專利名稱：肉紅膠韌革菌工廠化栽培方法
技術領域：
本發明屬于食用菌栽培生產領域，特別是涉及肉紅膠韌革菌的工廠化栽培方法。
背景技術：
肉紅膠韌革菌[Gloeostereumincarnatum]，別名榆耳、榆磨。屬于擔子菌亞門、層菌綱、 非褶菌目、伏革菌科、膠韌革菌屬。野生肉紅膠韌革菌主要分布于我國東北地區和日本北海 道，遼寧省的鐵嶺、清原、新賓、本溪和撫順，吉林省的通化、渾江、撫松、長白和安圖等， 黑龍江省的東部山區是榆耳的主產區，新疆也有少量分布。
肉紅膠韌革菌是著名的藥食兼用真菌。榆耳引入中藥已有悠久的歷史。明朝著名的醫藥 學家李時珍所著《本草綱目》中載"榆耳八月采之"、"八月榆耳，以美酒漬曝，同青梁米、 紫莧實蒸熟為末。每服三指撮，酒下，令人辟谷不饑。"肉紅膠韌革菌子實體營養成分極為 豐富。據中國預防醫學科學院營養與食品衛生研究所分析，肉紅膠韌革菌主要含有蛋白質、 糖類、維生素E、維生素B,、維生素B2、鈣、磷、鐵、鋅等微量元素及谷氨酸、賴氨酸等人 體所必需的各種氨基酸。
吉林特產高等專科學校唐玉琴、趙義濤在2003第7期的"農技服務"雜志上發表了 "榆 耳高產栽培技術"文章，這篇文章公開了一些榆耳菌人工栽培技術。
目前，我國肉紅膠韌革菌的生產主要以野生和人工栽培為主，工廠化栽培技術尚未開發 成功。

發明內容
發明解決的主要問題是提供肉紅膠韌革菌工廠栽培技術。
本發明采用液體接種技術，通過工廠化栽培條件實現了榆耳菌周年化工廠化栽培生產。 項目技術概述如下
接種將培養好的液體菌種計量加入滅菌后固體栽培袋料中；
菌絲生長階段管理將袋料放入25-2『C的培養室中，控制空氣相對濕度控制在65%— 70%，通過空凋或其他設備控制溫度，保持空氣新鮮，培養8-15天后菌絲即可長滿菌袋；
子實體形成分化期的管理將長滿菌絲的菌袋移入子實體培養室，控制溫度在10-18°C， 控制空氣濕度在92-96%之間，保持5-8天，通入新鮮潔凈空氣；隨后用消毒刀片將菌袋原基 形成處開口，將溫度調整到18-23'C，控制濕度94-97%,每天通風3次，每次30—60分鐘， 同時進行散射光照射，16-20天后子實體形成。
本發明中固體培養基配方為粉碎棉籽殼(稻稈)70%,粉碎玉米芯6%，碳酸鈣2%， 麥麩22%，共0.25公斤，加水使水分含量達到60-65%，均勻混合灌裝到玻璃瓶、塑料袋 等培養袋中。培養袋滅菌條件為12rC滅菌1.5小時。
本發明采用液體菌種培養技術代替了傳統榆耳等食用菌栽培中采用的固體菌種制備方 法，液體菌種培養技術概述如下榆耳斜面菌株轉接到一級液體種子搖瓶中發酵培養，然后 將一級液體種子再按照5-20%的接種量轉接到二級液體種子搖瓶中發酵培養，將二級液體種子 轉接到發酵罐培養，獲得接種用液體菌種；將液體菌種接入固體袋料中進行人工培養。
具體內容包括-
(1) 一級種子培養將膠韌革菌斜面菌種挑取一塊接入裝有100亳升培養基的500毫 升搖瓶中進行一級種子培養，培養條件旋轉式搖床80 180轉/分，22 28'C培養 48 80小時左右；
(2) 二級種子培養將一級搖瓶種子以5 20%接種量接入裝有1升培養基的3升搖瓶 中進行培養，培養條件旋轉式搖床80~180轉/分，22 2『C培養48 72小時左右；
(3) 種子罐培養以5 20%的接種量把二級種子接入裝有100升發酵培養基的總容積 為150升的種子罐。培養條件為培養溫度22 28'C，攪拌速度80 180轉/分，通風量(V/V) 1:0. 3 0. 8,罐壓0. 03 0. 1Mpa,培養36 56小時；
發酵罐培養完畢將液體菌種通過無菌軟管按照1-10%的接種量接入滅菌后的袋裝料中采
用工廠化栽培方式進行培養。 采用本發明工藝培養菌種可以快速和規模化培養，與傳統固體接種方式相比，極大的縮 短了菌種培養時間，極大減少了人員的耗費，降低了工廠的生產成本；由于采用同一菌齡的 出于對數期強壯菌種，從而保證了在后期發菌工序中質量均一且不易感染雜菌，子實體的培 養時間與固體接種方式也大為縮短。
本發明中膠韌革菌菌種購于中國農業微生物中心，菌號ACCC50314， ACCC50363， ACCC50365， ACCC50394， ACCC50395， ACCC5()414， ACCC50423， ACCC50471等菌種。 本發明中斜面培養基組成可以為PDA斜面培養基或其他合適培養基。
