣化的重要方法，對我國獼猴桃育種具有重大價值。

④適用于定向選育果實高vc含量的獼猴桃品系。

附圖說明

圖1是本方法的步驟流程圖；

圖2是f1代高維生素c的雄株f1-ch圖片；

圖3是f2代種間雜交群體果實表型圖片；

圖4是f2代群體維生素c分布坐標圖；

圖5是超高維生素c新品系f2-ec圖片。

具體實施方式

下面結合附圖和實施例詳細說明：

如圖1，本方法的步驟流程是：

①選定第一代雜交親本

毛花獼猴桃果實維生素c含量高，但果實較小且具有青氣味；而中華獼猴桃的果實較大，味道甜美，但維生素c含量比毛花獼猴桃低。本發明首先通過測定國家獼猴桃資源圃中收集的獼猴桃資源，選定果實大于40g、果實維生素c含量超過600mg/100g鮮果重的毛花獼猴桃為母本，花期較長且長勢旺盛的中華獼猴桃為父本。

②開展第一代種間雜交

收集中華獼猴桃的花粉，對毛花獼猴桃雌株授粉，在當年11月收集成熟的果子，洗種并保存；

第二年2月對種子播種，培育成小苗，轉移到大田；經3-5年培育，獲得成年的f1代種間雜交群體。

③f1代高維生素c的雄株選育

因為獼猴桃果實vc含量跟葉片vc含量存在相關性，通過測定f1代實生群體葉片和部分果實維生素c含量，發現其中有部分植株外部形態主要像母本毛花獼猴桃，但長勢比毛花獼猴桃強得多，枝條萌發率高，多年生老枝也能抽生枝條，易于更新復壯。其中特別是代號f1-ch的植株（見圖2），花色（紅色）艷麗，長勢旺盛，葉片維生素c含量與母本毛花獼猴桃相近；因此選定為下一代雜交父本。

④開展種間回交：

收集高維生素c含量的雄株f1-ch的花粉，對中華獼猴桃品種‘豐悅’(vc：163毫克/100克)授粉，在當年9月底收集成熟的果子，洗種并保存；

第二年2月對種子播種，培育成小苗，轉移到大田；經3-5年培育，獲得成年的f2代種間雜交群體（見圖3）。

⑤f2代群體系統評測

調查f2代群體，收集群體中每個結果株的果實，對獼猴桃果實的維生素c含量，糖、酸、青氣味等多個指標開展系統測定；

調查發現f2代群體維生素c分化明顯，變異范圍為261-627mg/100g鮮果重（見圖4），其中部分個體不存在顯著顯著青氣味，且果實味道甜，可溶性固形物高于16%。

⑥通過3年系統評估，最終獲得超高維生素c新品系f2-ec，其所述特定性狀為：果實的維生素c含量為573.1mg/100g鮮果重，果實味道甜美，果實大于60g，且無顯著青氣味（見圖5）。