專利名稱：生物樣品玻璃化冷凍和保存工具的制作方法
技術領域：
本發明涉及應用于卵子和胚胎以及其他細胞的玻璃化冷凍和保存過程中所使用的 工具。
背景技術：
人類卵子和胚胎的冷凍技術在輔助生殖技術中是一項強有力的治療及生育力保存 方法。尤其是卵子的冷凍保存對于因為盆腔疾病，放療及化療的副作用所產生的卵巢功 能喪失危險的女性來說，是一種切實可行的生育力保存方法。盡管己經有使用人類冷凍 卵子懷孕分娩的報導，但是人類卵子的冷凍保存技術仍處于發展階段。目前玻璃化冷凍 技術可使人類卵母細胞解凍后的存活率提高并獲有效的妊娠和活嬰出生。
細胞的玻璃化冷凍技術，即在冷卻的過程中使活細胞內的水分沒有冰晶形成而直接 成為玻璃樣凝固狀態。從理論上來講，提高冷凍速度將會導致細胞內的水分形成玻璃化 狀態。但是實際上僅僅提高冷凍速度是不能保證細胞內水分形成玻璃化狀態。根據研究 表明，大多數玻璃化冷凍技術都使用很高濃度的冷凍保護劑，例如，二甲基亞砜(DMSO) 或甘油等等。這樣才能保證冷凍細胞解凍后存活。到目前為止所采用的細胞玻璃化冷凍 技術是把細胞直接暴露于液氮(一196° C)以達到快速降溫使細胞內的水分玻璃化。然 而，細胞樣品直接暴露于液氮將有被液氮中的病毒細菌及其他病原體污染的危險性。如 果把細胞放入封閉的試管或其他容器中，再進行玻璃化冷凍，勢必達不到預期的快速降 溫的速度目的。鑒于此，提高冷凍速度與不直接暴露生物樣品在液氮中是克服細胞玻璃 化冷凍技術和生物樣品安全保存亟待解決的問題。

發明內容
為了解決既可使生物樣品以快速玻璃化冷凍，又可使生物樣品不直接暴露于液氮以 防止潛在的生物污染危險的問題，本發明提供一種卵子和胚胎等生物樣品玻璃化冷凍和 保存工具。
具體的結構設計方案如下
生物樣品玻璃化冷凍和保存工具包括麥管和護套管，麥管兩端可被加熱或堵塞密 封，護套管套設在麥管中部。
所述麥管的長度為80-90mra，兩端直徑為。1. 5-2. Omm，其中部為纖細薄壁管，中部
的纖細薄壁管長度為20-30mm，直徑為①0. 3-0. 35mm;
所述護套管長度為45-50mra，直徑為。2. 05-2. 55mm;其中部兩側對稱設有長度為 30—35rnm、寬度為1. 0_1. 5mra內凹窗口。
所述麥管的材料為塑料材料，如聚丙烯；
所述護套管的材料為金屬材料。
本發明的有益技術效果體現在下述幾個方面
1、 本發明工具用于卵子或胚胎以及其他細胞的玻璃化冷凍保存，既可使生物樣品 以快速玻璃化冷凍，又可使生物樣品不直接暴露于液氮以防止潛在的生物污染危險。
2、 本發明護套管的兩側分別開有內凹窗口，可方便將麥管工具直接放置在顯微鏡 下觀察。
3、 本發明因纖細薄壁管部分位于中央，兩端開口處直徑較大，便于吸取卵子與胚 胎以及其他細胞，彌補同類產品吸取樣品困難的缺點。
4、 本發明使用的麥管纖巧，避免了同類產品體積較大的缺點，占用空間小，使得 貯存數量多，有效地減少液氮損耗，降低冷凍成本。
5、 本發明使用了金屬護套管，有效地保護了麥管，使麥管不容易遭到折斷、損壞， 而且具有一定的堅硬度。


圖l為本發明結構示意圖，
圖2為圖l俯視圖，
圖3為護大管結構示意圖，
圖4為麥管結構示意圖，
圖5為圖3的俯視圖，
圖6為圖3的側視圖。
具體實施例方式