本發明中液體種子培養基組成為淀粉1%，蔗糖3%，葡萄糖2%，蛋白胨0.5%，脫脂大 豆蛋白粉O. 1%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂O. 1%，維生素B,2PPm， PH6. 0。
液體發酵培養基組成為淀粉3%，蔗糖3%，葡萄糖3%，蛋白胨0.5%，脫脂大豆蛋白粉 1.5%,磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂O. 1%，維生素B,2PPm, PH6.0。
本發明主要利用農產品廢料廢秸稈、麩皮、廢棉籽殼等加工具有營養豐富、食用價值高 的榆耳菌子實體產品，符合我國循環經濟的發展方向，可充分利用本地資源優勢，大力發展。
本發明中采用榆耳菌液體接菌技術、榆耳菌工廠化周年生產工藝技術將從根本上改變食 用菌傳統的栽培方式，有效解決了傳統食用菌栽培受季節限制、生產粗放、規模小等實際問 題；本技術實現了食用菌的周年化規模生產，產品質量穩定可控，該項技術可廣泛推廣應用 于其他珍稀食用菌的工廠化栽培；
本發明采用榆耳菌液體接菌生產工藝，大大縮短了發菌周期，有效提高了生產效率，與 固體接菌相比具有明顯的優勢，較固體接菌發菌周期縮短了2/3;同時，采用車間智能控制技 術生產榆耳菌子實體鮮品產品；本項目生產的榆耳菌子實體產品避免了環境污染，食品安全 性高、產品品質及標準一致、產品質量穩定、生產周期短，大大降低了生產成本。
本項目技術屬國內外首創，較傳統栽培方法具有明顯的優勢，其中，菌棒成品率可達到 98%以上、菇產量較瓶栽工藝提高10%左右，該項技術面對我國巨大的食用菌市場，推廣前景 將十分廣闊。
具體實施例方式
下面的實施例可以使本專業技術人員更全面地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。
實施例1 液體菌種培養
(1) 一級種子培養將膠韌革菌斜面菌種挑取一塊接入裝有100毫升培養基的500毫升 搖瓶中進行一級種子培養，培養條件旋轉式搖床100轉/分，25'C培養50小時左右；(2) 二級種子培養將一級搖瓶種子以10%接種量接入裝有1升培養基的3升搖瓶中進行培養， 培養條件旋轉式搖床120轉/分，25'C培養52小時左右；(3)種子罐培養以10%的接種 量把二級種子接入裝有100升發酵培養基的總容積為150升的種子罐。培養條件為培養溫 度25。C，攪拌速度120轉/分，通風量(V/V) 1:0.4，罐壓0. 05Mpa，培養40小時；
接種在無菌空間內采用無菌軟管將發酵罐內培養的液體菌種通過按照固體料重量3% 的接種量接入滅菌后的袋裝料或瓶裝培養基中，隨后封口； 子實體培養
(1)菌絲生長階段管理將袋料放入25T:的培養室中，控制空氣相對濕度控制在65%—
70%，采用空凋控制溫度，通入新鮮空氣，培養10天后菌絲長滿菌袋；
(2)子實體形成分化期的管理將長滿菌絲的菌袋移入子實體培養室，控制溫度在 13'C，控制空氣濕度在94%之間，保持6天，通入新鮮潔凈空氣，隨后用消毒刀片在菌袋原 基形成處開口，將溫度調整到1『C，控制濕度94%，每天通風3次，每次40分鐘，同時進行 散射光照射，18天后子實體形成.，
本發明中固體培養基配方為粉碎棉籽殼70%,粉碎玉米芯6%，碳酸鈣2%，麥麩22%， 共0.25公斤，加水使水分含量達到65%,均勻混合灌裝到玻璃瓶、塑料袋等培養袋中。培養 袋滅菌條件為12rC滅菌1.5小時。
本發明中膠韌革菌菌種購于中國農業微生物中心，菌號ACCC50314。 本發明中液體種子培養基組成為淀粉1%，蔗糖3%，葡萄糖2%，蛋白胨0.5%,脫脂大 豆蛋白粉O. 1%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂O. 1%，維生素B,2PPm， PH6. 0。
液體發酵培養基組成為淀粉3%,蔗糖3%，葡萄糖3%，蛋白胨0.5%，脫脂大豆蛋白粉 1.5%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂O. 1%，維生素B,2PPm, PH6.0。 本發明中新鮮潔凈空氣采用空氣過濾機抽入。
實施例2 液體菌種培養
(1) 一級種子培養將膠籾革菌斜面菌種挑取一塊接入裝有100毫升培養基的500毫升 搖瓶中進行一級種子培養，培養條件旋轉式搖床100轉/分，24'C培養48小時左右；(2) 二級種子培養將一級搖瓶種子以10%接種量接入裝有1升培養基的3升搖瓶中進行培養， 培養條件旋轉式搖床120轉/分，24'C培養48小時左右；(3)種子罐培養以10%的接種 量把二級種子接入裝有100升發酵培養基的總容積為150升的種子罐。培養條件為培養溫 度24'C，攪拌速度90轉/分，通風量(V/V) 1:0.4，罐壓0. 05Mpa,培養40小時；
