本發(fā)明涉及栽培技術(shù),尤其涉及白芨組織育苗培養(yǎng)。
背景技術(shù):
:白芨(bletillastriata(thunb.)reichb.f.)為蘭科(orchidaceae)植物白芨屬多年生草本植物,以干燥塊莖入藥。具有收斂止血,消腫生肌的功效。對(duì)咯血、吐血、便血及外傷止血、瘡瘍腫毒、手足跋裂等有較好療效,廣泛用于治療肺結(jié)核及支氣管擴(kuò)張咯血、胃潰瘍出血等癥,其白芨膠廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥和日用化學(xué)品等領(lǐng)域,市場(chǎng)需求量大增,帶動(dòng)大面積的白芨種植。在白芨育苗階段,如何增加出芽量,提高育苗數(shù)量是本發(fā)明的研究主體,其常規(guī)解決辦法是采用組織培養(yǎng),如專利號(hào)為cn201110175931.1的發(fā)明專利“一種快速繁殖白芨苗的方法”,能夠獲得大量的白芨幼苗,對(duì)原球莖進(jìn)行切碎后用培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng),由于其對(duì)切碎的原球莖的愈合能力有限,故此在進(jìn)行培育前需要用中毒性的洗衣粉和高毒性的升汞溶液對(duì)假鱗莖進(jìn)行消毒,不僅對(duì)白芨造成污染,而且還會(huì)影響育苗的成活率。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,具體方案為:一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖20~30g、氨基酸50~75mg、維生素1~4mg、瓊脂10~25g、左旋龍腦20~40mg;溶劑為水。進(jìn)一步的,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少兩種。進(jìn)一步的,所述氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸的組合,其比例為10∶(1~3)∶(3~5)∶(1~3)∶(2~5)。進(jìn)一步的,所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12中的至少兩種與肌醇的組合,進(jìn)一步的,所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12、肌醇的組合,其比例為7∶(1~4)∶(4~7)∶(1~3)。進(jìn)一步的,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為還含有激動(dòng)素10~15mg。進(jìn)一步的,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為還含有生長素0.1~0.3mg。進(jìn)一步的,所述的生長素為5-羥-iaa、萘乙酸、吲哚丁酸的組合,其組合比例為10∶(1~4)∶(2~5)。本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明提供的愈合培養(yǎng)基能夠快速愈合白芨原球莖的切割面,其愈傷組織誘導(dǎo)率高于80%,愈傷指標(biāo)數(shù)在3以上,生長率高于70%。具體實(shí)施方式下面進(jìn)一步描述本發(fā)明的技術(shù)方案,但要求保護(hù)的范圍并不局限于所述。實(shí)施例一本實(shí)施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖20g、氨基酸50mg、維生素1mg、瓊脂10g、左旋龍腦20mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少兩種;本實(shí)施例選擇等量的甘氨酸和異亮氨酸所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12中的至少兩種與肌醇的組合,本實(shí)施例選擇等量的維生素b1、維生素b2與肌醇的組合。實(shí)施例二本實(shí)施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖30g、氨基酸75mg、維生素4mg、瓊脂25g、左旋龍腦40mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少兩種;本實(shí)施例選擇等量的異亮氨酸和蘇氨酸;所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12中的至少兩種與肌醇的組合,本實(shí)施例選擇等量的、維生素b2、維生素b12與肌醇的組合。實(shí)施例三本實(shí)施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖25g、氨基酸60mg、維生素3mg、瓊脂15g、左旋龍腦30mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少兩種;本實(shí)施例選擇等量的蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸;維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12中的至少兩種與肌醇的組合,本實(shí)施例選擇等量的維生素b1、維生素b12與肌醇的組合。實(shí)施例四本實(shí)施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖20g、氨基酸50mg、維生素1mg、瓊脂10g、左旋龍腦20mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸的組合,其比例為10∶1∶3∶1∶2。維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12、肌醇的組合,其比例為7∶1∶4∶1。實(shí)施例五本實(shí)施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖30g、氨基酸75mg、維生素4mg、瓊脂25g、左旋龍腦40mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸的組合,其比例為10∶3∶5∶3∶5。所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12、肌醇的組合,其比例為7∶4∶7∶3。實(shí)施例六本實(shí)施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖25g、氨基酸60mg、維生素3mg、瓊脂15g、左旋龍腦30mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸的組合,其比例為10∶2∶4∶2∶4。所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12、肌醇的組合,其比例為7∶3∶5∶2。實(shí)施例七本實(shí)施例與實(shí)施例六不同的地方在于:該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為還含有激動(dòng)素10~15mg。實(shí)施例八本實(shí)施例與實(shí)施例七不同的地方在于:該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為還含有生長素0.1~0.3mg,生長素為5-羥-iaa、萘乙酸、吲哚丁酸的組合,其組合比例為10∶(1~4)∶(2~5)。同時(shí),為了證明本發(fā)明的有益效果,本發(fā)明還提供了以下試驗(yàn)例:取白芨的原球莖切成小塊,用該培養(yǎng)基進(jìn)行愈合培養(yǎng),分別選擇用實(shí)施例一~實(shí)施例八的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),標(biāo)號(hào)為s1~s8,,利用spss統(tǒng)計(jì)分析如啊年對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果做回歸系數(shù)的季涮和統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)。、培養(yǎng)條件:原球莖先進(jìn)行消毒,然后在進(jìn)行切成碎塊,培養(yǎng)溫度24±1℃700勒克斯下進(jìn)行培養(yǎng),測(cè)試指標(biāo)包括最早出現(xiàn)愈傷組織的時(shí)間、原球莖的愈傷率和愈傷組織的生長率;根據(jù)原球莖的傷化程度,將愈傷指數(shù)分成5級(jí),無愈傷化為0級(jí),愈傷化在0~25%的為1級(jí),在26%~50%的為2級(jí),在51%~75%的為3級(jí),76%~100%為4級(jí)。愈合組織生長率=((收獲量-接種量)/接種量)/培養(yǎng)時(shí)間白芨的原球莖切成小碎塊后再培養(yǎng)基中培養(yǎng)30d,調(diào)查愈傷數(shù)、誘導(dǎo)率、平均愈傷指數(shù)、生長率。表1編號(hào)接種數(shù)愈傷數(shù)誘導(dǎo)率平均愈傷指數(shù)生長率s130250.833.150.75s230260.863.211.01s330240.83.210.84s430250.833.180.94s530270.93.191.21s630280.933.171.2s730270.93.191.18s830270.93.231.14通過上表可以看出,本實(shí)施例提供的愈合培養(yǎng)基的愈傷組織誘導(dǎo)率均較高,達(dá)到80%~100%,平均愈傷數(shù)達(dá)到3以上。當(dāng)前第1頁12