下面結合附圖，通過實施例對本發明作進一步地說明。
實施例l:
生物樣品玻璃化冷凍和保存工具包括麥管1和護套管2，護套管2套裝在麥管1中 部，見圖1和圖2;
麥管的長度為90mm，兩端直徑為O2.0mm，其中部為纖細薄壁管，中部的纖細薄壁 管長度為30mm，直徑為①0.35咖，見圖4。麥管的材料為聚丙烯。
護套管長度為50ram，直徑為①2.55mm;其中部兩側對稱設有長度為35mm、寬度為 1.5mm內凹窗口，見圖3、圖5和圖6。護套管的材料為金屬材料。
卵子或胚胎以及細胞的首選玻璃化冷凍和解凍操作程序如下。卵子或胚胎以及細胞 在平衡液中懸浮5分鐘后轉入玻璃化冷凍液中。在45-60秒內將卵子或胚胎以及細胞與 玻璃化冷凍液吸入麥管1的承載生物樣品的纖細薄壁管3部分，然后將麥管1兩端用加 熱或密封件堵塞密封，并快速投入液氮中保存。解凍時，載有樣品的麥管1直接放入37. ° C溫水中解凍。切斷麥管l兩端將樣品推出，爾后將樣品放入解凍液和稀釋液中。
麥管材料首選低膨脹系數的材料，以防止組件在室溫和液氮溫度之間這樣快而大的 溫度變化時爆裂。麥管部分適合用聚丙烯來制作(加入充填劑和強化劑可提高預期性能， 首選的材料是Profax PD626-H12 Basell)，防護套可用不銹鋼來制作。
實施例2:
生物樣品玻璃化冷凍和保存工具包括麥管1和護套管2，護套管2套裝在麥管1中
部；
麥管l的長度為80ram，兩端直徑為01.5mm，其中部為纖細薄壁管3，中部的纖細 薄壁管長度為20ran，直徑為O0.3mm;纖細薄壁管部分為承載生物樣品的承載部分；
護套管2長度為45mm，直徑為。2. 05mm;其中部兩側對稱設有長度為30咖、寬度 為1. 0內凹窗口 4。
其它同實施例1。
權利要求
1、生物樣品玻璃化冷凍和保存工具，其特征在于包括麥管和護套管，護套管套設在麥管中部，所述麥管的長度為80-90mm，兩端直徑為Φ1.5-2.0mm，其中部為纖細薄壁管，中部的纖細薄壁管長度為20-30mm，直徑為Φ0.3-0.35mm；所述護套管長度為45-50mm，直徑為Φ2.05-2.55mm；其中部兩側對稱設有長度為30-35mm、寬度為1.0-1.5mm內凹窗口。
2、 根據權利要求1所述的生物樣品玻璃化冷凍和保存工具，其特征在于所述麥 管的材料為塑料材料。
3、 根據權利要求1所述的生物樣品玻璃化冷凍和保存工具，其特征在于所述護 套管的材料為金屬材料。
全文摘要
本發明涉及卵子和胚胎等生物樣品玻璃化冷凍和保存工具。本發明既解決了生物樣品的快速冷凍又不使樣品直接暴露于液氮，為此防止潛在的生物污染危險的問題。生物樣品玻璃化冷凍和保存工具包括麥管和護套管，護套管套設在麥管上；麥管中部為纖細薄壁管，纖細薄壁管長度為20-30mm，直徑為Φ0.3-0.35mm；護套管中部兩側對稱設有內凹窗口。采用本發明麥管工具用于卵子或胚胎以及其他細胞的玻璃化冷凍保存，既可使生物樣品以快速玻璃化冷凍，又可使生物樣品不直接暴露于液氮以防止潛在的生物污染危險。
文檔編號C12N5/06GK101200706SQ20071019224
公開日2008年6月18日 申請日期2007年12月21日 優先權日2007年12月21日
發明者千日成, 曹云霞 申請人:安徽醫科大學