本發明涉及組培育苗的技術領域,尤其是一種白芨組培育苗的方法。
技術背景
白芨,別名白及、冰球子、地螺絲、利知子和連及草等，為蘭科白芨屬多年生草本植物。其塊莖具有補肺、消腫、生肌、止血、斂瘡等功效，用于治療肺傷咳血、潰瘍疼痛、湯火灼傷、手足開裂等癥。近年來，白芨不僅作為傳統中草藥和觀賞植物廣泛運用，而且在化妝品的運用領域也日益受到重視。目前，白芨主要以采集野生自然資源為主，由于運用范圍的不斷擴大，其野生資源被過渡的采挖，儲蓄量急劇的減少。白芨不易發芽，主要以一分為二的分株方式進行繁殖，不但繁殖率低、繁殖的速度慢，而且耗種量大，還與用藥爭奪原料。采用組織培養技術，可以快速培養大量種苗，以滿足人工栽培的需要。
技術實現要素：
本發明需要解決的技術問題是針對上述技術問題提出的一種白芨組培育苗的方法。
為解決上述技術問題，本發明提供了一種白芨組培育苗的方法，包括如下步驟：S1：外植體的準備：選取新鮮的白芨側芽，先用蒸餾水對側芽進行清洗，再用洗潔精溶液浸泡10min～20min；然后將白芨側芽用蒸餾水洗凈，置于80％的酒精浸泡1～2min,最后用0.2％的生汞溶液進行滅菌10～15min，經過滅菌后的白芨側芽再用無菌水清洗3～5次，用消毒過的美工刀切掉白芨側芽的底部形成新的傷口；S2：將上述的外植體放入MS培養基中進行培養；S3：在培養基中 添加6-芐氨基嘌呤0.6～2.5mg/L和萘乙酸0.1～0.4mg/L；S4：當白芨組培苗在生根培養基上長出3條以上根時，將瓶苗置于室內煉苗3～5d，再打開瓶蓋，煉苗1～2d，然后將小苗移出培養基，假植在沙床中3個月，最后進行移栽。
進一步地，上述技術方案中，所述S2中培養基中還設置有瓊脂5g/L、白糖20g/L。
進一步地，上述技術方案中，所述S2中的培養條件為光照強度1600～2000lx，光照時間為15h/d,培養溫度為24度～28度。
進一步地，上述技術方案中，所述6-芐氨基嘌呤為1.5mg/L，所述萘乙酸為0.1mg/L。
采用上述方法組培白芨后，操作簡單，生產成本低，培植的白芨的成活率高。
具體實施方式
上述的組培方法都是發明人經過多次實驗得知的最佳配比，尤其是6-芐氨基嘌呤為1.5mg/L和萘乙酸為0.1mg/L。6-芐氨基嘌呤添加的量過多的時候，會導致叢生芽誘導率下降，芽變細變弱的線性，嚴重的時候還會出現焦尾放入現象。當萘乙酸的量添加過多的時候,增殖系數會降低,芽基部的愈傷組織會增加.苗細弱,葉色發黃。
實施例一：
S1：外植體的準備：選取新鮮的白芨側芽，先用蒸餾水對側芽進行清洗，再用洗潔精溶液浸泡18min；然后將白芨側芽用蒸餾水洗凈，置于80％的酒精浸泡1min,最后用0.2％的生汞溶液進行滅菌12min，經過滅菌后的白芨側芽再用無菌水清洗3次，用消毒過的美工刀切掉白芨側芽的底部形成新的傷口；S2：將上 述的外植體放入MS培養基中進行培養；S3：在培養基中添加6-芐氨基嘌呤0.8mg/L和萘乙酸0.2mg/L；S4：當白芨組培苗在生根培養基上長出3條以上根時，將瓶苗置于室內煉苗4d，再打開瓶蓋，煉苗1d，然后將小苗移出培養基，假植在沙床中3個月，最后進行移栽。
實驗一中對100支幼苗進行測驗，最后測試幼苗成活率為86.8％。
實施例二：
S1：外植體的準備：選取新鮮的白芨側芽，先用蒸餾水對側芽進行清洗，再用洗潔精溶液浸泡15min；然后將白芨側芽用蒸餾水洗凈，置于80％的酒精浸泡2min,最后用0.2％的生汞溶液進行滅菌13min，經過滅菌后的白芨側芽再用無菌水清洗4次，用消毒過的美工刀切掉白芨側芽的底部形成新的傷口；S2：將上述的外植體放入MS培養基中進行培養；S3：在培養基中添加6-芐氨基嘌呤1.5mg/L和萘乙酸0.1mg/L；S4：當白芨組培苗在生根培養基上長出3條以上根時，將瓶苗置于室內煉苗3d，再打開瓶蓋，煉苗1d，然后將小苗移出培養基，假植在沙床中3個月，最后進行移栽。
實驗二中對100支幼苗進行測驗，最后測試幼苗成活率為96.5％。
實施例三：
S1：外植體的準備：選取新鮮的白芨側芽，先用蒸餾水對側芽進行清洗，再用洗潔精溶液浸泡20min；然后將白芨側芽用蒸餾水洗凈，置于80％的酒精浸泡2min,最后用0.2％的生汞溶液進行滅菌15min，經過滅菌后的白芨側芽再用無菌水清洗4次，用消毒過的美工刀切掉白芨側芽的底部形成新的傷口；S2：將上述的外植體放入MS培養基中進行培養；S3：在培養基中添加6-芐氨基嘌呤2.3mg/L和萘乙酸0.3mg/L；S4：當白芨組培苗在生根培養基上長出3條以上根 時，將瓶苗置于室內煉苗4d，再打開瓶蓋，煉苗1d，然后將小苗移出培養基，假植在沙床中3個月，最后進行移栽。
實施例三中對100支幼苗進行測驗，最后測試幼苗成活率為93.2％。
由上述三個實施例可以獲知，實施例二為最佳實施例。白芨幼苗的成活率最高，生長情況最佳。
雖然以上描述了本發明的具體實施方式，但是本領域熟練技術人員應當理解，這些僅是舉例說明，可以對本實施方式作出多種變更或修改，而不背離本發明的原理和實質，本發明的保護范圍僅由所附權利要求書限定。