接種在無菌空間內采用無菌軟管將發酵罐內培養的液體菌種通過按照5%的接種量接 入滅菌后的袋裝料或瓶裝培養基中，隨后封口； 子實體培養
(1) 菌絲生長階段管理將袋料放入25'C的培養室中，控制空氣相對濕度控制在70%， 采用空凋控制溫度，保持空氣新鮮，培養12天后菌絲長滿菌袋；
(2) 子實體形成分化期的管理將長滿菌絲的菌袋移入子實體培養室，控制溫度在16 'C，控制空氣濕度在92%，保持6天，通入新鮮潔凈空氣，隨后用消毒刀片在菌袋原基形成 處開口，將溫度調整到18'C，控制濕度94%，每天通風3次，每次50分鐘，同時進行散射光 照射，20天后子實體形成。
本發明中固體培養基配方為粉碎棉籽殼70%,粉碎玉米芯6%，碳酸鈣2%，麥麩22%, 共0.25公斤，加水使水分含量達到65%,均勻混合灌裝到玻璃瓶、塑料袋等培養袋中。培養 袋滅菌條件為121'C滅菌1. 5小時。
本發明中膠韌革菌菌種購于中國農業微生物中心，菌號ACCC50394。 本發明中液體種子培養基組成為淀粉1%，蔗糖3%,葡萄糖2%,蛋白胨0.5%，脫脂大
豆蛋白粉O. 1%,磷酸二氫鉀0.2%,硫酸鎂O. 1%，維生素B,2PPm， P朋.0。
液體發酵培養基組成為淀粉3%，蔗糖3%，葡萄糖3%，蛋白胨0.5%，脫脂大豆蛋白粉
1.5%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂().1%，維生素B,2PPm， PH6.0。 本發明中新鮮潔凈空氣采用空氣過濾機抽入。
權利要求
1.一種肉紅膠韌革菌工廠化栽培方法，其特征在于包括如下步驟接種肉紅膠韌革菌液體菌種加入栽培袋料中；子實體培養將袋料放入25-28℃的培養室中，空氣濕度65％-70％，培養8-15天；將菌袋移入子實體培養室，溫度10-18℃，空氣濕度92-96％，培養5-8天；菌袋原基形成處開口，將溫度調整到18-23℃，濕度94-97％，每天通風，散射光照射，培養16-20天。
2. 根據權利要求1所述的一種肉紅膠韌革菌工廠化栽培方法，其特征在于菌種采用液體培養 菌種。
3. 根據權利要求1或2所述的一種肉紅膠韌革菌工廠化栽培方法，其特征在于液體菌種的培 養方法包括如下步驟榆耳斜面菌株轉接到一級液體種子搖瓶中發酵培養，然后將一級液體 種子再轉接到二級液體種子搖瓶中發酵培養，將二級液體種子轉接到發酵罐培養，獲得接種 用液體菌種。
4. 根據權利要求1或2所述的一種肉紅膠韌革菌工廠化栽培方法，其特征在于液體菌種的培 養方法包括如下步驟 一級種子培養將膠韌革菌斜面菌種挑取一塊接入裝有100毫升培養 基的500毫升搖瓶中進行一級種子培養，培養條件旋轉式搖床80 180轉/分，22 28'C培 養48 80小時左右；二級種子培養將一級搖瓶種子以5 20%接種量接入裝有1升發酵培 養基的3升搖瓶中進行培養，培養條件旋轉式搖床80 180轉/分，22 28'C培養48 72 小時左右；種子罐培養以5 20%的接種量把二級種子接入裝有100升發酵培養基的總容積 為150升的種子罐；培養條件為培養溫度22 28°C,攪拌速度80 180轉/分，通風量(V/V) 1:0. 3 0. 8,罐壓0. 03 0. 1Mpa,培養36~56小時。
全文摘要
本發明公開了肉紅膠韌革菌工廠化栽培方法，本發明屬于食用菌生產方法領域，特別是涉及肉紅膠韌革菌工廠化栽培方法。發明解決的主要問題是提供肉紅膠韌革菌工廠栽培技術。本發明采用液體接種技術，通過工廠化栽培條件實現了榆耳菌周年化工廠化栽培生產。項目技術如下將培養好的液體菌種計量加入滅菌后固體栽培袋料中；將袋料放入25-28℃的培養室中，控制空氣相對濕度，培養8-15天后將菌袋移入子實體培養室，控制溫度和濕度保持5-8天；在菌袋原基形成處開口，溫度調整到18-23℃，控制濕度94-97％，同時進行散射光照射，16-20天后子實體形成。
文檔編號C12N1/14GK101099435SQ20061008963
公開日2008年1月9日 申請日期2006年7月7日 優先權日2006年7月7日
發明者岳國海, 張貴林, 績 李, 蔡永峰 申請人:中國食品發酵工業研究院